Name: isometric contractility measurement of the mouse mesenteric artery using wire myography
Uploaded: 2018-08-20T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography at JoVE.com

Мы благодарим д-р Вэй ци он (Soochow университета, Сучжоу, Китай) и д-р Ян Ning Qiao (Шэньси педагогический университет, г. Сиань, Китай) для оказания технической помощи. Эта работа была поддержана Фонд национального естественных наук Китая (Грант 31272311, 81373295 и 81473420) и проекта, финансируемых приоритетных академические программы развития Цзянсу высших учебных заведений (Грант № ysxk-2016).

Животных манипуляции были утверждены институциональный уход животных и использование Комитет (IACUC) модель животных исследовательский центр Нанкин университета.
1. решение подготовка
<ol><li>Приготовляют раствор HEPES-Tyrode (H-T), используя 137.0 мм NaCl, 2,7 мм KCl, 1.8 мм CaCl2, 1 мм MgCl<s...

<ol>
	<li>Bevan, J. A., Osher, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+direct+method+for+recording+tension+changes+in+the+wall+of+small+blood+vessels+in+vitro.">A direct method for recording tension changes in the wall of small blood vessels in vitro.</a> Agents and Actions. 2 (5), 257-260 (1972).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+vascular+smooth+muscle+cells+in+situ.">Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ.</a> Nature. 260 (5552), 617-619 (1976).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contractile+Properties+of+Small+Arterial+Resistance+Vessels+in+Spontaneously+Hypertensive+and+Normotensive+Rats.">Contractile Properties of Small Arterial Resistance Vessels in Spontaneously Hypertensive and Normotensive Rats.</a> Circulation Research. 41 (1), 19-26 (1977).</li><li>Mulvany, M. J., Nyborg, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+increased+calcium+sensitivity+of+mesenteric+resistance+vessels+in+young+and+adult+spontaneously+hypertensive+rats.">An increased calcium sensitivity of mesenteric resistance vessels in young and adult spontaneously hypertensive rats.</a> British Journal of Pharmacology. 71 (2), 585-596 (1980).</li><li>Mulvany, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Procedures for investigation of small vessels using small vessel myograph. , (2004).</li><li>Halpern, W., Mulvany, M. J., Warshaw, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+smooth+muscle+cells+in+the+walls+of+arterial+resistance+vessels.">Mechanical properties of smooth muscle cells in the walls of arterial resistance vessels.</a> The Journal of Physiology. 275, 88-101 (1978).</li><li>Michael, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+blood+pressure+arising+from+a+defect+in+vascular+function.">High blood pressure arising from a defect in vascular function.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (18), 6702-6707 (2008).</li><li>Bridges, L. E., Williams, C. L., Pointer, M. A., Awumey, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenteric+artery+contraction+and+relaxation+studies+using+automated+wire+myography.">Mesenteric artery contraction and relaxation studies using automated wire myography.</a> Journal of Visualized Experiments. (55), (2011).</li><li>del Campo, L., Ferrer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Wire Myography to Study Vascular Tone and Vascular Structure of Isolated Mouse Arteries. , (2015).</li><li>Fisher, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+smooth+muscle+phenotypic+diversity+and+function.">Vascular smooth muscle phenotypic diversity and function.</a> Physiological Genomics. 42 (3), 169-187 (2010).</li><li>Crowley, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+roles+for+the+kidney+and+systemic+tissues+in+blood+pressure+regulation+by+the+renin-angiotensin+system.">Distinct roles for the kidney and systemic tissues in blood pressure regulation by the renin-angiotensin system.</a> The Journal of Clinical Investigation. 115 (4), 1092-1099 (2005).</li><li>Qiao, Y. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myosin+phosphatase+target+subunit+1+(MYPT1)+regulates+the+contraction+and+relaxation+of+vascular+smooth+muscle+and+maintains+blood+pressure.">Myosin phosphatase target subunit 1 (MYPT1) regulates the contraction and relaxation of vascular smooth muscle and maintains blood pressure.</a> The Journal of Biological Chemistry. 289 (32), 22512-22523 (2014).</li><li>He, W. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+myosin+light+chain+kinase+in+regulation+of+basal+blood+pressure+and+maintenance+of+salt-induced+hypertension.">Role of myosin light chain kinase in regulation of basal blood pressure and maintenance of salt-induced hypertension.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 301 (2), H584-H591 (2011).</li><li>Yang, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+identification+of+a+tribenzylisoquinoline+alkaloid+from+Nelumbo+nucifera+Gaertn,+a+novel+potential+smooth+muscle+relaxant.">Isolation and identification of a tribenzylisoquinoline alkaloid from Nelumbo nucifera Gaertn, a novel potential smooth muscle relaxant.</a> Fitoterapia. 124, 58-65 (2018).</li><li>Slez&#225;k, P., Waczul&#237;kov&#225;, I., Bali&#353;, P., P&#250;zserov&#225;, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accurate+Normalization+Factor+for+Wire+Myography+of+Rat+Femoral+Artery.">Accurate Normalization Factor for Wire Myography of Rat Femoral Artery.</a> Physiological Research. 59 (6), 1033-1036 (2010).</li><li>Kearney, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+burden+of+hypertension:+analysis+of+worldwide+data.">Global burden of hypertension: analysis of worldwide data.</a> The Lancet. 365 (9455), 217-223 (2005).</li><li>Good, N. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrogen+Ion+Buffers+for+Biological+Research.">Hydrogen Ion Buffers for Biological Research.</a> Biochemistry. 5 (2), 467-477 (1966).</li></ol>

Гипертония является задачей широкого общественного здравоохранения из-за тяжелых осложнений, в том числе сердечно-сосудистых и почечных заболеваний16. Понимания патогенеза гипертензии и изучения более антигипертензивные препараты стало насущной задачей в этой области. ?...

Система myograph небольшой сосуд, используемый здесь был для измерения Изометрические сужением сосудов малого сопротивления с внутренним диаметром от 100 до 400 мкм. изолированных малых судов (около 2 мм длиной) были вставлены два провода диаметром 40 мкм и затем были монтируется на челюсти микрометр стороне датчика и последовательно. Этот метод myograph был впервые предложил в 19721 и затем разработан прежде всего Mulvany и его коллеги2,3,4,5,6. Это теперь зрелый техника стабильной оборудованием, легко производительности и стандартный нормализации процедуры7,8,9. Мы использовали этот метод с некоторыми изменениями для измерений в мыши верхней брыжеечной артерии.
Гладких мышц сосудистой линии стены почти всех кровеносных сосудов. Их основная функция заключается в создании сил посредством сокращения в ответ на различные стимулы. Нормальный сократимости гладких мышц сосудов имеет важное значение для регулирования кровяного давления и дополнение питания10. Ненормальной регуляции артериального давления приводит к различных заболеваний, в том числе гипертонии, сердечной недостаточности и ишемия. Некоторые исследования показали, что ненормальное давление всегда связан с неблагополучной гладких мышц сосудистой сократимости7,11,12,13. Метод myograph позволяет расследования Изометрические сократимости мыши сосудов вызванных различные стимулы, включая сосудосуживающие средства, ингибиторы и наркотиков. Успешные измерения сжатия поможет нам понять механизмы поддержания давления крови и патогенезе сосудистых заболеваний, связанных с гладких мышц и исследовать новые терапевтические подходы.
Многие китайские травы широко использовались для клинического лечения сосудистых заболеваний; Однако их эффективные ингредиенты обычно остаются неизвестными. Таким образом изоляции и выявление эффективных компонентов является очень важным для разработки новых лекарств. Технология myograph Многопроволочная предлагает простой подход для отбора активных компонентов в лекарственных растениях. Мы сообщили ряд исследований с использованием системы myograph небольшой сосуд расследовать мыши верхней брыжеечной артерии сужением и определили природных соединений с борьбе с гипертонией активность12,,1314. Здесь, мы описываем подробный протокол для метода myograph и оценить эффект миорелаксантов neoliensinine, изолированных от эмбрионов семян Лотос (Nelumbo nucifera Gaertn.) 14.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Multi wire myograph system</td>
			<td>DMT</td>
			<td>610-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel wire</td>
			<td>DMT</td>
			<td>400447</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Geuder dissection scissor</td>
			<td>DMT</td>
			<td>400431</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont forceps</td>
			<td>DMT</td>
			<td>300413</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab/8SP</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>ML785</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>LabChart 5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>SigmaAldrich</td>
			<td>S5886</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>SigmaAldrich</td>
			<td>P5405</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>SigmaAldrich</td>
			<td>C4901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2&#183;6H2O</td>
			<td>SigmaAldrich</td>
			<td>M2393</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-Glucose</td>
			<td>SigmaAldrich</td>
			<td>G6152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>A100511-0250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>SigmaAldrich</td>
			<td>S8045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>SigmaAldrich</td>
			<td>D2650</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isometric contractility measurement of the mouse mesenteric artery using wire myography

Проволока myograph техника используется для оценки сократимости сосудистой гладкой мускулатуры в ответ на depolarization, GPCR агонисты/ингибиторы и наркотики. Он широко используется во многих исследованиях на физиологические функции сосудистой гладкой мускулатуры, патогенеза сосудистых заболеваний, как гипертония и разработки лекарств релаксант гладких мышц. Мышь является широко используется модель животных с большим бассейном модели заболеванием и генетически модифицированных штаммов. Мы ввели этот метод измерения изометрического сокращения мыши верхней брыжеечной артерии в деталях. 1.4-мм сегмент мыши сопротивление верхней брыжеечной артерии был изолирован и установлен на камеру myograph, передав две стальные провода через ее просвета. После уравновешивания и нормализации шаги судно сегмент был потенцированные high-K+ раствором дважды перед сужением assay. В качестве примера применения этого метода в разработке лекарств мы измерили релаксант эффект Роман природное вещество, neoliensinine, изолированных от китайских трав, эмбрионы семян Лотос (Nelumbo nucifera (Gaertn.) на мыши брыжеечных артерии. Сегменты судна, установлен в myograph камере были стимулировали раствором high-K+ . Когда силы натяжения этап стабильного поступательного, накопленных доз neoliensinine были добавлены к камере. Мы обнаружили, что neoliensinine был эффект миорелаксантов дозозависимый на гладких мышц, таким образом, о том, что он несет потенциальной деятельности против гипертонии. Кроме того как судно сегмент может выжить по крайней мере 4 часа после монтажа и поддерживать сократимости, вызванных high-K+ решения для много раз, мы предполагаем, что провода myograph система может использоваться для трудоемкий процесс скрининга наркотиков.

Мы измеряется Изометрические сократимости верхней брыжеечной артерии мыши с помощью многопроволочной myograph системы и оценку релаксант эффект neoliensinine, очищенного от эмбрионов семян Лотос (Nelumbo nucifera Gaertn.) 14. мыши сопротивление верхней брыжеечной артери...

Watch this Scientific Journal Video about Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography at JoVE.com

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography (Video) | JoVE

Изометрические сократимости измерение верхней брыжеечной артерии мыши, с помощью проволоки миография

Проволока myograph техника используется для изучения функций сосудистой гладкой мускулатуры и экран новых лекарств. Мы доклад подробный протокол для измерения Изометрические сократительную способность мыши верхней брыжеечной артерии и скрининга новых миорелаксанты гладких мышц сосудов.

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion (Video) | JoVE

Мышь модели окклюзии средней мозговой артерии

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse (Video) | JoVE

Применение постоянных средней мозговой артерии Лигирование в мышь

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Mesenteric Artery Contraction and Relaxation Studies Using Automated Wire Myography

Mesenteric Artery Contraction and Relaxation Studies Using Automated Wire Myography (Video) | JoVE

Брыжеечной артерии Сокращение и отдых Исследования с помощью автоматизированной миография провода

Proximal resistance vessels, such as the mesenteric arteries, contribute substantially to the peripheral resistance. These small vessels of between ...

Epidural Intracranial Pressure Measurement in Rats Using a Fiber-optic Pressure Transducer

Epidural Intracranial Pressure Measurement in Rats Using a Fiber-optic Pressure Transducer (Video) | JoVE

Эпидуральная внутричерепного Измерение давления у крыс с помощью волоконно-оптических преобразователей давления

Elevated intracranial pressure (ICP) is a significant problem in several forms of ischemic brain injury including stroke, traumatic brain injury and ...

In vivo Measurement of the Mouse Pulmonary Endothelial Surface Layer

In vivo Measurement of the Mouse Pulmonary Endothelial Surface Layer (Video) | JoVE

В естественных условиях измерения мышь легочных эндотелиальных поверхностного слоя

The endothelial glycocalyx is a layer of proteoglycans and associated glycosaminoglycans lining the vascular lumen. In vivo, the glycocalyx is highly ...

Assessing Myogenic Response and Vasoactivity In Resistance Mesenteric Arteries Using Pressure Myography

Assessing Myogenic Response and Vasoactivity In Resistance Mesenteric Arteries Using Pressure Myography (Video) | JoVE

Оценка Миогенный ответ и вазоактивности В Сопротивление брыжеечных артерий, используя миография давления

Small resistance arteries constrict and dilate respectively in response to increased or decreased intraluminal pressure; this phenomenon known as myogenic ...

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine (Video) | JoVE

Изоляция и Использование разделов крупного рогатого брыжеечной артерии и вены, как биологических испытаний для тестирования для вазоактивности в тонком кишечнике

Mammalian gastrointestinal systems are constantly exposed to compounds (desirable and undesirable) that can have an effect on blood flow to and from that ...

Measurement of the Pressure-volume Curve in Mouse Lungs

Measurement of the Pressure-volume Curve in Mouse Lungs (Video) | JoVE

Измерение давления объема Curve в мышиных легких

In recent decades the mouse has become the primary animal model of a variety of lung diseases. In models of emphysema or fibrosis, the essential ...

Murine Model of Femoral Artery Wire Injury with Implantation of a Perivascular Drug Delivery Patch

Murine Model of Femoral Artery Wire Injury with Implantation of a Perivascular Drug Delivery Patch (Video) | JoVE

Мышиной модели бедренной артерии Wire травмы с имплантацией Периваскулярный Drug Delivery Patch

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model (Video) | JoVE

Индукция ускоренного атеросклероза у мышей: модель "Wire-Injury"

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...