此方法可以帮助回答实验笔画字段中的关键问题，例如如何减少与这些模型的关联，以及如何提高可重复性。这项技术的主要优点是，它允许通过常见的胡萝卜动脉再灌注，因此不依赖于威利斯的圆，它可以在动物之间解剖变化，因此可能有助于实验结果测量中看到的变异性。此方法的可视化演示至关重要，因为由于使用密封剂以确保 CCA 在维修后获得完全专利所涉及的技术困难，因此很难了解 CCA 容器维修步骤。
首先，根据测试协议准备和麻醉鼠标。然后使用数字15手术刀刀片，使一个1.5厘米的中线切口在暴露的腹颈。使用钝解剖技术，轻轻地将唾液腺缩回一侧，露出气管。
然后解剖常见的胡萝卜动脉，或CCA，从周围的组织和血管神经释放。在此之后，通过两个小段的不可溶解的6-0缝合下CCA，后向CCA，和腹到阴道神经。拉一条丝绸领带靠近外科医生，并松散地系在CCA周围。
然后松散地将第二根丝绸系在内部和外部的卡皮德动脉的分叉上。接下来，在外向系上方应用微血管夹，确保分叉不受阻。使用微型静脉剪刀在 CCA 上制作一个小孔。
将 7-0 硅胶涂层的微丝插入 CCA 中，并将其推进到微血管夹中。然后拧紧心系，将灯丝固定到位。并使用夹子去除微血管夹。
接下来，将灯丝推进到内部胡萝卜动脉（ICA）。一旦灯丝头通过外向系，拉紧领带，防止失血。使用端丝领带，将 CCA 提起并拉到小鼠身体的外侧，将灯丝引导到弯曲处，经过 pterygopalatin 动脉（PPA）的开口。
一旦灯丝就位，通过进一步拧紧远方的丝绸领带来固定它。在 MCAO 期结束时，收回灯丝，直到白色长丝头清晰可见。然后松开远近 CCA 系，将灯丝头从容器中拆下。
接下来，从容器中完全拆下灯丝头。在此之后，将微血管夹放在水平位置，朝向 CCA 分叉，并在外向扎带旁边放置。然后将另一个剪辑放在近近 CCA 领带下方，朝向外科医生。
小心使用杜蒙 5 钳子去除两个丝绸领带。并使用无菌棉芽干燥区域。然后将纤维素原和血栓密封剂溶液一和二添加到无菌培养皿中。
使用微静脉剪刀和钝解剖技术，获得细腹片的胸腺肌。然后，使用Dumont 5钳子，拿组织垫，并均匀地混合在纤维素原和血栓密封剂溶液中。在这里，重要的是要确保组织垫足够大，足以覆盖CCA切口。
一旦它混合在两个溶液中，必须立即放在切口上，以防止过度凝固和粘附不良。两个溶液混合后，将组织垫取出到 CCA 切口。将组织垫平放在具有中等压力的切口上，并打开钳子。
迅速取出心骨微血管夹，同时将组织垫放在位上。接下来，慢慢缓解来自组织垫的压力，让血液在切口区域动。现在，慢慢地轻轻地释放近近微血管夹的压力，然后完全去除。
去除顶部夹允许少量血液激活密封剂。远点夹的稳步释放允许在切口部位逐渐增加压力，进一步激活，并有助于防止修复失败。最后，一旦容器被密封，用可溶解的6-0缝合缝合伤口。
在该协议中，对24只成年雄性小鼠进行了中脑动脉闭塞（MCAO）。避免ECA结扎和增加镇痛表明在MCAO后48小时减肥的趋势。丝切除5分钟后，MCA脑区域区域脑血流量显著增加。
灌注一直保持到船舶修理，在CCA船只修理后，向MCA领土灌注增加。这表明，与仅依靠威利斯的圈子相比，CCA的修复允许血液灌注增加对缺血区。T2 加权 MRI 用于确定总 LV 和 DTI 扫描用于确定 MCAO 后 48 小时的核心 LV。
这两个群体之间没有显著的区别。有趣的是，CCA 修复组中，总 LV 和核心 LV 的可变性显著降低。我们的分析表明，与典型的 CCA 连接程序相比，在 MCAO 之后，每个治疗组需要更少的动物才能证明 LV 减少了 30%。
在尝试此过程时，重要的是要记住确保组织包的尺寸足以覆盖 CCA 切口。此外，在将垫放在 CCA 上之前，速度很重要，以防止密封剂过度凝固。
