Name: preparing a 68ga-labeled arginine glycine aspartate (rgd)-peptide for angiogenesis
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparing a 68Ga-labeled Arginine Glycine Aspartate RGD-peptide for Angiogenesis at JoVE.com

Detta arbete stöds av en kärnteknisk forskning och utveckling av programmet av National Research Foundation i Korea (NRF) bidraget finansieras av den koreanska regeringen (nr 2017M2A2A6A02019904).

Alla djurförsök genomfördes i enlighet med riktlinjerna för vård och användning av försöksdjur under protokoll godkänts av Korea Institute av radiologiska och medicinska vetenskaper djur studier kommittén. Alla reagenser och lösningsmedel köptes och användas utan ytterligare rening. NOTA-RGD-peptider utarbetades enligt litteraturen metoder15.
FÖRSIKTIGHET: 68Ga avger både positron och gammastrålar. Alla experiment, inklusive direkt eller indir...

<ol>
	<li>Friedlander, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Definition+of+Two+Angiogenic+Pathways+by+Distinct+alpha+v+integrins.">Definition of Two Angiogenic Pathways by Distinct alpha v integrins.</a> Science. 270 (5241), 1500-1502 (1995).</li><li>Janssen, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+Targeting+with+Radiolabeled+alpha+v+beta+3+Integrin+Binding+Peptides+in+a+Nude+Mouse+Model.">Tumor Targeting with Radiolabeled alpha v beta 3 Integrin Binding Peptides in a Nude Mouse Model.</a> Cancer Research. 62, 6146-6151 (2002).</li><li>Kok, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+and+functional+evaluation+of+RGD-modified+proteins+as+&#945;v&#946;3+integrin+directed+therapeutics.">Preparation and functional evaluation of RGD-modified proteins as &#945;v&#946;3 integrin directed therapeutics.</a> Bioconjugate Chemistry. 13 (1), 128-135 (2002).</li><li>Garanger, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+multifunctional+molecular+conjugate+vector+for+targeting,+imaging,+and+therapy+of+tumors.">New multifunctional molecular conjugate vector for targeting, imaging, and therapy of tumors.</a> Molecular Therapy. 12 (6), 1168-1175 (2005).</li><li>Dijkgraaf, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PET+imaging+of+&#945;v&#946;3+integrin+expression+in+tumours+with+68Ga-labelled+mono-,+di-+and+tetrameric+RGD+peptides.">PET imaging of &#945;v&#946;3 integrin expression in tumours with 68Ga-labelled mono-, di- and tetrameric RGD peptides.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 38 (1), 128-137 (2011).</li><li>Liu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=68Ga-labeled+cyclic+RGD+dimers+with+Gly3and+PEG4linkers:+Promising+agents+for+tumor+integrin+&#945;v&#946;3+PET+imaging.">68Ga-labeled cyclic RGD dimers with Gly3and PEG4linkers: Promising agents for tumor integrin &#945;v&#946;3 PET imaging.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 36 (6), 947-957 (2009).</li><li>Li, Z. B., Chen, K., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=68Ga-labeled+multimeric+RGD+peptides+for+microPET+imaging+of+integrin+&#945;v&#946;3expression.">68Ga-labeled multimeric RGD peptides for microPET imaging of integrin &#945;v&#946;3expression.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 35 (6), 1100-1108 (2008).</li><li>Liu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isomerism+and+solution+dynamics+of+90Y-labeled+DTPA-biomolecule+conjugates.">Isomerism and solution dynamics of 90Y-labeled DTPA-biomolecule conjugates.</a> Bioconjugate Chemistry. 12 (1), 84-91 (2001).</li><li>Haubner, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glycosylated+RGD-containing+peptides:+tracer+for+tumor+targeting+and+angiogenesis+imaging+with+improved+biokinetics.">Glycosylated RGD-containing peptides: tracer for tumor targeting and angiogenesis imaging with improved biokinetics.</a> Journal of Nuclear Medicine. 42 (2), 326-336 (2001).</li><li>Sivolapenko, G. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+metastatic+melanoma+utilising+a+technetium-99m+labelled+RGD-containing+synthetic+peptide.">Imaging of metastatic melanoma utilising a technetium-99m labelled RGD-containing synthetic peptide.</a> Euroean Journal of Nuclear Medicine. 25 (10), 1383-1389 (1998).</li><li>Haubner, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+Imaging+of+&#945;v&#946;3+Integrin+Expression+Using+18+F-labeled+RGD-containing+Glycopeptide+and+Positron+Emission+Tomography.">Noninvasive Imaging of &#945;v&#946;3 Integrin Expression Using 18 F-labeled RGD-containing Glycopeptide and Positron Emission Tomography.</a> Cancer Research. 61, 1781-1785 (2001).</li><li>Clarke, E. T., Martell, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stabilities+of+trivalent+metal+ion+complexes+of+the+tetraacetate+derivatives+of+12-,+13-+and+14-membered+tetraazamacrocycles.">Stabilities of trivalent metal ion complexes of the tetraacetate derivatives of 12-, 13- and 14-membered tetraazamacrocycles.</a> Inorganica Chimica Acta. 190 (1), 37-46 (1991).</li><li>Clarke, E. T., Martell, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stabilities+of+the+Fe(III),+Ga(III)+and+In(III)+chelates+of+N,N&#8242;,N&#8243;-triazacyclononanetriacetic+acid.">Stabilities of the Fe(III), Ga(III) and In(III) chelates of N,N&#8242;,N&#8243;-triazacyclononanetriacetic acid.</a> Inorganica Chimica Acta. 181 (2), 273-280 (1991).</li><li>Shetty, D., Lee, Y. S., Jeong, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=68Ga-labeled+radiopharmaceuticals+for+positron+emission+tomography.">68Ga-labeled radiopharmaceuticals for positron emission tomography.</a> Nuclear Medicine Molecular Imaging. 44 (4), 233-240 (2010).</li><li>Shin, U. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+and+Preliminary+Evaluation+of+68Ga-NOTA-Biphenyl-c(RGDyK)+for+the+Quantification+of+Integrin+&#945;v&#946;3.">Synthesis and Preliminary Evaluation of 68Ga-NOTA-Biphenyl-c(RGDyK) for the Quantification of Integrin &#945;v&#946;3.</a> Bulletin of the Korean Chemical Society. 38 (12), 1415-1418 (2017).</li><li>Cai, W., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multimodality+Molecular+Imaging+of+Tumor+Angiogenesis.">Multimodality Molecular Imaging of Tumor Angiogenesis.</a> Journal of Nuclear Medicine. 49, 113-128 (2008).</li></ol>

I denna studie, introducerade vi ett protokoll för att förbereda en radiopeptide inriktning αvβ3 integrin och dess biologisk utvärdering. Utveckling av traditionella läkemedel innebär en komplicerad procedur. Det kräver en stor mängd referensmaterial och en relativt lång utvärdering tid. Även om den föreslagna metoden inte kan ersätta delikat utvärderingsprocessen, kan detta system användas vid screening. Det föreslagna systemet skulle avsevärt minska tiden och kostnaderna.
<p ...

Angiogenes är en biologisk process som kännetecknas av utveckling av nya blodkärl. Bland många angiogenetic faktorer, αvβ3 integrin är associerade med invasivitet, eftersom integrin uttrycks mycket angiogena tumör fartyg men är frånvarande i normal vävnad1.
Radiomärkt receptor bindande peptider med arginin glycin aspartat (RGD) domänen, som har en hög affinitet motvα β3 integrin receptorer, betraktas som lovande angiogenes imaging agenter2,3 , 4 , 5 , 6 , 7. flera radiofarmaka har skapats för husdjur och dess biologiska egenskaper har validerats i olika djurmodeller8,9,10,11. När det gäller en radionuklid har 68Ga flera fördelar jämfört med andra radioisotoper. För det första, det har en hög tillgänglighet för användare och är ekonomiskt fördelaktiga eftersom en cyclotron inte krävs. För det andra producera 68Ga-baserade radiofarmaka hög rumslig upplösning jämfört med single-photon utsläpp beräknas tomography (SPECT), möjliggör mer exakt kvantifiering. Slutligen kan 67.71 minuter halveringstiden för 68Ga vara tillräckligt för beredning av små peptider eller proteiner.
För att producera ett stabilt komplex med 68Ga, har många kelater utvecklats. Representativa kelater är 1,4,8,11-tetraazacyclotetradecanetetraacetic syra (TETA), 1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7,10-tetraacetic acid (DOTA), 1,4,7-triazacyclononane-1,4,7-triacetic syra (NOTA), diethylenetriaminepentaacetic syra (DTPA), och N, N'-di(2-hydroxybenzyl) etylendiamin-N, N'-diacetic syra (HBED). NOTA har rapporterats att bilda ett mycket stabila komplex med 68Ga (log stabilitet konstant 30,98)12,13,14.
Syftet med föreliggande studie är att ge en koncis protokoll för utvecklingen av en ny radiopeptide (figur 1). Som ett exempel förbereder vi 68Ga-märkt RGD-peptider och nuvarande metoder för biologisk utvärdering av dessa analoger i xenograft modell.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:775px;" width="775">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:231px;">68Ga/68Ge generator</td>
			<td style="width:187px;">ITG Company</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:239px;">10 mCi&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Hydrogen chloride solution</td>
			<td style="width:187px;">Sigma-aldrich</td>
			<td>84429</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Sodium acetate</td>
			<td style="width:187px;">Sigma-aldrich</td>
			<td style="width:119px;">S2889</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">C18 reverse-phase cartridge</td>
			<td style="width:187px;">Waters</td>
			<td style="width:119px;">WAT020515</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:231px;">0.22-&#956;m sterile filter</td>
			<td style="width:187px;">Milllipore</td>
			<td style="width:119px;">SLGV033RS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Radio-TLC scanner</td>
			<td style="width:187px;">Bioscan</td>
			<td style="width:119px;">AR2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">ITLC paper</td>
			<td style="width:187px;">Agilent</td>
			<td style="width:119px;">SGI001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Citric acid</td>
			<td style="width:187px;">Sigma-aldrich</td>
			<td>251275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:231px;">HPLC</td>
			<td style="width:187px;">Waters</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:239px;">Waters 1525 system containing binary pump, photo diode array (Waters 2998), radioactivity detector (Raytest, Gabi)</td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:231px;">C-18 colunm</td>
			<td style="width:187px;">Develosil</td>
			<td style="width:119px;">HG31546150W</td>
			<td>ODS-HG-5, 150 &#8569; 4.6 mm, 5&#956;m</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Acetonitrile</td>
			<td style="width:187px;">J.T. Baker</td>
			<td style="width:119px;">14-650-359</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Trifluoroacetic acid</td>
			<td style="width:187px;">Sigma-aldrich</td>
			<td style="width:119px;">302031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Dulbecco&#39;s modified Eagle media&#160;</td>
			<td style="width:187px;">Thermo fisher scientific</td>
			<td style="width:119px;">11965092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">fetal bovine serum</td>
			<td style="width:187px;">Thermo fisher scientific</td>
			<td style="width:119px;">16000044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">T175 flasks&#160;</td>
			<td style="width:187px;">Corning</td>
			<td>CLS431080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Trypsin-EDTA (0.25%)</td>
			<td style="width:187px;">Thermo fisher scientific</td>
			<td>25200072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">penicillin-streptomycin</td>
			<td style="width:187px;">Thermo fisher scientific</td>
			<td style="width:119px;">15240112</td>
			<td style="width:239px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">&#947;-counter</td>
			<td style="width:187px;">Perkin Elmer</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:239px;">1480 Wizard 3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Insunlin syringe</td>
			<td style="width:187px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:119px;">326105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Synringe pump</td>
			<td style="width:187px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;">70-4500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">micro-PET/CT</td>
			<td style="width:187px;">Siemens Inveon</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparing a 68ga-labeled arginine glycine aspartate (rgd)-peptide for angiogenesis

Αvβ3 integrin är en heterodimeriskt vidhäftning molekyl involverad i tumör cellmigration och angiogenes. Integrin är i ökad utsträckning hos angiogena tumör endothelial celler, där det vanligtvis har en låg koncentration. Detta specifika uttryck för αvβ3 gör det en giltig biomarkör för antiangiogenetisk och imaging droger. Som en funktionell bildgivande modalitet ger positronemissionstomografi (PET) information om biokemiska och fysiologiska förändringar i vivo, på grund av dess unika hög känslighet i nanomolar skala. Radiometal-baserade PET radiofarmaka har därför fått stor uppmärksamhet för icke-invasiv kvantifiering av tumör angiogenes. Detta dokument ger en systemisk protokoll för att förbereda en ny radiometal-märkt peptid för utvärdering av angiogenes. Detta protokoll innehåller information om radiokemiska tillförlitlighet, fettlöslig, cell upptag, serum stabilitet och farmakokinetiska egenskaper. Den 68Ga-RGD-peptid är en av de representativa PET-liganderna mot αvβ3 integrin. Här introducerar vi ett protokoll för att förbereda en 68Ga-RGD-peptid och utvärdering av dess biologiska effekt.

Kelering av 68GaCl3 med NOTA-RGD-peptiden var enkel, och radiolabeling avkastningen var 99%. Reaktion föroreningar bort som visas i figur 2. 68Ga-RGD-peptid strålningskemisk renhet var större än 99%, och specifik aktivitet i slutet av syntesen var 90-130 MBq/nmol (figur 3).
Cell upptaget värden för 68Ga-RGD-peptid var 1,...

Watch this Scientific Journal Video about Preparing a 68Ga-labeled Arginine Glycine Aspartate RGD-peptide for Angiogenesis at JoVE.com

Preparing a 68Ga-labeled Arginine Glycine Aspartate RGD-peptide for Angiogenesis

Αvβ3 integrin är en typ av vidhäftning protein som uttrycks mycket på aktiverade endotelceller som genomgår angiogenes. Således, utvärdera integriteten av integrin är av stort intresse i onkologi. Här introducerar vi en metod för att förbereda 68Ga-märkt radiopeptides och en metod för att bedöma dess biologiska effektiviteten.

Förbereda en 68Ga-märkt arginin glycin aspartat (RGD)-peptiden för angiogenes

The &#945;v&#946;3 integrin is a heterodimeric adhesion molecule involved in tumor cell migration and angiogenesis. The integrin is overexpressed in ...

Denna metod kan hjälpa till att besvara viktiga frågor i utarbetandet av Gallium 68 märkt RGD-Peptide och metoden för den biologiska utvärderingen av dess analoger. Den största fördelen med denna teknik är att det är ett enkelt systemiskt protokoll för utveckling av en ny radiometall-märkt peptid. Demonstrera förfarandet kommer att Ki-Hye Jung, en post-doc från vårt institut.Börja med att använda 0,5 molar saltsyra för att elute radiolabeled gallium triklorid från en radiolabeled gallium germanium generator. Rensa ut föreningen i fem milliliter reaktionsflaska med kvävegas vid 80 grader Celsius. Följt av tillsats av 100 mikrogram av arginiumin glycinaacetat eller RGD-peptid i en molar natriumacetat till den torkade föreningen.Värm reaktionsblandningen vid 80 grader Celsius i fem minuter innan blandningen kyls till rumstemperatur. För att rena råprodukten med hög prestanda vätskekromatografi, tillsätt lösningen till en C18-kolonn och passera lösningen genom en C18-patron med omvänd fas. Tvätta patronen med två milliliter saltlösning och elera den radiomärkta peptiden med 0,7 milliliter 95%etanol följt av borttagning av lösningsmedlet vid 80 grader Celsius under kvävegas under 20 minuter.Rekonstruera den renade peptiden i PBS och filtrera den radiolabeled produkten genom en steril 0.22 micron steril sil. Formulera peptiden i en milliliter av steril saltlösning och spot en mikroliter av peptidlösning på en omedelbar tunn lagerkromatografiplatta. Sedan utveckla plattan i kammaren som innehåller vattenhaltiga 0,1 molar citronsyra tills nio centimeter bort från platsen för att bestämma radiokemiska avkastningen.För att bedöma in vivo cellulära upptag av peptiden, behandla en gånger 10 till den sjätte mänskliga glioblastoma celler per brunn i sex brunnsplattor med 111 kilobecquerel av radiolabeled RGD-peptid per brunn vid 37 grader Celsius för 30, 60, 90 eller 120 minuter i tre exemplar. I slutet av inkubationen, tvätta brunnarna två gånger med två milliliter PBS per tvätt, och skörda cellerna med 0,25%Trypsin och 0,02%EDTA i PBS vid 37 grader Celsius i tre till fem minuter. Sedan överföra cellerna från varje brunn i 15 milliliter koniska rör för att mäta den radiolabeled peptidupptaget på en gammaräknare.För att bedöma serumstabiliteten hos den radiomärkta RGD-peptiden, tillsätt 500 mikroliter av nyberedda musserum, 500 mikroliter av humant serum och 500 mikroliter PBS till 50 mikroliter av varje prov och inkubera blandningarna i 37 grader Celsius i upp till två timmar. Spot sedan en till två mikroliter av varje prov på en omedelbar tunt lager kromatografi platta efter 30, 60, 90 och 120 minuter inkubation och utveckla plattorna som visats. För att bestämma lipoilicity av peptiden, tillsätt 10 mikroliter av den radiolabeled RGD-peptid till en octanal PBS system och blanda injektionsflaskan generöst i fem minuter vid rumstemperatur.Samla sedan upp peptiden genom centrifugeringen och skörda 100 mikroliter prov från varje lager för mätning med en gammaräknare. För att generera radiolabeled tumörmodeller, ladda fem gånger 10 till den sjätte mänskliga glioblastoma celler i 100 microliters av PBS i en halv tum insulinspruta utrustad med en 28 gauge nål per BALB / c naken mus som skall injiceras, och leverera tumörcellerna subkutant i den vänstra flanken av varje mottagare. För in vivo-kvantifiering av peptiden genom positronemissionstomografi, eller PET, placera huvudet en tumörbärande, sövd mus i PET-gantry och intravenöst administrera 7,4 megabecquerels av radiolabeled RGD-peptid lösning i 200 microliters av PBS i varje xenograft mus modell via ven svansen över en minut medan du utför en PET scan i listan läge.För ex vivo biodistribution analys, injicera 0,37 megabecquerels av radiolabeled RGD-peptid i 200 microliters av PBS i svansvenen av en xenografted, tumör-bärande djur, och skörda vävnader av intresse på 30, 60, 90 och 120 minuter efter injektion. Väg sedan vävnaderna och mäta deras radioaktivitet med en gammaräknare. Efter kelering, reaktion föroreningar kan framgångsrikt bort genom hög prestanda vätskekromatografi som visats.En större än 99%radiokemisk renhet av den radiomärkta RGD peptid kan uppnås med en specifik verksamhet i slutet av syntesen mellan 90 och 130 megabecquerels per nanometer. PET-analys visar ett initialt högt upptag i de stora organen, inklusive lever, njure, hjärta, muskel, samt inom tumören. Under de senare analysstadsstegen kan tumörregionen vara tydligt visualiserad med tumören till muskelförhållandet som förblir oförändrad, vilket indikerar peptidens kinetiska stabilitet.Ex vivo biodistribution analys visar att den ackumulerade radioaktivitet i tumören minskar med tiden som förväntat från in vivo PET resultaten. Medan du försöker detta förfarande, det är viktigt att komma ihåg att även om vår metod inte kan ersätta den känsliga biologiska utvärderingsprocessen, det kan användas för att avsevärt använda tid och kostnad för en traditionell praxis läkemedelsutveckling. Glöm inte att arbeta med de radioaktiva materialen kan vara extremt farligt och försiktighetsåtgärder, såsom att använda rätt skyddsutrustning som en personlig dosimeter och termoluminescerande dosimeter bör alltid tas medan du utför dessa förfaranden.

Research

JoVE Journal

Medicine

Preparing a 68Ga-labeled Arginine Glycine Aspartate (RGD)-peptide for Angiogenesis

A Mouse Model of the Cornea Pocket Assay for Angiogenesis Study

En musmodell av hornhinnan Pocket-analys för Angiogenes Study

A normal cornea is clear of vascular tissues. However, blood vessels can be induced to grow and survive in the cornea when potent angiogenic factors are ...

Angiogenesis in the Ischemic Rat Lung

Angiogenes i Ischemisk råttlunga

The  adult lung is perfused by both the systemic bronchial artery and the entire  venous return flowing through the pulmonary arteries. In most lung ...

In vivo Imaging of Tumor Angiogenesis using Fluorescence Confocal Videomicroscopy

In vivo Imaging of Tumor Angiogenesis using Fluorescence Confocal Videomicroscopy

In vivo avbildning av blodkärl i tumören med hjälp av fluorescens Confocal videomikroskopi

Fibered confocal fluorescence in vivo imaging with a fiber optic bundle uses the same principle as fluorescent confocal microscopy. It can excite ...

Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

Näthinneavlossning modell i gnagare genom subretinal Injektion av natriumhyaluronat

Subretinal injection of sodium hyaluronate is a widely accepted method of inducing retinal detachment (RD). However, the height and duration of RD or the ...

High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

High-throughput Flödescytometri cellbaserad analys för att detektera antikroppar till N-metyl-D-aspartat-receptor-eller dopamin-2-receptor i humant serum

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases ...

Establishment of a Human Multiple Myeloma Xenograft Model in the Chicken to Study Tumor Growth, Invasion and Angiogenesis

Inrättande av en människa multipelt myelom xenograftmodell i Chicken att studera tumörtillväxt, invasion och Angiogenes

Multiple myeloma (MM), a malignant plasma cell disease, remains incurable and novel drugs are required to improve the prognosis of patients. Due to the ...

Continuous IV Infusion is the Choice Treatment Route for Arginine-vasopressin Receptor Blocker Conivaptan in Mice to Study Stroke-evoked Brain Edema

Kontinuerlig intravenös infusion är valet behandling Route för arginin-vasopressin-receptorblockerare Conivaptan i möss för att studera Stroke-framkallade hjärnödem

Stroke is one of the major causes of morbidity and mortality in the world. Stroke is complicated by brain edema and other pathophysiological events. Among ...

Surgical Angiogenesis in Porcine Tibial Allotransplantation: A New Large Animal Bone Vascularized Composite Allotransplantation Model

Kirurgiska angiogenes i svin Tibial Allotransplantation: ett nytt stort djurs ben vaskulariserad sammansatta Allotransplantation modell

Segmental bone loss resulting from trauma, infection malignancy and congenital anomaly remains a major reconstructive challenge. Current therapeutic ...

Intravital Microscopy of Monocyte Homing and Tumor-Related Angiogenesis in a Murine Model of Peripheral Arterial Disease

Intravital mikroskopi av monocyt Homing och tumör-relaterade angiogenes i en murin modell av perifer arteriell sjukdom

The therapeutic goal for peripheral arterial disease and ischemic heart disease is to increase blood flow to ischemic areas caused by hemodynamic ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

Bedömning av terapeutisk angiogenes i en murin modell av Hindlimb ischemia

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...