Name: use of autometallography to localize and semi-quantify silver in cetacean tissues
Uploaded: 2018-10-04T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Use of Autometallography to Localize and Semi-Quantify Silver in Cetacean Tissues at JoVE.com

우리는 대만 Cetacean 좌초 네트워크 샘플 수집 및 저장, 대만 Cetacean 사회, 타이페이;를 포함 하 여에 대 한 감사 Cetacean 연구 실험실 (교수 선취 Siang Chou), 연구소의 생태학 및 진화 생물학, 국립 대만 대학, 타이 페이; 자연 과학 (박사 Chiou-주 야 오), 타이중;의 국립 박물관 그리고 해양 생물학 & Cetacean 연구 센터, 국립 쳉 쿵 대학. 우리 또한 그들의 허용에 대 한 임업 국, 농업 위원회, 행정원을 감사합니다.

연구 국제 지침에 따라 수행 하 고 cetacean 조직 샘플의 사용은 위원회의 농업의 대만 (연구 허용 104-07.1-SB-62)에 의해 허용 되었다.
1. 조직 샘플 준비 ICP MS 분석
참고: 간, 신장 조직 수집에서 갓 죽은 고 적당히 autolyzed 좌초 고래24, 4 종, 1 그램퍼스 griseus (Gg), 6 좌초 된 고래를 포함 하 여 2 Kogia 종 (코), 2 Lagenodelphis 호세이 ...

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H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+concentrations+of+four+Taiwanese+toothed+cetaceans+indicating+the+silver+and+cadmium+pollution+in+the+western+Pacific+Ocean.">Tissue concentrations of four Taiwanese toothed cetaceans indicating the silver and cadmium pollution in the western Pacific Ocean.</a> Marine Pollution Bulletin. 124 (2), 993-1000 (2017).</li><li>Li, W. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunotoxicity+of+silver+nanoparticles+(AgNPs)+on+the+leukocytes+of+common+bottlenose+dolphins+(Tursiops+truncatus).">Immunotoxicity of silver nanoparticles (AgNPs) on the leukocytes of common bottlenose dolphins (Tursiops truncatus).</a> Scientific Reports. , (2018).</li><li>Bornhorst, J. A., Hunt, J. W., Urry, F. M., McMillin, G. 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K., Domouhtsidou, G. P., Raftopoulou, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localization+of+Hg+and+Pb+in+the+palps,+the+digestive+gland+and+the+gills+in+Mytilus+galloprovincialis+(L.)+using+autometallography+and+X-ray+microanalysis.">Localization of Hg and Pb in the palps, the digestive gland and the gills in Mytilus galloprovincialis (L.) using autometallography and X-ray microanalysis.</a> Environmental Pollution. 125 (3), 345-353 (2003).</li><li>Loumbourdis, N. S., Danscher, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autometallographic+tracing+of+mercury+in+frog+liver.">Autometallographic tracing of mercury in frog liver.</a> Environmental Pollution. 129 (2), 299-304 (2004).</li><li>Stoltenberg, M., Larsen, A., Kemp, K., Bloch, D., Weihe, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autometallographic+tracing+of+mercury+in+pilot+whale+tissues+in+the+Faroe+Islands.">Autometallographic tracing of mercury in pilot whale tissues in the Faroe Islands.</a> International Journal of Circumpolar Health. 62 (2), 182-189 (2003).</li></ol>

문서 연구의 목적은 suborgan 수준에서 Ag 배포를 평가 하 고 cetacean 조직에 Ag 농도 추정 하는 보조 메서드를 설정 하는 것입니다. 현재 프로토콜 ICP-MS, 2) AMG 분석 알려진된 Ag 농도와 일치 하는 쌍 조직 샘플의 3) Ag 농도 추정에 대 한 회귀 모델 (욕설)의 설립에 의해 cetacean 조직에 Ag 농도의 결정 1) 포함 AMG 양수 값, 4)에 의해 평가의 정확성과 정밀도 CHAA, 및 5의) 욕설에 의해 Ag의 추정 농도.
<p class="jo...

나노 (AgNPs) 섬유, 화장품, 그리고 그들의 위대한 항균 효과1,2인 의료 항목을 포함 하 여 상용 제품에 광범위 하 게 사용 되었습니다. 따라서, AgNPs와 AgNP 포함 된 제품의 생산 시간이3,4증가 됩니다. 그러나, AgNPs 환경으로 공개 될 수 있습니다 그리고 바다5,6에 축적. 그들은 Ag 오염의 주요 소스 되 고 Ag의 환경 독성에 대 한 대중의 인식을 증가.
해양 환경에서 AgNPs Ag의 상태는 복잡 하 고 끊임없이 변화입니다. 이전 연구 AgNPs 입자, 집계, 분해, 반응 화학 종 또는+ Ag 이온7,8에서 다시 생성으로 남아 있을 수 있는 표시 했습니다. 여러 종류의 Ag, AgCl, 등 그들은 생물이 유기 체에 의해 섭취 될 수 있다 하 고 먹이 사슬9,10입력 해양 퇴적 물에서 발견 되었습니다. 대만의 남서 해안을 따라 치 구 라군 지역에서 실시 이전 연구, 해양 퇴적 물의 Ag 농도 매우 낮고 crustal 풍요에 유사한 그리고 그 생선 간 조직의 일반적으로 검출 아래 제한 (< 0.025 μ g/g 습식/습식)11. 그러나, 다른 국가에서 이전 연구는 간의 상대적으로 높은 Ag 농도 고래12,13의 설명 했다. 고래는 간은에서 Ag 농도 연령에 따라, 그들의 시체에 Ag의 소스는 대부분 그들의 먹이12제안 이다. 이 결과 더 높은 영양 수준에서 동물에 Ag의 biomagnification을 좋습니다. 고래, 바다에서 정점 육 식으로 수 있습니다 고통을 할 Ag/Ag 화합물12,,1314로 인 한 부정적인 건강에 미치는 영향. 가장 중요 한 것은, 고래, 처럼 인간은 포유동물, 및 부정적인 건강 영향 고래에 Ag/Ag 화합물으로 인 한 인간에서도 발생할 수 있습니다. 즉, 고래 해양 환경 및 인간 건강에 대 한 센 티 넬 동물 수 있습니다. 따라서, 건강 효과, 조직 분포 및 고래에 Ag의 농도 큰 관심사.
ICP-MS를 사용 하 여 높은 자본 비용 (악기 및 유지 관리) 및 조직 스토리지에 대 한 요구 사항에 의해 제한 cetacean 조직에 Ag/Ag 화합물의 농도 유도 결합된 플라즈마 질량 분광학 (ICP-MS)에 의해 측정 될 수 있다, 비록 /preparation12,15. 또한, 그것은 일반적으로의 물류 어려움, 부족 인력, 관련된 리소스12의 부족으로 좌초 cetacean 경우 모든 조사에서 포괄적인 조직 샘플을 수집 어렵습니다. 냉동된 조직 샘플 ICP MS 분석에 대 한 제한 된 냉동 공간 때문에 쉽게 저장 되지 않습니다 그리고 냉동된 조직 샘플 깨진된 냉장 장비12인해 삭제 될 수 있습니다. 이러한 상기 장애물 ICP MS 분석 냉동된 조직 샘플을 사용 하 여 오염 수준 cetacean 조직에서의 수사를 방해. 반면, 포 르 말린 고정 조직 샘플은 상대적으로 죽은 좌초 고래의 검 시 동안 수집 하기 쉽다. 따라서, 그것은 포 르 말린 고정 조직 샘플을 사용 하 여 cetacean 조직에서 중 금속 검출/측정 하는 사용 하기 편한 하 고 저렴 한 방법을 개발 하는 데 필요한.
Suborgan 분포 및 농도의 알칼리 그리고 알칼리 성 지구 금속 포 르 말린 고정 하는 동안 변경 될 수 있습니다, 비록 파라핀 포함 (FFPE) 과정, 전이 금속, Ag에 낮은 효과 지적된16있다 합니다. 따라서, FFPE 직물 금속 현지화 및 측정16,17에 대 한 이상적인 샘플 자원으로 간주 되었습니다. Autometallography (AMG), 조직화 학적인 과정 FFPE 직물 단면도에 검은 AMG 긍정적인 신호를 변함없이 크기의 황금 노란색으로 중 금속을 증폭 수 있습니다 및 이러한 증폭 된 중 금속은 가벼운 현미경 검사 법18, 에서 구상 될 수 있다 19 , 20 , 21. 그러므로, AMG 메서드 중 금속의 suborgan 배포판에 정보를 제공 합니다. 그것은 ICP MS만 기관 레벨18에 중 금속의 농도 측정할 수 있기 때문에 생물 학적 시스템에서 중 금속의 대사 경로 공부에 대 한 중요 한 추가 정보를 제공할 수 있습니다. 또한, 디지털 이미지 분석 소프트웨어 ImageJ, 같은 조직학 조직 섹션22,23의 정량 분석에 적용 되었습니다. FFPE 직물 단면도의 검은 AMG 긍정적인 신호를 변함없이 크기의 황금 노란색 정량 고 중 금속의 농도 추정 하는 데 사용 될 수 있습니다. 회귀 모델 이미지 정량 분석 및 ICP-MS, cetacean 라는에서 얻은 데이터를 기반으로 예상할 수 있는 절대 Ag 농도 이미지 정량 분석 AMG 메서드에서 직접 결정 될 수 없다, 조직학 Ag 분석 결과 (욕설)입니다. ICP MS 분석 가장 좌초 고래에 의해 Ag 농도 측정에 어려움을 고려 하면 CHAA는 Ag 농도 cetacean 조직, ICP MS 분석의 부족에 의해 결정 될 수 없다 추정 하 귀중 한 보조 방법 냉동 조직 샘플입니다. 이 종이 suborgan 수준 및 고래의 간 및 신장 조직에 Ag 농도 추정 하는 욕설 이라는 분석 결과에서 Ag 지역화에 대 한 조직화 학적인 기법 (AMG 방법)의 프로토콜을 설명 합니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58232/58232fig1.jpg"> 그림 1: Ag 농도 추정에 대 한 설립 및 cetacean 조직학 Ag 분석 결과 (욕설)의 응용 프로그램을 묘사 하는 순서도. CHAA cetacean 조직학 Ag 분석 결과, FFPE = = 포 르 말린 고정 파라핀 포함, ICP MS = 유도 결합된 플라즈마 질량 분광학. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58232/58232fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>HQ Silver enhancement kit</td>
			<td>Nanoprobes</td>
			<td>#2012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgipath Paraplast</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>39601006</td>
			<td>Paraffin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100% Ethanol</td>
			<td>Muto Pure Chemical Co., Ltd</td>
			<td>4026</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Xylene</td>
			<td>Muto Pure Chemical Co., Ltd</td>
			<td>4328</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silane coated slide</td>
			<td>Muto Pure Chemical Co., Ltd</td>
			<td>511614</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glass (25 x 50 mm)</td>
			<td>Muto Pure Chemical Co., Ltd</td>
			<td>24501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Malinol</td>
			<td>Muto Pure Chemical Co., Ltd</td>
			<td>20092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GM Haematoxylin Staining</td>
			<td>Muto Pure Chemical Co., Ltd</td>
			<td>3008-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% neutral buffered formalin solution</td>
			<td>Chin I Pao Co., Ltd</td>
			<td>---</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tip (1000 &#956;L)</td>
			<td>MDBio, Inc.</td>
			<td>1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PIPETMAN Classic P1000</td>
			<td>Gilson, Inc.</td>
			<td>F123602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml Centrifuge Tube</td>
			<td>GeneDireX, Inc.</td>
			<td>PC115-0500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dogfish liver</td>
			<td>National Research Council of Canada</td>
			<td>DOLT-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dogfish muscle</td>
			<td>National Research Council of Canada</td>
			<td>DORM-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS)</td>
			<td>PerkinElmer Inc.</td>
			<td>PE-SCIEX ELAN 6100 DRC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FreeZone 6 liter freeze dry system</td>
			<td>Labconco</td>
			<td>7752030</td>
			<td>For freeze drying</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BRAND&#174; SILBERBRAND volumetric flask</td>
			<td>Merck</td>
			<td>Z326283</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 mL standard vial, flat interior with 33 mm closure</td>
			<td>Savillex Corporation</td>
			<td>200-030-12</td>
			<td>For diagestion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitric acid, superpur&#174;, 65.0%</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1.00441</td>
			<td>For diagestion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot Plate/Stirrers</td>
			<td>Corning&#174;</td>
			<td>PC-220</td>
			<td>For diagestion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Shear lab mixer</td>
			<td>Silverson</td>
			<td>SL2T</td>
			<td>For homogenization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile polypropylene sample jar (250mL)</td>
			<td>Thermo Scientific&#8482;</td>
			<td>6186L05</td>
			<td>For homogenization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital camera</td>
			<td>Nikon Corporation</td>
			<td>DS-Fi2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope</td>
			<td>Nikon Corporation</td>
			<td>ECLIPSE Ni-U</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon&#8482; Finesse&#8482; 325 manual microtome</td>
			<td>Thermo Scientific&#8482;</td>
			<td>A78100001H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accu-Cut&#174; SRM&#8482; 200 rotary microtome</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>1429</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome blade S35</td>
			<td>FEATHER&#174;</td>
			<td>207500000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide staining dish and cover</td>
			<td>Brain Research Laboratories</td>
			<td>#3215</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel staining rack</td>
			<td>Brain Research Laboratories</td>
			<td>#3003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon embedding center</td>
			<td>Thermo Scientific&#8482;</td>
			<td>S-EC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Citadel&#174; tissue processor</td>
			<td>Thermo Scientific&#8482;</td>
			<td>69800003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide warmer</td>
			<td>Lab-Line Instruments</td>
			<td>26005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath</td>
			<td>Shandon Capshaw</td>
			<td>3964</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1541-070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prism 6.01 for windows</td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td></td>
			<td>Statistic software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ</td>
			<td>National Institutes of Health</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel tissue embedding mould</td>
			<td>Shenyang Roundfin Trade Co., Ltd</td>
			<td>RD-TBM003</td>
			<td>For paraffin emedding</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

use of autometallography to localize and semi-quantify silver in cetacean tissues

나노 (AgNPs) 섬유, 화장품, 그리고 그들의 강력한 항균 효과 인해 의료 항목을 포함 하 여 상용 제품에 광범위 하 게 사용 되었습니다. 그들은 또한 환경에 공개 될 수 있습니다 하 고 바다에 축적. 따라서, AgNPs는 Ag 오염의 주요 원천 및 Ag의 환경 독성에 대 한 대중의 인식을 증가. Ag의 (에서 소비자/육 식 동물) 확대 및 bioaccumulation (생산자)에 이전 학문은 설명 했다. 고래, 바다의 정점 육 식으로 수 있습니다 부정적인 영향 되었습니다 Ag/Ag 화합물에 의해. Cetacean 조직에 Ag/Ag 화합물의 농도 유도 결합된 플라즈마 질량 분광학 (ICP-MS)에 의해 측정 될 수 있다, 비록 ICP MS를 사용 하 여 높은 자본 비용 및 조직 스토리지/준비에 대 한 요구 사항에 의해 제한 됩니다. 따라서, autometallography (AMG) 메서드를 사용 하 여 이미지 정량 분석 포 르 말린 고정, 파라핀 끼워 넣어진 (FFPE) 조직 suborgan 수준에서 Ag 배포를 지역화 하 고 cetacean에 Ag 농도 추정 하는 보조 방법 있을 수 있습니다 조직입니다. AMG 긍정적인 신호 근 신장 관 상피, hepatocytes, Kupffer 세포의 세포질에 다양 한 크기의 검은 알갱이를 주로 갈색입니다. 때때로, 일부 비정 질 황금 노란색 갈색 AMG 긍정적인 신호는 루멘과 일부 근 신장 tubules의 지하실 막에 설명 되어 있습니다. Ag 농도 추정에 대 한 분석 결과 Cetacean 조직학 Ag 분석 결과 (욕설), AMG 방법 및 ICP-MS의 이미지 정량 분석에서 데이터에 의해 설립 하는 회귀 모델은 이름은입니다. AMG 지역화 CHAA와 반 계량 중 금속 사용 spatio 시간적 및 크로스-종 연구에 대 한 편리한 방법론을 제공 합니다.

Cetacean 간 및 신장 조직에 AMG 긍정적인 신호의 대표 이미지는 그림 5에 나와 있습니다. AMG 긍정적인 신호 근 신장 관 상피, hepatocytes, Kupffer 세포의 세포질에 다양 한 크기의 검은 알갱이 변함없이 크기의 갈색을 포함합니다. 때때로, 아 몰 퍼스 황금 노란색 갈색 AMG 긍정적인 신호 루멘과 일부 근 신장 tubules의 지하실 막에 설명 되어 있습니다. ICP-MS의 ?...

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Use of Autometallography to Localize and Semi-Quantify Silver in Cetacean Tissues

지역화를 Autometallography 및 Cetacean 조직에 실버 반 계량의 사용

프로토콜 cetacean 간 및 신장 조직에 Ag를 지역화 하려면 autometallography에 의해 제공 됩니다. 또한, cetacean 조직학 Ag 분석 결과 (욕설) 라는 새로운 분석 결과 그 조직에 Ag 농도 견적 하기 위하여 개발 된다.

Silver nanoparticles (AgNPs) have been extensively used in commercial products, including textiles, cosmetics, and health care items, due to their strong ...

이 방법은 생물학적 시스템 내의 중금속 의 하위 기관 분포 및 농도에 대한 환경 독성학 분야의 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 AMG가 사용하기 쉽고 저렴한 방법론이며, 이는 조직에서 중금속을 조사하기위한 귀중한 보조제라는 것입니다. 우리는 돌고래와 고래의 조직을 사용하여 프로토콜을 보여줍니다.그러나, 우리는 프로토콜이 다양한 동물 종에서 사용될 수 있다고 믿습니다. 웬타 리와 함께 절차를 시연하는 것은 우리 연구소의 임상의인 순성(Shun Theng)이 될 것입니다. 좌초된 세타산으로부터 AMG 분석을 위한 쌍 매칭 간 및 신장 조직을 수집하고, 조직을 24~48시간 동안 10%의 중성 완충 포르말린의 10배 부피로 고정하는 것으로 시작한다.다음으로, 일회용 스테인리스 스틸 마이크로톤 블레이드를 사용하여 포르말린 고정 간 및 신장 조직을 1센티미터, 3mm 구간으로 2센티미터로 자르고 동일한 개인의 간과 신장 섹션을 동일한 라벨이 부착된 카세트에 배치합니다. 일련의 등급에 등급이 매겨진 에탄올과 자일렌 몰입을 통해 조직 프로세서의 섹션을 탈수하고 1 시간 2 시간 파라핀 몰입을 합니다. 2 시간 파라핀 침지 후, 조직을 강철 조직학 금형의 바닥으로 옮기고 탈수 된 조직 샘플을 신선한 녹은 파라핀으로 포함시킴을 포함시킴이 됩니다.파라핀이 고화될 때까지 파랭판에 고정된 파라핀 내장 조직 블록을 차갑게 하고, 조직 표면이 노출될 때까지 마이크로토메에서 각 블록을 다듬습니다. 샘플을 영하 20도에서 10분간 식히고 마이크로톤에 5마이크로미터 의 조직 섹션을 가져옵니다. 핀셋과 브러쉬를 사용하여 조직 섹션의 리본을 획득할 때 들어 올리고 분리 될 때까지 섭씨 45도의 이중 증류 수조 표면에 띄우고 개별 현미경 슬라이드에 놓습니다.그런 다음 슬라이드를 섭씨 60도에서 1시간 동안 미끄럼온에 놓습니다. 그런 다음 슬라이드 랙에 슬라이드를 놓고 8-5 및 3 분 잠복식을 위해 순수 비 자일렌 200 ~250 밀리리터를 포함하는 세 가지 염색 요리에 섹션을 분리합니다. 등급에 매겨진 에탄올 용액의 다른 염색 접시에 탈 파라피화 샘플을 수분화한 다음 이중 증류수에서 헹구는 것입니다.PBS에서 섹션을 한 번 헹구면 5% Triton X 100, PBS에서만 여러 번, 세척당 30초 동안 신선한 이중 증류수로 한 번 보충합니다. 마지막 세척 후 각 샘플을 300 마이크로리터의 혼합 은 개선 키트 솔루션으로 라벨을 부착하여 실온에서 어둠 속에서 15분 이상 라벨을 붙입니다. 인큐베이션이 끝나면 슬라이드를 이중 증류수로 세척하고 슬라이드당 300 마이크로리터의 헤마톡시린을 10초 동안 반소 얼룩지게 합니다.흐르는 수돗물로 슬라이드를 씻으십시오. 건조하고 장착 매체로 섹션을 장착합니다. 그런 다음, 각 조직 섹션의 10 무작위 조직 학적 이미지를 캡처, 빛 현미경의 40X 목표에 따라.자동 메타알로그래피 또는 AMG를 분석하려면 시료의 긍정성, 적절한 이미지 분석 소프트웨어 프로그램에서 이미지를 열고 이미지, 유형 및 RGB 스택을 선택하여 첫 번째 이미지를 빨간색, 파란색 및 녹색 색상 채널로 분할합니다. 블루 채널에서, 이미지를 선택, 조정 및 임계값, 각 이미지에서 AMG 양성 신호와 영역의 백분율을 측정, 수동으로 핵, 또는 적혈구에 거짓 양성 영역의 존재에 따라 각 이미지의 임계 값에 대한 컷오프 값을 조정. 분석을 클릭하고 측정을 설정하고 영역 분수를 확인하여 영역 분획이 기록됨을 지정합니다.분석 및 측정을 클릭하여 결과 창의 각 조직학적 이미지 백분율 영역 열의 양수 백분율 영역 열을 표시합니다. 유도 결합된 플라즈마 질량 분광법과 AMG 양성 값 간의 상관 관계를 평가하려면 적절한 그래프 소프트웨어를 엽니다. 새 프로젝트 파일을 만들고 XY 및 상관 관계를 선택합니다.유도 결합된 플라즈마 질량 분광법 및 AMG 분석의 결과를 입력하고, 분석 및 상관관계를 선택하여 Pearson 상관 관계 분석에 의한 분석 결과 간의 연관성 강도를 분석한다. 매개 변수에서 비선형 회귀 창에서 적합 페이지에서 다른 회귀 모델을 선택하고 비교 페이지에서 비교 방법을 선택합니다. 제곱 F 테스트의 추가 합계와 아카이케의 정보 기준을 포함합니다.비교 방법의 결과에 따르면, 세타산 조직학적 은 분석에서 비교적 적합한 회귀 모델을 선택하고, 알 수 없는 은 농도를 가진 세타산 간 및 신장 조직의 은 농도를 추정하기 위해 분석법을 사용합니다. AMG 양성 신호는 간세포와 Kupffer 세포의 세포질에 있는 다양한 크기, 갈색에서 검은 과립을 포함하고, 몇몇 근위 신장 관의 루멘 및 지하실 막에 있는 갈색 AMG 양성 신호에 가끔 무정형, 황금 황색을 포함합니다. 분석된 간 및 신장 조직에서 교원결합 된 혈장 질량 분광법과 AMG 양성값의 결과 사이에는 긍정적인 상관관계가 있으며, 기원을 통한 바람직한 선형 회귀와 함께, 제곱 F 테스트의 추가 합계에 따라, 그리고 아카이케의 정보 기준.이 절차를 시도하는 동안 AMG 방법은 보조 방법이며 ICPMS와 같은 다른 특정 방법과 함께 조직의 중금속 의 실제 구성을 모니터링하는 데 사용해야 한다는 것을 기억하는 것이 중요합니다.

Research

JoVE Journal

Environment

Optimize Flue Gas Settings to Promote Microalgae Growth in Photobioreactors via Computer Simulations

컴퓨터 시뮬레이션을 통해 광 바이오 반응기에서 미세 조류의 성장을 촉진하기 위해 연소 가스 설정을 최적화

Flue gas from power plants can promote algal cultivation and reduce greenhouse gas emissions1. Microalgae not only capture solar energy more efficiently ...

연구

환경과학

Technique for Studying Arthropod and Microbial Communities within Tree Tissues

나무 조직 내에서 절지 동물과 미생물 군집 유학을위한 기술

Phloem tissues of pine are habitats for many thousands of organisms.  Arthropods and microbes use phloem and cambium tissues to seek mates, lay eggs, rear ...

Transient Gene Expression in Tobacco using Gibson Assembly and the Gene Gun

깁슨 조립 및 유전자 총을 사용하여 담배 일시적인 유전자 발현

In order to target a single protein to multiple subcellular organelles, plants typically duplicate the relevant genes, and express each gene separately ...

A Fish-feeding Laboratory Bioassay to Assess the Antipredatory Activity of Secondary Metabolites from the Tissues of Marine Organisms

물고기 먹이 실험 생물 검정은 해양 생물의 조직에서 이차 대사 산물의 Antipredatory 활동을 평가하기 위해

Marine chemical ecology is a young discipline, having emerged from the collaboration of natural products chemists and marine ecologists in the 1980s with ...

The Use of High-resolution Infrared Thermography (HRIT) for the Study of Ice Nucleation and Ice Propagation in Plants

The Use of High-resolution Infrared Thermography HRIT for the Study of Ice Nucleation and Ice Propagation in Plants

식물의 얼음 핵 얼음 전파의 연구에 대한 고해상도 적외선 체열 (HRIT)의 사용

Freezing events that occur when plants are actively growing can be a lethal event, particularly if the plant has no freezing tolerance. Such frost events ...

The Use of an Automated System (GreenFeed) to Monitor Enteric Methane and Carbon Dioxide Emissions from Ruminant Animals

The Use of an Automated System GreenFeed to Monitor Enteric Methane and Carbon Dioxide Emissions from Ruminant Animals

자동화 시스템 (GreenFeed)의 사용 반추 동물의 장내 메탄과 이산화탄소 배출량을 모니터링하려면

Ruminant animals (domesticated or wild) emit methane (CH4) through enteric fermentation in their digestive tract and from decomposition of manure during ...

Use of a Battery of Chemical and Ecotoxicological Methods for the Assessment of the Efficacy of Wastewater Treatment Processes to Remove Estrogenic Potency

폐수 처리 프로세스의 효능의 평가를위한 화학 및 생체 독성 방법의 배터리를 사용하면 에스트로겐 효능을 제거하는 방법

Endocrine Disrupting Compounds pose a substantial risk to the aquatic environment. Ethinylestradiol (EE2) and estrone (E1) have recently been included in ...

Use of a Filter Cartridge for Filtration of Water Samples and Extraction of Environmental DNA

여과 물 샘플 및 환경 DNA의 추출을위한 필터 카트리지의 사용

Recent studies demonstrated the use of environmental DNA (eDNA) from fishes to be appropriate as a non-invasive monitoring tool. Most of these studies ...

The Calibration and Use of Capacitance Sensors to Monitor Stem Water Content in Trees

나무에서 줄기 물 콘텐츠를 모니터링 하는 교정 및 정전 용량 센서의 사용

Water transport and storage through the soil-plant-atmosphere continuum is critical to the terrestrial water cycle, and has become a major research focus ...

Use of Principal Components for Scaling Up Topographic Models to Map Soil Redistribution and Soil Organic Carbon

토양 재배포 및 토양 유기 탄소를 매핑할 지형 모델 확장에 대 한 주요 부품의 사용

Landscape topography is a critical factor affecting soil formation and plays an important role in determining soil properties on the earth surface, as it ...