Name: humanized nod/scid/il2r&#947;null (hu-nsg) mouse model for hiv replication and latency studies
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Humanized NOD/SCID/IL2rÃŽÂ³null hu-NSG Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies at JoVE.com

هذا العمل كان تدعمه معاهد الصحة الوطنية [منح الأرقام R01AI29329 و R01AI42552 و R01HL07470 J.J.R.] والمعهد الوطني للسرطان من "المعاهد الوطنية للصحة" [المنحة رقم P30CA033572 لدعم المدينة "علم الجينوم التكاملية في الأمل" ، الصيدلة التحليلية، والنوى الخلوي تحليلية]. وحصل الكاشف التالية عن طريق المعهد الوطني لبحوث الإيدز المعاهد الوطنية للصحة ومرجع برنامج كاشف، شعبة من الإيدز، نييد، الصحة: فيروس "ال فيروس نقص المناعة البشرية".

تم تنفيذ جميع الإجراءات ورعاية الحيوان وفقا لبروتوكولات استعرضت ووافقت على "رعاية الحيوان المؤسسية" بمدينة الأمل واستخدام اللجنة (IACUC) أجراها الباحث الرئيسي لهذه الدراسة (الدكتور جون روسي، 12034 # إياكوك). تم الحصول على أنسجة الكبد الأجنة البشرية من "الموارد المتقدمة في العلوم البيولوجية" (أل...

<ol>
	<li>Greiner, D. L., Hesselton, R. A., Shultz, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SCID+mouse+models+of+human+stem+cell+engraftment.">SCID mouse models of human stem cell engraftment.</a> Stem cells. 16 (3), 166-177 (1998).</li><li>Rongvaux, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+function+of+human+innate+immune+cells+in+a+humanized+mouse+model.">Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model.</a> Nature. 32 (4), 364-372 (2014).</li><li>Walsh, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+Mouse+Models+of+Clinical+Disease.">Humanized Mouse Models of Clinical Disease.</a> Annual review of pathology. 12, 187-215 (2017).</li><li>Shultz, L. D., Brehm, M. A., Garcia-Martinez, J. V., Greiner, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mice+for+immune+system+investigation:+progress,+promise+and+challenges.">Humanized mice for immune system investigation: progress, promise and challenges.</a> Nature reviews. Immunology. 12 (11), 786-798 (2012).</li><li>Shultz, L. D., Ishikawa, F., Greiner, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mice+in+translational+biomedical+research.">Humanized mice in translational biomedical research.</a> Nature reviews. Immunology. 7, (2007).</li><li>Moir, S., Fauci, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=B+cells+in+HIV+infection+and+disease.">B cells in HIV infection and disease.</a> Nature reviews. Immunology. 9 (4), 235-245 (2009).</li><li>McCune, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+SCID-hu+mouse:+murine+model+for+the+analysis+of+human+hematolymphoid+differentiation+and+function.">The SCID-hu mouse: murine model for the analysis of human hematolymphoid differentiation and function.</a> Science. 241 (4873), 1632-1639 (1988).</li><li>Mosier, D. E., Gulizia, R. J., Baird, S. M., Wilson, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+a+functional+human+immune+system+to+mice+with+severe+combined+immunodeficiency.">Transfer of a functional human immune system to mice with severe combined immunodeficiency.</a> Nature. 335, 256 (1988).</li><li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+defects+in+innate+and+adaptive+immunologic+function+in+NOD/LtSz-scid+mice.">Multiple defects in innate and adaptive immunologic function in NOD/LtSz-scid mice.</a> Journal of immunology. 154 (1), 180-191 (1995).</li><li>Ohbo, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+hematopoiesis+in+mice+with+a+truncated+mutant+of+the+interleukin-2+receptor+gamma+chain.">Modulation of hematopoiesis in mice with a truncated mutant of the interleukin-2 receptor gamma chain.</a> Blood. 87 (3), 956-967 (1996).</li><li>Ito, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOD/SCID/gamma(c)(null)+mouse:+an+excellent+recipient+mouse+model+for+engraftment+of+human+cells.">NOD/SCID/gamma(c)(null) mouse: an excellent recipient mouse model for engraftment of human cells.</a> Blood. 100 (9), 3175-3182 (2002).</li><li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+lymphoid+and+myeloid+cell+development+in+NOD/LtSz-scid+IL2R+gamma+null+mice+engrafted+with+mobilized+human+hemopoietic+stem+cells.">Human lymphoid and myeloid cell development in NOD/LtSz-scid IL2R gamma null mice engrafted with mobilized human hemopoietic stem cells.</a> Journal of immunology. 174 (10), 6477-6489 (2005).</li><li>Ishikawa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+functional+human+blood+and+immune+systems+in+NOD/SCID/IL2+receptor+{gamma}+chain(null)+mice.">Development of functional human blood and immune systems in NOD/SCID/IL2 receptor {gamma} chain(null) mice.</a> Blood. 106 (5), 1565-1573 (2005).</li><li>Watanabe, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+analysis+of+the+functions+of+human+B+and+T+cells+in+humanized+NOD/shi-scid/gammac(null)+(NOG)+mice+(hu-HSC+NOG+mice).">The analysis of the functions of human B and T cells in humanized NOD/shi-scid/gammac(null) (NOG) mice (hu-HSC NOG mice).</a> International immunology. 21 (7), 843-858 (2009).</li><li>McDermott, S. P., Eppert, K., Lechman, E. R., Doedens, M., Dick, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+human+cord+blood+engraftment+between+immunocompromised+mouse+strains.">Comparison of human cord blood engraftment between immunocompromised mouse strains.</a> Blood. 116 (2), 193-200 (2010).</li><li>Mazurier, F., Doedens, M., Gan, O. I., Dick, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+myeloerythroid+repopulation+after+intrafemoral+transplantation+of+NOD-SCID+mice+reveals+a+new+class+of+human+stem+cells.">Rapid myeloerythroid repopulation after intrafemoral transplantation of NOD-SCID mice reveals a new class of human stem cells.</a> Nature. 9 (7), 959-963 (2003).</li><li>Melkus, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mice+mount+specific+adaptive+and+innate+immune+responses+to+EBV+and+TSST-1.">Humanized mice mount specific adaptive and innate immune responses to EBV and TSST-1.</a> Nature medicine. 12, 1316 (2006).</li><li>Lan, P., Tonomura, N., Shimizu, A., Wang, S., Yang, Y. -. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstitution+of+a+functional+human+immune+system+in+immunodeficient+mice+through+combined+human+fetal+thymus/liver+and+CD34++cell+transplantation.">Reconstitution of a functional human immune system in immunodeficient mice through combined human fetal thymus/liver and CD34+ cell transplantation.</a> Blood. 108 (2), 487-492 (2006).</li><li>Brehm, M. A., Bortell, R., Verma, M., Shultz, L. D., Greiner, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+Mice+in+Translational+Immunology.">Humanized Mice in Translational Immunology.</a> Translational Immunology. , 285-326 (2016).</li><li>King, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hu-PBL-NOD-scid+IL2rgnull+mouse+model+of+xenogeneic+graft-versus-host-like+disease+and+the+role+of+host+MHC.">Hu-PBL-NOD-scid IL2rgnull mouse model of xenogeneic graft-versus-host-like disease and the role of host MHC.</a> Clinical &amp; Experimental Immunology. 157, 104-118 (2009).</li><li>Halkias, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conserved+and+divergent+aspects+of+human+T-cell+development+and+migration+in+humanized+mice.">Conserved and divergent aspects of human T-cell development and migration in humanized mice.</a> Immunology and cell biology. 93 (8), 716-726 (2015).</li><li>Satheesan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+replication+and+latency+in+a+humanized+NSG+mouse+model+during+suppressive+oral+combinational+ART.">HIV replication and latency in a humanized NSG mouse model during suppressive oral combinational ART.</a> Journal of virology. , (2018).</li><li>Zhou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Receptor-targeted+aptamer-siRNA+conjugate-directed+transcriptional+regulation+of+HIV-1.">Receptor-targeted aptamer-siRNA conjugate-directed transcriptional regulation of HIV-1.</a> Theranostics. 8 (6), 1575-1590 (2018).</li><li>Zhou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-specific+RNA+aptamer+against+human+CCR5+specifically+targets+HIV-1+susceptible+cells+and+inhibits+HIV-1+infectivity.">Cell-specific RNA aptamer against human CCR5 specifically targets HIV-1 susceptible cells and inhibits HIV-1 infectivity.</a> Chemistry &amp; biology. 22 (3), 379-390 (2015).</li><li>Brechtl, J. R., Breitbart, W., Galietta, M., Krivo, S., Rosenfeld, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+highly+active+antiretroviral+therapy+(HAART)+in+patients+with+advanced+HIV+infection:+impact+on+medical,+palliative+care,+and+quality+of+life+outcomes.">The use of highly active antiretroviral therapy (HAART) in patients with advanced HIV infection: impact on medical, palliative care, and quality of life outcomes.</a> Journal of pain and symptom management. 21 (1), 41-51 (2001).</li><li>Richman, D. D., Margolis, D. M., Delaney, M., Greene, W. C., Hazuda, D., Pomerantz, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Challenge+of+Finding+a+Cure+for+HIV+Infection.">The Challenge of Finding a Cure for HIV Infection.</a> Science. 323 (5919), 1304-1307 (2009).</li><li>Pace, M. J., Agosto, L., Graf, E. H., O'Doherty, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+reservoirs+and+latency+models.">HIV reservoirs and latency models.</a> Virology. 411 (2), 344-354 (2011).</li><li>Van Herck, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sampling+from+the+retro-orbital+plexus,+the+saphenous+vein+and+the+tail+vein+in+rats:+comparative+effects+on+selected+behavioural+and+blood+variables.">Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables.</a> Laboratory animals. 35 (2), 131-139 (2001).</li><li>Autissier, P., Soulas, C., Burdo, T. H., Williams, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+12-color+flow+cytometry+panel+to+study+lymphocyte,+monocyte,+and+dendritic+cell+subsets+in+humans.">Evaluation of a 12-color flow cytometry panel to study lymphocyte, monocyte, and dendritic cell subsets in humans.</a> Cytometry. 77 (5), 410-419 (2010).</li><li>Lu, W., Mehraj, V., Vyboh, K., Cao, W., Li, T., Routy, J. -. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD4:CD8+ratio+as+a+frontier+marker+for+clinical+outcome,+immune+dysfunction+and+viral+reservoir+size+in+virologically+suppressed+HIV-positive+patients.">CD4:CD8 ratio as a frontier marker for clinical outcome, immune dysfunction and viral reservoir size in virologically suppressed HIV-positive patients.</a> Journal of the International AIDS Society. 18, 20052 (2015).</li><li>van't Wout, A. B., Schuitemaker, H., Kootstra, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+propagation+of+HIV-1+on+peripheral+blood+mononuclear+cells.">Isolation and propagation of HIV-1 on peripheral blood mononuclear cells.</a> Nature protocols. 3, 363 (2008).</li><li>Reagan-Shaw, S., Nihal, M., Ahmad, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dose+translation+from+animal+to+human+studies+revisited.">Dose translation from animal to human studies revisited.</a> FASEB journal: official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. 22 (3), 659-661 (2008).</li><li>Han, Y., Wind-Rotolo, M., Yang, H. -. C., Siliciano, J. D., Siliciano, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+approaches+to+the+study+of+HIV-1+latency.">Experimental approaches to the study of HIV-1 latency.</a> Nature reviews. Microbiology. 5 (2), 95-106 (2007).</li><li>Marsden, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+Latency+in+the+Humanized+BLT+Mouse.">HIV Latency in the Humanized BLT Mouse.</a> Journal of virology. 86 (1), 339-347 (2012).</li><li>Karpel, M. E., Boutwell, C. L., Allen, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BLT+humanized+mice+as+a+small+animal+model+of+HIV+infection.">BLT humanized mice as a small animal model of HIV infection.</a> Current opinion in virology. 13, 75-80 (2015).</li><li>Durand, C. M., Blankson, J. N., Siliciano, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developing+strategies+for+HIV-1+eradication.">Developing strategies for HIV-1 eradication.</a> Trends in immunology. 33 (11), 554-562 (2012).</li><li>Van Lint, C., Bouchat, S., Marcello, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-1+transcription+and+latency:+an+update.">HIV-1 transcription and latency: an update.</a> Retrovirology. 10, 67 (2013).</li><li>Xu, L., Zhang, Y., Luo, G., Li, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+roles+of+stem+cell+memory+T+cells+in+hematological+malignancies.">The roles of stem cell memory T cells in hematological malignancies.</a> Journal of hematology &amp; oncology. 8, 113 (2015).</li><li>Chun, T. -. W., Moir, S., Fauci, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+reservoirs+as+obstacles+and+opportunities+for+an+HIV+cure.">HIV reservoirs as obstacles and opportunities for an HIV cure.</a> Nature immunology. 16 (6), 584-589 (2015).</li><li>Redel, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-1+regulation+of+latency+in+the+monocyte-macrophage+lineage+and+in+CD4++T+lymphocytes.">HIV-1 regulation of latency in the monocyte-macrophage lineage and in CD4+ T lymphocytes.</a> Journal of leukocyte biology. 87 (4), 575-588 (2010).</li><li>Laird, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+Quantification+of+the+Latent+Reservoir+for+HIV-1+Using+a+Viral+Outgrowth+Assay.">Rapid Quantification of the Latent Reservoir for HIV-1 Using a Viral Outgrowth Assay.</a> PLoS pathogens. 9 (5), e1003398 (2013).</li></ol>

الفئران المناعة انجرافتيد مع خلايا/الأنسجة البشرية موجودة الخصائص الفسيولوجية شبيهة بالإنسان وقيمة هائلة لدراسات علم الأمراض والفيزيولوجيا المرضية، وعلم المناعة بشأن الأمراض الخاصة بالإنسان. بين عدة سلالات من الفئران المناعة، الموافقة. Cg-بركدكإخضاعهاIl2rgtm1Wji النموذجي ...

لإنشاء نماذج حيوانية مناسبة للأمراض التي تصيب الإنسان هو المفتاح لإيجاد علاج، نماذج الحيوانات المناسبة منذ فترة طويلة تم متابعتها وتتحسن مع مرور الوقت. وقد وضعت سلالات متعددة من نماذج مورين المناعة التي تسمح انجرافتمينت من الخلايا البشرية و/أو الأنسجة واللاحقة تنفيذ مهام أنسنة1،2. مثل هذه النماذج الماوس أنسنة حاسمة بالنسبة للتحقيقات المتعلقة بالأمراض الخاصة بالإنسان3،،من45.
متلازمة نقص المناعة المكتسب (الإيدز) الناتجة عن الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية (HIV) مثال واحد. قبل إنشاء نماذج الماوس أنسنة، تقتصر القيود الأخلاقية والتقنية فيروس نقص المناعة البشرية/الإيدز السريرية دراسات أجريت على الحيوانات أن المقدمات غير البشرية3. ومع ذلك، ارتفاع النفقات والاحتياجات للرعاية المتخصصة لمثل هذه الحيوانات تعيق الدراسات فيروس نقص المناعة البشرية/الإيدز في الإعدادات الأكاديمية النموذجية. فيروس نقص المناعة البشرية أساسا يصيب البشرية CD4 + T-الخلايا ويؤثر التنمية والاستجابات المناعية الخلايا المناعية البشرية الأخرى مثل الخلايا البائية، الضامة، والخلايا الجذعية6؛ ولذلك، نماذج حيوانية صغيرة زرعها مع نظم المناعة البشرية الفنية في ارتفاع الطلب.
وجاءت انطلاقة في عام 1988، عندما وضعت الفئران CB17-مشمولان بطفرة بركدكإخضاعها وأظهرت engraftment الناجح ل نظام المناعة البشرية1. نتائج الطفرات بركدكمشمولان في مهام خلية تي وب المعيبة ونظام المناعة تكيفية أبلاتيد في الفئران، مما يمكن انجرافتمينت من الأجهزة الطرفية البشرية الدم الخلايا وحيدات النوى (ببمكس)، الخلايا الجذعية المكونة للدم (HSCs)، و الأنسجة المكونة للدم الجنين7،8. ومع ذلك، كثيرا ما لوحظت مستويات منخفضة من انجرافتمينت في هذا النموذج؛ الأسباب المحتملة 1) المتبقية نشاط المناعة الفطرية التضمين عبر القاتل الطبيعية (ناغورني كاراباخ)-الخلايا و 2) تطوير المرحلة المتأخرة من الماوس وب-الخلايا التائية (يجتازها)5. التطور اللاحق لمرضى السكري غير البدناء (NOD)-مشمولان الماوس نموذج تحقق أسفل درامية-تنظيم نشاط ناغورني كاراباخ-الخلية؛ وهكذا، أنها قادرة على دعم مستوى أعلى وأكثر انجرافتمينت المستدام ل مكونات الجهاز المناعي البشري9. مواصلة قمع أو إعاقة التنمية للحصانة الفطرية، نماذج الماوس واضعة الاقتطاع أو خروج المغلوب مجموع interleukin-2 مستقبلات γ-سلسلة (Il2rg) في (الموافقة)--تم إنشاء خلفيةإخضاعها . Il2rg، γ سيتوكين-مستقبلات تعرف أيضا باسم المشترك-سلسلة، عنصر لا غنى عنه لمختلف سيتوكين مستقبلات10،11،،من1213. سلالات مثل انحناء. Cg-بركدكإخضاعهاIl2rgtm1Wji (مجموعة موردي المواد النووية) و NODShi.Cg-بركدكإخضاعهاIl2rgtm1Sug (وتد) يقدم قوي تعطيل الماوس سيتوكين إشارات والاجتثاث الكامل لوضع ناغورني كاراباخ-الخلية، في بالإضافة إلى إعاقة شديدة لمناعة التكيفية14،،من1516.
غالباً ما يلجأ ثلاثة نماذج الماوس أنسنة آخذا إخضاعها الطفرة و Il2rg بالضربة القاضية في أبحاث فيروس نقص المناعة البشرية/الإيدز: نموذج يستأجره (نخاع العظام/الكبد/الغدة الصعترية)، ونموذج PBL (من الكريات البيض الدموية الطرفية)، ونموذج SRC (الخلية إعادة إسكانها يكونوا مشمولان) 3. BLT نموذج يتم إنشاؤها عن طريق العمليات الجراحية زرع كبد الجنين البشري والغدة الصعترية تحت الكبسولة الكلي الماوس مصحوبا بالحقن الوريدي للجنين الكبد هسكس3،،من1718. يوفر الطراز الماوس يستأجره engraftment عالية الفعالية، التنمية البشرية الخلايا المكونة للدم في جميع الأنساب، وإنشاء نظام المناعة القوى البشرية؛ بالإضافة إلى ذلك، الخلايا التائية المتعلمات الغدة الصعترية ذاتي بشرية ويحمل المقيدة-هلا الاستجابات المناعية4،5،،من1719. ومع ذلك، يبقى الحاجة إلى العمليات الجراحية العيب الرئيسي من طراز BLT. هو إنشاء نموذج الماوس PBL عن طريق الحقن الوريدي مع الخلايا اللمفاوية الطرفية البشرية. نموذج PBL يوفر الراحة وغلة ناجحة تي خلية انجرافتمينت، ولكن تطبيقه محدودة بسبب غير كافية ب-الخلية و engraftment خلية النقوي، مستويات engraftment منخفضة عموما، وظهور أمراض شديدة في الفساد – مقابل – المضيف (GVHD)3 ،20. يتم تأسيس نموذج الماوس SRC من خلال ضخ هسكس البشرية في حديثي الولادة أو صغار البالغين مشمولان الفئران. معارض انجرافتمينت متوسط كفاءة أعلى من 25% (اعتبرت الدم المحيطي النسبة المئوية CD45)، ويدعم تطوير متعددة-النسب هسكس حقن ووضع نظام المناعة البشرية الفطرية. ومع ذلك، هو الحد الطراز SRC أن استجابة خلايا T الفأر المقيدة-H2 بدلاً من البشرية المقيدة-هلا14،21.
يعتبر الطراز الماوس SRC نموذج سهلة وموثوق بها السريري فيروس نقص المناعة البشرية/الإيدز الصغيرة الدراسات الحيوانية، يتجلى engraftment يتسق نظام المناعة البشري والتنمية الناجحة المكونة للدم. ونحن سابقا ذكرت إنشاء نموذج ماوس "مجموعة موردي المواد النووية" هو جين تاو SRC إخضاعها (هو جين تاو-مجموعة موردي المواد النووية) ووصف تطبيقه في النسخ المتماثل لفيروس نقص المناعة البشرية والكمون الدراسات22،،من2324. يسلك هذا الطراز الماوس هو جين تاو-مجموعة موردي المواد النووية مستويات عالية من صاروخ موجه نخاع العظام، والقابلية للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، وخلاصة للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية والمرضية. بالإضافة إلى ذلك، يستجيب على نحو ملائم للعلاج المضاد للفيروسات الرجعية اندماجي (عربة) نموذج الفأر هو جين تاو-مجموعة موردي المواد النووية ويجمل البلازما الارتداد الفيروسي عند سحب عربة، يؤكد إنشاء فيروس نقص المناعة البشرية الكمون الخزان25،26 ،27. هذا الخزان زمن انتقال فيروس نقص المناعة البشرية كذلك بأدلة إنتاج فيروس النسخ المتماثل المختصة الفيروسات السابقين فيفو الناجمة عن الإنسان يستريح CD4 + تي الخلايا المعزولة من الفئران المصابة والمعالجة بعربة هو جين تاو-مجموعة موردي المواد النووية.
هنا، يمكننا وصف البروتوكول مفصلاً لإنشاء نموذج الفأر هو جين تاو-مجموعة موردي المواد النووية من المواليد الفئران مجموعة موردي المواد النووية، بما في ذلك الإجراءات المتصلة بفيروس نقص المناعة البشرية العلاج العدوى وعربة للتنمية الكمون. ونحن نتوقع هذا البروتوكول لتقديم مجموعة جديدة من النهج في الدراسات الحيوانية فيروس نقص المناعة البشرية فيما يتعلق بفيروس نقص المناعة البشرية الفيروسات والكمون، والعلاج.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>CD34 MicroBead Kit, human</td>
			<td>MiltenyiBiotec</td>
			<td>130-046-703</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CryoStor CS2</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>07932</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOD.Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wji </td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>005557</td>
			<td>Order breeders instead of experimental mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IsoFlo</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-806-3204</td>
			<td>Order through animal facility, restricted item</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clidox disinfectant</td>
			<td>Fisher Sicentific</td>
			<td>NC9189926</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wescodyne</td>
			<td>Fisher Sicentific</td>
			<td>19-818-419</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton 80508 syringe/needle</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>80508</td>
			<td>Custom made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood collection tube (K2EDTA)</td>
			<td>BD Bioscience</td>
			<td>367843</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood collection tube (Heparin)</td>
			<td>BD Bioscience</td>
			<td>365965</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Capillary tube (Heparinized)</td>
			<td>Fisher Sicentific</td>
			<td>22-362574</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red Blood Cell Lysis Buffer</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>11814389001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QIAamp Viral RNA mini kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>52906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TaqMan Fast VIrus 1-step Master Mix</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>4444434</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HIV-1 P24 ELISA (5 Plate kit)</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td>NEK050B001KT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IgG from human serum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I4506-100MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IgG from mouse serum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I5381-10MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BB515 Mouse Anti-Human CD45 (clone HI30)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>564586</td>
			<td>RRID: AB_2732068, LOT 6347696</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-Cy7 Mouse Anti-Human CD3 (Clone SK7)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>557851</td>
			<td>RRID: AB_396896, LOT 6021877</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pacific Blue Mouse Anti-Human CD4 (Clone RPA-T4)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>558116</td>
			<td>RRID: AB_397037, LOT 6224744</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BUV395 Mouse Anti-Human CD8 (Clone RPA-T8)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>563795</td>
			<td>RRID: AB_2722501, LOT 6210668</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC-Alexa Fluor 750 Mouse Anti-Human CD14 (TuK4)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>MHCD1427</td>
			<td>RRID: AB_10373536, LOT 1684947A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE Mouse Anti-Human CD19 (SJ25-C1)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>MHCD1904</td>
			<td>RRID: AB_10373382, LOT 1725304B</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

humanized nod/scid/il2r&#947;null (hu-nsg) mouse model for hiv replication and latency studies

القواعد الأخلاقية والتحديات التقنية للبحوث في علم الأمراض البشرية وعلم المناعة والتنمية العلاجية قد وضعت نماذج حيوانية صغيرة في ارتفاع الطلب. مع تشابه شديد الجينية والسلوكية للبشر، هي الحيوانات الصغيرة مثل الماوس مرشحا جيدا لنماذج الأمراض البشرية، يمكن من خلالها لخص أعراض شبيهة بالإنسان والردود. علاوة على ذلك، يمكن تغيير الخلفية الوراثية الماوس لاستيعاب المطالب المتنوعة. إيماءة/نظام/IL2rγ الماوسفارغة (مجموعة موردي المواد النووية) واحدة من سلالات الماوس المناعة الأكثر استخداماً؛ فإنه يسمح انجرافتمينت بالخلايا الجذعية المكونة للدم البشري و/أو الأنسجة البشرية والتطور اللاحق لنظام المناعة البشرية الفنية. وهذا معلما حاسما في فهم التشخيص والفيزيولوجيا المرضية للإنسان-خاصة بأمراض مثل فيروس نقص المناعة البشرية/الإيدز، ومساعدة في البحث عن علاج. هنا، نحن تقرير بروتوكول مفصل لتوليد نموذج ماوس أنسنة مجموعة موردي المواد النووية (هو جين تاو-مجموعة موردي المواد النووية) بزرع الخلايا الجذعية المكونة للدم في ماوس مجموعة موردي المواد النووية الولدان مكيفة الإشعاع. يظهر نموذج الفأر هو جين تاو-مجموعة موردي المواد النووية تطوير نسب متعددة لزرع الخلايا الجذعية البشرية والقابلية للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية-1 الفيروسية. كما أنه يلخص الخصائص البيولوجية الرئيسية استجابة للعلاج المضاد للفيروسات الرجعية اندماجي (عربة).

وكثيراً ما يتم تحليل التدفق الخلوي التحقق من صحة نقاء هسكس معزولة، وتقييم مستويات engraftment، الشخصية الاستجابات المناعية للعدوى الفيروسية، واستقصاء فعالية عربة. لوحة جسم نموذجي يحتوي على 4-6 أجسام المسمى فلوريسسينتلي الفردية؛ وهكذا، سيتوميتير تدفق مع الليزر متعددة وتشكيل?...

Watch this Scientific Journal Video about Humanized NOD/SCID/IL2rÃŽÂ³null hu-NSG Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies at JoVE.com

Humanized NOD/SCID/IL2rÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³null hu-NSG Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies

هذا البروتوكول يوفر طريقة لإنشاء أنسنة الفئران (هو جين تاو-مجموعة موردي المواد النووية) عن طريق حقن أحياناً من الخلايا الجذعية المكونة للدم البشري في الإشعاع مكيفة الولدان الفئران مجموعة موردي المواد النووية. الماوس هو جين تاو-مجموعة موردي المواد النووية هو عرضه للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية والعلاج المضاد للفيروسات الرجعية اندماجي (عربة) ويخدم كنموذج مناسب الفيزيولوجية المرضية للتحقيقات النسخ المتماثل وزمن انتقال فيروس نقص المناعة البشرية.

أنسنة إيماءة/نظام/IL2rγفارغة الماوس (هو جين تاو-مجموعة موردي المواد النووية) نموذج للنسخ المتماثل من فيروس نقص المناعة البشرية والدراسات الكمون

Ethical regulations and technical challenges for research in human pathology, immunology, and therapeutic development have placed small animal models in ...

ويمكن لهذه المسائل أن تساعد في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في البحوث المتعلقة بفيروس نقص المناعة البشرية/الإيدز، مثل الآلية الجزيئية والتوقعات المتعلقة بعدوى فيروس نقص المناعة البشرية، وكيف وأين يتم إنشاء خزان الكمون. وميزة هذه التقنية هي أنها غير غازية، وأنشأت فئران هو-إنسغ التي يجب أن تعالج تطور متعدد النسب على الخلايا الجذعية البشرية المزروعة المعرضة للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية وتقبلاً للمعالجة القلبية المعالجة بطب الارت. تبدأ عن طريق تصفية هضم, الإنسان, الجنين, أنسجة الكبد, عينة الطين من خلال معقم, 70 ميكرومتر, نايلون, شبكة مصفاة للحصول على تعليق خلية واحدة, وإثراء لD34 + HSCs عن طريق الخلايا المغناطيسية تنشيط الفرز وفقا لتعليمات الشركة المصنعة.بعد العد، إعادة تعليق HSC في مرتين عشر إلى السابع خلايا قابلة للحياة لكل ملليلتر تركيز في DPBS جديدة على الجليد. في المكان التالي كامل الإنسان حديثي الولادة NOD / SCID / غاما أو NSG القمامة الماوس في العقيمة ، على شكل فطيرة ، وتشعيع قفص ، وعلاج الحيوانات مع 200 إلى 250 درجة مئوية من أشعة غاما من مصدر الإشعاع cesium - 137. ثم تحميل الخلايا في صنع مخصص، هاملتون 80508 50 ميكرولتر حقنة مجهزة بإبرة 30 قياس، وحقن كل حديثي الولادة مباشرة في الكبد مع خمس مرات عشر إلى الخامس الإنسان قابلة للحياة CD34 + HSCs و 25 ميكرولترات من DPBS.عشرة إلى اثني عشر أسبوعا بعد العدوى، تدور أسفل الرجعية المدارية، الطرفية، عينات الدم من كل فأرة عن طريق الطرد المركزي، ونقل عظمى البلازما إلى أنابيب microcentrifuge لتخزين سلبية 80 درجة مئوية كما هو مناسب تجريبيا. للتحقق من صحة engraftment HSC، إعادة تعليق الكريات مع 200 ميكرولترات من خلايا الدم الحمراء العازلة، وسحب تعليق الخلية في أنبوب microcentuge 1.5 ملليمتر لاحتضان لمدة عشر دقائق في درجة حرارة الغرفة. ثم جمع ما تبقى من خلايا الدم البيضاء عن طريق الطرد المركزي لاثنين من يغسل في 0.5 ملليلتر من الطازجة، 0.01 في المئة الألبومين مصل البقر، أو BSA، في DPBS لكل غسل.بعد الغسيل الثاني، كتلة الخلايا مع 100 ميكرولترات من حظر كوكتيل لمدة عشرين دقيقة في 4 درجات مئوية تليها وضع العلامات مع كوكتيل المضادة للجسم المناسبة من الاهتمام في 2 ميكرولترات من المضادة للجسم لكل مرة واحدة إلى التركيز الخلايا السادسة. بعد 30 دقيقة في 4 درجات مئوية، وغسل الخلايا مرتين في DPBS جديدة بالإضافة إلى BSA، وتقييم عينات الدم المحيطية عن طريق تدفق الخلايا وفقا للبروتوكولات القياسية لتحديد النسبة المئوية للإنسان CD45 + CD3 + CD14 + أو CD19 + الخلايا لكل عينة. ثم حساب نسبة CD4 + إلى CD8 + T الخلايا ، وتقييم الحمل الفيروسي مع في عينات البلازما وفقا لمعايير ، وكمية ، وعكس transcriptase ، وبروتوكولات PCR.لتقييم آثار الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، وتقديم فيروس نقص المناعة البشرية بالة للفيروس إلى تخدير، وفئران NSG مع أكبر من 20 في المئة البشرية CD45 + خلية السكان في الدم المحيطي، في 200 نانوغرام من التركيز P24 لكل فأرة عن طريق الإدارة intraperitoneal، وجمع عينات الدم عن طريق النزيف الرجعية المدارية كل أسبوعين، وتحليل كل من CD4 إلى CD8 نسبة وحمالة البلازما الفيروسية ، كما هو موضح. للتحقق من صحة قمع الفيروسية تزويد المصابين, الحيوانات NSG الإنسان مع الطازجة, الجمع بينات, المضادة للفيروسات الرجعية العلاج, أو cART, في الماء المحلاة كل أسبوع لمدة 4 أسابيع, جمع عينات الدم عن طريق النزيف الرجعية المدارية كل أسبوعين وتحليل كل من نسبة CD4 إلى CD8 والحمل الفيروسي البلازما كما هو موضح. لحابس انتعاش الفيروسية عندما الأحمال الفيروسية البلازما هي أقل من حد الكشف ويتم استعادة نسبة CD4-إلى-CD8 بين 1.5 و 2.5 جمع عينات الدم الطرفية من خلال نزيف الرجعية المدارية كل 2 أسابيع بعد انسحاب CART وتقييم العينات كما هو موضح.أثناء التحقق من صحة engraftment الأولي، يجب أن يتراوح عدد الخلايا CD45 البشرية من 20 إلى 80 في المائة، ويجب أن تظهر المجموعات الفرعية من الكريات البيض البشرية كسكان منفصلة عن طريق تحليل تدفق الخلايا. تبقى نسبة CD4 + إلى CD8 + الخلايا بين 1.5 و 2.5 في الأفراد الأصحاء في حين لوحظ استنفاد خلايا CD4 + T بشكل كبير عند العدوى الفيروسية. وتجدر الإشارة إلى أن نسبة صحية يتم استعادة استجابة لعلاج CART.ويمكن رسم الكشف عن الأحمال الفيروسية البلازما بواسطة كمية RT PCR طوال مسار العدوى ونظام CART واستخدامها لتقييم كفاءة التسليم الفيروسي والعلاج المضاد للفيروسات، على التوالي. على الرغم من أن هذه الطريقة يمكن أن توفر نظرة ثاقبة في دراسات الفيروسات فيروس نقص المناعة البشرية / الإيدز والتنمية العلاجية، ويمكن أيضا أن تطبق على دراسات أخرى تتعلق بأمراض الإنسان، مثل السرطان والسكري وأمراض المناعة الذاتية. مهد تطوير نموذج الماوس هوو-NSG الطريق للباحثين في علم المناعة والأورام لاستكشاف خلل وظيفي جديد وعلم الأمراض في البشر، وخاصة الدراسات الميكانيكية والعلاجية التي تستهدف العدوى المزمنة بفيروس نقص المناعة البشرية وخزان الكمون.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Humanized NOD/SCID/IL2r&#947;null (hu-NSG) Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies

Genotypic Inference of HIV-1 Tropism Using Population-based Sequencing of V3

الاستدلال الوراثي من HIV - 1 Tropism باستخدام السكان على أساس تسلسل V3

Background: Prior to receiving a drug from CCR5-antagonist class in HIV therapy, a patient must undergo an HIV tropism test to confirm that his or her ...

Dissecting Host-virus Interaction in Lytic Replication of a Model Herpesvirus

تشريح المضيف للفيروسات التفاعل في النسخ المتماثل التحللي من الفيروسة الموديل

In response to viral infection, a host develops various defensive responses, such as activating innate immune signaling pathways that lead to antiviral ...

Using the BLT Humanized Mouse as a Stem Cell based Gene Therapy Tumor Model

باستخدام الماوس BLT إنساني وساق الموديل خلية مقرها جين ورم العلاج

Small animal models such as mice have been extensively used to study human  disease and to develop new therapeutic interventions. Despite the wealth of  ...

Humanized Mouse Model to Study Bacterial Infections Targeting the Microvasculature

أنسنة نموذج الفأر لدراسة الالتهابات البكتيرية استهداف الأوعية الدموية الدقيقة

Neisseria meningitidis causes a severe, frequently fatal sepsis when it enters the human blood stream. Infection leads to extensive damage of the blood ...

Rapid Screening of HIV Reverse Transcriptase and Integrase Inhibitors

الفحص السريع للفيروس نقص المناعة البشرية والناسخ العكسي مثبطات Integrase

Although a number of anti HIV drugs have been approved, there are still problems with toxicity and drug resistance. This demonstrates a need to identify ...

Pairwise Growth Competition Assay for Determining the Replication Fitness of Human Immunodeficiency Viruses

زوجيا النمو الفحص التنافس على تحديد النسخ المتماثل للياقة البدنية من الفيروسات نقص المناعة البشرية

In vitro fitness assays are essential tools for determining viral replication fitness for viruses such as HIV-1. Various measurements have been used to ...

A 3D Human Lung Tissue Model for Functional Studies on Mycobacterium tuberculosis Infection

A 3D Human Lung Tissue Model for Functional Studies on Mycobacterium tuberculosis Infection

نموذج الأنسجة 3D الرئة الإنسان للدراسات وظيفية على<em&gt; المتفطرة السلية</em&gt; العدوى

Tuberculosis (TB) still holds a major threat to the health of people worldwide, and there is a need for cost-efficient but reliable models to help us ...

Measurement of In Vitro Integration Activity of HIV-1 Preintegration Complexes

Measurement of In Vitro Integration Activity of HIV-1 Preintegration Complexes

قياس ل<em&gt; في المختبر</em&gt; التكامل آخر من HIV-1 Preintegration مجمعات

HIV-1 envelope proteins engage cognate receptors on the target cell surface, which leads to viral-cell membrane fusion followed by the release of the ...

Influenza A Virus Studies in a Mouse Model of Infection

فيروس الإنفلونزا أ الفيروس دراسات في نموذج ماوس للإصابة

Influenza viruses cause over 500,000 deaths worldwide1 and are associated with an annual cost of 12 - 14 billion USD in the United States alone ...

Establishment of the Dual Humanized TK-NOG Mouse Model for HIV-associated Liver Pathogenesis

إنشاء نموذج الماوس ثنائي الأنسنة TK-NOG لمسببات أمراض الكبد المرتبطة بفيروس نقص المناعة البشرية

Despite the increased life expectancy of patients infected with human immunodeficiency virus-1 (HIV-1), liver disease has emerged as a common cause of ...