Name: humanized nod/scid/il2r&#947;null (hu-nsg) mouse model for hiv replication and latency studies
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Humanized NOD/SCID/IL2rÃŽÂ³null hu-NSG Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies at JoVE.com

Bu eser Ulusal [numaraları R01AI29329, R01AI42552 ve R01HL07470 J.J.R. için vermek] Sağlık Enstitüleri ve Ulusal Sağlık Enstitüleri [grant numarası P30CA033572 şehir umut bütünleştirici genomik desteklemek için Ulusal Kanser Enstitüsü tarafından desteklenmiştir Analitik Farmakoloji ve analitik sitometresi çekirdek]. Aşağıdaki reaktif NIH AIDS araştırma ve başvuru reaktif Program, bölünme AIDS, NIAID, NIH elde edildi: HIV BaL virüs.

Tüm hayvan bakımı ve yordamları gözden geçirilmiş ve şehir, umut hayvan Kurulusları tarafından onaylanmış iletişim kuralları ve kullanım Komitesi (IACUC) (Dr. John Rossi, IACUC #12034) Bu çalışmada yürütücü tarafından düzenlenen göre gerçekleştirilmiş. İnsan fetal karaciğer dokusu gelişmiş Bioscience kaynaklardan (Alameda, CA), kar amacı gütmeyen bir organizasyon, federal ve eyalet düzenlemelerine uygun olarak elde edildi. Satıcının kendi kurumsal İnceleme Kurulu (IRB) ve insan konu...

<ol>
	<li>Greiner, D. L., Hesselton, R. A., Shultz, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SCID+mouse+models+of+human+stem+cell+engraftment.">SCID mouse models of human stem cell engraftment.</a> Stem cells. 16 (3), 166-177 (1998).</li><li>Rongvaux, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+function+of+human+innate+immune+cells+in+a+humanized+mouse+model.">Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model.</a> Nature. 32 (4), 364-372 (2014).</li><li>Walsh, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+Mouse+Models+of+Clinical+Disease.">Humanized Mouse Models of Clinical Disease.</a> Annual review of pathology. 12, 187-215 (2017).</li><li>Shultz, L. D., Brehm, M. A., Garcia-Martinez, J. V., Greiner, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mice+for+immune+system+investigation:+progress,+promise+and+challenges.">Humanized mice for immune system investigation: progress, promise and challenges.</a> Nature reviews. Immunology. 12 (11), 786-798 (2012).</li><li>Shultz, L. D., Ishikawa, F., Greiner, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mice+in+translational+biomedical+research.">Humanized mice in translational biomedical research.</a> Nature reviews. Immunology. 7, (2007).</li><li>Moir, S., Fauci, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=B+cells+in+HIV+infection+and+disease.">B cells in HIV infection and disease.</a> Nature reviews. Immunology. 9 (4), 235-245 (2009).</li><li>McCune, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+SCID-hu+mouse:+murine+model+for+the+analysis+of+human+hematolymphoid+differentiation+and+function.">The SCID-hu mouse: murine model for the analysis of human hematolymphoid differentiation and function.</a> Science. 241 (4873), 1632-1639 (1988).</li><li>Mosier, D. E., Gulizia, R. J., Baird, S. M., Wilson, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+a+functional+human+immune+system+to+mice+with+severe+combined+immunodeficiency.">Transfer of a functional human immune system to mice with severe combined immunodeficiency.</a> Nature. 335, 256 (1988).</li><li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+defects+in+innate+and+adaptive+immunologic+function+in+NOD/LtSz-scid+mice.">Multiple defects in innate and adaptive immunologic function in NOD/LtSz-scid mice.</a> Journal of immunology. 154 (1), 180-191 (1995).</li><li>Ohbo, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+hematopoiesis+in+mice+with+a+truncated+mutant+of+the+interleukin-2+receptor+gamma+chain.">Modulation of hematopoiesis in mice with a truncated mutant of the interleukin-2 receptor gamma chain.</a> Blood. 87 (3), 956-967 (1996).</li><li>Ito, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOD/SCID/gamma(c)(null)+mouse:+an+excellent+recipient+mouse+model+for+engraftment+of+human+cells.">NOD/SCID/gamma(c)(null) mouse: an excellent recipient mouse model for engraftment of human cells.</a> Blood. 100 (9), 3175-3182 (2002).</li><li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+lymphoid+and+myeloid+cell+development+in+NOD/LtSz-scid+IL2R+gamma+null+mice+engrafted+with+mobilized+human+hemopoietic+stem+cells.">Human lymphoid and myeloid cell development in NOD/LtSz-scid IL2R gamma null mice engrafted with mobilized human hemopoietic stem cells.</a> Journal of immunology. 174 (10), 6477-6489 (2005).</li><li>Ishikawa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+functional+human+blood+and+immune+systems+in+NOD/SCID/IL2+receptor+{gamma}+chain(null)+mice.">Development of functional human blood and immune systems in NOD/SCID/IL2 receptor {gamma} chain(null) mice.</a> Blood. 106 (5), 1565-1573 (2005).</li><li>Watanabe, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+analysis+of+the+functions+of+human+B+and+T+cells+in+humanized+NOD/shi-scid/gammac(null)+(NOG)+mice+(hu-HSC+NOG+mice).">The analysis of the functions of human B and T cells in humanized NOD/shi-scid/gammac(null) (NOG) mice (hu-HSC NOG mice).</a> International immunology. 21 (7), 843-858 (2009).</li><li>McDermott, S. P., Eppert, K., Lechman, E. R., Doedens, M., Dick, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+human+cord+blood+engraftment+between+immunocompromised+mouse+strains.">Comparison of human cord blood engraftment between immunocompromised mouse strains.</a> Blood. 116 (2), 193-200 (2010).</li><li>Mazurier, F., Doedens, M., Gan, O. I., Dick, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+myeloerythroid+repopulation+after+intrafemoral+transplantation+of+NOD-SCID+mice+reveals+a+new+class+of+human+stem+cells.">Rapid myeloerythroid repopulation after intrafemoral transplantation of NOD-SCID mice reveals a new class of human stem cells.</a> Nature. 9 (7), 959-963 (2003).</li><li>Melkus, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mice+mount+specific+adaptive+and+innate+immune+responses+to+EBV+and+TSST-1.">Humanized mice mount specific adaptive and innate immune responses to EBV and TSST-1.</a> Nature medicine. 12, 1316 (2006).</li><li>Lan, P., Tonomura, N., Shimizu, A., Wang, S., Yang, Y. -. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstitution+of+a+functional+human+immune+system+in+immunodeficient+mice+through+combined+human+fetal+thymus/liver+and+CD34++cell+transplantation.">Reconstitution of a functional human immune system in immunodeficient mice through combined human fetal thymus/liver and CD34+ cell transplantation.</a> Blood. 108 (2), 487-492 (2006).</li><li>Brehm, M. A., Bortell, R., Verma, M., Shultz, L. D., Greiner, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+Mice+in+Translational+Immunology.">Humanized Mice in Translational Immunology.</a> Translational Immunology. , 285-326 (2016).</li><li>King, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hu-PBL-NOD-scid+IL2rgnull+mouse+model+of+xenogeneic+graft-versus-host-like+disease+and+the+role+of+host+MHC.">Hu-PBL-NOD-scid IL2rgnull mouse model of xenogeneic graft-versus-host-like disease and the role of host MHC.</a> Clinical &amp; Experimental Immunology. 157, 104-118 (2009).</li><li>Halkias, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conserved+and+divergent+aspects+of+human+T-cell+development+and+migration+in+humanized+mice.">Conserved and divergent aspects of human T-cell development and migration in humanized mice.</a> Immunology and cell biology. 93 (8), 716-726 (2015).</li><li>Satheesan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+replication+and+latency+in+a+humanized+NSG+mouse+model+during+suppressive+oral+combinational+ART.">HIV replication and latency in a humanized NSG mouse model during suppressive oral combinational ART.</a> Journal of virology. , (2018).</li><li>Zhou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Receptor-targeted+aptamer-siRNA+conjugate-directed+transcriptional+regulation+of+HIV-1.">Receptor-targeted aptamer-siRNA conjugate-directed transcriptional regulation of HIV-1.</a> Theranostics. 8 (6), 1575-1590 (2018).</li><li>Zhou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-specific+RNA+aptamer+against+human+CCR5+specifically+targets+HIV-1+susceptible+cells+and+inhibits+HIV-1+infectivity.">Cell-specific RNA aptamer against human CCR5 specifically targets HIV-1 susceptible cells and inhibits HIV-1 infectivity.</a> Chemistry &amp; biology. 22 (3), 379-390 (2015).</li><li>Brechtl, J. R., Breitbart, W., Galietta, M., Krivo, S., Rosenfeld, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+highly+active+antiretroviral+therapy+(HAART)+in+patients+with+advanced+HIV+infection:+impact+on+medical,+palliative+care,+and+quality+of+life+outcomes.">The use of highly active antiretroviral therapy (HAART) in patients with advanced HIV infection: impact on medical, palliative care, and quality of life outcomes.</a> Journal of pain and symptom management. 21 (1), 41-51 (2001).</li><li>Richman, D. D., Margolis, D. M., Delaney, M., Greene, W. C., Hazuda, D., Pomerantz, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Challenge+of+Finding+a+Cure+for+HIV+Infection.">The Challenge of Finding a Cure for HIV Infection.</a> Science. 323 (5919), 1304-1307 (2009).</li><li>Pace, M. J., Agosto, L., Graf, E. H., O'Doherty, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+reservoirs+and+latency+models.">HIV reservoirs and latency models.</a> Virology. 411 (2), 344-354 (2011).</li><li>Van Herck, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sampling+from+the+retro-orbital+plexus,+the+saphenous+vein+and+the+tail+vein+in+rats:+comparative+effects+on+selected+behavioural+and+blood+variables.">Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables.</a> Laboratory animals. 35 (2), 131-139 (2001).</li><li>Autissier, P., Soulas, C., Burdo, T. H., Williams, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+12-color+flow+cytometry+panel+to+study+lymphocyte,+monocyte,+and+dendritic+cell+subsets+in+humans.">Evaluation of a 12-color flow cytometry panel to study lymphocyte, monocyte, and dendritic cell subsets in humans.</a> Cytometry. 77 (5), 410-419 (2010).</li><li>Lu, W., Mehraj, V., Vyboh, K., Cao, W., Li, T., Routy, J. -. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD4:CD8+ratio+as+a+frontier+marker+for+clinical+outcome,+immune+dysfunction+and+viral+reservoir+size+in+virologically+suppressed+HIV-positive+patients.">CD4:CD8 ratio as a frontier marker for clinical outcome, immune dysfunction and viral reservoir size in virologically suppressed HIV-positive patients.</a> Journal of the International AIDS Society. 18, 20052 (2015).</li><li>van't Wout, A. B., Schuitemaker, H., Kootstra, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+propagation+of+HIV-1+on+peripheral+blood+mononuclear+cells.">Isolation and propagation of HIV-1 on peripheral blood mononuclear cells.</a> Nature protocols. 3, 363 (2008).</li><li>Reagan-Shaw, S., Nihal, M., Ahmad, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dose+translation+from+animal+to+human+studies+revisited.">Dose translation from animal to human studies revisited.</a> FASEB journal: official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. 22 (3), 659-661 (2008).</li><li>Han, Y., Wind-Rotolo, M., Yang, H. -. C., Siliciano, J. D., Siliciano, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+approaches+to+the+study+of+HIV-1+latency.">Experimental approaches to the study of HIV-1 latency.</a> Nature reviews. Microbiology. 5 (2), 95-106 (2007).</li><li>Marsden, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+Latency+in+the+Humanized+BLT+Mouse.">HIV Latency in the Humanized BLT Mouse.</a> Journal of virology. 86 (1), 339-347 (2012).</li><li>Karpel, M. E., Boutwell, C. L., Allen, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BLT+humanized+mice+as+a+small+animal+model+of+HIV+infection.">BLT humanized mice as a small animal model of HIV infection.</a> Current opinion in virology. 13, 75-80 (2015).</li><li>Durand, C. M., Blankson, J. N., Siliciano, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developing+strategies+for+HIV-1+eradication.">Developing strategies for HIV-1 eradication.</a> Trends in immunology. 33 (11), 554-562 (2012).</li><li>Van Lint, C., Bouchat, S., Marcello, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-1+transcription+and+latency:+an+update.">HIV-1 transcription and latency: an update.</a> Retrovirology. 10, 67 (2013).</li><li>Xu, L., Zhang, Y., Luo, G., Li, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+roles+of+stem+cell+memory+T+cells+in+hematological+malignancies.">The roles of stem cell memory T cells in hematological malignancies.</a> Journal of hematology &amp; oncology. 8, 113 (2015).</li><li>Chun, T. -. W., Moir, S., Fauci, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV+reservoirs+as+obstacles+and+opportunities+for+an+HIV+cure.">HIV reservoirs as obstacles and opportunities for an HIV cure.</a> Nature immunology. 16 (6), 584-589 (2015).</li><li>Redel, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-1+regulation+of+latency+in+the+monocyte-macrophage+lineage+and+in+CD4++T+lymphocytes.">HIV-1 regulation of latency in the monocyte-macrophage lineage and in CD4+ T lymphocytes.</a> Journal of leukocyte biology. 87 (4), 575-588 (2010).</li><li>Laird, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+Quantification+of+the+Latent+Reservoir+for+HIV-1+Using+a+Viral+Outgrowth+Assay.">Rapid Quantification of the Latent Reservoir for HIV-1 Using a Viral Outgrowth Assay.</a> PLoS pathogens. 9 (5), e1003398 (2013).</li></ol>

İmmün fare insan hücreleri/dokusu ile engrafted insan benzeri fizyolojik özellikleri sunmak ve insan özgü hastalıklar ile ilgili patoloji, patofizyolojisi ve İmmünoloji çalışmalar için çok büyük bir değeri vardır. İmmün fareler, NOD birden fazla suşları arasında. CG -PrkdcscidIl2rgtm1Wji (NSG) modelidir en immünyetmezligi3,12,19 sinyal ablated fare özgü sitokin yanı sıra doğ...

İnsan hastalıkları uygun hayvan modellerinde kurulması için bir çare bulma anahtar olduğundan, uygun hayvan modelleri uzun edilmiş takip ve zaman içinde geliştirilmiş. Birden fazla immün fare modelleri suşların engraftment insan hücreleri ve/veya doku ve insanlaşmış işlevleri1,2sonraki yürütülmesine izin veren geliştirdik. İnsanlaşmış fare modelleri gibi insan özgü hastalıklar3,4,5araştırmalar için kritik öneme sahiptir.
Edinilmiş bağışıklık yetersizliği Sendromu (AIDS) enfeksiyon human Immunodeficiency virus (HIV) ile sonuçlanan bir örnektir. İnsanlaşmış fare modelleri kurulması önce etik ve teknik sınırlamalar HIV/AIDS preklinik hayvan çalışmaları insan dışı primatlar3sınırlı. Ancak, yüksek gider ve bu tür hayvan için özel bakım için gereksinimleri normal akademik ayarlar çalışmalarda HIV/AIDS engel. HIV öncelikle insan CD4 + T-hücreleri bozar ve gelişme ve bağışıklık yanıtı B-hücreler, makrofajlar ve dendritik hücreleri6gibi diğer insan bağışıklık hücrelerinin etkiler; Bu nedenle, fonksiyonel insan bağışıklık sistemleri ile nakledilen küçük hayvan yüksek talep modellerdir.
Bir atılım CB17 -scid fareler Prkdcscid mutasyon ile geliştirilmiş olup, insan bağışıklık sistemi1' in başarılı engraftment gösterdi otelde 1988'de geldi. Arızalı T ve B hücre fonksiyonları Prkdcscid mutasyon sonuçlarında ve farelerde ablated edinilmiş bağışıklık sistemi, böylece insan periferik engraftment etkinleştirme kan mononükleer hücreler (PBMCs), hematopoetik kök hücre (HSCs), ve Fetal hematopoetik doku7,8. Yine de, engraftment seviyesinin düşük sık sık bu modelde gözlenen; olası nedenleri şunlardır 1) kalan doğuştan gelen bağışıklık etkinlik doğal öldürücü (NK) yolu ile modüle-hücreleri ve 2) fare T ve B hücreleri (leakiness)5son aşama geliştirilmesi. Obez olmayan diyabetik (NOD) sonraki gelişimi-scid fare modeli elde dramatik aşağı-Yönetmeliğin NK hücre faaliyet; Böylece, daha yüksek bir seviyeye ve insan bağışıklık sistemi bileşenleri9daha fazla sürdürülebilir engraftment desteklemek yapabiliyor. Daha fazla bastırmak veya kesilmesi veya interleukin-2 reseptör γ-zinciri (Il2rg) Toplam nakavt (sallama) taşıyan fare modelleri doğuştan gelen bağışıklık, gelişimine engel -scid arka plan kuruldu. Il2rg, olarak da bilinen ortak sitokin reseptör γ-zinciri, çeşitli sitokin reseptörleri10,11,12,13, vazgeçilmez bir bileşenidir. Suşları başını sallamak gibi. CG -PrkdcscidIl2rgtm1Wji (NSG) ve NODShi.Cg -PrkdcscidIl2rgtm1Sug (takoz) mevcut fare sitokin sinyal sağlam bozulma ve tam ablasyon NK hücre gelişimi içinde edinilmiş bağışıklığın14,15,16ağır bozukluğu için ek.
Mutasyon ve Il2rg nakavt scid taşıyan üç insanlaşmış fare modelleri sık HIV/AIDS araştırma istihdam edilmektedir: BLT (kemik iliği/karaciğer/timus) model PBL (periferik kan lökosit) model ve SRC (SCID kullanıma hücre) modeli 3. BLT modeli insan fetal karaciğer ve timus fetal karaciğer HSCs3,17,18İntravenöz enjeksiyon ile eşlik fare böbrek kapsülü altında cerrahi nakli yoluyla oluşturulur. BLT fare modeli yüksek engraftment yeterlik, Bütün soy insan hematopoetik hücrelerin gelişimi ve güçlü bir insan bağışıklık sistemi kurulması sunar; Ayrıca, T-hücreleri bir insan otolog timus eğitimli ve HLA-sınırlı bağışıklık yanıtı4,5,17,19sergi. Ancak, cerrahi işlemler gereksinimini BLT modelinin önemli dezavantajı kalır. PBL fare modeli ile insan periferik lenfoid hücreleri Intravenöz enjeksiyon tarafından kurulmuştur. PBL modeli kolaylık sunuyor ve başarılı T-hücre engraftment verir, ancak uygulama yetersiz B-hücre ve myeloid hücre engraftment, düşük engraftment seviyeleri genel ve ağır graft - versus - host hastalığı (GVHD)3 başlangıçlı nedeniyle sınırlıdır ,20. SRC fare modeli insan HSCs enjeksiyonuyla yeni doğan veya Genç Yetişkin SCID fareler içine kuruldu. Bu ortalama engraftment verimliliği % 25 (periferik kan CD45 yüzde değerlendirildi) yukarıda sergiler ve enjekte HSCs çoklu-lineage gelişimi ve doğuştan gelen bir insan bağışıklık sistemi hazırlama destekler. Ancak, SRC model T hücreli yanıt olduğunu fare olduğunu H2 tarafından kısıtlanmış insan HLA-sınırlı14,21yerine kısıtlamasıdır.
SRC fare modeli tarafından bir insan bağışıklık sistemi ve başarılı hematopoetik geliştirme engraftment tutarlı örneği preklinik HIV/AIDS küçük hayvan çalışmaları için facile ve güvenilir bir model olarak kabul edilir. Biz daha önce bir NSG Hu-SRC-SCID (hu-NSG) fare modeli kurulması bildirdi ve HIV çoğaltma ve gecikme süresi çalışmaları22,23,24kendi uygulamasında açıklanan. Bu hu-NSG fare modeli kemik iliği posta, HIV enfeksiyonu duyarlılık düzeyi yüksek ve HIV enfeksiyonu ve Patogenez Rekapitülasyon sergiler. Ayrıca, hu-NSG fare modeli uygun şekilde Kombinatorik antiretroviral tedavi (sepeti) yanıt verir ve plazma viral rebound sepeti çekilmesi, bir HIV gecikme süresi rezervuar25,26 kurulması teyit üzerine tablodur ,27. Bu HIV gecikme süresi rezervuar daha fazla insan CD4 + T-hücreleri enfekte ve sepeti tedavi hu NSG fareler izole dinlenme tarafından indüklenen çoğaltma yetkili HIV virüs ex vivo üretim tarafından kanıtlanmış.
Burada, yenidoğan NSG fare gecikme süresi Kalkınma HIV enfeksiyonu ve sepeti tedavisi ile ilgili yordamları da dahil olmak üzere, hu-NSG fare modelinden kurulması için detaylı protokolü açıklar. Yeni HIV hayvan çalışmaları HIV Viroloji, gecikme süresi ve tedavi ile ilgili yaklaşımlar sunar için bu iletişim kurallarını bekliyoruz.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>CD34 MicroBead Kit, human</td>
			<td>MiltenyiBiotec</td>
			<td>130-046-703</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CryoStor CS2</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>07932</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOD.Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wji </td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>005557</td>
			<td>Order breeders instead of experimental mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IsoFlo</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-806-3204</td>
			<td>Order through animal facility, restricted item</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clidox disinfectant</td>
			<td>Fisher Sicentific</td>
			<td>NC9189926</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wescodyne</td>
			<td>Fisher Sicentific</td>
			<td>19-818-419</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton 80508 syringe/needle</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>80508</td>
			<td>Custom made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood collection tube (K2EDTA)</td>
			<td>BD Bioscience</td>
			<td>367843</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood collection tube (Heparin)</td>
			<td>BD Bioscience</td>
			<td>365965</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Capillary tube (Heparinized)</td>
			<td>Fisher Sicentific</td>
			<td>22-362574</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red Blood Cell Lysis Buffer</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>11814389001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QIAamp Viral RNA mini kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>52906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TaqMan Fast VIrus 1-step Master Mix</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>4444434</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HIV-1 P24 ELISA (5 Plate kit)</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td>NEK050B001KT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IgG from human serum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I4506-100MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IgG from mouse serum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I5381-10MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BB515 Mouse Anti-Human CD45 (clone HI30)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>564586</td>
			<td>RRID: AB_2732068, LOT 6347696</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-Cy7 Mouse Anti-Human CD3 (Clone SK7)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>557851</td>
			<td>RRID: AB_396896, LOT 6021877</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pacific Blue Mouse Anti-Human CD4 (Clone RPA-T4)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>558116</td>
			<td>RRID: AB_397037, LOT 6224744</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BUV395 Mouse Anti-Human CD8 (Clone RPA-T8)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>563795</td>
			<td>RRID: AB_2722501, LOT 6210668</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC-Alexa Fluor 750 Mouse Anti-Human CD14 (TuK4)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>MHCD1427</td>
			<td>RRID: AB_10373536, LOT 1684947A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE Mouse Anti-Human CD19 (SJ25-C1)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>MHCD1904</td>
			<td>RRID: AB_10373382, LOT 1725304B</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

humanized nod/scid/il2r&#947;null (hu-nsg) mouse model for hiv replication and latency studies

Etik kuralları ve teknik sorunlar için araştırma insan patoloji, immünoloji ve terapötik geliştirme küçük hayvan modelleri yüksek talep soktuk. Yakın bir genetik ve davranışsal benzerlik ile insanlar, fare gibi küçük hayvan insan hastalık modelleri, hangi aracılığıyla insan benzeri belirtiler ve yanıt-e doğru recapitulated için iyi adaylardır. Ayrıca, fare genetik arka plan çeşitli talepleri karşılamak için değiştirilebilir. NOD/SCID/IL2rγnull (NSG) fare en çok kullanılan immün fare suşları biridir; engraftment ile insan hematopoetik kök hücre ve/veya insan doku ve işlevsel bir insan bağışıklık sisteminin sonraki geliştirme sağlar. Bu prognoz ve insan özgü hastalıklar HIV/AIDS gibi Patofizyoloji anlama ve tedavi için arama yardım önemli bir kilometre taşıdır. Burada, hematopoetik kök hücre transplantasyonu radyasyon şartına yenidoğan NSG fare içine tarafından bir insanlaşmış NSG fare modeli (hu-NSG) oluşturmak için ayrıntılı bir protokol rapor. Hu-NSG fare modeli çoklu soy gelişme HIV-1 viral enfeksiyon duyarlılık ve transplante insan kök hücreleri gösterir. Ayrıca Kombinatorik antiretroviral tedavi (sepeti) karşılık olarak anahtar biyolojik özellikleri beyannamedir.

Akış Sitometresi Analizi sık izole HSCs saflığı doğrulamak, engraftment seviyesini, viral enfeksiyon, profil bağışıklık yanıtlarını ve sepeti etkinliği anket yapılır. Tipik antikor panelinde 4-6 bireysel fluorescently etiketli antikorlar bulunur; Böylece, bir akış sitometresi birden çok lazerler ve filtreleri geniş bir seçki ile doğru sonuçlar elde edilmesi için önemlidir.
İlk engraftment doğrulama,...

Watch this Scientific Journal Video about Humanized NOD/SCID/IL2rÃŽÂ³null hu-NSG Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies at JoVE.com

Humanized NOD/SCID/IL2rÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³null hu-NSG Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies

Bu iletişim kuralı radyasyon şartına yenidoğan NSG fareler içine insan hematopoetik kök hücre intrahepatic enjeksiyon yoluyla insanlaşmış fareler (hu-NSG) kurmak için bir yöntem sağlar. Hu-NSG fare duyarlı HIV enfeksiyonu ve kombinatorik antiretroviral tedavi (sepet) ve HIV çoğaltma ve gecikme süresi incelemeler için uygun bir patofizyolojik model olarak hizmet vermektedir.

İnsanlaşmış NOD/SCID/IL2rγnull (hu-NSG) fare modeli HIV çoğaltma ve gecikme süresi çalışmaları için

Ethical regulations and technical challenges for research in human pathology, immunology, and therapeutic development have placed small animal models in ...

Bu konular, HIV/AIDS araştırmalarında, hiv enfeksiyonunun moleküler mekanizması ve prognozu ve gecikme rezervuarının nasıl ve nerede kurulduğu gibi temel soruların yanıtlatılanına yardımcı olabilir. Bu tekniğin avantajı non-invaziv olmasıdır, ve HIV enfeksiyonuna duyarlı ve cART duyarlı olan nakledilen insan kök hücreleri üzerinde bir çok soy gelişimi tedavi etmek gerekir bir hu-NSG fareler kurdu. Sindirilmiş, insan, fetal, karaciğer dokusu, bulamaç örneğini steril, 70 mikrometre, naylon, örgü süzgeç üzerinden filtreleyerek tek bir hücre süspansiyonu elde etmek için başlayın ve üreticinin talimatlarına göre manyetik aktif hücre sıralaması ile CD34+HSC'ler için zenginleştirin.Saydıktan sonra, hsc'yi buzdaki taze DPBS'de mililitre konsantrasyonu başına iki kez-on-yedinci canlı hücrelerde yeniden askıya alın. Sonraki yer steril içine bir bütün neonatal insan NOD / SCID / gama veya NSG fare çöp, pasta şeklinde, ışınlama kafesi, ve bir sezyum-137 radyasyon kaynağından gama ışını 200 ila 250 santigrat derece ile hayvanlar tedavi. Sonra özel yapım içine hücreleri yükleyin, Hamilton 80508 50-mikrolitre şırınga 30-gauge iğne ile donatılmış, ve beş-on-on-beşinci canlı insan CD34 + HSC ve DPBS 25 mikrolitre ile karaciğer doğrudan her yenidoğan hayvan enjekte.On-on iki hafta enfeksiyon sonrası, retro-orbital aşağı spin, periferik, santrifüj ile her fareden kan örnekleri, ve deneysel olarak uygun olarak negatif 80 santigrat depolama için mikrosantrifüj tüpleriçin plazma supernates aktarın. HSC engraftment doğrulama için, kırmızı kan hücresi lisis tampon 200 mikrolitre ile pelet yeniden askıya almak ve oda sıcaklığında on dakikalık kuluçka için 1,5 milimetre mikrosantrifüj tüp hücre süspansiyonlar çekin. Daha sonra kalan beyaz kan hücrelerini, yıkama başına DPBS'de 0,5 mililitre taze, yüzde 0,01 büyükbaş hayvan serum albumini veya BSA'da iki yıkama için santrifüj ile toplayın.İkinci yıkamadan sonra, 4 santigrat derece yirmi dakika boyunca engelleme kokteyl 100 mikrolitre ile hücreleri bloke ve bir kez-bir-bir-altıdan altıncı hücre konsantrasyonu başına anti-vücut 2 mikrolitre ilgi uygun anti-vücut kokteyl ile etiketleme izledi. 4 santigrat derecede 30 dakika sonra hücreleri taze DPBS artı BSA'da iki kez yıkayın ve numune başına insan CD45+CD3+CD14+veya CD19+hücrelerinin yüzdesini ölçmek için standart protokollere göre akış sitometrisi ile periferik kan örneklerini değerlendirin. Daha sonra CD4+-CD8+T hücrelerinin oranını hesaplayın ve plazma örneklerindeki viral yükü standart, nicel, ters transkriptaz, PCR protokollerine göre değerlendirin.HIV enfeksiyonunun etkilerini değerlendirmek için, hiv balya virüsünü anestezi, insan, NSG farelere periferik kanlarında yüzde 20'den fazla insan CD45+hücre popülasyonu ile, intraperitoneal uygulama yoluyla fare konsantrasyonu başına 200 nanogram P24'te, her iki haftada bir retro-orbital kanama yoluyla kan örnekleri toplayarak ve hem CD4-TO-CD8 oranını hem de plazma yükünü analiz etmek için , gösterildiği gibi. Viral bastırma doğrulama kaynağı için taze, kombinatoryal, anti-retroviral tedavi veya cART ile enfekte, insan NSG hayvanlar, tatlı suda her hafta 4 hafta boyunca, retro-orbital kanama ile kan örnekleri toplama her iki haftada bir ve hem CD4-to-CD8 oranı ve plazma viral yük olarak gösterildiği gibi analiz. Plazma viral yükleri algılama limitinin altında olduğunda ve CD4-TO-CD8 oranı 1.5 ile 2.5 arasında geri yüklendiğinde viral rebound'u değerlendirmek için cART çekilmesinden sonra her 2 haftada bir retro-orbital kanama yoluyla periferik kan örnekleri toplanır ve örnekleri gösterildiği gibi değerlendirir.İlk engraftment doğrulama sırasında, insan CD45 + hücre sayısı yüzde 20 ila 80 arasında olmalıdır, ve insan lökosit alt kümeleri akış sitometrik analiz ile ayrık popülasyonlar olarak görünmelidir. Sağlıklı bireylerde CD4+-CD8+hücrelerin inkişafı ise tipik olarak viral enfeksiyon da gözlenirken, cd4+-CD8+hücrelerin oranı 1.5 ile 2.5 arasında kalmaktadır. Özellikle cART tedavisine yanıt olarak sağlıklı oran geri kazanılır.Enfeksiyon ve cART rejimi boyunca kantitatif RT PCR ile plazma viral yüklerin tespiti çizilebilir ve viral doğum ve anti-viral tedavi verimliliğini değerlendirmek için kullanılır, sırasıyla. Bu yöntem HIV / AIDS viroloji çalışmaları ve terapötik gelişimi içine fikir sağlayabilir rağmen, aynı zamanda kanser, diyabet gibi insan hastalığı ile ilgili diğer çalışmalara uygulanabilir, ve oto-immün hastalıklar. Hu-NSG fare modeli geliştirme immünoloji ve onkoloji araştırmacılar için insanlarda yeni bir disfonksiyon ve patoloji keşfetmek için yol açtı, hiv kronik enfeksiyon ve gecikme rezervuar hedefleyen özellikle mekanistik ve terapötik çalışmalar.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Humanized NOD/SCID/IL2r&#947;null (hu-NSG) Mouse Model for HIV Replication and Latency Studies

Genotypic Inference of HIV-1 Tropism Using Population-based Sequencing of V3

HIV-1 tropizm genotipik Çıkarım kullanarak Nüfus tabanlı Sıralama V3

Background: Prior to receiving a drug from CCR5-antagonist class in HIV therapy, a patient must undergo an HIV tropism test to confirm that his or her ...

Dissecting Host-virus Interaction in Lytic Replication of a Model Herpesvirus

Model Herpesvirüs Litik çoğaltma Diseksiyon Host-virüs Etkileşim

In response to viral infection, a host develops various defensive responses, such as activating innate immune signaling pathways that lead to antiviral ...

Using the BLT Humanized Mouse as a Stem Cell based Gene Therapy Tumor Model

Bir Kök Hücre tabanlı Gen Terapisi Tümör Modeli olarak BLT Insanlaşmış Fare Kullanma

Small animal models such as mice have been extensively used to study human  disease and to develop new therapeutic interventions. Despite the wealth of  ...

Humanized Mouse Model to Study Bacterial Infections Targeting the Microvasculature

Insanlaşmış Fare Modeli mikrovaskülatürde Hedefleme Bakteriyel Enfeksiyonlar Eğitim için

Neisseria meningitidis causes a severe, frequently fatal sepsis when it enters the human blood stream. Infection leads to extensive damage of the blood ...

Rapid Screening of HIV Reverse Transcriptase and Integrase Inhibitors

HIV ters transkriptaz ve integraz inhibitörleri hızlı taranması

Although a number of anti HIV drugs have been approved, there are still problems with toxicity and drug resistance. This demonstrates a need to identify ...

Pairwise Growth Competition Assay for Determining the Replication Fitness of Human Immunodeficiency Viruses

İnsan İmmün Yetmezlik Virüs çoğaltma Fitness belirlenmesi için İkili Büyüme Rekabet Analizi

In vitro fitness assays are essential tools for determining viral replication fitness for viruses such as HIV-1. Various measurements have been used to ...

A 3D Human Lung Tissue Model for Functional Studies on Mycobacterium tuberculosis Infection

A 3D Human Lung Tissue Model for Functional Studies on Mycobacterium tuberculosis Infection

Fonksiyonel Araştırmaları 3D İnsan Akciğer Doku Modeli<em&gt; Mycobacterium tuberculosis</em&gt; Enfeksiyon

Tuberculosis (TB) still holds a major threat to the health of people worldwide, and there is a need for cost-efficient but reliable models to help us ...

Measurement of In Vitro Integration Activity of HIV-1 Preintegration Complexes

Measurement of In Vitro Integration Activity of HIV-1 Preintegration Complexes

Ölçümü<em&gt; İn Vitro</em&gt; HIV-1 Preintegration Kompleksleri Entegrasyon Etkinliği

HIV-1 envelope proteins engage cognate receptors on the target cell surface, which leads to viral-cell membrane fusion followed by the release of the ...

Influenza A Virus Studies in a Mouse Model of Infection

Grip A virüs enfeksiyonu bir fare modeli çalışmalarda

Influenza viruses cause over 500,000 deaths worldwide1 and are associated with an annual cost of 12 - 14 billion USD in the United States alone ...

Establishment of the Dual Humanized TK-NOG Mouse Model for HIV-associated Liver Pathogenesis

HIV ile ilişkili Karaciğer Patogenezi için Çift İnsanize TK-NOG Fare Modelinin Oluşturulması

Despite the increased life expectancy of patients infected with human immunodeficiency virus-1 (HIV-1), liver disease has emerged as a common cause of ...