Name: evaluating the anti-depression effect of xiaoyaosan on chronically-stressed mice
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
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Esta pesquisa foi apoiada por concessões do Nacional Natural Science Foundation da China (n. º 81630104; n. º 81473597) e os fundos de pesquisa Fundamental para as universidades Central (n º 2018-JYBZZ-XS005). O protocolo e os resultados demonstrados neste trabalho origina-se o artigo Envolvimento de normalizado Glial fibrilar ácida expressão da proteína no hipocampo em efeitos Antidepressant-Like de Xiaoyaosan em ratos cronicamente estressado pelo Dr. Xiu-Fang Ding, et al

Este protocolo foi aprovado pelo Comitê de ética Animal da Universidade de Beijing de medicina chinesa e estava de acordo com todas as orientações para o cuidado e o uso de animais de laboratório da China. Não havia nenhuma situação de morte acidental durante o procedimento experimental, e nenhum animal precisou ser sacrificado neste estudo.
1. preparar drogas para o experimento
Nota: As ervas chinesas foram compradas e então autenticadas pelo Dr. B. Liu da ...

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F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+the+glutamate/glutamine+cycle+and+glutamate+transporter+GLT-1+in+antidepressant-like+effects+of+Xiao+Yao+san+on+chronically+stressed+mice.">Involvement of the glutamate/glutamine cycle and glutamate transporter GLT-1 in antidepressant-like effects of Xiao Yao san on chronically stressed mice.</a> BMC Complementary &amp; Alternative Medicine. 17 (1), 326 (2017).</li><li>Murua, V. S., Gomez, R. A., Andrea, M. E., Molina, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shuttle-box+deficits+induced+by+chronic+variable+stress:+reversal+by+imipramine+administration.">Shuttle-box deficits induced by chronic variable stress: reversal by imipramine administration.</a> Pharmacol Biochem Behav. 38 (1), 125 (1991).</li><li>Duan, J. 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F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xiao+Yao+San+Improves+Depressive-Like+Behaviors+in+Rats+with+Chronic+Immobilization+Stress+through+Modulation+of+Locus+Coeruleus-Norepinephrine+System.">Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behaviors in Rats with Chronic Immobilization Stress through Modulation of Locus Coeruleus-Norepinephrine System.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative. , 605914 (2014).</li><li>Wu, L. 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O modelo CUMS utilizado neste estudo é um método comum para estabelecer o modelo de estresse diátese de depressão24. A maioria das manifestações de CUMS podem ser restauradas por drogas antidepressivas, que indicou que este método de modelo tem uma validade preditiva forte25. Por esse método, animais recebem estímulos estressantes imprevisíveis crônicos e desenvolvem núcleo sintomas de depressão maior, incluindo a diminuição da lugar preferência condicionado...

MDD é uma doença mental crônica, altamente recorrente, que apresenta com persistente mau humor, depressão, baixa auto-estima, retardo mental, perda de interesse, distúrbios do sono, profundamente pessimistas ou suicidas tendencies; causou grandes danos à saúde humana e estabilização social1. Tornou-se uma das causas mais primária do mundo da deficiência, e pode ser uma das principais causas principais de fardo de doença até 2030, de acordo com a Organização Mundial de saúde2,3. Atualmente, a psicoterapia e medicamentos antidepressivos são considerados para ser a primeira escolha para tratar MDD. No entanto, um enorme número de pacientes diagnosticados com MDD não respondem à terapia ou medicação contínua, e eles são listados como tendo depressão resistente ao tratamento4.
Xiaoyaosan é um clássico chinês composto5 que tem sido amplamente utilizada para tratar doenças psicológicas por milhares de anos desde a dinastia Sung na China6. É composto de 8 ervas chinesas: Radix Bupleuri Radix Paeoniae Alba, Radix Angelicae Sinensis, Poria, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, Radix Glycyrrhizae, Rhizoma Zingiberis Recens e Herba Menthae. Xiaoyaosan contém vários constituintes, tem múltiplos alvos e utiliza múltiplos caminhos7. Xiaoyaosan comumente mostrou ser uma fórmula segura e eficaz para o tratamento de várias doenças relacionadas a mental transtornos, e estudos modernos também têm-se centrado sobre o mecanismo antidepressão deste composto de8,9, 10. A patogênese da MDD ainda é incerto, embora existam hipóteses variadas, incluindo a hipótese de monoamina, a hipótese de receptores de neurotransmissores, a hipótese de mudança de função neuroendócrina, a hipótese de anormalidade do sistema imunológico, etc. Vários estudos têm mostrado que o efeito antidepressivo do Xiaoyaosan tem uma conexão com as bases materiais de hipóteses acima11,12e seus manifestos de ação terapêutica como uma melhoria a depressiva-como comportamentos13.
Além disso, com a prevalência de depressão, sociedade moderna sofreu reduções na força de trabalho, antecipadas e tratamentos caros14. Tratamento caro precisa de atenção médica, que significa uma gama de aumento dos custos médico e precisa antecipação de resultados indesejados precisos, bem como efeitos colaterais15. A erva chinesa Xiaoyaosan tem componentes acessíveis, efeitos únicos e leves efeitos colaterais. Sua aplicação pode desempenhar um papel na redução da carga de tratamento médico moderno. Portanto, para fornecer uma base mais teórica para a aplicação da Xiaoyaosan, uma terapia alternativa clínica deve ser oferecida para o tratamento da depressão, a incidência de que aumenta ano a ano e deve melhorar a saúde humana ao mesmo tempo. Este artigo descreve um protocolo envolvendo o uso de Xiaoyaosan para evitar os comportamentos depressivos, como estabelecendo o modelo depressivo do mouse. O teste de campo aberto e o teste de preferência de sacarose foram usados para verificar os efeitos do antidepressivo de Xiaoyaosan.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chinese Herbs</td>
			<td>Tongrentang (Bozhou, AnHui) Decoction Pieces Limited Company</td>
			<td>-</td>
			<td>The drugs were extracted by the Chinese medicine preparation room of the China-Japan Friendship Hospital, distilled water was used to prepare the suspension of Xiaoyaosan, and the dose was 0.25 g/kg/d.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoxetine</td>
			<td>PATHEON FRANCE</td>
			<td>5545A</td>
			<td>The distilled water was used to prepare the suspension of fluoxetine, and the dose 2.6 mg/kg/d.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6j mice</td>
			<td>Beijing Vital River of the Charles River Company</td>
			<td>SCXK 2011-0004</td>
			<td>60 healthy male C57BL/6J mice aged 12 weeks were purchased from Beijing Vital River of the Charles River Company.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse cage</td>
			<td>Styling Biotechnology</td>
			<td>34853016</td>
			<td>318&#215;202&#215;135 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Distilled Water</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>The water was used througout the experiment.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>-</td>
			<td>The sucrose was used in the sucrose preference test to prepare 1% sucrose solution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACS-2EAS Electronic Balance</td>
			<td>Beijing Hengzhongheng Electronic Technology Co., Ltd.</td>
			<td>-</td>
			<td>It was used to weigh the avoirdupois of mice at different stages.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wooden Black Lusterless Box</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>(40 cm x 40 cm x 15 cm), divided into 25 equal squares by blue lines.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WV-CP470 Camera</td>
			<td>Panasonic, Japan</td>
			<td>-</td>
			<td>A HD digital camera which was used for recording the whole process of the open field test.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Etho Vision 3.0 Software</td>
			<td>Noldus, Wageningen, Holland</td>
			<td>-</td>
			<td>A video-tracking system which was used to evaluate the locomotor function and emotionality of mice.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPSS Statistics 21.0 Software</td>
			<td>IBM</td>
			<td>-</td>
			<td>SPSS 21.0 software was used to analyze the data, one-way ANOVA or non-parametric test was used for general data based on normality test and homogeneity test for variance, and LSD method was adopted for the comparisons between groups.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graphpad Prism 6.0 Software</td>
			<td>Graphpad Software,Inc.USA</td>
			<td>-</td>
			<td>Graphpad Prism 6.0 software was used to draw statistical graphs.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

evaluating the anti-depression effect of xiaoyaosan on chronically-stressed mice

Além do uso padronizado de medicamentos antidepressivos e psicoterapia, o uso da medicina tradicional chinesa tem levado a uma melhoria global dos pacientes com transtorno depressivo maior (MDD). Portanto, o objetivo deste estudo foi estabelecer o modelo de depressivos do rato, observar as mudanças de comportamento associadas com estresse crônico suave imprevisível (CUMS), e então avaliar o efeito de antidepressão de Xiaoyaosan. Ratos foram divididos aleatoriamente em quatro grupos: um grupo de controle, um grupo de modelo, um grupo de tratamento com Xiaoyaosan e um grupo de tratamento com fluoxetina. Todos os mouses individualmente foram mantidos em gaiolas, e depressão foi induzida em ratos, expondo-lhes várias manipulações projetadas de CUMS durante 21 dias, conforme descrito no protocolo. Ratos no grupo controle e grupo modelo receberam 0,5 mL de água destilada, enquanto ratos nos grupos de tratamento receberam qualquer Xiaoyaosan (0,25 g/kg/dia) ou fluoxetina (2,6 mg/kg/dia). Os fármacos utilizados no estudo foram dadas intragastrically diariamente durante as três semanas inteiras. Para estimar os comportamentos depressivos, como, uma série de parâmetros, incluindo o estado de casaco, peso corporal, abra a nota do teste de campo e pontuação de teste de preferência de sacarose foram gravadas. A análise dos dados mostrou que comportamentos do modelo de ratos foram alterados significativamente em comparação com comportamentos dos ratos no grupo de controle, que foram melhorados pelo tratamento de Xiaoyaosan e fluoxetina. As descobertas atuais demonstraram os efeitos de antidepressão de Xiaoyaosan sobre os comportamentos de ratos induzida por CUMS e revelaram que compostos a partir da prescrição de Xiaoyaosan podem ser útil para o tratamento da depressão, considerando seus efeitos benéficos na comportamentos depressivos, como.

Observe que os resultados tenham sido publicados anteriormente pelo Dr. Xiu-Fang Ding, et al 18
Os dados foram expressos como média ± erro padrão da média (SEM). Uma ANOVA One-Way ou um teste não-paramétrico foi usado para dados gerais baseados o teste de normalidade e o teste de homogeneidade da variância. Para as comparações entre os grupos, foi utilizado o teste de LSD. Além disso, o...

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Evaluating the Anti-depression Effect of Xiaoyaosan on Chronically-stressed Mice

Aqui, apresentamos um protocolo para estabelecer o modelo de depressivos do rato, observar as mudanças de comportamento associadas com estresse crônico suave imprevisível (CUMS) e avaliar o efeito de antidepressão de Xiaoyaosan.

Avaliação do efeito antidepressão de Xiaoyaosan em ratos cronicamente estressado

In addition to the standardized use of antidepressant medications and psychotherapy, the usage of traditional Chinese medicine has lead to an overall ...

Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave no campo da depressão, prevenção e tratamento usando a medicina tradicional chinesa, como xiaoyaosan, uma fórmula amplamente utilizada na doença psicológica por milhares de anos na China. A principal vantagem dessa técnica é fornecer um suporte experimental para a disponibilidade de Xiaoyaosan na prevenção e tratamento da depressão. As implicações dessa técnica se estendem para a pesquisa pré-clínica sobre o tratamento da depressão porque fornece um protocolo padronizado para detectar o efeito antidepressivo usando a medicina tradicional chinesa.Geralmente, indivíduos novos nesse método lutarão porque o processo de modelagem é muito complicado e os importantes parâmetros de medição para comportamentos depressivos não são fáceis de dominar. Para induzir a depressão, exponha os camundongos diariamente a qualquer 2 dos 7 estressores seguintes por 21 dias consecutivos. Observe administrar medicamentos aos camundongos nos dois grupos de tratamento todos os dias antes da modelagem e fornecer 0,5 mililitros de água destilada para os camundongos nos grupos de controle e modelo.Exponha os ratos à privação de alimentos esvaziando a alimentação de cada gaiola. Ou privação de água removendo a garrafa de água por 24 horas. Exponha os ratos ao estresse de contenção, onde o rato é contido em uma pequena banheira de plástico por 3 horas.Ou uma gaiola vazia com o estofamento removido. Como outra opção, exponha os ratos a gaiolas molhadas e sujas, despejando água em cada gaiola e mantendo-se molhados por 24 horas. Exponha ratos a gaiolas lotadas em que cinco ratos são colocados em uma gaiola por 25 horas.Para a última opção, exponha os ratos à natação gelada forçando cada rato a nadar em um aquário de vidro claro com água gelada por cinco minutos. Por fim, registo o estado do casaco e o peso corporal semanalmente até o final da modelagem no dia 21 e calcule a pontuação total do estado do casaco. Nos dois primeiros dias do teste de preferência de sacarose, abriga os ratos individualmente com duas garrafas cheias de água da torneira.Nos próximos dois dias, dê aos ratos duas garrafas cheias com solução de 1%de sacarose. No último dia, dê aos ratos duas garrafas por 24 horas, uma com água da torneira e outra com solução de 1%de sacarose. Para eliminar uma preferência lateral dos ratos no comportamento de beber, mude a posição das duas garrafas após 12 horas.Regisso volume tanto da solução de sacarose consumida quanto da água da torneira. Por último, calcule a preferência de sacarose. Comece dividindo o chão de uma caixa de madeira de quatro lados sem brilho em 25 quadrados iguais por linhas azuis.Limpe a caixa de campo aberto com 5% de álcool antes do acesso de cada mouse. Em seguida, coloque o mouse no centro do campo aberto. Suspenda uma câmera digital de alta definição aproximadamente 200 centímetros bem acima do campo e registre o comportamento de cada mouse por 5 minutos.Finalmente, avalie e analise o vídeo comportamental dos ratos pelo software do sistema de rastreamento de vídeo e regise os dados da distância total de execução e número de entradas na zona central. O estado do casaco de camundongos foi notavelmente melhorado após o tratamento contínuo com Xiaoyaosan ou Fluoxetine em comparação com o grupo modelo. Na terceira semana, foi manifestada uma redução significativa do peso corporal.Na linha de base, os camundongos em todos os grupos tinham uma preferência semelhante de sacarose. No entanto, observou-se queda significativa na preferência por sacarose após 3 semanas de procedimento de estresse no grupo modelo. Além disso, todos os camundongos apresentaram um estado comportamental semelhante antes da exposição ao estresse na linha de base.No entanto, após a exposição ao estresse por 3 semanas, a distância total movida em 5 minutos foi significativamente menor no grupo modelo do que no grupo controle. O número de entradas na zona central do grupo modelo também diminuiu significativamente em comparação com o grupo controle. Ao tentar esse procedimento, é importante lembrar de realizar esse teste de comportamento, bem como administrar os dois medicamentos, de 1 a 2 horas antes da modelagem diária, a fim de confirmar os efeitos pelo próprio medicamento.Após este procedimento, outros métodos como o teste de natação forçada podem ser realizados a fim de responder a perguntas adicionais como xiaoyaosan pode melhorar o comportamento desesperado de ratos depressivos no teste de natação forçada? Após o desenvolvimento, essa técnica abriu caminho para pesquisadores na exploração do efeito e do mecanismo subjacente da medicina chinesa no campo da prevenção e tratamento da depressão.

Research

JoVE Journal

Behavior

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

Um procedimento para estudar o efeito da restrição alimentar prolongada em heroína Buscando em ratos abstinentes

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

Comportamento

Eye Tracking, Cortisol, and a Sleep vs. Wake Consolidation Delay: Combining Methods to Uncover an Interactive Effect of Sleep and Cortisol on Memory

Eye Tracking, Cortisol, e um sono vs Wake Consolidação Atraso: Combinando métodos para descobrir um efeito interativo do Sono e Cortisol em Memória

Although rises in cortisol can benefit memory consolidation, as can sleep soon after encoding, there is currently a paucity of literature as to how these ...

A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment

Um protocolo para alojar ratos em um ambiente enriquecido

Environmental enrichment (EE) is a housing environment for mice that boosts mental and physical health compared to standard laboratory housing. Our recent ...

A General Method for Evaluating Deep Brain Stimulation Effects on Intravenous Methamphetamine Self-Administration

Um método geral para avaliar os efeitos Estimulação Profunda do Cérebro em metanfetamina intravenosa auto-administração

Substance use disorders, particularly to methamphetamine, are devastating, relapsing diseases that disproportionally affect young people.  There is a need ...

A Method for Evaluating the Reinforcing Properties of Ethanol in Rats without Water Deprivation, Saccharin Fading or Extended Access Training

Um método para avaliar as propriedades de reforço de etanol em ratos sem água Privação, Sacarina desvanecimento ou treinamento de Acesso Ampliado

Operant oral self-administration methods are commonly used to study the reinforcing properties of ethanol in animals. However, the standard methods ...

Comparing the Frequency Effect Between the Lexical Decision and Naming Tasks in Chinese

Comparando o efeito de frequência entre a decisão lexical e tarefas de nomeação em chinês

In psycholinguistic research, the frequency effect can be one of the indicators for eligible experimental tasks that examine the nature of lexical access. ...

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

Um método para testar o efeito de sugestões ambientais no comportamento de acoplamento em<em&gt; Drosophila melanogaster</em

An individual's sexual drive is influenced by genotype, experience and environmental conditions. How these factors interact to modulate sexual behaviors ...

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

Reconhecimento de objetos novos e localização de objeto comportamental testes em ratos em um orçamento

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various ...

Evaluating Skilled Prehension in Mice Using an Auto-Trainer

Avaliando a Prehension qualificada em camundongos usando um instrutor automático

We describe a method to introduce na&#239;ve mice to a novel prehension (reach-to-grasp) task. Mice are housed singly in cages with a frontal slot that ...

Investigating the Effect of Visual Imagery and Learning Shape-Audio Regularities on Bouba and Kiki

Investigando o efeito de imagens visuais e aprendizagem forma-regularidades de áudio em Bouba e Kiki

This article presents a protocol for investigating the role of visual imagery in the bouba/kiki-effect, whether training in noticing the bouba/kiki ...