Name: assessing cellular stress and inflammation in discrete oxytocin-secreting brain nuclei in the neonatal rat before and after first colostrum feeding
Uploaded: 2018-11-14T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing Cellular Stress and Inflammation in Discrete Oxytocin-secreting Brain Nuclei in the Neonatal Rat Before and After First Colostrum Feeding at JoVE.co

Yazarlar Manon Ranger ve Alexandra Schulz bu protokolü hazırlarken kendi yardım için teşekkür ederiz.

Bu çalışmada kurumsal hayvan bakımı ve kullanımı komiteler Columbia Üniversitesi ve New York Eyalet psikiyatrik Enstitüsü tarafından kabul edildi.
1. doku hazırlık
<ol><li>Zamanlanmış gebe rats satıcıdan sipariş.</li>
	<li>İletim başlar kadar zamanlanmış gebe rats onların geldikten sonra hafta içinde onların büyüyen abdomens gözlemleyerek ve daha sonra yavrular için kafes inceleyerek üzerinde beklenen teslim tarihini bakarak her 2 h izleyin.</li>
	<li>Timeli iç...

<ol>
	<li>Hietaniemi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+profiles+in+fetal+and+neonatal+rat+offspring+of+energy-restricted+dams.">Gene expression profiles in fetal and neonatal rat offspring of energy-restricted dams.</a> Journal of Nutrigenetics and Nutrigenomics. 2 (4-5), 173-183 (2009).</li><li>Okabe, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homogenous+glycine+receptor+expression+in+cortical+plate+neurons+and+Cajal-Retzius+cells+of+neonatal+rat+cerebral+cortex.">Homogenous glycine receptor expression in cortical plate neurons and Cajal-Retzius cells of neonatal rat cerebral cortex.</a> Neuroscience. 123 (3), 715-724 (2004).</li><li>Mailleux, P., Takazawa, K., Erneux, C., Vanderhaeghen, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distribution+of+the+neurons+containing+inositol+1,4,5-trisphosphate+3-kinase+and+its+messenger+RNA+in+the+developing+rat+brain.">Distribution of the neurons containing inositol 1,4,5-trisphosphate 3-kinase and its messenger RNA in the developing rat brain.</a> Journal of Comparative Neurology. 327 (4), 618-629 (1993).</li><li>Carter, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+and+Human+Evolution.">Oxytocin and Human Evolution.</a> Current Topics in Behavioral Neuroscience. , (2017).</li><li>Sippel, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+and+Stress-related+Disorders:+Neurobiological+Mechanisms+and+Treatment+Opportunities.">Oxytocin and Stress-related Disorders: Neurobiological Mechanisms and Treatment Opportunities.</a> Chronic Stress (Thousand Oaks). 1, (2017).</li><li>Agnati, L. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aspects+on+the+integrative+actions+of+the+brain+from+neural+networks+to+"brain-body+medicine".">Aspects on the integrative actions of the brain from neural networks to "brain-body medicine".</a> Journal of Receptors and Signal Transduction Research. 32 (4), 163-180 (2012).</li><li>Welch, M. G., Margolis, K. G., Li, Z., Gershon, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+regulates+gastrointestinal+motility,+inflammation,+macromolecular+permeability,+and+mucosal+maintenance+in+mice.">Oxytocin regulates gastrointestinal motility, inflammation, macromolecular permeability, and mucosal maintenance in mice.</a> American Journal Physiology: Gastrointestinal and Liver Physiology. 307 (8), G848-G862 (2014).</li><li>Welch, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+and+developmental+regulation+of+oxytocin+(OT)+and+oxytocin+receptors+(OTR)+in+the+enteric+nervous+system+(ENS)+and+intestinal+epithelium.">Expression and developmental regulation of oxytocin (OT) and oxytocin receptors (OTR) in the enteric nervous system (ENS) and intestinal epithelium.</a> Journal of Comparative Neurology. 512 (2), 256-270 (2009).</li><li>Prakash, B. S., Paul, V., Kliem, H., Kulozik, U., Meyer, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+oxytocin+in+milk+of+cows+administered+oxytocin.">Determination of oxytocin in milk of cows administered oxytocin.</a> Analytica Chimica Acta. 636 (1), 111-115 (2009).</li><li>Solangi, A. R., Memon, S. Q., Mallah, A., Khuhawar, M. Y., Bhanger, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+separation+of+oxytocin,+norfloxacin+and+diclofenac+sodium+in+milk+samples+using+capillary+electrophoresis.">Quantitative separation of oxytocin, norfloxacin and diclofenac sodium in milk samples using capillary electrophoresis.</a> Biomedical Chromatography. 23 (9), 1007-1013 (2009).</li><li>Klein, B. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+modulates+markers+of+the+unfolded+protein+response+in+Caco2BB+gut+cells.">Oxytocin modulates markers of the unfolded protein response in Caco2BB gut cells.</a> Cell Stress and Chaperones. 19 (4), 465-477 (2014).</li><li>Klein, B. Y., Tamir, H., Hirschberg, D. L., Glickstein, S. B., Welch, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+modulates+mTORC1+pathway+in+the+gut.">Oxytocin modulates mTORC1 pathway in the gut.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 432 (3), 466-471 (2013).</li><li>Klein, B. Y., Tamir, H., Ludwig, R. J., Glickstein, S. B., Welch, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colostrum+oxytocin+modulates+cellular+stress+response,+inflammation,+and+autophagy+markers+in+newborn+rat+gut+villi.">Colostrum oxytocin modulates cellular stress response, inflammation, and autophagy markers in newborn rat gut villi.</a> Biochemical an Biophysical Research Communications. 487 (1), 47-53 (2017).</li><li>Donnet-Hughes, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+role+of+the+intestinal+microbiota+of+the+mother+in+neonatal+immune+education.">Potential role of the intestinal microbiota of the mother in neonatal immune education.</a> Proceedings of the Nutritional Society. 69 (3), 407-415 (2010).</li><li>Perez, P. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+imprinting+of+the+neonatal+immune+system:+lessons+from+maternal+cells?.">Bacterial imprinting of the neonatal immune system: lessons from maternal cells?.</a> Pediatrics. 119 (3), e724-e732 (2007).</li><li>Takeda, S., Kuwabara, Y., Mizuno, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concentrations+and+origin+of+oxytocin+in+breast+milk.">Concentrations and origin of oxytocin in breast milk.</a> Endocrinolcia Japonica. 33 (6), 821-826 (1986).</li><li>Quintana, D. S., Outhred, T., Westlye, L. T., Malhi, G. S., Andreassen, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+oxytocin+administration+on+brain+activity:+a+systematic+review+and+meta-analysis+protocol.">The impact of oxytocin administration on brain activity: a systematic review and meta-analysis protocol.</a> Systematic Reviews. 5 (1), 205 (2016).</li><li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+aspects+of+the+brain+growth+spurt.">Comparative aspects of the brain growth spurt.</a> Early Human Development. 3 (1), 79-83 (1979).</li><li>Orr, M. E., Garbarino, V. R., Salinas, A., Buffenstein, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extended+Postnatal+Brain+Development+in+the+Longest-Lived+Rodent:+Prolonged+Maintenance+of+Neotenous+Traits+in+the+Naked+Mole-Rat+Brain.">Extended Postnatal Brain Development in the Longest-Lived Rodent: Prolonged Maintenance of Neotenous Traits in the Naked Mole-Rat Brain.</a> Frontiers in Neuroscience. 10, 504 (2016).</li><li>Hansson, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time-resolved+quantitative+proteome+analysis+of+in+vivo+intestinal+development.">Time-resolved quantitative proteome analysis of in vivo intestinal development.</a> Molecular and Cellular Proteomics. 10 (3), (2011).</li><li>Mochizuki, K., Yorita, S., Goda, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+changes+in+the+jejunum+of+rats+during+the+transient+suckling-weaning+period.">Gene expression changes in the jejunum of rats during the transient suckling-weaning period.</a> Journal of Nutritional Science and Vitaminology (Tokyo). 55 (2), 139-148 (2009).</li><li>Rinaman, L., Banihashemi, L., Koehnle, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+life+experience+shapes+the+functional+organization+of+stress-responsive+visceral+circuits.">Early life experience shapes the functional organization of stress-responsive visceral circuits.</a> Physiology and Behavior. 104 (4), 632-640 (2011).</li><li>Johannes, G., Sarnow, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cap-independent+polysomal+association+of+natural+mRNAs+encoding+c-myc,+BiP,+and+eIF4G+conferred+by+internal+ribosome+entry+sites.">Cap-independent polysomal association of natural mRNAs encoding c-myc, BiP, and eIF4G conferred by internal ribosome entry sites.</a> RNA. 4 (12), 1500-1513 (1998).</li><li>Rinaman, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hindbrain+noradrenergic+A2+neurons:+diverse+roles+in+autonomic,+endocrine,+cognitive,+and+behavioral+functions.">Hindbrain noradrenergic A2 neurons: diverse roles in autonomic, endocrine, cognitive, and behavioral functions.</a> American Journal of Physiology: Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 300 (2), R222-R235 (2011).</li><li>Walker, C. D., Toufexis, D. J., Burlet, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothalamic+and+limbic+expression+of+CRF+and+vasopressin+during+lactation:+implications+for+the+control+of+ACTH+secretion+and+stress+hyporesponsiveness.">Hypothalamic and limbic expression of CRF and vasopressin during lactation: implications for the control of ACTH secretion and stress hyporesponsiveness.</a> Progress in Brain Research. 133, 99-110 (2001).</li><li>Montiel-Castro, A. J., Gonzalez-Cervantes, R. M., Bravo-Ruiseco, G., Pacheco-Lopez, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+microbiota-gut-brain+axis:+neurobehavioral+correlates,+health+and+sociality.">The microbiota-gut-brain axis: neurobehavioral correlates, health and sociality.</a> Frontiers in Integrative Neuroscience. 7, 70 (2013).</li><li>Blevins, J. E., Ho, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+oxytocin+signaling+in+the+regulation+of+body+weight.">Role of oxytocin signaling in the regulation of body weight.</a> Reviews in Endocrine and Metabolic Disorders. 14 (4), 311-329 (2013).</li><li>Welch, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+administration+of+secretin+and+oxytocin+inhibits+chronic+colitis+and+associated+activation+of+forebrain+neurons.">Combined administration of secretin and oxytocin inhibits chronic colitis and associated activation of forebrain neurons.</a> Neurogastroenterology Motility. 22 (6), 654 (2010).</li><li>Berthoud, H. R., Neuhuber, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+and+chemical+anatomy+of+the+afferent+vagal+system.">Functional and chemical anatomy of the afferent vagal system.</a> Autonomic Neuroscience: Basic and Clinical. 85 (1-3), 1-17 (2000).</li><li>Taniuchi, S., Miyake, M., Tsugawa, K., Oyadomari, M., Oyadomari, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrated+stress+response+of+vertebrates+is+regulated+by+four+eIF2alpha+kinases.">Integrated stress response of vertebrates is regulated by four eIF2alpha kinases.</a> Scientific Reports. 6, 32886 (2016).</li><li>Altschuler, S. M., Bao, X. M., Bieger, D., Hopkins, D. A., Miselis, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viscerotopic+representation+of+the+upper+alimentary+tract+in+the+rat:+sensory+ganglia+and+nuclei+of+the+solitary+and+spinal+trigeminal+tracts.">Viscerotopic representation of the upper alimentary tract in the rat: sensory ganglia and nuclei of the solitary and spinal trigeminal tracts.</a> Journal of Comparative Neurology. 283 (2), 248-268 (1989).</li><li>Shapiro, R. E., Miselis, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+central+neural+connections+of+the+area+postrema+of+the+rat.">The central neural connections of the area postrema of the rat.</a> Journal of Comparative Neurology. 234 (3), 344-364 (1985).</li><li>Paxinos, G., Watson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates. , (1997).</li><li>Nayak, R., Pintel, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adeno-associated+viruses+can+induce+phosphorylation+of+eIF2alpha+via+PKR+activation,+which+can+be+overcome+by+helper+adenovirus+type+5+virus-associated+RNA.">Adeno-associated viruses can induce phosphorylation of eIF2alpha via PKR activation, which can be overcome by helper adenovirus type 5 virus-associated RNA.</a> Journal of Virology. 81 (21), 11908-11916 (2007).</li><li>Zaborske, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome-wide+analysis+of+tRNA+charging+and+activation+of+the+eIF2+kinase+Gcn2p.">Genome-wide analysis of tRNA charging and activation of the eIF2 kinase Gcn2p.</a> Journal of Biological Chemistry. 284 (37), 25254-25267 (2009).</li><li>Hollis, J. H., Lightman, S. L., Lowry, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integration+of+systemic+and+visceral+sensory+information+by+medullary+catecholaminergic+systems+during+peripheral+inflammation.">Integration of systemic and visceral sensory information by medullary catecholaminergic systems during peripheral inflammation.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1018, 71-75 (2004).</li><li>Klein, B. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+opposes+effects+of+bacterial+endotoxin+on+ER-stress+signaling+in+Caco2BB+gut+cells.">Oxytocin opposes effects of bacterial endotoxin on ER-stress signaling in Caco2BB gut cells.</a> Biochimica et Biophysica Acta. 1860 (2), 402-411 (2016).</li><li>Kaltschmidt, B., Kaltschmidt, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NF-kappaB+in+the+nervous+system.">NF-kappaB in the nervous system.</a> Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. 1 (3), a001271 (2009).</li></ol>

Mikrodiseksiyon ayrı olan bir tekniği, OTR zengini beyin çekirdekleri yenidoğan sıçan beyin bu yazıda sunulur. Bu nöronlar yüksek, beyindeki iyi karakterize hücre çekirdeği içinde bile uzmanlaşmış olan bu de tanınır. Sağlam hipotez testleri belirli OTR zengini çekirdeği yalıtmak için son derece tekrarlanabilir bu yaklaşım sağlar. Otomatik Western blot kullanarak, tutarlılık ve tekrarlanabilirlik sonuçları daha da düzeldi. Bu tekniğin bir sınırlama mütevazı beyin yumruk değişkenlik ka...

Gün-için-hafta Doğum sonrası boyunca meydana gelen erken beyin gelişimi anlayışımızı aksine nispeten az dinamik değişiklikleri sıçanlarda yaşamın ilk saatlerinde meydana gelen sayısız hakkında bilinir. Önemli bir sorun küçük boyutu yenidoğan sıçan beyin ve ayrık beyin bölgeleri veya tek hücre yalıtmak yüksek teknoloji ürünü araçlar için bir gereklilik olmuştur. Çalışmalar kez aktif sinyal moleküllerinin işlev düzeylerini sağlam bir anlayış vermez gen transkripsiyon ve translasyon değil1,2, değerlendirmek. Diğerleri ifade ifade düzeyleri3miktar için izin vermeyen immünhistokimya başvuru beyin bölgelerine kullanarak inceleyin. Bugüne kadar hiçbir çalışma gerektiren hızlı yalıtım ve fedakarlık ve protein ifade ve protein fosforilasyon Western kullanarak ölçüm ayrı beyin bölgelerinde yem rats ilk kolostrum ile ilişkili yollar sinyal aktif inceledi kurutma. Beyin mikrodiseksiyon büyük ve daha büyük beyin üzerinde gerçekleştirilir iken, bir tek hücre beyin yumruk P0 beyinde gerçekleştirme başvuru belirlenememiştir. Bu kağıt kısıtlı protein ifade nispeten küçük örneklerinde ölçmek için nispeten düşük teknoloji yumruk tekniği ve bir Western blot yordamı kullanarak yenidoğan beyin bölgelerinde izole için bir protokol sunar. Bu iletişim kuralı translasyonel modifikasyonlar ve protein ifade değerlendirme gerektiren araştırma soruları için uygun olabilir (Örn., fosforilasyon) herhangi bir tür küçük beyni nispeten sınırlı bölgelerde aşağıdaki koşullarda Kullanıcı bir atlas ve tanımlanabilir yerler ile görsel olarak beyin bölgesi ilgi belirlemek için.
Bu teknik yenidoğan rats ilk kolostrum besleme, oksitosin (OT) zengin olduğu sonucu beyinde meydana gelen değişiklikleri anlamak için geliştirilmiştir. OT uzun süt hayal kırıklığı ve rahim kasılması uyarmak onun yetenek için bilinmektedir. Ancak, OT şimdi birçok vücut fonksiyonları ve davranışları4Yönetmelikte çok çeşitli roller oynamak için bilinir. Örneğin, OT stres ve inflamasyon adaptif affiliative davranışlar5ile birlikte karşı çıkıyor, mide boşalma gecikmeler ve bağırsak transit yavaşlatır. OT reseptörleri (OTR) enterik sinir hücreleri ve bağırsak epitel6,7,8' tespit edilmiştir. OT, gastrointestinal etkilerini erken postnatal dönemde bebek için özellikle önemlidir. Örneğin, emzirme OT önemli miktarda teslim yenidoğan gut9,10ile ilişkilidir ve veri OTR ağır dönem8emdikleri süt sırasında duodenal villus overexpressed göster.
Vitro deneyler bir gut hücre satırı kullanarak hücresel düzeyde bu oksitosin yolu11,12 sinyal stres önemli molekülleri modüle ve proteinler Çeviride bir düzenleyici rol oynar göstermiştir 12. bu çalışmalar bileşenleri süt anneden eksojen oksitosin de dahil olmak üzere, hücresel stres13azaltmak için ventilasyon gelişeceğini protein yanıtta önemli olduğunu göstermektedir.
Vivo ve ex vivo çalışmalar kolostrum OT yeni doğmuş fare gut villus hücresel stres tepki, inflamasyon ve autophagy işaretleyicilerini modüle göstermiştir. Gut microbiota için kolostrum14,15 ve OT9 gibi hormonlar dahil çok sayıda protein anneden aynı anda maruz kaldığında yenidoğan enterositler önemli hücresel stres luminal yan acı , 10 , 16.
OT etkileri beyin eğitimi17olmuştur. Ancak, gut erken postnatal dönemde gösterdi OT sinyal mekanizmaları beyinde incelenmiştir değil. Bu yazıda, ayrık beyin çekirdekleri yenidoğan sıçan beyin sapı ve Elektroforez kullanarak hipotalamus izole bir yöntem izole beyin bölgeleri profil için kullanılır. Bu yöntem genel hücre beyin alanlarda Doğum, önce ve sonra en düşük fiyat gliyal/nöronal dizini olan beyin dokusunda emdikleri ilk süt mümkün olduğunca yakın sinyal durumunu yakalamak için hedeftir. Bu tekniğin geliştirilmesi için gerekçe bu nöronların otomatik bir Western blot kullanarak ex vivo çalışmalar için daha homojen bir koleksiyon ile sınırlı, mikroskopik beyin bölgeleri yenidoğan pups yalıtım hızlı için sağlanmıştır metodoloji, nispeten küçük disseke örnekleri üzerinde son derece tutarlı sonuçlar sunuyor. Ön çalışma bir eksiklik daha fazla brüt diseksiyon (beyin dilimler veya tüm beyin) ve büyük hayvanlar18,19içerir. Dalgalar doğumdan sonra gliyal farklılaşma featuring son derece dinamik ve Genç yavrularını beyinlerdir. Belgili tanımlık pups ilk besleyerek etkisinde beyin değişiklikleri incelemek için tekrarlanabilir diseksiyon ile sınırlı nöronal hücre çekirdeği eğitim gereklidir.
Beyin gelişimi sırasında beyin bölgeleri üzerindeki etkisi nadiren okudu, ancak süt yem genellikle sağlık veya gen ifadesinde (örneğin, enterositler20,21), üzerindeki immünolojik ve beslenme etkisi için analiz edilir. Süt transit gut etkisi beyin fonksiyonu referans olarak gut cholecystokinin reseptörleri vagus geçiş beyin sapı çekirdeği, ancak hücre içi sinyal yolları22analiz edildi. Orada geniş bir edebiyat gelişmekte olan yenidoğan beyin güvenlik açığı için yetersiz annelerin beslenme sırasında gebelik23, ama stres ve inflamasyon sinyalleri değil ele alınmaktadır. Önemlisi, geçerli yöntem visseral uyaranların vagus röle üzerinden kan tarihi kolostrum uyaranlara izole bir fenomen gün sıfır sıçan yenidoğanlarda yararlanır. Bu olgunlaşmamış çekirdeği tractus solitarius (NTS) tarafından karakterize sözde stres Hipo-yanıt dönemdir-hipotalamik devre NTS, paraventricular çekirdeği (PVN), sınırlayan hemen Doğum24,25 sonra ve supraoptic çekirdeği (oğlu) kan tarihi uyaranlara sinyalleri.
Bu yöntem birden çok sinyal yolları analiz için yararlıdır ve beyin dokusu içinde rats, anneler meydan var ek olarak ya da değil her türlü tedavi Doğum sonrası gün-0 hasat olması koşuluyla nöronal hücre için nispeten sınırlı Hamilelik sırasında. Çöp sinyal ön besleme karşı yem kolostrum etkileri için analiz edilebilir. Zavallı zengin protein verim karşı ile beyin bölgeleri arasında sinyal karşılaştırırken, bu yöntem bağışıklık-Nefelometri protein antijenleri için paralel kılcal polipeptid bantlarında toplam protein tayini kılcal sağlar. Bu yöntem, rasgele birimleri, standart nicel eğrileri olmadan aynı antikor ve kılcal başına toplam protein referansı tarafından elde edilen sonuçlar kullanarak sayısal karşılaştırma sağlar. Farklı antikor tarafından elde edilen sonuçlar karşılaştırma yalnızca nicel standart eğrileri kullanılarak mümkündür.
Çift yönlü gut ve beyin ve bu arasında meydana gelen her iki organ26işlevinde etkisi olabilir sinyal değerlendirmesi için bu yönteme izin. Kapsamlı son yıllarda27' eğitimi aldı, oksitosin ve gıda alımı arasındaki ilişkiyi artan oksitosin sinyalizasyon ve besin kullanılabilirlik arasındaki bağlantıyı destekler. Bu çalışmalar da açıkları hipotalamik oksitosin sinyal içinde indirimleri ile birleştiğinde bu enerjiyi converse kavramı destekler.
OT etkisi beyin aktivitesi üzerinde daha önceki çalışmalar indüklenen bağırsak iltihabı olan vagotomy28için ateşe dayanıklı hipotalamik PVN, amigdala ve piriform kortekste cFos transkripsiyon elde edildi gösterdi. Ancak, sistemik OT infüzyonu ile secretin gut28provoke inflamatuar reaksiyon beyin cFos yanıtı azalmıştır. Bu eksojen OT etkisini vagus Röleler, muhtemelen kan yoluyla sinyal molekülleri alan postrema6,29taşınan üzerinden başka yolları tarafından gerçekleştirildiği ileri sürdü.
Bu çalışmada, daha önce gut gözlemledim hücresel stres sinyal yolları beyinde değerlendirildi. Hipotez süt bileşenleri korumak veya inflamasyon etkisi bağırsak geçirgenliği mikrobiyal ve diğer metabolitler için erteleme ve sırayla, beyin üzerindeki etkileri işlev yapıldı. Önce ve sonra tarafından kolostrum13, astar villus içinde bulunan BiP sinyali karşı IKB açık uzlaşmaz farklılıklar hala süreci geliştirmek, yenidoğan bebeklerin, beyinlerinin bu gut kolostrum kaynaklı sinyaller hissediyorum önerdi.
Endoplazmik retikulum stres ile ilişkili olan önceki gut deneylerde kullanılan sinyal protein işaretleri ölçüldü. ER refakatçi BIP, (Bu bir stres yanıt ıntegrator30hizmet vermektedir) çeviri başlatma faktörü eIF2a, eIF2a kinaz p dahil-PKR ve iki iltihap sinyalli proteinler (NF-kB ve onun inhibitörü, IKB).
Yeteneklerini salgılar ya OT için cevap erişkinlerde temel altı beyin bölgeleri seçilmiştir. Üst medulla bulunan NTS, visseral giriş ilk geçiş ve gut31 ve muhtemelen kan tarihi sitokinler, toksinler ve hormonlar aracılığıyla bitişik alan-postrema32vagus duyusal nöronlarda üzerinden doğrudan sinyal alır. PVN, supraoptic çekirdeği (oğlu), striatum nükleuslar (STR), serebral korteks (CX) ve medial preoptic çekirdeği (MPO) almak gut NTS üzerinden gelen sinyal.
Sonuçları bu hemen postnatal dönem kolostrum priming önce ve sonra hemen ilk besleme PVN ve oğlu ile karşılaştırıldığında NTS farklıdır hücresel stres tepki gösterdi. CX içinde sinyal, STR ve MPO PVN ve oğlu, bundan de farklıydı. Daha önce hücre stres ve bağırsak iltihabı modüle gösterilen OT ayrı koruyucu işlevlerinin büyük olasılıkla beyin bazı alanlara göre hissettim. Toplu olarak, verilerin hücresel düzeyde, Doğum sonra ilk saatlerde beyin besin yetersizliği ile ilişkili metabolik stres yanıt verdiğini gösterir. Verileri ölçüde ve yem kolostrum modülasyonlu etkileri yönünü bölge bağımlı olduğunu ve bazı bölgelerde, onlar daha önce gösterilen gut OT etkileri ayna de gösterilir.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bradford solution</td>
			<td>Bio Rad</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein lysis kit</td>
			<td>Protein simple</td>
			<td>CBS403</td>
			<td>Bicine/CHAPS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WES kits</td>
			<td>Protein simple</td>
			<td>WES-Mouse 12-230 master kit (PS-MK15), WES-Rabbit 12-230 master kit (PS-MK14), WES 12-230 kDa total Protein master kit (PS-TP07)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-mouse IgG HRP conjugate</td>
			<td>Protein simple</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-phospho-eIF2a</td>
			<td>Cell Signaling technology</td>
			<td>SER51, 9721</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mouse mAb anti-PKR</td>
			<td>Cell Signaling technology</td>
			<td>2103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-phospho-PKR</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>Thr451, 07-886</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit mAb anti-PKR</td>
			<td>Cell Signaling technology</td>
			<td>12297</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rabbit mAb anti-GAPDH</td>
			<td>Cell Signaling technology</td>
			<td>2118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mouse mAb anti-phospho-IKB</td>
			<td>Cell Signaling technology</td>
			<td>9246</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mouse mAb anti-IKB</td>
			<td>Cell Signaling technology</td>
			<td>4814</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rabbit anti-BiP</td>
			<td>Cell Signaling technology</td>
			<td>3183</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti GCN2</td>
			<td>Cell Signaling technology</td>
			<td>3302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit mAb anti-phospho-GCN2</td>
			<td>BIORBYT</td>
			<td>T899</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pregnant Sprague-Dawley rats</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Punch device</td>
			<td>WellTech Rapid Core or Harris Uni-Core</td>
			<td>0.35, 0.50, 0.75, 1.0, 1.20, 1.50</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing cellular stress and inflammation in discrete oxytocin-secreting brain nuclei in the neonatal rat before and after first colostrum feeding

Bu iletişim kuralı oksitosin reseptör zengin beyin çekirdekleri yenidoğan beyinde önce ve sonra ilk kolostrum besleme yalıtmak için hedeftir. Ifade için metabolik stres yanıt vermek için bilinen proteinlerin beyin çekirdekleri yalıtır Western blot kullanarak ölçülmüştür. Bu vücuttaki metabolik stres kaynaklı besin yetersizliği tetiklenen nöronal stres değerlendirmek için yapılmıştır. Biz daha önce ventilasyon besin yetersizliği gut metabolik stres aydınlığa çıkartıyor gösterdi. Ayrıca, kolostrum oksitosin hücresel stres tepki, inflamasyon ve autophagy işaretleyicilerini yeni doğmuş fare gut villus öncesinde ve ilk yem sonra gelen. Endoplazmik retikulum stres ile ilişkili protein işaretleri sinyal [ER refakatçi bağlayıcı immünglobulin protein (BiP), ökaryotik çeviri başlatma faktör 2A (eIF2a) ve eIF2a kinaz protein kinaz R (p-PKR)], iki yanı sıra iltihap sinyalli proteinler [nükleer faktör-κB (NF-kB) ve inhibitörü κB (IKB)], yeni doğan beyin çekirdekleri içinde ölçülen [yalnız yolu (NTS), paraventricular çekirdeği (PVN), supra-optik çekirdeği (oğlu), korteks (CX), striatum çekirdeği (STR), çekirdek ve medial preoptic çekirdeği (MPO)] (kolostrum tarafından unprimed) ilk besleme önce ve (kolostrum tarafından astarlanmalıdır) hemşirelik başladıktan sonra. Sesli uyarı/GRP78 ve p-eIF2a ifadesi astarlanmalıdır NTS dokuda upregulated içinde unprimed ve downregulated vardı. Oysa NF-kB alt ve koşulların her ikisi de NTS, PVN ve oğlu değişmeden NF-kB (yüksek) CX, STR ve MPO sitoplazmada muhafaza edildi. Toplu BiP ve p-eIF2 bulgular bir stres tepkisi ile tutarlıdır. eIf2a tarafından dsRNA bağımlı kinaz (p-PKR) oğlu, CX, STR ve MPO fosforile. Ancak, NTS (ve daha az bir ölçüde de PVN), eIf2a başka bir kinaz, genel kontrol nonderepressible-2 kinaz (GCN2) tarafından fosforile. Daha önce yeni doğan gut enterositler gözlenen stres oransal mekanizmaları bazı OTR zengini beyin bölgelerde yansıtılması için görünür. NTS ve PVN diğer bölgelerden farklı fosforilasyon mekanizması (altında besin eksikliği) kullanmak ve besin yetersizliği etkisini ateşe dayanıklı olabilir. Toplu olarak, bu veri besin yetersizliği stres beyin yanıt kolostrum astarlanmalıdır enterositler sinyal tarafından mahsup edilir öneriyor.

İmmunoreactivity göre toplam protein temsilcisi bantları beyin çekirdekleri çok düşük hasat protein ile olduğunu göstermektedir. Bu kanonik Western blot karşılaştırıldığında son derece hassas otomatik Western blot tekniğin kullanımı gerektirir. Bu yaklaşım lane Batı lekesi içinde başına göre kılcal başına fortyfold daha az protein ile çalıştırabilirsiniz.
Kolostrum astar farklı etkileri beyin çe...

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Cellular Stress and Inflammation in Discrete Oxytocin-secreting Brain Nuclei in the Neonatal Rat Before and After First Colostrum Feeding at JoVE.co

Assessing Cellular Stress and Inflammation in Discrete Oxytocin-secreting Brain Nuclei in the Neonatal Rat Before and After First Colostrum Feeding

Hücresel stres ve ayrık oksitosin salgılayan beyin çekirdekleri içinde yenidoğan sıçan iltihabı önce ve sonra ilk kolostrum besleme değerlendirilmesi

Burada, ilk kolostrum beslenme ile birlikte yenidoğan sıçan beyin beyin çekirdekleri yalıtmak için bir iletişim kuralı mevcut. Bu teknik Enterocytes sinyal tarafından modüle gibi besin yetersizliği stres beyin çalışma sağlar.

The goal of this protocol is to isolate oxytocin-receptor rich brain nuclei in the neonatal brain before and after first colostrum feeding. The expression ...

Bu yöntem, doğum sonrası gelişim alanında süt emzirmenin beyindeki stres sinyalini nasıl etkilediği ne kadar önemli soruların cevaplanmasına yardımcı olabilir. Bu teknik, ilk doğal açlık döneminde belirli beyin bölgelerini yakalamak ve ilk doğal kolostrum yemi kısa bir süre sonra ilgili bölgelerle karşılaştırmak için kullanılabilir. Emzirmenin davranış ve duygu fizyolojisini nasıl etkilediğini anlamak, ex-vivo beyin dokusu analizi sırasında çeşitli reseptörlere karşı bir antagonist kullanılmasını sağlar.Çekirdek yumrukları elde etmek için, eldivenli bir el ile kuyruğundan sıçan yavruları kaldırın. Beyin hasat sonra, hızla oda sıcaklığında bir polimetil metakrilat beyin kalıbına tüm organ yerleştirin ve hemen doku 500 mikrometre kalınlığında dilim yapmak için yeni bir jilet kullanın. Kesitlerin doğru yönünü korumak için elde edilen dilimleri petri kabına yerleştirin.Tüm beyin kesitli olduğunda, hızlı bir şekilde çanak glikoz olmadan yapay beyin omurilik sıvısı ekleyin ve bir orbital shaker sürekli karıştırma ile 28-30 derece santigrat 60 dakika boyunca dilimleri kuluçka. Yumruklanacak beyin çekirdeklerini belirlemek ve kesiği yeni bir Petri kabına inceleyici mikroskop altında yerleştirmek için her dokuda bir beyin atlası ve anatomik işaretler kullanın. Görselleştirildikten sonra, 4 ila 6 farklı çekirdeği hızlı bir şekilde delmek ve her delikli çekirdeği proteus inhibitörleri ve fosfataz inhibitörleri içeren uygun şekilde etiketlenmiş mikro-santrifüj tüpüne 0,06 mL buz gibi protein çıkarma tamponuna hızla batırmak için bir yapıştırma aracı kullanın.Kuluçka sonunda, soğutulmuş bir mini santrifüj içinde çıkarılan çekirdekleri santrifüj ve dikkatle buz üzerinde uygun önceden soğutulmuş 1,5 mL mikro-santrifüj tüp içine her tüpten supernatant 0.055 mL aktarmak için bir mikro pipet kullanın. Negatif 20 santigrat santigrat depolamadan önce, her protein stok tüpünden 0,012 mL süpernatant ı ilk numune hazırlama için buz üzerinde uygun 0,5 mL önceden soğutulmuş tüpe aktarın. Numuneleri kapiller protein ölçümü için hazırlamak için, protein lisis kitinden 0,5 mL etiketli tüplerdeki numunelerin her birine 0,003 mL ana karışım reaktifi ekleyin.Daha sonra, 0,016 mL deiyonize su da bir biyotinylated moleküler ağırlık merdiven çözeltisi için master mix reaktif 0.004 mL ekleyin ve merdiven ve protein özü örnekleri 95 derece santigrat ısı bloğu, beş dakika sonra dört derece santigrat tüm tüpleri depolama. Sinyal protein analizi için, yeni bir otomatik Batı plakası olan E-1'den E-25'e kadar yeni hazırlanmış luminol peroksit çözeltisine 0,01 mL, D-2'den D-25'e kadar olan wells'e 0,01 mL ikincil anti-fare antikor ekleyin ve kitten D-1'e 0,01 mL streptavidin horseradish peroksidaz ekleyin. C-2'den C-25'e kadar yeni hazırlanmış primer antikorların 0,01 mL'sini ve B-25'e kadar olan kuyulara 0,01 mL antikor dilüent iki çözelti ekleyin.F sırakuyularını boş bırakın ve F satırının altındaki üç satırın beş bölmesini 0,45 mL yıkama tamponuyla doldurun. Daha sonra, buzdolabındaki numuneleri 30 saniye boyunca kısaca döndürün ve A-2 ile başlayan a satırının her kuyusuna her numuneden 0,03 mL ekleyin. Daha sonra, iyi A-1 biyotinylated moleküler ağırlık merdiveni 0.005 mL ekleyin ve santrifüj için plaka kapağı.Plaka santrifüj edilirken, otomatik Batı ilişkili yazılımda yeni bir çalışma dosyası açın ve moleküler boyut analizi başlatın. Test sayfasında, her kılcal damara örnek adlar ve birincil ve ikincil antikorların adlarını girin. Santrifüjün sonunda, plakayı otomatik Batı aletine yerleştirin ve kapağı kılcal kartuş kutusundan soyun.Santrifüjden sonra, hava kabarcıklarını incelemeyi unutmayın, çünkü kılcal damardaki hava kabarcıkları elektroforetik akımı engelleyebilir ve tüm turda başarısız olabilir. Kartuşu cihazın içinde belirlenen konuma takın ve kapıyı kapatın. Başlat'ı tıklatın.Tdenemenin türü yle birlikte istendiğinde, denemenin adını uygun metin kutusuna girin ve tamam'ı tıklatın. Etkinleştirilmiş çalıştırma tarihi ve çalıştırma dosyasındaki kimlik numarası istendiğinde, çalıştırmanın ne zaman sona erdiğini not edin. Koşunun sonunda, kılcal kartuşun keskinlik lerin bertaraf edilmesine ve plakayı biyolojik tehlikeli maddelerin bertaraf edilmesine atın.Elektroforez ayrımından sonra, fosforilasyonlu ökaryotik çeviri başlatma faktörü 2A'yı temsil eden 40-43 kilodaltonantijenantijenlerin immün reaktivite zirveleri için çalışma dosyalarını kontrol edin. Bu boyuttaki molekül ağırlığı zirvelerinin eksik olduğu durumlarda, eğrinin altına sağ tıklayın ve eğrinin altındaki boyutların ve rasgele miktarların kaydedilmesini sağlamak için zirveye moleküler ağırlık eklemeyi seçin. Unprimeds doku örnekleri içinde, yalnız parçanın çekirdeklerinde bağlayıcı amino globulin protein düzeyleri diğer bölgelerin tümgöre anlamlı olarak daha yüksektir.Kolostrum ile bağırsak dokusunun priming yalnız parçanın çekirdeklerinde bağlayıcı amino globulin protein düzeylerini azaltır ve paraventriküler çekirdekleri ve süper optik çekirdekleri üzerinde hiçbir etkisi yoktur. Tersine, priming korteks içinde amino globulin protein düzeylerini artırır, striation çekirdekleri, ve medial preoptik çekirdekleri unprimed dokuya göre, çeşitli test beyin çekirdeklerinde bağlayıcı amino globulin protein düzeyleri bağırsak astar farklı tepki ve henüz test edilen çeşitli çekirdekler arasında herhangi bir göstermiştir çapraz konuşma olduğunu ima. Ökaryotik çeviri başlatma faktörü 2A ve fosforilasyonlu ökaryotik çeviri başlatma faktörü 2A düzeyleri diğer çekirdeklere göre asal olmayan durumda yükselir.Astarlamadan sonra hem ökaryotik çeviri başlatma faktörü 2A hem de fosforilasyonlu ökaryotik çeviri başlatma faktörü 2A düzeyleri, astarlanmamış dokuya göre tek başına pistin çekirdeğine göre azalır. Diğer tüm test edilmiş çekirdeklerde primer, ökaryotik çeviri başlatma faktörü 2A ve fosforilasyonlu ökaryotik çeviri başlatma faktörü 2A'nın asal olmayan dokuya göre düzeylerini artırır. Ancak, fosforilasyon protein kiziaz reseptör düzeyleri soliter parçanın çekirdeklerinde astarlanmış örneklere göre astarlanmamış örneklerde düşüktür, kuvvetle başka bir kiazaz ökaryotik çeviri başlatma faktörü 2A fosforilasyon dahil olduğunu düşündürmektedir.Bu teknik, gelişiminden sonra, doğum sonrası gelişim alanında araştırmacıların doku büyümesi ve farklılaşmasında rol oynayan sinyal yollarını ve emzirmeden etkilenip etkilenmediklerini keşfetmelerinin önünü açmıştır. Örneğin, dithiothreitol gibi uçucu azaltıcı ajanlarla çalışmanın tehlikeli olabileceğini ve bu prosedürü hazırlarken kimyasal başlıkta hazırlık gibi önlemlerin her zaman alınması gerektiğini unutmayın.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Seven Steps to Stellate Cells

Hücreler stellat Yedi Adımda

Hepatic stellate cells are liver-resident  cells of star-like morphology and are located in the space of Disse between  liver sinusoidal endothelial cells ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Trichuris muris Infection: A Model of Type 2 Immunity and Inflammation in the Gut

Trichuris muris Infection: A Model of Type 2 Immunity and Inflammation in the Gut

Trichuris muris Enfeksiyon: Gut Tip 2 Bağışıklık ve İnflamasyon Bir Model

Trichuris muris is a natural pathogen of mice and is biologically and antigenically similar to species of Trichuris that 
infect humans and livestock1. ...

Assessing Somatic Hypermutation in Ramos B Cells after Overexpression or Knockdown of Specific Genes

Spesifik genlerin aşırı ekspresyonu veya demonte sonra Ramos B Hücreleri somatik hipermutasyon Değerlendirilmesi

B cells start their life with low affinity antibodies generated by V(D)J recombination.  However, upon detecting a pathogen, the variable (V) region of an ...

Primary Microglia Isolation from Mixed Glial Cell Cultures of Neonatal Rat Brain Tissue

Yenidoğan Rat Beyin Dokusu Karışık Glial Hücre Kültürleri Primer mikroglia İzolasyonu

Microglia account for approximately 12% of the  total cellular population in the mammalian brain. While neurons and astrocytes are considered  the major ...

Culturing Microglia from the Neonatal and Adult Central Nervous System

Yenidoğan ve Erişkin Merkezi sinir sisteminin Kültüre Mikroglia

Microglia are the resident macrophage-like cells of the central nervous system (CNS) and, as such, have critically important roles in physiological and ...

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Neuropathogenic olmayan İnvaziv Modeli<em&gt; Escherichia coli</em&gt; Yenidoğan Sıçan Enfeksiyon

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal ...

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

Salmonella typhimuriumyalıtım-makrofajlar üzerinden Phagosomes içeren

Salmonella typhimurium is a facultative intracellular bacterium that causes gastroenteritis in humans. After invasion of the lamina propria, S. ...

Assessing the Cellular Immune Response of the Fruit Fly, Drosophila melanogaster, Using an In Vivo Phagocytosis Assay

Assessing the Cellular Immune Response of the Fruit Fly, Drosophila melanogaster, Using an In Vivo Phagocytosis Assay

Bir In Vivo fagositoz tahlil kullanarak Drosophila melanogaster, meyve sineği hücresel bağışıklık yanıtı değerlendirirken

In all animals, innate immunity provides an immediate and robust defense against a broad spectrum of pathogens. Humoral and cellular immune responses are ...

Highly Efficient Transfection of Primary Macrophages with In Vitro Transcribed mRNA

In Vitro Transcribed mRNA ile Primer Makrofajların Yüksek Verimli Transföytüsü

Macrophages are phagocytic cells specialized in detecting molecules of non-self origin. To this end, they are equipped with a large array of pattern ...

Blocking Lymph Flow by Suturing Afferent Lymphatic Vessels in Mice

Farelerde Afferent Lenfatik Damarlar Dikerek Lenf Akışını Engelleme

Lymphatic vessels are critical in maintaining tissue fluid balance and optimizing immune protection by transporting antigens, cytokines, and cells to ...