Felles fordel med denne teknikken er at visuelle minner kan studeres på en kontrollert måte i faste i stedet for frittgående tremyrer. Denne metoden har potensial til å bli brukt til å undersøke det nevrale grunnlaget for visuell læring i en svært veletablert modell for insektnavigasjon. For å velge myrene som er motivert til å spise, legg en lysbilde med dråpe sukrose inne i en liten boks med influensa som dekker veggene.
Plasser deretter hver valgte ant i boksen og vent for å se om den mates på sukrosedråpen. Hvis anten strømmer på sukrosedråpen, overfør den umiddelbart til en tom boks. Etter dette, overfør hver myr til et eget rør og plasser kort røret i fryseren for å immobilisere myrene.
Plasser den immobiliserte anten i holderen gjennom kuttet i papp, og ta den ved leddet mellom hodet og thoraxen. Bruk deretter insektpinner for å sikre at antennene forblir på siden av hodet. Ved hjelp av et skreddersydd varmeelement smelter du voks for å feste spissen av en insektpinne til antens hode, parallelt med papp.
Etter at voksen tørker, fjern insektpinnene fra antennene, og fjern forsiktig anten fra holderen. Deretter fikser du insektpinnen som holder anten i en modelleringsleiresylinder, og fikser en skreddersydd plastholder under den. Sørg for at anten opprettholder en typisk stående stilling og at hele kroppen, unntatt hodet, kan bevege seg fritt.
Plasser først et kamera med et makroobjektiv oppå den hvite akrylboksen rett over antholderen, og plasser anten i holderen inne i esken. Deretter fester du en nål og sukrosefylt sprøyte, den ubetingede stimulansen, til et lyst blått papprektangel, den betingede stimulansen, for bruk som et visuelt signal. For part trening, start opptak av anten 10 sekunder før du presenterer den betingede stimulansen.
Hvis anten utfører Maxilla Labium Extension Reflex, eller MaLER, i løpet av denne tiden, utsette rettssaken i noen sekunder. Flytt sprøyten med betinget stimulans foran anten i 10 sekunder. Deretter utstråler du en enkelt dråpe sukrose fra sprøyten og mater anten i fem sekunder.
Gjenta den parede treningsprosedyren 10 ganger med fem minutter mellom hver studie. For ulønnet opplæring, start videoopptaket 10 sekunder før rettssaken. Deretter presenterer du den betingede stimulansen som tidligere beskrevet.
Etter 2,5 minutter, lever den ubetingede sukrosestimulansen direkte til antens munndeler med en sprøyte uten den blå papp. Når treningsforsøkene er fullført, starter du kameraopptaket 10 sekunder før testfasen. Deretter presenterer du den betingede stimulansen til anten i 10 sekunder.
Etter at testen er over, lever sukrose ubetinget stimulans til anten for å bekrefte at anten fortsatt er motivert til å mate. Ved hjelp av opptaket gjort under trening og testing, score ant svar i løpet av 10 sekunder med betinget stimulans presentasjon. Til slutt skiller du antens svar under den betingede stimulanspresentasjonen i tre kategorier, full forlengelse med bevegelse som om fôring, full forlengelse uten bevegelse eller delvis forlengelse av maxilla labium eller maksillære palper.
I denne protokollen utførte maur som gjennomgikk part opplæring stadig mer MaLER som svar på den betingede stimulansen. Tvert imot viste ubetalte maur ingen signifikant økning i MaLER under treningen. For å undersøke deres korte og mellomlangtidsminne ble maur testet enten 10 minutter eller en time etter den siste treningsprøven.
For begge testene var andelen maur som utførte MaLER som svar på den betingede stimulansen høyere når de hadde gjennomgått parert trening. MaLER svar ble delt inn i tre kategorier, FEM, FE, og PE. Vanligvis utførte maur FEM eller PE oftere enn FE. Imidlertid viste bare noen få maur konsekvent samme type respons. Mens du prøver denne prosedyren, Det er viktig å huske å håndtere maur nøye for å redusere stressnivåer og eventuelle skader, spesielt under sele.
Ved å tilpasse denne prosedyren kan ulike visuelle stimuli brukes for å undersøke egenskapene tremyrer bruker til å danne visuelle minner. Etter utviklingen baner denne teknikken vei for forskere innen insektnevrovitenskap og navigasjon for å utforske visuelle assosiative minner med tremyrer for microfa.
