Name: mouse body temperature measurement using infrared thermometer during passive systemic anaphylaxis and food allergy evaluation
Uploaded: 2018-09-14T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mouse Body Temperature Measurement Using Infrared Thermometer During Passive Systemic Anaphylaxis and Food Allergy Evaluation at JoVE.com

Pesquisa no Kawakami lab foi apoiada pelo NIH concede: R01 AR064418-01A1, R01 HL124283-01, R21 AI 115534-01 e R41AI124734-01.

Todos os experimentos com animais foram aprovados pelo cuidado Animal e Comissão de utilização do Instituto de La Jolla para alergia e Imunologia.
1. medição de temperatura de corpo Mouse durante Anesthetization
<ol><li>Coloque o mouse em uma caixa de indução de anestesia. ANESTHETIZE usando fluxo de 1 L/min de oxigênio com 5% de isoflurano. Nota: Anesthetization é confirmada quando o mouse deixa o movimento voluntário e tem estado parado por mais de 30 s. Alternativamente, freq...

<ol>
	<li>Finkelman, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaphylaxis:+lessons+from+mouse+models.">Anaphylaxis: lessons from mouse models.</a> The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 120 (3), 506-515 (2007).</li><li>Lee, J. K., Vadas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaphylaxis:+mechanisms+and+management.">Anaphylaxis: mechanisms and management.</a> Clinical and Experimental Allergy: Journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology. 41 (7), 923-938 (2011).</li><li>Newsom, D. M., Bolgos, G. L., Colby, L., Nemzek, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+body+surface+temperature+measurement+and+conventional+methods+for+measuring+temperature+in+the+mouse.">Comparison of body surface temperature measurement and conventional methods for measuring temperature in the mouse.</a> Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 43 (5), 13-18 (2004).</li><li>Wong, J. P., Saravolac, E. G., Clement, J. G., Nagata, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+murine+hypothermia+model+for+study+of+respiratory+tract+influenza+virus+infection.">Development of a murine hypothermia model for study of respiratory tract influenza virus infection.</a> Laboratory Animal Science. 47 (2), 143-147 (1997).</li><li>Quimby, J. M., Olea-Popelka, F., Lappin, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+digital+rectal+and+microchip+transponder+thermometry+in+cats.">Comparison of digital rectal and microchip transponder thermometry in cats.</a> Journal of American Association for Laboratory Animal Science. 48 (4), 402-404 (2009).</li><li>Mei, J., Riedel, N., Grittner, U., Endres, M., Banneke, S., Emmrich, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body+temperature+measurement+in+mice+during+acute+illness:+implantable+temperature+transponder+versus+surface+infrared+thermometry.">Body temperature measurement in mice during acute illness: implantable temperature transponder versus surface infrared thermometry.</a> Scientific Reports. 8 (1), 3526 (2018).</li><li>Doyle, E., Trosien, J., Metz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocols+for+the+induction+and+evaluation+of+systemic+anaphylaxis+in+mice.">Protocols for the induction and evaluation of systemic anaphylaxis in mice.</a> Methods in Molecular Biology. 1032, 133-138 (2013).</li><li>Brandt, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mast+cells+are+required+for+experimental+oral+allergen-induced+diarrhea.">Mast cells are required for experimental oral allergen-induced diarrhea.</a> The Journal of Clinical Investigations. 112 (11), 1666-1677 (2003).</li><li>Ando, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histamine-releasing+factor+enhances+food+allergy.">Histamine-releasing factor enhances food allergy.</a> The Journal of Clinical Investigations. 127 (12), 4541-4553 (2017).</li><li>Brandt, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+IL-4/IL-13+signaling+to+alleviate+oral+allergen-induced+diarrhea.">Targeting IL-4/IL-13 signaling to alleviate oral allergen-induced diarrhea.</a> The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 123 (1), 53-58 (2009).</li></ol>

O protocolo descrito foi criado com o objetivo de medir a temperatura do corpo sem o uso de anestesia. Apesar de sua relativa facilidade com que temperatura leituras podem ser obtidas, existem várias advertências que acomodar esta técnica, além dos efeitos mais óbvios como lidar com stress e temperaturas ambientes diferentes.
Primeiro, a fim de manter as leituras de temperatura consistente durante todo o experimento, o local onde a temperatura está sendo medida deve ser predeterminado us...

Medição da temperatura corporal tem sido uma parte essencial de monitorar os efeitos dos sintomas de choque anafiláticas em animal modelos1,2. Diferenças de temperatura tem sido tradicionalmente medidas pelo termômetros retal em ratos3,4. Com estas medidas, investigadores confiantemente tem retratado as diferenças de temperatura entre variáveis; no entanto, esse método é um procedimento demorado e faz com que a aflição de ratos, que podem aumentar a temperatura do corpo. Sondagem retal também pode causar na mucosa rasgando e infecção3. Além disso, os ratos devem ser anestesiados para humanamente inserir a sonda rectal para medir a temperatura3. Este é um processo lento, e proíbe a medição das temperaturas sucessivas dentro de um curto período de tempo. Além disso, fenótipos de atividade de ratos não podem ser observados durante esse tempo, até que o anestésico é completamente desgastado, que é outro processo demorado. Mais recentemente, outros métodos confiáveis para medir a temperatura do corpo tem usado implantado subcutaneamente transmissor infravermelho passivo tags ou transmissores de rádio que incluem uma temperatura sensor3,5,6. Embora eles são aceitos como a prática ideal por alguns pesquisadores, esses métodos não são amplamente utilizados por causa de altos custos iniciais e angústia aos ratos, devido a implantação cirúrgica de um sensor de temperatura sob a pele ou outra parte do corpo.
Para demonstrar que uma diferença de temperatura é um reflexo preciso de sintomas em um modelo de doença1,2, ratos devem ser acordado durante a medição de temperatura e ser capaz de voltar à sua atividade normal fenotípica imediatamente antes e após a medição. Nesse sentido, buscamos um método pelo qual isto poderia ser alcançado.
Nosso objetivo era exatamente e barata medir a temperatura do corpo do mouse, sem a necessidade de anestesia e sem restrições à atividade, para permitir a observação dos fenótipos comportamentais durante e após o tempo de medição de temperatura. Para atingir este objetivo, era evidente que uma técnica menos invasiva do que a temperatura retal padrão sondas foi necessária. Termometros infravermelho têm sido utilizados há décadas na medicina clínica, especialmente em pediatria, para obter leituras precisas da temperatura. Tem sido um método alternativo que permitiu que os clínicos com rapidez e precisão obter medições de temperatura em bebês e crianças exigentes que são ativamente móveis. Estamos implementado essa mesma técnica em ratos e desenvolveu um método bem sucedido para obter temperaturas sem anestesia. Importante, mostramos que esse método é capaz de replicar os resultados de anafilaxia sistêmica passiva bem estabelecida em relação a mudanças de temperatura, enquanto também ser capaz de observar a atividade do mouse durante a medição. Além disso, nós usamos o mesmo método para avaliar a temperatura do corpo dos ratos alimento-alérgica, enquanto simultaneamente investiga outros sintomas, para demonstrar que a temperatura do corpo é de fato um reflexo preciso do nível de atividade e fenótipo geral da rato.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:744px;" width="744">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:260px;">Non-contact infrared thermometer</td>
			<td style="width:164px;">SinoPie</td>
			<td style="width:127px;">DT-8861</td>
			<td style="width:193px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-dinitrophenyl (DNP) IgE</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D8406-.2MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PrecisionGlide 30G needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PrecisionGlide 26G needle&#160;</td>
			<td>BD</td>
			<td>305111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1 mL syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dinitrophenyl - human serum albumin</td>
			<td>Biosearch Technologies</td>
			<td>D-5059-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ovalbumin from chicken egg white</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A5503-50G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Imject Alum</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>77161</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Animal Feeding Needles, disposable</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>01-208-87</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mouse body temperature measurement using infrared thermometer during passive systemic anaphylaxis and food allergy evaluation

Medição de temperatura de corpo do mouse é de suma importância para a investigação de alergias e sintomas de choque anafiláticas. Sondas retais para leituras de temperatura é comum, e eles têm provados ser precisos e inestimável a este respeito. No entanto, este método de medição da temperatura requer os ratos a ser anestesiada para inserir a sonda sem prejuízo para o animal. Isso limita a capacidade de observar outros fenótipos do mouse simultaneamente. A fim de investigar outros fenótipos durante a medição de temperaturas, sondas retais não são ideais, e um outro método é desejado. Aqui, apresentamos um método não invasivo de medição de temperatura que incorra a exigência de anestesia do mouse, mantendo a confiabilidade igual a sondas retais em medir a temperatura do corpo. Nós usamos um termômetro infravermelho que detecta as temperaturas de superfície de corpo em intervalos entre 2 e 150 mm. Este método de medição de temperatura do corpo é bem sucedido em confiantemente, replicando as tendências de mudança de temperatura durante experimentos de anafilaxia sistema passivo em camundongos. Nós mostramos que as temperaturas de superfície do corpo são aproximadamente 2,0 ° C inferior a medições da sonda retal, mas o grau de queda de temperatura segue a mesma tendência. Além disso, podemos usar a mesma técnica para observar ratos em um modelo de alergia alimentar para avaliar os níveis de temperatura e atividade simultaneamente.

Anafilaxia sistêmica passiva: 10 semana para injeção iv, velhos camundongos BALB/c fêmeas foram anestesiados. Antes da injeção, medimos a temperatura do corpo (Video 1) conforme descrito na etapa 1. A Figura 1 mostra a tendência de temperatura de ambas as populações após injeção iv. O rato sensibilizados por IgE, mostrou uma queda de temperatura máxima de 3,0 ° C durante 20 min, enquanto o mouse de controle de PBS teve uma queda...

Watch this Scientific Journal Video about Mouse Body Temperature Measurement Using Infrared Thermometer During Passive Systemic Anaphylaxis and Food Allergy Evaluation at JoVE.com

Mouse Body Temperature Measurement Using Infrared Thermometer During Passive Systemic Anaphylaxis and Food Allergy Evaluation

Medição de temperatura de corpo do mouse usando o termômetro infravermelho durante passiva anafilaxia sistêmica e avaliação de alergia alimentar

Aqui nós apresentamos um novo método para medir com precisão as diferenças de temperatura de corpo em anafilaxia sistêmica passiva (PSA) e modelos de rato de alergia alimentar usando um termômetro infravermelho. Este procedimento tem sido duplicado com precisão em resultados anteriores de PSA.

Mouse body temperature measurement is of paramount importance for investigating allergies and anaphylactic symptoms. Rectal probes for temperature ...

Essa metodologia ajuda a abordar questões-chave no campo da alergia e da imunologia, especificamente aquelas que se referem a fenótipos que podem estar associados a mudanças de temperatura corporal. As principais vantagens dessa técnica são que ela é barata, não invasiva e não requer anestesia. As implicações desta técnica permitem aos pesquisadores reduzir o estresse e a dor dos camundongos durante a medição da temperatura, eliminando os efeitos da anestesia e/ou visualizar fenótipos comportamentais.Para medir a temperatura do corpo do camundongo após a anestesia, confirme a sedação por taxa respiratória ou imobilidade e segure o rato pela nuca com um dedo indicador e polegar e a cauda com um dedo mindinho. Enquanto segura o mouse paralela à superfície do banco de laboratório, coloque um sensor de termômetro infravermelho abaixo do abdômen inferior com a superfície plana externa do termômetro de dois a cinco milímetros de distância da superfície do abdômen entre os dois mamilos superiores. Em seguida, pressione o gatilho do termômetro para medir a temperatura do animal, tomando o cuidado de manter o rato e o termômetro estável.Para medir a temperatura do corpo do rato sem anestésico, pegue o rato no meio da cauda e exponha o abdômen. Deixe o mouse segurar em uma superfície de borda reta com suas prevassões e segure o gatilho para medir a temperatura. Alternativamente, deixe o mouse segurar a borda superior reta do termômetro e fazer com que o mouse se sente na superfície plana externa do termômetro com seu abdômen logo acima do sensor infravermelho durante a medição da temperatura.Para uma sensibilização de anafilaxia sistêmica passiva use uma seringa de um mililitro equipada com uma agulha de calibre 26 para injetar 200 microliters de anti-Dinitrophenol recém-preparado, ou DNP, IgE em PBS, no peritônio de cada animal receptor apenas lateral para a linha média entre os mamilos mais inferiores e o segundo mais inferiores. 24 horas após a injeção, meça a temperatura corporal de cada animal receptor como demonstrado, e carregue uma seringa de um mililitro equipada com uma agulha de calibre 30 com 100 microliters de albumina de soro humano DNP recém-preparada. Para induzir a anafilaxia sistêmica passiva, insira a agulha no lado medial do olho em um ângulo raso visando atrás do olho, e injete todo o volume da solução intravenosamente no seio venoso retro-orbital.Em seguida, coloque o mouse sozinho em uma gaiola de recuperação com monitoramento até a recumbência total, e meça a temperatura e a atividade do corpo a cada 10 minutos durante 70 minutos. Camundongos sensibilizados pelo IgE demonstram uma queda de temperatura máxima de três graus Celsius em 20 minutos, enquanto os camundongos de controle pbs exibem uma queda máxima de 1,1 graus Celsius no mesmo período de tempo após o desafio. Observações comportamentais também podem ser realizadas em animais não anestesiados para avaliar a relação entre as quedas de temperatura observadas e a atividade do camundongo.Neste desafio representativo de alergia alimentar ao camundongo, o grupo controle da PBS demonstrou uma queda significativa de temperatura 10 minutos após o desafio em comparação com o grupo tratado inibidor de 2CA. A avaliação dos escores de atividade e quedas de temperatura desse desafio de alergia alimentar revelou uma correlação estatisticamente significativa entre os dois conjuntos de dados. Após este procedimento, outros experimentos envolvendo medidas de temperatura corporal do rato podem ser realizados para responder a perguntas adicionais sobre fenótipos comportamentais que estão associados à mudança de temperatura corporal.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Quantitative Analyses of all Influenza Type A Viral Hemagglutinins and Neuraminidases using Universal Antibodies in Simple Slot Blot Assays

Análise quantitativa de todos Influenza Tipo A Hemaglutininas Virais e neuraminidases usando anticorpos Universal em Ensaios Blot simples slot

Hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA) are two surface proteins of influenza viruses which are known to play important roles in the viral life cycle ...

Imunologia e Infecção

Application of a Mouse Ligated Peyer&#x2019;s Patch Intestinal Loop Assay to Evaluate Bacterial Uptake by M cells

Application of a Mouse Ligated Peyer&#8217;s Patch Intestinal Loop Assay to Evaluate Bacterial Uptake by M cells

Aplicação de um rato ligado patch Peyer Assay alça intestinal para avaliar absorção pelas células bacterianas M

The inside of our gut is inhabited with enormous number of commensal bacteria. The mucosal surface of the gastrointestinal tract is continuously exposed ...

Assessing Hepatic Metabolic Changes During Progressive Colonization of Germ-free Mouse by 1H NMR Spectroscopy

Assessing Hepatic Metabolic Changes During Progressive Colonization of Germ-free Mouse by 1H NMR Spectroscopy

Avaliar as alterações metabólicas hepáticas Durante a colonização progressiva de Germ-free Mouse 1 H NMR Spectroscopy

It is well known that gut bacteria contribute significantly to the host homeostasis, providing a range of benefits such as immune protection and vitamin ...

Isolation, Purification and Labeling of Mouse Bone Marrow Neutrophils for Functional Studies and Adoptive Transfer Experiments

Isolamento, purificação e Rotulagem de neutrófilos da medula óssea do rato de Estudos funcionais e Experimentos de transferência adotiva

Neutrophils are critical effector cells of the innate immune system. They are rapidly recruited at sites of acute inflammation and exert protective or ...

A Mouse Model for Pathogen-induced Chronic Inflammation at Local and Systemic Sites

Um modelo de rato para induzida por patógeno inflamação crônica no local e sistêmica Sites

Chronic inflammation is a major driver of pathological tissue damage and a unifying characteristic of many chronic diseases in humans including ...

Measuring Local Anaphylaxis in Mice

Medindo Anafilaxia locais em Ratos

Allergic responses are the result of the activation of mast cells and basophils, and the subsequent release of vasoactive and proinflammatory mediators. ...

Detection of True IgE-expressing Mouse B Lineage Cells

Detecção de True IgE-expressando Rato B células da linhagem

B lymphocyte immunoglobulin heavy chain (IgH) class switch recombination (CSR) is a process wherein initially expressed IgM switches to other IgH ...

High-throughput Quantitative Real-time RT-PCR Assay for Determining Expression Profiles of Types I and III Interferon Subtypes

De alto rendimento quantitativo em tempo real de RT-PCR Ensaio para Determinar Perfis de Expressão do tipo I e III do interferão subtipos

Described in this report is a qRT-PCR assay for the analysis of seventeen human IFN subtypes in a 384-well plate format that incorporates highly specific ...

Automated Measurement of Cryptococcal Species Polysaccharide Capsule and Cell Body

Automated Measurement of Cryptococcal Species Polysaccharide Capsule and Cell Body

Automáticos de medição de criptocócica espécie polissacarídeo cápsula e corpo celular

The purpose of this technique is to provide a consistent, accurate, and manageable process for large numbers of polysaccharide capsule measurements.
...

Evaluation of Extracellular Vesicle Function During Malaria Infection

Avaliação da função de vesículas extracelulares durante a infecção da malária

Malaria is a life-threatening disease caused by Plasmodium parasites, with P. falciparum being the most prevalent on the African continent and responsible ...