Name: preparation of acute spinal cord slices for whole-cell patch-clamp recording in substantia gelatinosa neurons
Uploaded: 2019-01-18T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Acute Spinal Cord Slices for Whole-cell Patch-clamp Recording in Substantia Gelatinosa Neurons at JoVE.com

यह काम चीन की राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (No. ८१५६०१९८, ३१६६०२८९) से अनुदान द्वारा समर्थित था ।

वर्णित सभी प्रायोगिक प्रोटोकॉल नानचांग विश्वविद्यालय (नानचांग, पीआर चाइना, एथिकल No. 2017-010) की पशु नैतिकता समिति द्वारा अनुमोदित किए गए थे । प्रायोगिक पशुओं के तनाव और दर्द को कम करने के लिए सभी प्रयास किए ?...

<ol>
	<li>Todd, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+circuitry+for+pain+processing+in+the+dorsal+horn.">Neuronal circuitry for pain processing in the dorsal horn.</a> Nature Reviews Neuroscience. 11 (12), 823-836 (2010).</li><li>Yoshimura, M., Nishi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blind+patch-clamp+recordings+from+substantia+gelatinosa+neurons+in+adult+rat+spinal+cord+slices:+pharmacological+properties+of+synaptic+currents.">Blind patch-clamp recordings from substantia gelatinosa neurons in adult rat spinal cord slices: pharmacological properties of synaptic currents.</a> Neuroscience. 53 (2), 519-526 (1993).</li><li>Maxwell, D. J., Belle, M. D., Cheunsuang, O., Stewart, A., Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphology+of+inhibitory+and+excitatory+interneurons+in+superficial+laminae+of+the+rat+dorsal+horn.">Morphology of inhibitory and excitatory interneurons in superficial laminae of the rat dorsal horn.</a> The Journal of Physiology. 584 (Pt. 2, 521-533 (2007).</li><li>Grudt, T. J., Perl, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlations+between+neuronal+morphology+and+electrophysiological+features+in+the+rodent+superficial+dorsal+horn.">Correlations between neuronal morphology and electrophysiological features in the rodent superficial dorsal horn.</a> The Journal of Physiology. 540 (Pt 1), 189-207 (2002).</li><li>Lu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+feed-forward+spinal+cord+glycinergic+neural+circuit+gates+mechanical+allodynia.">A feed-forward spinal cord glycinergic neural circuit gates mechanical allodynia.</a> Journal of Clinical Investigation. 123 (9), 4050-4062 (2013).</li><li>Zheng, J., Lu, Y., Perl, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibitory+neurones+of+the+spinal+substantia+gelatinosa+mediate+interaction+of+signals+from+primary+afferents.">Inhibitory neurones of the spinal substantia gelatinosa mediate interaction of signals from primary afferents.</a> The Journal of Physiology. 588 (Pt 12), 2065-2075 (2010).</li><li>Balasubramanyan, S., Stemkowski, P. L., Stebbing, M. J., Smith, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sciatic+chronic+constriction+injury+produces+cell-type-specific+changes+in+the+electrophysiological+properties+of+rat+substantia+gelatinosa+neurons.">Sciatic chronic constriction injury produces cell-type-specific changes in the electrophysiological properties of rat substantia gelatinosa neurons.</a> Journal of Neurophysiology. 96 (2), 579-590 (2006).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+signal-regulated+kinase+(ERK)+activation+is+required+for+itch+sensation+in+the+spinal+cord.">Extracellular signal-regulated kinase (ERK) activation is required for itch sensation in the spinal cord.</a> Molecular Brain. 7, 25 (2014).</li><li>Kopach, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+alters+trafficking+of+extrasynaptic+AMPA+receptors+in+tonically+firing+lamina+II+neurons+of+the+rat+spinal+dorsal+horn.">Inflammation alters trafficking of extrasynaptic AMPA receptors in tonically firing lamina II neurons of the rat spinal dorsal horn.</a> Pain. 152 (4), 912-923 (2011).</li><li>Takasu, K., Ono, H., Tanabe, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+hyperpolarization-activated+cyclic+nucleotide-gated+cation+channels+at+primary+afferent+terminals+contribute+to+chronic+pain.">Spinal hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channels at primary afferent terminals contribute to chronic pain.</a> Pain. 151 (1), 87-96 (2010).</li><li>Iura, A., Takahashi, A., Hakata, S., Mashimo, T., Fujino, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reductions+in+tonic+GABAergic+current+in+substantia+gelatinosa+neurons+and+GABAA+receptor+delta+subunit+expression+after+chronic+constriction+injury+of+the+sciatic+nerve+in+mice.">Reductions in tonic GABAergic current in substantia gelatinosa neurons and GABAA receptor delta subunit expression after chronic constriction injury of the sciatic nerve in mice.</a> European Journal of Pain. 20 (10), 1678-1688 (2016).</li><li>Alles, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+nerve+injury+increases+contribution+of+L-type+calcium+channels+to+synaptic+transmission+in+spinal+lamina+II:+Role+of+alpha2delta-1+subunits.">Peripheral nerve injury increases contribution of L-type calcium channels to synaptic transmission in spinal lamina II: Role of alpha2delta-1 subunits.</a> Molecular Pain. 14, 1-12 (2018).</li><li>Santos, S. F., Rebelo, S., Derkach, V. A., Safronov, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excitatory+interneurons+dominate+sensory+processing+in+the+spinal+substantia+gelatinosa+of+rat.">Excitatory interneurons dominate sensory processing in the spinal substantia gelatinosa of rat.</a> The Journal of Physiology. 581 (Pt 1), 241-254 (2007).</li><li>Lu, Y., Perl, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modular+organization+of+excitatory+circuits+between+neurons+of+the+spinal+superficial+dorsal+horn+(laminae+I+and+II).">Modular organization of excitatory circuits between neurons of the spinal superficial dorsal horn (laminae I and II).</a> The Journal of Neuroscience. 25 (15), 3900-3907 (2005).</li><li>Hantman, A. W., van den Pol, A. N., Perl, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+and+physiological+features+of+a+set+of+spinal+substantia+gelatinosa+neurons+defined+by+green+fluorescent+protein+expression.">Morphological and physiological features of a set of spinal substantia gelatinosa neurons defined by green fluorescent protein expression.</a> The Journal of Neuroscience. 24 (4), 836-842 (2004).</li><li>Yasaka, T., Tiong, S. Y., Hughes, D. I., Riddell, J. S., Todd, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Populations+of+inhibitory+and+excitatory+interneurons+in+lamina+II+of+the+adult+rat+spinal+dorsal+horn+revealed+by+a+combined+electrophysiological+and+anatomical+approach.">Populations of inhibitory and excitatory interneurons in lamina II of the adult rat spinal dorsal horn revealed by a combined electrophysiological and anatomical approach.</a> Pain. 151 (2), 475-488 (2010).</li><li>Yin, H., Park, S. A., Han, S. K., Park, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+5-hydroxytryptamine+on+substantia+gelatinosa+neurons+of+the+trigeminal+subnucleus+caudalis+in+immature+mice.">Effects of 5-hydroxytryptamine on substantia gelatinosa neurons of the trigeminal subnucleus caudalis in immature mice.</a> Brain Research. 1368, 91-101 (2011).</li><li>Hu, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lidocaine+Inhibits+HCN+Currents+in+Rat+Spinal+Substantia+Gelatinosa+Neurons.">Lidocaine Inhibits HCN Currents in Rat Spinal Substantia Gelatinosa Neurons.</a> Anesthesia and Analgesia. 122 (4), 1048-1059 (2016).</li><li>Peng, H. Z., Ma, L. X., Lv, M. H., Hu, T., Liu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minocycline+enhances+inhibitory+transmission+to+substantia+gelatinosa+neurons+of+the+rat+spinal+dorsal+horn.">Minocycline enhances inhibitory transmission to substantia gelatinosa neurons of the rat spinal dorsal horn.</a> Neuroscience. 319, 183-193 (2016).</li><li>Peng, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+presynaptic+HCN+channels+to+excitatory+inputs+of+spinal+substantia+gelatinosa+neurons.">Contribution of presynaptic HCN channels to excitatory inputs of spinal substantia gelatinosa neurons.</a> Neuroscience. 358, 146-157 (2017).</li><li>Liu, N., Zhang, D., Zhu, M., Luo, S., Liu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minocycline+inhibits+hyperpolarization-activated+currents+in+rat+substantia+gelatinosa+neurons.">Minocycline inhibits hyperpolarization-activated currents in rat substantia gelatinosa neurons.</a> Neuropharmacology. 95, 110-120 (2015).</li><li>Brown, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+whole-cell+recording+from+visually+preselected+neurons+of+perirhinal+cortex+in+brain+slices+from+young+and+aging+rats.">Methods for whole-cell recording from visually preselected neurons of perirhinal cortex in brain slices from young and aging rats.</a> Journal of Neuroscience Methods. 86 (1), 35-54 (1998).</li><li>Rothman, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neurotoxicity+of+excitatory+amino+acids+is+produced+by+passive+chloride+influx.">The neurotoxicity of excitatory amino acids is produced by passive chloride influx.</a> The Journal of Neuroscience. 5 (6), 1483-1489 (1985).</li><li>Rice, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+ascorbate+in+the+preparation+and+maintenance+of+brain+slices.">Use of ascorbate in the preparation and maintenance of brain slices.</a> Methods. 18 (2), 144-149 (1999).</li><li>Takasu, K., Ogawa, K., Minami, K., Shinohara, S., Kato, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Injury-specific+functional+alteration+of+N-type+voltage-gated+calcium+channels+in+synaptic+transmission+of+primary+afferent+C-fibers+in+the+rat+spinal+superficial+dorsal+horn.">Injury-specific functional alteration of N-type voltage-gated calcium channels in synaptic transmission of primary afferent C-fibers in the rat spinal superficial dorsal horn.</a> European Journal of Pharmacology. 772, 11-21 (2016).</li><li>Tian, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excitatory+synaptic+transmission+in+the+spinal+substantia+gelatinosa+is+under+an+inhibitory+tone+of+endogenous+adenosine.">Excitatory synaptic transmission in the spinal substantia gelatinosa is under an inhibitory tone of endogenous adenosine.</a> Neuroscience Letters. 477 (1), 28-32 (2010).</li><li>Funai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+dexmedetomidine+augments+inhibitory+synaptic+transmission+in+the+superficial+dorsal+horn+through+activation+of+descending+noradrenergic+control:+an+in+vivo+patch-clamp+analysis+of+analgesic+mechanisms.">Systemic dexmedetomidine augments inhibitory synaptic transmission in the superficial dorsal horn through activation of descending noradrenergic control: an in vivo patch-clamp analysis of analgesic mechanisms.</a> Pain. 155 (3), 617-628 (2014).</li><li>Yamasaki, H., Funai, Y., Funao, T., Mori, T., Nishikawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+tramadol+on+substantia+gelatinosa+neurons+in+the+rat+spinal+cord:+an+in+vivo+patch-clamp+analysis.">Effects of tramadol on substantia gelatinosa neurons in the rat spinal cord: an in vivo patch-clamp analysis.</a> PLoS One. 10 (5), e0125147 (2015).</li><li>Furue, H., Narikawa, K., Kumamoto, E., Yoshimura, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Responsiveness+of+rat+substantia+gelatinosa+neurones+to+mechanical+but+not+thermal+stimuli+revealed+by+in+vivo+patch-clamp+recording.">Responsiveness of rat substantia gelatinosa neurones to mechanical but not thermal stimuli revealed by in vivo patch-clamp recording.</a> The Journal of Physiology. 521 (Pt 2), 529-535 (1999).</li><li>Ting, J. T., Daigle, T. L., Chen, Q., Feng, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+brain+slice+methods+for+adult+and+aging+animals:+application+of+targeted+patch+clamp+analysis+and+optogenetics.">Acute brain slice methods for adult and aging animals: application of targeted patch clamp analysis and optogenetics.</a> Methods in Molecular Biology. 1183, 221-242 (2014).</li><li>Ting, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+Acute+Brain+Slices+Using+an+Optimized+N-Methyl-D-glucamine+Protective+Recovery+Method.">Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method.</a> Journal of Visualized Experiments. (132), e53825 (2018).</li><li>Li, J., Baccei, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+Tissue+Damage+Promotes+Spike+Timing-Dependent+Synaptic+Long-Term+Potentiation+in+Adult+Spinal+Projection+Neurons.">Neonatal Tissue Damage Promotes Spike Timing-Dependent Synaptic Long-Term Potentiation in Adult Spinal Projection Neurons.</a> The Journal of Neuroscience. 36 (19), 5405-5416 (2016).</li><li>Ford, N. C., Ren, D., Baccei, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NALCN+channels+enhance+the+intrinsic+excitability+of+spinal+projection+neurons.">NALCN channels enhance the intrinsic excitability of spinal projection neurons.</a> Pain. , (2018).</li><li>Cui, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+synaptic+transmission+from+primary+afferents+to+spinal+substantia+gelatinosa+neurons+by+group+III+mGluRs+in+GAD65-EGFP+transgenic+mice.">Modulation of synaptic transmission from primary afferents to spinal substantia gelatinosa neurons by group III mGluRs in GAD65-EGFP transgenic mice.</a> Journal of Neurophysiology. 105 (3), 1102-1111 (2011).</li><li>Yang, K., Ma, R., Wang, Q., Jiang, P., Li, Y. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optoactivation+of+parvalbumin+neurons+in+the+spinal+dorsal+horn+evokes+GABA+release+that+is+regulated+by+presynaptic+GABAB+receptors.">Optoactivation of parvalbumin neurons in the spinal dorsal horn evokes GABA release that is regulated by presynaptic GABAB receptors.</a> Neuroscience Letters. , 55-59 (2015).</li></ol>

यह प्रोटोकॉल स्पाइनल कॉर्ड स्लाइस तैयार करने के लिए चरण विवरण, जो हमने सफलतापूर्वक उपयोग किया है जब पूरे-सेल पैच-क्लैंप प्रयोगों पर एसजी न्यूरॉन्स18,19,20,21...

substantia gelatinosa (एसजी, लेमिना रीढ़ की हड्डी पृष्ठीय सींग के द्वितीय) एक निर्विवाद रूप से महत्वपूर्ण प्रसारण और संवेदी सूचना विनियमन के लिए रिले केंद्र है । यह उत्तेजक और निरोधात्मक न्यूरॉन्स से बना है, जो प्राथमिक afferent फाइबर, स्थानीय न्यूरॉन्स, और अंतर्जात उतरते निरोधात्मक प्रणाली1से आदानों प्राप्त करते हैं. हाल के दशकों में, तीव्र रीढ़ की हड्डी टुकड़ा तैयारी के विकास और पूरे सेल पैच दबाना रिकॉर्डिंग के आगमन के आंतरिक electrophysiological और रूपात्मक गुण पर विभिंन अध्ययनों एसजी ंयूरॉंस2सक्षम है, 3 , 4 एसजी5,6में स्थानीय सर्किट के रूप में के रूप में अच्छी तरह से अध्ययन । इसके अलावा, इन विट्रो में रीढ़ की हड्डी टुकड़ा तैयारी का उपयोग करके, शोधकर्ताओं ने न्यूरॉन excitabilities में परिवर्तन की व्याख्या कर सकते हैं7,8, आयन चैनल के समारोह9,10, और synaptic गतिविधियों11,12 विभिन्न रोग की स्थिति के अंतर्गत । इन अध्ययनों की भूमिका की हमारी समझ गहरा है कि एसजी ंयूरॉंस के विकास और पुराने दर्द और neuropathic खुजली के रखरखाव में खेलते हैं ।
अनिवार्य रूप से, कुंजी शर्त के लिए एक स्पष्ट दृश्य प्राप्त करने के लिए ंयूरॉन सोमा और आदर्श पूरे-कोशिका पैचिंग तीव्र रीढ़ की हड्डी के स्लाइस का उपयोग करने के लिए सुनिश्चित करने के लिए उत्कृष्ट गुणवत्ता के स्लाइस इतना स्वस्थ और patched ंयूरॉंस प्राप्त किया जा सकता है । हालांकि, रीढ़ की हड्डी के स्लाइस की तैयारी एक ventral laminectomy प्रदर्शन और पिया-रेशेदार झिल्ली, जो स्वस्थ स्लाइस प्राप्त करने में बाधा हो सकती है हटाने के रूप में कई कदम, शामिल है । हालांकि यह रीढ़ की हड्डी स्लाइस तैयार करने के लिए आसान नहीं है, रीढ़ की हड्डी के स्लाइस पर इन विट्रो में रिकॉर्डिंग प्रदर्शन कई फायदे हैं । सेल संस्कृति की तैयारी की तुलना में, रीढ़ की हड्डी स्लाइस आंशिक रूप से अंतर्निहित synaptic कनेक्शन है कि एक शारीरिक रूप से प्रासंगिक हालत में है संरक्षित कर सकते हैं । इसके अलावा, पूरे सेल पैच-दबाना रीढ़ की हड्डी स्लाइस का उपयोग कर रिकॉर्डिंग ऐसे डबल पैच क्लैंप के रूप में अन्य तकनीकों के साथ जोड़ा जा सकता है13,14, रूपात्मक अध्ययन15,16 और एकल सेल आरटी-पीसीआर 17. इसलिए, इस तकनीक को एक विशिष्ट क्षेत्र के भीतर संरचनात्मक और आनुवंशिक विचलन निस्र्पक पर अधिक जानकारी प्रदान करता है और स्थानीय सर्किट की संरचना की जांच के लिए अनुमति देता है ।
यहां, हम तीव्र रीढ़ की हड्डी के स्लाइस तैयार करने और एसजी न्यूरॉन्स से पूरे सेल पैच दबाना रिकॉर्डिंग प्राप्त करने के लिए हमारे विधि का एक बुनियादी और विस्तृत विवरण प्रदान करते हैं ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S7653</td>
			<td>Used for the preparation of ACSF and PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>60130</td>
			<td>Used for the preparation of ACSF, sucrose-ACSF, and K+-based intracellular solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH2PO4&#183;2H2O</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>71500</td>
			<td>Used for the preparation of ACSF, sucrose-ACSF and PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2&#183;2H2O</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5080</td>
			<td>Used for the preparation of ACSF and sucrose-ACSF</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2&#183;6H2O</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M2670</td>
			<td>Used for the preparation of ACSF and sucrose-ACSF</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5761</td>
			<td>Used for the preparation of ACSF and sucrose-ACSF</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-Glucose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G7021</td>
			<td>Used for the preparation of ACSF</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ascorbic acid</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P5280</td>
			<td>Used for the preparation of ACSF and sucrose-ACSF</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium pyruvate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7631</td>
			<td>Used for the preparation of ACSF and sucrose-ACSF</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S7903</td>
			<td>Used for the preparation of sucrose-ACSF</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K-gluconate</td>
			<td>Wako</td>
			<td>169-11835</td>
			<td>Used for the preparation of K+-based intracellular solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2-Phosphocreatine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P1937</td>
			<td>Used for the preparation of intracellular solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E3889</td>
			<td>Used for the preparation of intracellular solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H4034</td>
			<td>Used for the preparation of intracellular solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mg-ATP</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9187</td>
			<td>Used for the preparation of intracellular solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Li-GTP</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G5884</td>
			<td>Used for the preparation of intracellular solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CsMeSO4</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C1426</td>
			<td>Used for the preparation of Cs+-based intracellular solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CsCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C3011</td>
			<td>Used for the preparation of Cs+-based intracellular solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TEA-Cl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T2265</td>
			<td>Used for the preparation of Cs+-based intracellular solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobiotin 488</td>
			<td>Vector</td>
			<td>SP-1145</td>
			<td>0.05% neurobiotin 488 could be used for morphological studies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7002</td>
			<td>3% agar block was used in our protocol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P6148</td>
			<td>4% paraformaldehyde was used for immunohistochemical processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4</td>
			<td>Hengxing Chemical Reagents</td>
			<td></td>
			<td>Used for the preparation of PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mount Coverslipping Medium</td>
			<td>Polyscience</td>
			<td>18606</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Urethan</td>
			<td>National Institute for Food and Drug Control</td>
			<td>30191228</td>
			<td>1.5 g/kg, i.p.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Borosilicate glass capillaries</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>TW150F-4</td>
			<td>1.5 mm OD, 1.12 mm ID</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette puller</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>P-97</td>
			<td>Used for the preparation of micropipettes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vibratome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>VT1000S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vibration isolation table</td>
			<td>Technical Manufacturing Corporation</td>
			<td>63544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infrared CCD camera</td>
			<td>Dage-MIT</td>
			<td>IR-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Patch-clamp amplifier</td>
			<td>HEKA</td>
			<td>EPC-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>MP-285</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-Y stage</td>
			<td>Burleigh</td>
			<td>GIBRALTAR X-Y</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Upright microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>BX51WI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osmometer</td>
			<td>Advanced</td>
			<td>FISKE 210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PH meter</td>
			<td>Mettler Toledo</td>
			<td>FE20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocol microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>LSM 700</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of acute spinal cord slices for whole-cell patch-clamp recording in substantia gelatinosa neurons

हाल ही में पूरे सेल पैच-substantia gelatinosa (एसजी) न्यूरॉन्स से clamping अध्ययन रीढ़ की हड्डी में अंतर्निहित के बारे में जानकारी का एक बड़ा शरीर प्रदान की है संवेदी संचरण, nociceptive विनियमन, और पुराने दर्द या खुजली विकास । electrophysiological रिकॉर्डिंग के कार्यांवयन तीव्र रीढ़ की हड्डी की उपयोगिता के आधार पर रूपात्मक अध्ययन के साथ एक साथ और अधिक ंयूरॉन गुण और एसजी में स्थानीय सर्किट की संरचना के बारे में हमारी समझ में सुधार हुआ है । यहां, हम रीढ़ की हड्डी स्लाइस और शो प्रतिनिधि पूरे सेल रिकॉर्डिंग और रूपात्मक परिणाम की तैयारी के लिए एक विस्तृत और व्यावहारिक गाइड प्रस्तुत करते हैं । इस प्रोटोकॉल आदर्श ंयूरॉन संरक्षण परमिट और vivo परिस्थितियों में एक निश्चित सीमा तक नकल कर सकते हैं । संक्षेप में, करने के लिए एक इन विट्रो में रीढ़ की हड्डी के स्लाइस की तैयारी को प्राप्त करने की क्षमता स्थिर वर्तमान और वोल्टेज दबाना रिकॉर्डिंग सक्षम बनाता है और इस प्रकार आंतरिक झिल्ली संपत्तियों में विस्तृत जांच की सुविधा सकता है, स्थानीय सर्किट और विविध प्रयोगात्मक दृष्टिकोण का उपयोग कर ंयूरॉन संरचना ।

तीव्र रीढ़ की हड्डी स्लाइस चित्रा 1में दिखाया गया आरेख के अनुसार तैयार किया गया । टुकड़ा करने की क्रिया और वसूली के बाद, एक रीढ़ की हड्डी टुकड़ा रिकॉर्डिंग चैंबर को हस्तांतरित क?...

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Acute Spinal Cord Slices for Whole-cell Patch-clamp Recording in Substantia Gelatinosa Neurons at JoVE.com

Preparation of Acute Spinal Cord Slices for Whole-cell Patch-clamp Recording in Substantia Gelatinosa Neurons

Substantia Gelatinosa न्यूरॉन्स में पूरे सेल पैच-क्लैंप रिकॉर्डिंग के लिए तीव्र रीढ़ की हड्डी के स्लाइस की तैयारी

यहाँ, हम पूरे सेल पैच के लिए आवश्यक कदम का वर्णन-substantia gelatinosa (एसजी) न्यूरॉन्स से निर्मित में इन विट्रो रीढ़ की हड्डी टुकड़ा से बना रिकॉर्डिंग दबाना. इस विधि आंतरिक झिल्ली गुण, synaptic संचरण और एसजी न्यूरॉन्स के रूपात्मक लक्षण वर्णन की अनुमति देता है अध्ययन किया जाना है ।

Recent whole-cell patch-clamp studies from substantia gelatinosa (SG) neurons have provided a large body of information about the spinal mechanisms ...

यह विधि संवेदी संचरण, निषेधात्मक विनियमन और पुराने दर्द या दर्द के विकास में अंतर्निहित रीढ़ की हड्डी तंत्र को स्पष्ट करने में मदद कर सकती है इस तकनीक का मुख्य लाभ यह है कि यह आदर्श न्यूरोनल संरक्षण की अनुमति दे सकता है और यह कुछ हद तक इन-वीवो स्थितियों की नकल कर सकता है। एक केशिका खींचने का उपयोग कर बोरोसिलिकेट ग्लास माइक्रोकैपिलरी से इलेक्ट्रोड रिकॉर्डिंग खींचकर शुरू करें। फिर, पिघले हुए एगर के साथ एक मोल्ड भरें ताकि 2.0 सेंटीमीटर एगर ब्लॉक द्वारा 1.5 सेंटीमीटर द्वारा 1.2 सेंटीमीटर तैयार किया जा सके।यदि ट्रांसवर्स सेक्शन की योजना बना रहे हैं तो ब्लॉक को केंद्रीय चैनल के लिए ट्रिम करें। या पैरासिटाल्टल वर्गों के लिए ब्लॉक के किनारे के साथ एक चैनल मांस। ट्रांसकार्डियल प्रोफ्यूसन और रीढ़ की हड्डी निकालने से पहले, सुक्रोज आधारित ACSF के 500 मिलीलीटर तैयार करें।बर्फ ठंड और 95% O2 और 5% CO2 के साथ संतुलन के लिए समाधान ठंडा। बर्फ पर सभी विच्छेदन उपकरण शांत करें। कौडल से रोस्ट्रल तक पीछे की त्वचा पर देशांतर पांच सेंटीमीटर चीरा बनाएं।फिर, दोनों तरफ रीढ़ और पसलियों के बीच रिब पिंजरे के माध्यम से काट दिया। रीढ़ की हड्डी के कौंडल छोर पर कट बनाने के लिए कैंची का इस्तेमाल करें। फिर आसपास के ऊतकों को काट लें और रीढ़ की हड्डी के लुम्बोसेक्रल सेगमेंट को जल्दी से अलग कर लें।बर्फ ठंड सुक्रोज आधारित ACSF युक्त एक ग्लास डिश के लिए लुम्बोसेक्रल सेगमेंट स्थानांतरित करें। वेंट्रल साइड के साथ ऊपर की ओर, कशेरुकी पेडीकल के माध्यम से द्विपक्षीय रूप से काटने के लिए ठीक कैंची का उपयोग करें और रीढ़ की हड्डी को ध्यान से बेनकाब करें। रीढ़ की हड्डी के दो सेंटीमीटर लंबे खंड को लम्बोसेक्राई वृद्धि के साथ अलग करें और रीढ़ की हड्डी को ठंडे सुक्रोज ACSF से भरे एक और ग्लास डिश में स्थानांतरित करें।मेनिंग और पिया आरेक्नोइड झिल्ली को हटाने के लिए विच्छेदन माइक्रोस्कोप के तहत काम करें। जितनी जल्दी हो सके सभी वेंट्रल और पृष्ठीय जड़ों को काट लें। मेनिंग्स और रीढ़ की जड़ों को हटाते समय रीढ़ की हड्डी को चोट पहुंचाने से बचने का ध्यान रखें, खासकर पृष्ठीय सींग।रीढ़ की हड्डी को पहले छंटनी किए गए एगर ब्लॉक पर रखें। ट्रांसवर्स स्लाइस तैयार करने के लिए, रीढ़ की हड्डी के वेंट्रल साइड को ब्लेड की ओर पृष्ठीय पक्ष के साथ एगर में संलग्न करें। पैरासिटाल्टल स्लाइस तैयार करने के लिए, वर्टिकल दिशा में एगर को सुपरग्लू के साथ वेंट्रल साइड संलग्न करें।फिर, आगर ब्लॉक को सुपरग्लू के साथ एक वाइब्रेटम के मंच पर माउंट करें। और 0.025 मिलीमीटर प्रति सेकंड की उन्नत गति और 80 हर्ट्ज की कंपन आवृत्ति के साथ 300 से 500 माइक्रोन ट्रांसवर्स या पैरासाइविटल स्लाइस तैयार करें। रीढ़ की हड्डी को डोरसो-वेंट्रेल कटा हुआ होना चाहिए।सर्वोत्तम परिणामों के लिए, स्लाइस को 15 से 20 मिनट के भीतर तैयार किया जाना चाहिए। कोशिका दृश्यता को संतुष्ट करने के लिए रीढ़ की हड्डी के टुकड़े की मोटाई 600 माइक्रोन से अधिक नहीं होनी चाहिए। 32 डिग्री सेल्सियस पर लगातार ऑक्सीजनयुक्त ACSF युक्त एक भंडारण कक्ष में नायलॉन जाल पर स्लाइस स्थानांतरित करने के लिए एक प्लास्टिक छंटनी की पिपेट का उपयोग करें।सबस्टेंटिया जिलेटिनोसा या एसजी न्यूरॉन्स से पूरे सेल पैच क्लैंप रिकॉर्डिंग का संचालन करने के लिए, केवल निरोधात्मक पोस्ट-सिंप्टिक धाराओं की रिकॉर्डिंग के लिए सीजियम आयन आधारित समाधान लागू करते समय रिकॉर्डिंग के लिए पोटेशियम आयन आधारित इंट्रासेल्युलर समाधानों का उपयोग करें। धीरे-धीरे रीढ़ की हड्डी के टुकड़े को रिकॉर्डिंग कक्ष में ले जाएं। और फिर इसे इष्टतम स्लाइस स्थिरता के लिए नायलॉन धागे के साथ यू आकार के प्लेटिनम तार के साथ मजबूती से स्थिर करें।कमरे के तापमान पर बुलबुला ACSF के साथ तेजी से टुकड़ा दरियादिली और पर्याप्त ऑक्सीजन प्राप्त करने के लिए प्रति मिनट दो से चार मिलीलीटर पर प्रचुरता दर निर्धारित किया है । फिर, कम रिज़ॉल्यूशन माइक्रोस्कोप लेंस का उपयोग करके, एसजी न्यूरॉन्स के क्षेत्र को पारदर्शी बैंड के रूप में पहचानें। एक स्वस्थ न्यूरॉन चुनें, जो उच्च रिज़ॉल्यूशन उद्देश्य का उपयोग करके लक्ष्य कोशिका के रूप में एक उज्ज्वल और चिकनी झिल्ली के साथ तीन आयामी आकार की विशेषता है और इसे वीडियो मॉनिटर स्क्रीन के केंद्र में समायोजित करें।पोटेशियम आयन आधारित या सीज़ियम आयन आधारित इंट्रासेलुलर समाधान की उचित मात्रा के साथ एक माइक्रो पिपेट भरें। इसके बाद इलेक्ट्रोड होल्डर में माइक्रो-पिपेट डालें और यह सुनिश्चित करें कि इंट्रासेल्युलर सॉल्यूशन होल्डर के अंदर सिल्वर वायर से संपर्क कर रहा है । माइक्रो पिपेट को फोकस में लाएं और इसे एसीएसएफ में विसर्जित करने के लिए माइक्रोमैनीपुलेटर का इस्तेमाल करें ।किसी भी गंदगी और मलबे को दूर करने के लिए एक हल्के सकारात्मक दबाव लागू करें। धीरे-धीरे माइक्रो पिपेट को लक्षित न्यूरॉन की ओर ले जाएं। एक बार जब पिपेट न्यूरॉन और न्यूरोनल झिल्ली पर एक बहुत छोटे डिंपल रूपों के पास पहुंचता है, तो एक गीगासील बनाने के लिए सकारात्मक दबाव जारी करें।होल्डिंग क्षमता को शून्य से 70 मिलीवोल्ट्स में बदलें, जो कोशिका की शारीरिक विश्राम झिल्ली क्षमता के करीब है। फिर, झिल्ली को तोड़ने और एक अच्छा पूरे सेल विन्यास बनाने के लिए माइक्रो पिपेट पर एक क्षणिक और कोमल सक्शन लागू करें। वर्तमान क्लैंप में प्रत्येक न्यूरॉन के फायरिंग पैटर्न का परीक्षण करके रिकॉर्ड फायरिंग गुण, जिसमें एक सेकंड की एक श्रृंखला के साथ 25 से 150 पिकोम्प की वर्तमान दालों को आराम करने वाली झिल्ली क्षमता पर 25 पिकोंप वेतन वृद्धि के साथ किया जाता है।दैहिक उपथरेहोल्ड धाराओं को रिकॉर्ड करने के लिए, वोल्टेज क्लैंप मोड में शून्य से 50 मिलीवोल्ट्स पर झिल्ली की क्षमता को पकड़ें, फिर 10 मिलीवोल्ट्स के साथ शून्य से 120 मिलीवोल्ट तक एक दूसरी अवधि की हाइपरपोलेशन वोल्टेज दालों की एक श्रृंखला लागू करें। शून्य से 70 मिलीवोल्ट की होल्डिंग क्षमता पर वोल्टेज क्लैंप मोड में पोटेशियम आयन आधारित इंट्रासेलुलर समाधान के साथ उत्तेजक पोस्ट-सिनेप्टिक धाराओं को रिकॉर्ड करें। रिकॉर्ड आईपीएससी आईपीएससी की रिकॉर्डिंग के लिए सीजियम आयन आधारित इंट्रासेलुलर समाधान का उपयोग करें।लगभग पांच मिनट के लिए शून्य से 70 मिलीवोल्ट्स पर झिल्ली की क्षमता रखने के बाद, धीरे-धीरे होल्डिंग क्षमता को शून्य मिलीवोलlts में बदल दें। स्थिरीकरण के लिए कुछ मिनट इंतजार करें और फिर IPSC घटनाओं को रिकॉर्ड करने के लिए शुरू करते हैं । एक दूसरे की एक श्रृंखला को आराम झिल्ली क्षमता पर एसजी न्यूरॉन में depolarizing द्वारा निर्धारित फायरिंग पैटर्न टॉनिक-फायरिंग, देरी से फायरिंग, गैप-फायरिंग, प्रारंभिक फट, फेसिक-फटने, एकल-स्पाइक और अनिच्छुक-फायरिंग के रूप में वर्गीकृत किया जा सकता है ।यह छवि वोल्टेज क्लैंप में उपधारित धाराओं के लिए आह्वान प्रोटोकॉल दिखाती है। ये प्रतिनिधि निशान आईएच, आईए और आईटी के रूप में वर्गीकृत वर्तमान इंजेक्शन को हाइपरपोलेराइज करने की प्रतिक्रिया दिखाते हैं। यह 50 माइक्रोमोलर एपीवी और 20 माइक्रोमोलर सीएनक्यूएक्स की अनुपस्थिति और उपस्थिति में एसजी न्यूरॉन्स से शून्य से 70 मिलीवोलlt पर दर्ज किया गया सेप्ससी का एक प्रतिनिधि ट्रेस है। यह ट्रेस एक विस्तारित टाइमस्केल पर एपीवी और सीएनक्यूएक्स के अलावा से पहले दर्ज एसईटीसी से पता चलता है।इस प्रक्रिया के बाद जोड़ा पैच क्लैंप रिकॉर्डिंग या ऑप्टोजेनेटिक्स जैसे तरीके सबस्टेंटिया जिलेटिनोसा में विशिष्ट न्यूरोनल माइक्रोसर्किट की विशेषता जैसे अतिरिक्त सवालों के जवाब देने के लिए किए जा सकते हैं।

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Electrophysiological and Morphological Characterization of Neuronal Microcircuits in Acute Brain Slices Using Paired Patch-Clamp Recordings

तीव्र मस्तिष्क स्लाइसें में neuronal microcircuits के electrophysiological और morphological विशेषता बनती पैच दबाना रिकॉर्डिंग का उपयोग

The combination of patch clamp recordings from two (or more) synaptically coupled neurons (paired recordings) in acute brain slice preparations with ...

Whole-cell Patch-clamp Recordings in Brain Slices

ब्रेन स्लाइस में पूरे सेल पैच दबाना रिकॉर्डिंग

Whole-cell patch-clamp recording is an electrophysiological technique that allows the study of the&#160;electrical properties of a substantial part of the ...

The Preparation of Oblique Spinal Cord Slices for Ventral Root Stimulation

उदर रूट उत्तेजना के लिए परोक्ष स्पाइनल कॉर्ड स्लाइस की तैयारी

Electrophysiological recordings from spinal cord slices have proven to be a valuable technique to investigate a wide range of questions, from cellular to ...

Whole-cell Patch-clamp Recordings for Electrophysiological Determination of Ion Selectivity in Channelrhodopsins

चैनलरहादोपिस में आयन की चुनिंदा के इलेक्ट्रोफिज़ियोलोजिकल निर्धारण के लिए पूरे सेल पैच-क्लैंप रिकॉर्डिंग

Over the past decade, channelrhodopsins became indispensable in neuroscientific research where they are used as tools to non-invasively manipulate ...

Application of Automated Image-guided Patch Clamp for the Study of Neurons in Brain Slices

ब्रेन स्लाइस में न्यूरॉन्स के अध्ययन के लिए स्वचालित छवि-निर्देशित पैच दबाना का आवेदन

Whole-cell patch clamp is the gold-standard method to measure the electrical properties of single cells. However, the in vitro patch clamp remains a ...

Auditory Brainstem Response and Outer Hair Cell Whole-cell Patch Clamp Recording in Postnatal Rats

श्रवण Brainstem प्रतिक्रिया और बाहरी बाल कोशिका पूरी सेल पैच दबाना जन्मोत्तर चूहों में रिकॉर्डिंग

The outer hair cell is one of the two types of sensory hair cells in the mammalian cochlea. They alter their cell length with the receptor potential to ...

Preparations and Protocols for Whole Cell Patch Clamp Recording of Xenopus laevis Tectal Neurons

Preparations and Protocols for Whole Cell Patch Clamp Recording of Xenopus laevis Tectal Neurons

तैयारी और पूरे सेल पैच दबाना के लिए प्रोटोकॉल Xenopus laevis Tectal ंयूरॉंस की रिकॉर्डिंग

The Xenopus tadpole retinotectal circuit, comprised of the retinal ganglion cells (RGCs) in the eye which form synapses directly onto neurons in the optic ...

Evaluation of Synaptic Multiplicity Using Whole-cell Patch-clamp Electrophysiology

पूरे सेल पैच का उपयोग कर Synaptic बहुलता का मूल्यांकन-क्लैंप इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी

In the central nervous system, a pair of neurons often form&#160;multiple synaptic contacts and/or functional neurotransmitter release sites (synaptic ...

Preparation of Acute Slices from Dorsal Hippocampus for Whole-Cell Recording and Neuronal Reconstruction in the Dentate Gyrus of Adult Mice

वयस्क चूहों के डेंटेट जाइरस में पूरे सेल रिकॉर्डिंग और न्यूरोनल पुनर्निर्माण के लिए पृष्ठीय हिप्पोकैम्पस से तीव्र स्लाइस की तैयारी

Although the general architecture of the hippocampus is similar along its longitudinal axis, recent studies have revealed prominent differences in ...

Hypothalamic Kisspeptin Neurons as a Target for Whole-Cell Patch-Clamp Recordings

हाइपोथैलेमिक किसपेप्टिन न्यूरॉन्स पूरे सेल पैच-क्लैंप रिकॉर्डिंग के लिए एक लक्ष्य के रूप में

Kisspeptins are essential for the maturation of the hypothalamic-pituitary-gonadal (HPG) axis and fertility. Hypothalamic kisspeptin neurons located in ...