Name: visualization of tangential cell migration in the developing chick optic tectum
Uploaded: 2018-10-24T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualization of Tangential Cell Migration in the Developing Chick Optic Tectum at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af JSP'ER KAKENHI Grant nummer 15K 06740 til Y.W.

1. Elektroporation i Ovo
<ol><li>Forberede udtryk plasmid DNA fluorescerende mærkning i høj koncentration. Isolere DNA fra 200 mL bakteriekulturen af alkalisk lysis metode ved hjælp af anion-exchange kolonner efter producentens protokol (Tabel af materialer). Mix pCAGGS-EGFP og pCAGGS-mCherryNuc i en endelig koncentration på 4 µg/µL hver. Bemærk: Endotoxin-fri plasmid DNA oprensning kan være at foretrække for elektroporation.</li>
	<li>Inkuber frugtbare hønseæg vandret ved 38 ° ...

<ol>
	<li>Mar&#237;n, O., Rubenstein, J. L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+migration+in+the+forebrain.">Cell migration in the forebrain.</a> Annual Reviews of Neuroscience. 26, 441-483 (2003).</li><li>Nadarajah, B., Alifragis, P., Wong, R. O. L., Parnavelas, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+migration+in+the+developing+cerebral+cortex:+Observations+based+on+real-time+imaging.">Neuronal migration in the developing cerebral cortex: Observations based on real-time imaging.</a> Cerebral Cortex. 13, 607-611 (2003).</li><li>Tabata, H., Nakajima, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multipolar+migration:+the+third+mode+of+radial+neuronal+migration+in+the+developing+cerebral+cortex.">Multipolar migration: the third mode of radial neuronal migration in the developing cerebral cortex.</a> Journal of Neuroscience. 23, 9996-10001 (2003).</li><li>Martini, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biased+selection+of+leading+process+branches+mediates+chemotaxis+during+tangential+neuronal+migration.">Biased selection of leading process branches mediates chemotaxis during tangential neuronal migration.</a> Development. 136, 41-50 (2009).</li><li>Polleux, F., Whitford, K. L., Dijkhuizen, P. A., Vitalis, T., Ghosh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+cortical+interneuron+migration+by+neurotrophins+and+PI3-kinase+signaling.">Control of cortical interneuron migration by neurotrophins and PI3-kinase signaling.</a> Development. 129, 3147-3160 (2002).</li><li>Watanabe, Y., Yaginuma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tangential+cell+migration+during+layer+formation+of+chick+optic+tectum.">Tangential cell migration during layer formation of chick optic tectum.</a> Development, Growth and Differentiation. 57, 539-543 (2015).</li><li>Watanabe, Y., Sakuma, C., Yaginuma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NRP1-mediated+Sema3A+signals+coordinate+laminar+formation+in+the+developing+chick+optic+tectum.">NRP1-mediated Sema3A signals coordinate laminar formation in the developing chick optic tectum.</a> Development. 141, 3572-3582 (2014).</li><li>Watanabe, Y., Sakuma, C., Yaginuma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dispersing+movement+of+neuronal+tangential+migration+in+superficial+layers+of+the+developing+chick+optic+tectum.">Dispersing movement of neuronal tangential migration in superficial layers of the developing chick optic tectum.</a> Developmental Biology. 437, 131-139 (2018).</li><li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.">A series of normal stages in the development of the chick embryo.</a> Journal of Morphology. 88, 49-92 (1951).</li><li>Cordelie&#768;res, F. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+cell+tracking+and+analysis+in+phase-contrast+videos+(iTrack4U):+development+of+Java+software+based+on+combined+mean-shift+processes.">Automated cell tracking and analysis in phase-contrast videos (iTrack4U): development of Java software based on combined mean-shift processes.</a> PLOS One. 8, e81266 (2013).</li><li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiji:+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis.">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature Methods. 9, 676-682 (2012).</li></ol>

Den protokol, der er beskrevet ovenfor er optimeret til påvisning af celle migration i overfladiske lag6,8. Det kan anvendes til påvisning af midterste lag migration vandløb (Movie 5)6,7, bare ved at flytte timingen af elektroporation (E5.5 til E4.5) og udbrud af kultur og imaging (E7.0 til E6.0).
Den præsenterede procedure er sammensat af...

Studiet af celle migration skrider frem med de fremrykkende teknik live Imaging. Efter fluorescerende celler mærkning, kan den temporale bevægelse af mærket celler i en kultur fad eller i vivo registreres under video mikroskopi. I studiet af neurale udvikling, har de morfologiske ændringer af migrere celler eller forlængede axoner analyseret ved hjælp af time-lapse billeddannelse. For effektiv imaging er det vigtigt at anvende en passende metode til fluorescerende celle mærkning og væv forberedelse, baseret på formålet med eksperiment og analyse. Til at analysere celle migration i udviklingslandene hjernen, været skive kultur almindeligt anvendt til at observere celle migration parallel til afsnittet skive som radial celle migration1,2,3. Skive kultur-systemet bruges også til påvisning af tangential celle migration4,5, men det er ikke egnet til retningsbestemt analyse i tilfælde hvor cellerne spredes vinkelret til afsnittet skive.
Den optiske tectum er sammensat af et flerlaget struktur, dannet af radiale og tangerer celle migration under fosterudviklingen. Tectal lag dannelse afhænger primært af radial migration af postmitotic neuronal forløber celler fra den ventrikulære zone, og deres endelige bestemmelsessted i lagene korrelerer med deres fødselsdato i ventrikulær zone6. Hvad angår tangential migration rapporteret vi tidligere to strømme af vandringer i de mellemste og overfladiske lag i et udviklende chick optiske tectum. I de midterste lag under E6-E8 overflytte de bipolare celler med en længe førende proces og en tynd afsluttende proces dorsalt eller ventrally langs axon fasciculus af tectal efferente axoner, der kører dorso-ventrally7. Efter denne axophilic migration differentiere cellerne i multipolær neuroner beliggende i de dybe lag. I de overfladiske lag under E7-E14 spredes de overfører celler horisontalt ved at reformere en forgrenet førende proces og scatter i flere retninger8. Efter sprede migration, differentiere til sidst de sidstnævnte celler i overfladiske neuroner i forskellige morfologier. I begge tilfælde er en flad-mount kultur effektiv til at observere celle bevægelse parallelt med pial overfladen.
Vi præsenterer her, en protokol for time-lapse imaging for at visualisere tangential celle migration i udviklingslandene chick optiske tectum7,8. Kombinationen af celle mærkning af elektroporation i ovo, og en efterfølgende fladskærms-mount kultur på celle kultur Indsæt muliggør påvisning af overflytter celle bevægelighed og migration retning. Målet med denne metode er at lette afsløringen af både individuelle celle opførsel på lang sigt og den kollektive indsats af en gruppe af celler i det vandrette plan.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NucleoBond Xtra Midi Plus EF</td>
			<td>MACHEREY-NAGEL</td>
			<td>740422.5</td>
			<td>endotoxin-free plasmid DNA purification kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 ml syringe</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>SS-20ESZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18 gauge needle</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>NN-1838R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green</td>
			<td>Wako</td>
			<td>061-00031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100x penicillin and streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glass capillary tube</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>G-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cell culture insert</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>Millicell CM-ORG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>L2020</td>
			<td>coating of culture insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>poly-L-Lysine</td>
			<td>Peptide Institute</td>
			<td>3075</td>
			<td>coating of culture insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glass bottom dish</td>
			<td>Matsunami</td>
			<td>D11130H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-MEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31985-070</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11765-054</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12483</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chick serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16110082</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10xHBSS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14065-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microsurgical knife</td>
			<td>Surgical specialties cooperation</td>
			<td>72-1501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>curved scissors</td>
			<td>AS ONE</td>
			<td>No.11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micropipette processor</td>
			<td>SUTTER INSTRUMENT</td>
			<td>P97/IVF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>forceps-type electrode</td>
			<td>BEX</td>
			<td>LF646P3x3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pulse generator</td>
			<td>BEX</td>
			<td>CUY21EX</td>
			<td>electroporator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fluorescence stereoscopic microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MZ16F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>inverted fluorescence microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>IX81</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gas controller</td>
			<td>Tokken</td>
			<td>MIGM/OL-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>temperature controller</td>
			<td>Tokai Hit</td>
			<td>MI-IBC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>laser confocal unit</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>FV300</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visualization of tangential cell migration in the developing chick optic tectum

Time-lapse imaging er en kraftfuld metode til at analysere overflytter celle adfærd. Efter fluorescerende celler mærkning, kan flytning af mærket cellerne i kulturen registreres under video mikroskopi. Til at analysere celle migration i udviklingslandene hjernen, er Skive kultur almindeligt anvendt til at observere celle migration parallel til afsnittet skive som radial celle migration. Dog kan begrænset information fås fra Skive kultur metode til at analysere celle migration vinkelret på afsnittet skive, som tangerer celle migration. Vi præsenterer her, protokoller for time-lapse imaging for at visualisere tangential celle migration i den udviklende chick optiske tectum. En kombination af celle mærkning af elektroporation i ovo og en efterfølgende fladskærms-mount kultur på celle kultur Indsæt giver mulighed for påvisning af overflytter celle bevægelse i det vandrette plan. Derudover letter vores metode påvisning af både individuelle celle opførsel og den kollektive kampskridt af en gruppe celler på lang sigt. Denne metode kan potentielt anvendes til at opdage den sekventielle ændring af fluorescerende-mærket mikro-struktur, herunder den cytoskeletale brudforlængelse i den neurale væv eller celler forskydning i den ikke-neurale væv.

Figur 2 viser den visualiseret overfladiske tangential migration i en flad-mount kultur på en forløbet tid (0, 9, 18, 27 h) efter starten af optagelsen. Film 1 er en time-lapse film af 10 min-mellemrum over en periode på 28 timer og 50 min. Rammen er valgt for at fokusere på de overflytte celler fra mærket nederste venstre hjørne af rammen til den umærkede plads (figur 3A). Massebevægelse...

Watch this Scientific Journal Video about Visualization of Tangential Cell Migration in the Developing Chick Optic Tectum at JoVE.com

Visualization of Tangential Cell Migration in the Developing Chick Optic Tectum

Visualisering af Tangential celle Migration i den udviklende Chick optiske Tectum

Vi beskriver metoder til fluorescerende mærkning af tangentielt migrere celler af elektroporation og for time-lapse billeddannelse af mærket celle bevægelse i en flad-mount kultur for at visualisere migrere celle adfærd i den udviklende chick optiske tectum .

Time-lapse imaging is a powerful method to analyze migrating cell behavior. After fluorescent cell labeling, the movement of the labeled cells in culture ...

Denne metode kan hjælpe med at besvare centrale spørgsmål inden for udviklingsbiologi, såsom mekanismerne i neuronal celle migration. Den største fordel ved denne teknik er, at du kan registrere individuel og kollektiv cellemigrering på lang sigt. Efter isolering af 200 milliliter bakteriekultur ved basisk lysismetoden blandes de to plasmider, således at den endelige koncentration af hver er fire mikrogram pr. mikroliter.Inkuber de frugtbare hønseæg vandret ved 38 grader Celsius i 70% relativ luftfugtighed. Efter to og en halv dag, bruge en 20 milliliter sprøjte med en 18 gauge nål til at fjerne fem milliliter albumin fra den spidse side af ægget. Forsegle hullet med tape.Dernæst skal du bruge buede saks til at skære toppen af æggeskallen og åbne et hul, to centimeter i diameter. Under et stereomikroskop skal du kontrollere embryonets udviklingsfase. Forsegl dette større hul med tape.Fortsæt inkubationen ved 38 grader Celsius og 70 procent relativ luftfugtighed indtil E5.5. Før elektroporation, forberede 10 mikroliter af de nævnte plasmid DNA farvet med 0,5 mikroliter af hurtig grøn. Der tilberedes også 10 milliliter autoklaveret PBS indeholdende 100 enheder pr. milliliter penicillin og 100 mikrogram pr. milliliter streptomycin.Brug en mikropipetteprocessor til fremstilling af mikropipetter fremstillet af glaskapillære rør. Skær den distale spids af mikropipetten til en passende pore størrelse for mængden af DNA, der skal injiceres. Brug en saks til at skære den forseglede top shell til at genåbne et hul, to og en halv centimeter i diameter, og sæt ægget stabil under stereomikroskopet.Aflejr et par dråber af den forberedte PBS-opløsning i ægget. Brug to fine hæceser, skal du skrælle den allantoic membran, der dækker fosteret, være omhyggelig med ikke at forårsage en blødning. Fjern derefter amnionen fra embryonets hoved.Mens du drejer hovedet med en mikrospatula, skal du bruge en mikropipette forbundet til et sugerør, at injicere mellem 0,1 og en mikroliter af den farvede DNA i ventrikulære hulrum i venstre optiske tectum. Placer et par pincet type elektroder omkring målområdet af det optiske tectum. Brug pulsgeneratoren til at oplade en forpuls på 30 volt i et millisekund med et interval på fem millisekunder og til efterfølgende impulser på seks volt i fem millisekunder med et interval på 10 millisekunder.Efter alt dette, forsegle hullet med tape, og fortsætte inkubering ved 38 grader Celsius og 70 procent relativ luftfugtighed. Læg elektroderne i blød i en plastikskål fyldt med PBS, og brug en interdental børste til at fjerne albumen. Gentag processen fra den første skalskæring til elektroporationen for hvert æg.En dag før Flat-Mount Kultur, begyndte at forberede den kodede cellekultur Indsæt ved at tilføje autoklave til destilleret vand til en 10 centimeter cellekultur parabol. Flyde nogle celle kultur Skær på vandet. Ved en opløsning, der indeholder otte mikrogram pr. milliliter laminin, og 80 mikrogram pr. milliliter Polly L, skal du sørge for at dække indsatserne.Inkubere natten over ved 37 grader Celsius i cellekulturen kuldioxid inkubator. På kulturens dag på E7.0 fjernede laminin- og poly l-lysinopløsningen fra indsatsen. Overfør derefter indsæt til en glasbundet skål fyldt med 1,1 milliliter kulturmedium.Overfør skålen til cellekulturen kuldioxid inkubator ved 37 grader Celsius. Sæt en fugtig kammerenhed på et omvendt konfokal mikroskop med en gasstrøm på 40% ilt og 5% kuldioxid, og en temperatur på 38 grader Celsius. For at begynde at forberede en vævsprøve på indsæt, skal du bruge hændeb til at klemme embryohovedet ud i en seks centimeter cellekulturskål, der indeholder iskold HBSS.Brug to fine pincet til at isolere det elektroporerede optiske tectum. Og brug derefter en plastik dropper til at overføre det til en konkav glasskål baseret på sort silicium og fyldt med iskold HBSS. Kontroller mærkningens position under fluorescerende stereoskopisk mikroskop.Ved hjælp af en mikro kirurgisk kniv, skåret ud tectal væv omkring mærkningen, mens der mærkes retningen af vævet i tectum. Derefter skal du bruge en plast dropper til at overføre det mærkede væv til indsatsen, så stiftens side er fastgjort til indsatsen. Læg tectalvævet i den ønskede retning, og fjern overskydende HBSS.Vævspræparatprocessen gentages for alle andre vævsprøver, der er beregnet til samme indsats. Derefter placeres skålen i det præfabrikerede kammer af det omvendte konfokale mikroskop. Brug det inverterede konfokale mikroskop, kontrollere fluorescerende mærkning og fokusere det mikroskopiske felt.Start laserkonfokale enheder. Prøve konfokal scanning for at justere retningen og placeringen af vævet langs x og y akser i marken. Vælg derefter scanningsstørrelsen.Beslut intervalet og det samlede interval for konfokal scanning langs z-aksen. Tag et interval på fem eller 10 mikrometer for 100 mikrometer rækkevidde. Vælg tidsintervallet for konfokal billeddannelse og den samlede billedvarighed.Når du har indstillet parametrene for det konfokale kørende program, skal du begynde billeddannelse. Når billeddannelse er færdig, kombineres konfokale billeder på en anden C-akse til at producere z-stack billeder med endelige fokus justering på hvert tidspunkt. Tilføj derefter Z-stakbillederne på forskellige tidspunkter for at konstruere en time-lapse-film.I denne undersøgelse, celle migration påvises i overfladiske lag gennem elektroporation i Ovo, flad mount celle kultur, og time-lapse konfokale billeddannelse. De tangentielt migrerende celler og kernerne i de overfladiske lag af det optiske tectum ses her nul timer, ni timer, 18 timer og 27 timer efter optagelsens indtræden. En time-lapse film på 10 minutter intervaller over en 28 timer og 50 minutter periode, viser massebevægelse af migrerende celler og deres kerner.Den fusionerede film viser tydeligt massebevægelsen af de migrerende celler. Retningstyrligheden af cellemigreringen kan undersøges ved at fokusere på de spredende celler fra det mærkede center til alle retninger. De klare billeder af den nukleare bevægelse, giver mulighed for automatisk sporing af den nukleare migration ved hjælp af en partikel tracking plugin.Tidsmæssige ændringer i forløb af tangential migration kan visualiseres og bevise, at den dispergering migration er retningsbestemt. Billeder med højere forstørrelse kan tages med fem minutters mellemrum. At undersøge individuelle celleadfærd med den sekventielle morfologiske ændring af den førende proces, efterfølgende proces og kerner.Efter denne procedure kan mærkning af lysende handlinger udføres. For at besvare yderligere spørgsmål som mekanismerne i Aksum vejledning.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Efficient Gene Transfer in Chick Retinas for Primary Cell Culture Studies: An Ex-ovo Electroporation Approach

Efficient Gene Transfer in Chick Retinas for Primary Cell Culture Studies: An Ex-ovo Electroporation Approach

Effektiv Gene Transfer i Chick nethinder for primær cellekultur Studies: An<em&gt; Ex-ovo</em&gt; Elektroporation Approach

The cone photoreceptor-enriched cultures derived from embryonic chick retinas have become an indispensable tool for researchers around the world studying ...

Forward Genetic Approach to Uncover Stress Resistance Genes in Mice &#8212; A High-throughput Screen in ES Cells

Frem Genetisk tilgang til Afdække Stress resistensgener i mus - En Højkapacitetsforskning skærm i ES-celler

Phenotype-driven genetic screens in mice is a powerful technique to uncover gene functions, but are often hampered by extremely high costs, which severely ...

Optimization of the Wound Scratch Assay to Detect Changes in Murine Mesenchymal Stromal Cell Migration After Damage by Soluble Cigarette Smoke Extract

Optimering af såret Scratch-analysen til at påvise ændringer i murine Mesenchymale stromacelle Migration efter skade ved Opløselig Cigaret røgekstrakt

Cell migration is vital to many physiological and pathological processes including tissue development, repair, and regeneration, cancer metastasis, and ...

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

Analyserer<em&gt; In vivo</em&gt; Cell Migration hjælp Cell transplantationer og Time-lapse Imaging i zebrafisk embryoner

Cell migration is key to many physiological and pathological conditions, including cancer metastasis. The cellular and molecular bases of cell migration ...

Technique to Target Microinjection to the Developing Xenopus Kidney

Technique to Target Microinjection to the Developing Xenopus Kidney

Teknik Target Mikroinjektion til udviklingslandene<em&gt; Xenopus</em&gt; Nyre

The embryonic kidney of Xenopus&#160;laevis (frog), the pronephros, consists of a single nephron, and can be used as a model for kidney disease. Xenopus ...

Application of Impermeable Barriers Combined with Candidate Factor Soaked Beads to Study Inductive Signals in the Chick

Anvendelse af impermeable barrierer Kombineret med Candidate Factor Soaked Perler til at studere Induktive Signaler i Chick

The chick embryo provides a superb vertebrate model that can be used to dissect developmental questions in a direct way. Its accessibility and robustness ...

Bioengineering of Humanized Bone Marrow Microenvironments in Mouse and Their Visualization by Live Imaging

Bioengineering af humaniserede knoglemarv mikro miljøer i mus og deres visualisering ved Live Imaging

Human hematopoietic stem cells (HSCs) reside in the bone marrow (BM) niche, an intricate, multifactorial network of components producing cytokines, growth ...

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualisering af Superior okulær Sulcus under Danio rerio embryogenese

Congenital ocular coloboma is a genetic disorder that is typically observed as a cleft in the inferior aspect of the eye resulting from incomplete choroid ...

Visualization and Analysis of Pharyngeal Arch Arteries using Whole-mount Immunohistochemistry and 3D Reconstruction

Visualisering og analyse af Pharyngeal Arch Arterier ved hjælp af fuld-mount Immunohistochemistry og 3D Rekonstruktion

Improper formation or remodeling of the pharyngeal arch arteries (PAAs) 3, 4, and 6 contribute to some of the most severe forms of congenital heart ...

Dissection, Immunohistochemistry and Mounting of Larval and Adult Drosophila Brains for Optic Lobe Visualization

Dissection, Immunohistochemistry and Mounting of Larval and Adult Drosophila Brains for Optic Lobe Visualization

The Drosophila optic lobe, comprised of four neuropils: the lamina, medulla, lobula and lobula plate, is an excellent model system for exploring the ...