Name: visualization of tangential cell migration in the developing chick optic tectum
Uploaded: 2018-10-24T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualization of Tangential Cell Migration in the Developing Chick Optic Tectum at JoVE.com

Dit werk werd gesteund door JSPS KAKENHI Grant nummer 15K 06740 aan Y.W.

1. Electroporation In Ovo
<ol><li>Voorbereiden op de expressie plasmide DNA fluorescerende labeling in hoge concentratie. Isoleren DNA van 200 mL voor bacteriële cultuur door de alkalische lysis methode met behulp van anion-wisselingskolommen volgens de fabrikant protocol (Tabel van materialen). Meng pCAGGS-EGFP en pCAGGS-mCherryNuc op een eindconcentratie van 4 µg/µL elke. Opmerking: Endotoxine-vrije plasmide DNA zuivering kan zijn voorkeur voor electroporation.</li>
	<li>Incubeer vruch...

<ol>
	<li>Mar&#237;n, O., Rubenstein, J. L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+migration+in+the+forebrain.">Cell migration in the forebrain.</a> Annual Reviews of Neuroscience. 26, 441-483 (2003).</li><li>Nadarajah, B., Alifragis, P., Wong, R. O. L., Parnavelas, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+migration+in+the+developing+cerebral+cortex:+Observations+based+on+real-time+imaging.">Neuronal migration in the developing cerebral cortex: Observations based on real-time imaging.</a> Cerebral Cortex. 13, 607-611 (2003).</li><li>Tabata, H., Nakajima, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multipolar+migration:+the+third+mode+of+radial+neuronal+migration+in+the+developing+cerebral+cortex.">Multipolar migration: the third mode of radial neuronal migration in the developing cerebral cortex.</a> Journal of Neuroscience. 23, 9996-10001 (2003).</li><li>Martini, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biased+selection+of+leading+process+branches+mediates+chemotaxis+during+tangential+neuronal+migration.">Biased selection of leading process branches mediates chemotaxis during tangential neuronal migration.</a> Development. 136, 41-50 (2009).</li><li>Polleux, F., Whitford, K. L., Dijkhuizen, P. A., Vitalis, T., Ghosh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+cortical+interneuron+migration+by+neurotrophins+and+PI3-kinase+signaling.">Control of cortical interneuron migration by neurotrophins and PI3-kinase signaling.</a> Development. 129, 3147-3160 (2002).</li><li>Watanabe, Y., Yaginuma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tangential+cell+migration+during+layer+formation+of+chick+optic+tectum.">Tangential cell migration during layer formation of chick optic tectum.</a> Development, Growth and Differentiation. 57, 539-543 (2015).</li><li>Watanabe, Y., Sakuma, C., Yaginuma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NRP1-mediated+Sema3A+signals+coordinate+laminar+formation+in+the+developing+chick+optic+tectum.">NRP1-mediated Sema3A signals coordinate laminar formation in the developing chick optic tectum.</a> Development. 141, 3572-3582 (2014).</li><li>Watanabe, Y., Sakuma, C., Yaginuma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dispersing+movement+of+neuronal+tangential+migration+in+superficial+layers+of+the+developing+chick+optic+tectum.">Dispersing movement of neuronal tangential migration in superficial layers of the developing chick optic tectum.</a> Developmental Biology. 437, 131-139 (2018).</li><li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.">A series of normal stages in the development of the chick embryo.</a> Journal of Morphology. 88, 49-92 (1951).</li><li>Cordelie&#768;res, F. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+cell+tracking+and+analysis+in+phase-contrast+videos+(iTrack4U):+development+of+Java+software+based+on+combined+mean-shift+processes.">Automated cell tracking and analysis in phase-contrast videos (iTrack4U): development of Java software based on combined mean-shift processes.</a> PLOS One. 8, e81266 (2013).</li><li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiji:+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis.">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature Methods. 9, 676-682 (2012).</li></ol>

Het protocol dat hierboven beschreven is geoptimaliseerd voor het opsporen van cel migratie in de oppervlakkige lagen6,8. Het is van toepassing voor het opsporen van middenlaag migratie streams (film 5)6,7, gewoon door een verschuiving van de timing van de electroporation (E5.5 naar E4.5) en het begin van de cultuur en imaging (E7.0 naar E6.0).
<p class="jove_content...

De studie van cel migratie heeft voortgang met de oprukkende techniek voor levende imaging. Na tl cel labeling, kan het tijdelijke verkeer van gelabelde cellen in een cultuur schotel of in vivo onder videomicroscopie worden opgenomen. In de studie van neurale ontwikkeling, hebben de morfologische veranderingen van cellen migreren of grondvlak axonen zijn geanalyseerd met behulp van time-lapse imaging. Voor effectieve beeldvorming is het essentieel een geschikte methode voor fluorescerende cel labeling en weefsel preparaat, gebaseerd op het doel van het experiment en de analyse toe te passen. Voor het analyseren van cel migratie in de ontwikkelende hersenen, heeft segment cultuur zijn gebruikte om te observeren cel migratie parallel aan de sectie van het segment, bijvoorbeeld radiale cel migratie,1,,2,3. Het segment cultuur systeem wordt ook gebruikt voor het opsporen van tangentiële cel migratie4,5, maar het is niet geschikt voor directionele analyse in gevallen waar de cellen loodrecht naar de segment-sectie verspreiden.
De optische tectum bestaat uit een meerdere lagen structuur, gevormd door radiaal en tangentieel cel migratie tijdens de embryonale ontwikkeling. Tectal laag vorming is voornamelijk afhankelijk van radiale migratie van neuronale voorlopercellen van de ventriculaire zone postmitotic, en hun eindbestemming in de lagen correleert met hun geboortedatum in de ventriculaire zone6. Wat betreft de tangentiële migratie meldden we eerder twee stromen van migraties in de oppervlakkige en middelste lagen in een derde kuiken optic tectum. In de middelste lagen tijdens E6-E8 migreren de bipolaire cellen met een lange leidende proces en een dunne achterstand proces dorsally of ventrally langs de axon arcuatus van tectal efferent axonen uitvoert dorso-ventrally7. Na de migratie van deze axophilic onderscheiden de cellen in de multipolaire neuronen zich in de diepe lagen. In de oppervlakkige lagen tijdens E7-E14 verspreiden de migreren cellen horizontaal door de hervorming van een vertakte leidende proces en scatter in meerdere richtingen8. Na de migratie te verspreiden, onderscheiden de laatstgenoemde cellen uiteindelijk in oppervlakkige neuronen van verschillende morphologies. In beide gevallen is een flat-mount cultuur efficiënt om te observeren cel beweging parallel aan het pial oppervlak.
Hier presenteren we een protocol voor time-lapse denkbaar om te visualiseren tangentiële cel migratie in de ontwikkelingslanden chick optic tectum7,-8. Combinatie van cel labeling door electroporation in ovo, en een latere flat-mount cultuur op de cel cultuur invoegen maakt detectie van migreren cel verkeer en migratie richting. Het doel van deze methode is om de detectie van zowel individuele cel gedrag in de lange termijn en de collectieve actie van een groep cellen in het horizontale vlak.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NucleoBond Xtra Midi Plus EF</td>
			<td>MACHEREY-NAGEL</td>
			<td>740422.5</td>
			<td>endotoxin-free plasmid DNA purification kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 ml syringe</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>SS-20ESZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18 gauge needle</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>NN-1838R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green</td>
			<td>Wako</td>
			<td>061-00031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100x penicillin and streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glass capillary tube</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>G-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cell culture insert</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>Millicell CM-ORG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>L2020</td>
			<td>coating of culture insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>poly-L-Lysine</td>
			<td>Peptide Institute</td>
			<td>3075</td>
			<td>coating of culture insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glass bottom dish</td>
			<td>Matsunami</td>
			<td>D11130H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-MEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31985-070</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11765-054</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12483</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chick serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16110082</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10xHBSS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14065-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microsurgical knife</td>
			<td>Surgical specialties cooperation</td>
			<td>72-1501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>curved scissors</td>
			<td>AS ONE</td>
			<td>No.11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micropipette processor</td>
			<td>SUTTER INSTRUMENT</td>
			<td>P97/IVF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>forceps-type electrode</td>
			<td>BEX</td>
			<td>LF646P3x3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pulse generator</td>
			<td>BEX</td>
			<td>CUY21EX</td>
			<td>electroporator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fluorescence stereoscopic microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MZ16F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>inverted fluorescence microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>IX81</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gas controller</td>
			<td>Tokken</td>
			<td>MIGM/OL-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>temperature controller</td>
			<td>Tokai Hit</td>
			<td>MI-IBC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>laser confocal unit</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>FV300</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visualization of tangential cell migration in the developing chick optic tectum

Time-lapse imaging is een krachtige methode om te migreren cel gedrag te analyseren. Na tl cel labeling, kan het verkeer van de gelabelde cellen in cultuur onder videomicroscopie worden opgenomen. Voor het analyseren van cel migratie in de ontwikkelende hersenen, wordt segment cultuur vaak gebruikt om te observeren cel migratie parallel aan de sectie van het segment, bijvoorbeeld radiale cel migratie. Echter kan beperkte informatie worden verkregen door de methode voor het analyseren van cel migratie loodrecht op de sectie van het segment, bijvoorbeeld tangentiële cel migratie segment cultuur. Hier presenteren we de protocollen voor time-lapse denkbaar om te visualiseren tangentiële cel migratie in de ontwikkelingslanden chick optic tectum. Een combinatie van cel labeling door electroporation in ovo en een daaropvolgende flat-mount cultuur op de cel cultuur invoegen maakt detectie van migreren cel beweging in het horizontale vlak. Bovendien vergemakkelijkt onze methode detectie van zowel individuele cel gedrag en de collectieve actie van een groep cellen op de lange termijn. Deze methode kan mogelijk worden toegepast om te ontdekken de sequentiële verandering van de TL-geëtiketteerden micro-structuur, met inbegrip van de axonale rek in de neurale verplaatsing van de weefsels of cellen in de niet-zenuwweefsel.

Figuur 2 toont de gevisualiseerde oppervlakkige tangentiële migratie in een flat-mount cultuur op een verstreken tijd (0, 9, 18, 27 h) na begin van opname. Film 1 is een time-lapse film van 10 min-intervallen over een periode van 28 uur en 50 minuten. Het frame is geselecteerd om zich te concentreren op de migreren cellen uit de label linksonder van het frame aan de labelloze ruimte (figuur 3A)....

Watch this Scientific Journal Video about Visualization of Tangential Cell Migration in the Developing Chick Optic Tectum at JoVE.com

Visualization of Tangential Cell Migration in the Developing Chick Optic Tectum

Visualisatie van tangentiële cel migratie in de ontwikkelingslanden Chick Optic Tectum

We beschrijven de methoden voor het labelen van fluorescerende tangentieel migreren cellen door electroporation, en voor time-lapse beeldvorming van de beweging van de gelabelde cel in een flat-mount cultuur om te visualiseren migreren cel gedrag in de ontwikkelingslanden chick optic tectum .

Time-lapse imaging is a powerful method to analyze migrating cell behavior. After fluorescent cell labeling, the movement of the labeled cells in culture ...

Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in de ontwikkelingsbiologie, zoals de mechanismen van neuronale celmigratie. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat u individuele en collectieve celmigratie op lange termijn detecteren. Na het isoleren van 200 milliliter bacteriële cultuur door de alkalische lyse methode, meng de twee plasmiden, zodanig dat de uiteindelijke concentratie van elk is vier microgram per microliter.Broed de vruchtbare kippeneieren horizontaal bij 38 graden Celsius in 70% relatieve vochtigheid. Gebruik na twee en een halve dag een spuit van 20 milliliter met een naald van 18 meter om vijf milliliter albumine van de puntige kant van het ei te elimineren. Sluit het gat af met tape.Gebruik vervolgens een gebogen schaar om de bovenkant van de eierschaal te snijden en een gat te openen, twee centimeter in diameter. Controleer onder een stereomicroscoop de ontwikkelingsfase van het embryo. Sluit dit grotere gat af met tape.Zet de incubatie voort bij 38 graden Celsius en 70 procent relatieve vochtigheid tot E5,5. Bereid vóór elektroporatie 10 microliter van het genoemde plasmide DNA dat gekleurd is met 0,5 microliter snel groen. Ook bereiden 10 milliliter van autoclaved PBS met 100 eenheden per milliliter penicilline, en 100 microgram per milliliter streptomycine.Gebruik een micropipet processor om micropipets gemaakt van glazen capillaire buizen voor te bereiden. Snijd de distale punt van de micropipet tot een geschikte poriegrootte voor de hoeveelheid DNA die moet worden geïnjecteerd. Gebruik een schaar om de verzegelde bovenste schelp te snijden om een gat te heropenen, twee en een halve centimeter in diameter, en zet het ei stabiel onder de stereomicroscoop.Deponeren een paar druppels van de voorbereide PBS oplossing in het ei. Met behulp van twee fijne tangen, schil het allantoïsche membraan dat het embryo bedekt, wees voorzichtig om geen bloeding te veroorzaken. Verwijder vervolgens de amnion van het hoofd van het embryo.Gebruik tijdens het draaien van de kop met een microspatula een micropipet die is aangesloten op een zuigbuis, om tussen 0,1 en één microliter van het gekleurde DNA in de ventriculaire holte van het linker optische tectum te injecteren. Plaats een paar tangen type elektroden rond het doelgebied van het optische tectum. Gebruik de pulsgenerator om een pre-puls van 30 volt op te laden voor een milliseconde met een interval van vijf milliseconden en voor latere pulsen van zes volt gedurende vijf milliseconden met een interval van 10 milliseconden.Na dit alles, verzegel het gat met tape, en blijven broeden op 38 graden Celsius en 70 procent relatieve vochtigheid. Week de elektroden in een plastic schotel gevuld met PBS, en gebruik een interdentale borstel om de albumen te verwijderen. Herhaal het proces van de eerste schaal snijden aan de elektroporatie voor elk ei.Een dag voor de Flat-Mount Cultuur, begon de voorbereiding van de gecodeerde cel cultuur Insert door het toevoegen van autoclave aan gedestilleerd water aan een 10 centimeter cel cultuur schotel. Float sommige cel cultuur Inserts op het water. Bij een oplossing met acht microgram per milliliter laminine en 80 microgram per milliliter Polly L, om de inserts te bedekken.Incubeer 's nachts bij 37 graden Celsius in de celcultuur koolstofdioxide incubator. Op de dag van de cultuur op E7.0, verwijderde de laminine en poly l-lysine oplossing uit de Insert. Breng de Insert vervolgens over op een glazen bodemschaal gevuld met 1,1 milliliter kweekmedium.Breng de schotel naar de celcultuur koolstofdioxide incubator op 37 graden Celsius. Zet een vochtige kamer eenheid op een omgekeerde confocale microscoop met een gasstroom van 40% zuurstof en 5% kooldioxide, en een temperatuur van 38 graden Celsius. Om te beginnen met het voorbereiden van een weefselmonster op de Insert, gebruik tangen om het embryohoofd uit te knijpen in een celkweekschotel van zes centimeter met ijskoude HBSS.Gebruik twee fijne tangen om het geëlektreerde optische tectum te isoleren. En gebruik dan een plastic druppel om het over te brengen in een holle glazen schotel op basis van zwart silicium en gevuld met ijskoude HBSS. Controleer de positie van de etikettering onder fluorescerende stereoscopische microscoop.Met behulp van een micro chirurgisch mes, knip het tectale weefsel rond de etikettering, terwijl de richting van het weefsel in het tectum. Gebruik hierna een plastic druppel om het gelabelde weefsel over te brengen naar de insert, zodat de pinzijde aan de insert is bevestigd. Leg het tectale weefsel in de gewenste richting en verwijder overtollige HBSS.Herhaal het weefselpreparaat voor andere weefselmonsters die bestemd zijn voor dezelfde insert. Plaats vervolgens de schotel in de voorgevormde kamer van de omgekeerde confocale microscoop. Controleer met behulp van de omgekeerde confocale microscoop de fluorescerende etikettering en richt u op het microscopische veld.Start de laser confocale eenheid. Monster de confocale scan om de richting en positie van het weefsel langs de x- en y-assen in het veld aan te passen. Selecteer vervolgens de scangrootte.Bepaal het interval en het totale bereik van de confocale scan langs de z-as. Neem een interval van vijf of 10 micrometer voor het bereik van 100 micrometer. Kies het tijdsinterval van de confocale beeldvorming en de totale beeldtijd.Na het instellen van de parameters van het confocale hardloopprogramma, begint u met beeldvorming. Zodra de beeldvorming is voltooid, combineerde u de confocale beelden op een andere C-as om z-stack-beelden te produceren met de uiteindelijke brandpuntsaanpassing op elk tijdstip. Voeg vervolgens de Z-stackafbeeldingen op verschillende tijdstippen toe om een time-lapse-film te maken.In deze studie wordt celmigratie gedetecteerd in oppervlakkige lagen door elektroporatie in Ovo, flat mount celcultuur en time-lapse confocale beeldvorming. De tangentially migrerende cellen en de kernen in de oppervlakkige lagen van het optische tectum worden hier gezien nul uur, negen uur, 18 uur en 27 uur na het begin van de opname. Een time-lapse film van 10 minuten intervallen over een periode van 28 uur en 50 minuten, toont de massabeweging van migrerende cellen en hun kernen.De samengevoegde film toont duidelijk de massabeweging van de migrerende cellen. De directionaliteit van de celmigratie kan worden onderzocht door zich te concentreren op de zich verspreidende cellen van het gelabelde centrum naar alle richtingen. De duidelijke beelden van de nucleaire beweging, zorgt voor de automatische tracking van de nucleaire migratie met behulp van een deeltjes tracking plugin.Temporele veranderingen van de trajecten van de tangentiële migratie kunnen worden gevisualiseerd en bewijzen dat de verspreidende migratie omnidirectioneel is. Hogere vergrotingsbeelden kunnen in intervallen van vijf minuten worden gemaakt. Om individueel celgedrag te onderzoeken met de sequentiële morfologische verandering van het leidende proces, het trailingproces en de kernen.Na deze procedure kan etikettering van verhelderende handelingen worden uitgevoerd. Om aanvullende vragen te beantwoorden, zoals de mechanismen van Aksum-begeleiding.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Efficient Gene Transfer in Chick Retinas for Primary Cell Culture Studies: An Ex-ovo Electroporation Approach

Efficient Gene Transfer in Chick Retinas for Primary Cell Culture Studies: An Ex-ovo Electroporation Approach

Efficiënte Gene Transfer in Chick netvliezen voor primaire cel Cultuurwetenschappen: An<em&gt; Ex-ovo</em&gt; Elektroporatie Aanpak

The cone photoreceptor-enriched cultures derived from embryonic chick retinas have become an indispensable tool for researchers around the world studying ...

Forward Genetic Approach to Uncover Stress Resistance Genes in Mice &#8212; A High-throughput Screen in ES Cells

Forward Genetische Aanpak stress resistentiegenen in Muizen Ontdek - Een High-throughput scherm in ES-cellen

Phenotype-driven genetic screens in mice is a powerful technique to uncover gene functions, but are often hampered by extremely high costs, which severely ...

Optimization of the Wound Scratch Assay to Detect Changes in Murine Mesenchymal Stromal Cell Migration After Damage by Soluble Cigarette Smoke Extract

Optimalisatie van de wond Scratch Assay om veranderingen in muizen mesenchymale Stromal Cell Migratie Detect Na Schade door Oplosbare sigarettenrook Extract

Cell migration is vital to many physiological and pathological processes including tissue development, repair, and regeneration, cancer metastasis, and ...

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

analyseren<em&gt; In Vivo</em&gt; Cell Migratie behulp Cell Transplantaties en Time-lapse Imaging in zebravis embryo&#39;s

Cell migration is key to many physiological and pathological conditions, including cancer metastasis. The cellular and molecular bases of cell migration ...

Technique to Target Microinjection to the Developing Xenopus Kidney

Technique to Target Microinjection to the Developing Xenopus Kidney

Micro-injectie techniek om Target aan de ontwikkelingslanden<em&gt; Xenopus</em&gt; Kidney

The embryonic kidney of Xenopus&#160;laevis (frog), the pronephros, consists of a single nephron, and can be used as a model for kidney disease. Xenopus ...

Application of Impermeable Barriers Combined with Candidate Factor Soaked Beads to Study Inductive Signals in the Chick

Toepassing van Waterdicht Barrières In combinatie met de kandidaat-Factor Soaked Beads om Inductive Signalen studie in de Chick

The chick embryo provides a superb vertebrate model that can be used to dissect developmental questions in a direct way. Its accessibility and robustness ...

Bioengineering of Humanized Bone Marrow Microenvironments in Mouse and Their Visualization by Live Imaging

Bioengineering van Humanized Botmarg Microenvironments in Mouse en hun visualisatie door Live Imaging

Human hematopoietic stem cells (HSCs) reside in the bone marrow (BM) niche, an intricate, multifactorial network of components producing cytokines, growth ...

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualisatie van de Superior oogbeschadigingen en/of Sulcus (hersenanatomie) tijdens Danio rerio embryogenese

Congenital ocular coloboma is a genetic disorder that is typically observed as a cleft in the inferior aspect of the eye resulting from incomplete choroid ...

Visualization and Analysis of Pharyngeal Arch Arteries using Whole-mount Immunohistochemistry and 3D Reconstruction

Visualisatie en analyse van faryngeale boogslagaders met behulp van Whole-mount Immunohistochemie en 3D Reconstructie

Improper formation or remodeling of the pharyngeal arch arteries (PAAs) 3, 4, and 6 contribute to some of the most severe forms of congenital heart ...

Dissection, Immunohistochemistry and Mounting of Larval and Adult Drosophila Brains for Optic Lobe Visualization

Dissection, Immunohistochemistry and Mounting of Larval and Adult Drosophila Brains for Optic Lobe Visualization

The Drosophila optic lobe, comprised of four neuropils: the lamina, medulla, lobula and lobula plate, is an excellent model system for exploring the ...