Name: visualization of tangential cell migration in the developing chick optic tectum
Uploaded: 2018-10-24T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualization of Tangential Cell Migration in the Developing Chick Optic Tectum at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av JSP KAKENHI bevilgning nummer 15K 06740 til Y.W.

1. Electroporation i Ovo
<ol><li>Forberede uttrykk plasmider DNA fluorescerende merking i høy konsentrasjon. Isolere DNA fra 200 mL bakteriell kultur av alkaliske lysis metoden bruker anion exchange kolonner i henhold til produsentens protokollen (Tabell for materiale). Bland pCAGGS-EGFP og pCAGGS-mCherryNuc i en endelig konsentrasjon av 4 µg/µL hver. Merk: Endotoxin-gratis plasmider DNA rensing kan være foretrukket for electroporation.</li>
	<li>Inkuber fertile chicken egg vannrett på...

<ol>
	<li>Mar&#237;n, O., Rubenstein, J. L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+migration+in+the+forebrain.">Cell migration in the forebrain.</a> Annual Reviews of Neuroscience. 26, 441-483 (2003).</li><li>Nadarajah, B., Alifragis, P., Wong, R. O. L., Parnavelas, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+migration+in+the+developing+cerebral+cortex:+Observations+based+on+real-time+imaging.">Neuronal migration in the developing cerebral cortex: Observations based on real-time imaging.</a> Cerebral Cortex. 13, 607-611 (2003).</li><li>Tabata, H., Nakajima, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multipolar+migration:+the+third+mode+of+radial+neuronal+migration+in+the+developing+cerebral+cortex.">Multipolar migration: the third mode of radial neuronal migration in the developing cerebral cortex.</a> Journal of Neuroscience. 23, 9996-10001 (2003).</li><li>Martini, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biased+selection+of+leading+process+branches+mediates+chemotaxis+during+tangential+neuronal+migration.">Biased selection of leading process branches mediates chemotaxis during tangential neuronal migration.</a> Development. 136, 41-50 (2009).</li><li>Polleux, F., Whitford, K. L., Dijkhuizen, P. A., Vitalis, T., Ghosh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+cortical+interneuron+migration+by+neurotrophins+and+PI3-kinase+signaling.">Control of cortical interneuron migration by neurotrophins and PI3-kinase signaling.</a> Development. 129, 3147-3160 (2002).</li><li>Watanabe, Y., Yaginuma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tangential+cell+migration+during+layer+formation+of+chick+optic+tectum.">Tangential cell migration during layer formation of chick optic tectum.</a> Development, Growth and Differentiation. 57, 539-543 (2015).</li><li>Watanabe, Y., Sakuma, C., Yaginuma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NRP1-mediated+Sema3A+signals+coordinate+laminar+formation+in+the+developing+chick+optic+tectum.">NRP1-mediated Sema3A signals coordinate laminar formation in the developing chick optic tectum.</a> Development. 141, 3572-3582 (2014).</li><li>Watanabe, Y., Sakuma, C., Yaginuma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dispersing+movement+of+neuronal+tangential+migration+in+superficial+layers+of+the+developing+chick+optic+tectum.">Dispersing movement of neuronal tangential migration in superficial layers of the developing chick optic tectum.</a> Developmental Biology. 437, 131-139 (2018).</li><li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.">A series of normal stages in the development of the chick embryo.</a> Journal of Morphology. 88, 49-92 (1951).</li><li>Cordelie&#768;res, F. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+cell+tracking+and+analysis+in+phase-contrast+videos+(iTrack4U):+development+of+Java+software+based+on+combined+mean-shift+processes.">Automated cell tracking and analysis in phase-contrast videos (iTrack4U): development of Java software based on combined mean-shift processes.</a> PLOS One. 8, e81266 (2013).</li><li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiji:+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis.">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature Methods. 9, 676-682 (2012).</li></ol>

Protokollen beskrevet ovenfor er optimalisert for å oppdage celle migrasjon i overfladisk lag6,8. Det gjelder for å oppdage midterste laget migrasjon bekker (film 5)6,7, bare ved å flytte tidspunktet for electroporation (E5.5 til E4.5) og utbruddet av kultur og imaging (E7.0 til E6.0).
Presentert prosedyren består av celle merking av elect...

Studiet av celle migrasjon har gått etter med fremmarsj teknikk for live bildebehandling. Etter fluorescerende celle merking, kan timelige bevegelsen av merkede celler i en kultur parabol eller i vivo registreres under video mikroskopi. I studiet av neural utvikling, er morfologiske endringene av migrering celler eller elongating axons analysert ved hjelp av tidsinnstilt bildebehandling. For effektiv bildebehandling er det viktig å bruke en egnet metode for fluorescerende celle merking og vev forberedelse, basert på eksperimentet og analyse. For å analysere celle migrasjon i utvikle hjernen, er slice kultur vanligvis brukt til å observere celle migrasjon parallelt delen skive som radial celle migrasjon1,2,3. Skive kultur-systemet brukes også for å oppdage tangentiell celle migrasjon4,5, men det er ikke egnet for retningsbestemt analyse i tilfeller der cellene spre vinkelrett til delen skive.
Fiberoptisk tectum består av en flerlags struktur, dannet av radial og tangentiell celle migrasjon under embryonale utviklingen. Tectal lag formasjonen avhenger hovedsakelig radial migrering av postmitotic neuronal forløper celler fra sonen ventrikkel og deres endelig destinasjon i lagene korrelerer med sine fødselsdato i ventrikkel sonen6. Som for tangentiell migrasjon rapportert vi tidligere to strømmer av overføringer i midten og overfladiske lagene i en utvikling chick fiberoptisk tectum. I de midterste lag under E6-E8 overføre bipolar cellene med en lang ledende prosess og en tynn etterfølgende prosessen på ryggen eller ventrally langs axon fasciculus av tectal efferent axons som kjører dorso-ventrally7. Etter denne axophilic overføring skille cellene i multipolar nevroner i de dype lag. I overfladisk lagene under E7-E14 spre overfører cellene vannrett ved å reformere en forgrenet ledende prosessen og scatter i flere retninger8. Etter spre migrasjon, skille sistnevnte cellene til slutt ut overfladisk nevroner i ulike morphologies. I begge tilfeller er en flat-mount kultur effektivt å observere celle bevegelse parallelt pial overflaten.
Her presenterer vi en protokoll for time-lapse tenkelig å visualisere tangentiell celle migrasjon i utviklingsland chick fiberoptisk tectum7,8. Kombinasjonen av cellen merking på electroporation i ovo, og en påfølgende flat-mount kultur på celle kultur innsatsen kan påvisning av overfører celle bevegelse og migrasjon retning. Målet med denne metoden er å lette oppdagelsen av både enkeltcelle atferd i langsiktig og kollektiv handling av en gruppe celler vannrett.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NucleoBond Xtra Midi Plus EF</td>
			<td>MACHEREY-NAGEL</td>
			<td>740422.5</td>
			<td>endotoxin-free plasmid DNA purification kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 ml syringe</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>SS-20ESZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18 gauge needle</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>NN-1838R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green</td>
			<td>Wako</td>
			<td>061-00031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100x penicillin and streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glass capillary tube</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>G-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cell culture insert</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>Millicell CM-ORG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>L2020</td>
			<td>coating of culture insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>poly-L-Lysine</td>
			<td>Peptide Institute</td>
			<td>3075</td>
			<td>coating of culture insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glass bottom dish</td>
			<td>Matsunami</td>
			<td>D11130H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-MEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31985-070</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11765-054</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12483</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chick serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16110082</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10xHBSS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14065-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microsurgical knife</td>
			<td>Surgical specialties cooperation</td>
			<td>72-1501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>curved scissors</td>
			<td>AS ONE</td>
			<td>No.11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micropipette processor</td>
			<td>SUTTER INSTRUMENT</td>
			<td>P97/IVF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>forceps-type electrode</td>
			<td>BEX</td>
			<td>LF646P3x3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pulse generator</td>
			<td>BEX</td>
			<td>CUY21EX</td>
			<td>electroporator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fluorescence stereoscopic microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MZ16F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>inverted fluorescence microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>IX81</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gas controller</td>
			<td>Tokken</td>
			<td>MIGM/OL-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>temperature controller</td>
			<td>Tokai Hit</td>
			<td>MI-IBC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>laser confocal unit</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>FV300</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visualization of tangential cell migration in the developing chick optic tectum

Tidsinnstilt bildebehandling er en kraftig metode for å analysere migrere celle atferden. Etter fluorescerende celle merking, kan bevegelsen av merket cellene i kultur registreres under video mikroskopi. For å analysere celle migrasjon i utvikle hjernen, er stykket kultur vanlig å observere celle migrasjon parallelt delen skive som radial celle migrasjon. Imidlertid kan begrenset informasjon fås fra skive kultur metoden å analysere celle migrasjon vinkelrett delen skive som tangentiell celle migrasjon. Her presenterer vi protokollene for time-lapse tenkelig å visualisere tangentiell celle migrasjon i utviklingsland chick fiberoptisk tectum. En kombinasjon av cellen merking av electroporation i ovo og en påfølgende flat-mount kultur på celle kultur innsatsen kan oppdagelsen av migreringen celle bevegelse vannrett. Dessuten Letter vår metode oppdagelsen av både enkeltcelle atferd og kollektiv handling av en cellegruppe på lang sikt. Denne metoden kan potensielt brukes for å følge endringen av fluorescerende-merket mikro-strukturen, inkludert axonal forlengelse i nevrale vev eller celle forskyvning i ikke-nevrale vev.

Figur 2 viser visualisert overfladisk tangentiell overføringen i en flat-mount kultur i en tidsperiode (0, 9, 18, 27 h) etter utbruddet av innspillingen. Film 1 er en time-lapse film av 10 min intervaller over en periode på 28 h og 50 minutter. Rammen er valgt for å fokusere på overfører cellene fra merket nederst i venstre hjørne av rammen til umerkede plass (figur 3A). Nasjonalsosialisten...

Watch this Scientific Journal Video about Visualization of Tangential Cell Migration in the Developing Chick Optic Tectum at JoVE.com

Visualization of Tangential Cell Migration in the Developing Chick Optic Tectum

Visualisering av tangentiell celle migrasjon i utviklingsland Chick fiberoptisk Tectum

Vi beskriver metodene for fluorescerende merking tangentially overføre celler av electroporation og for tidsinnstilt bildebehandling merket celle bevegelsen i en flat-mount kultur for å visualisere migrere celle atferd i den utvikle chick fiberoptisk tectum .

Time-lapse imaging is a powerful method to analyze migrating cell behavior. After fluorescent cell labeling, the movement of the labeled cells in culture ...

Denne metoden kan bidra til å svare på viktige spørsmål innen utviklingsbiologifeltet, for eksempel mekanismene for nevronal cellemigrasjon. Den største fordelen med denne teknikken er at du kan oppdage individuell og kollektiv cellemigrasjon på lang sikt. Etter å ha isolert 200 milliliter bakteriell kultur ved alkalisk lysismetode, bland de to plasmidene, slik at den endelige konsentrasjonen av hver er fire mikrogram per mikroliter.Inkuber de fruktbare kyllingeggene horisontalt ved 38 grader Celsius i 70% relativ fuktighet. Etter to og en halv dag, bruk en 20 milliliter sprøyte med en 18 gauge nål for å eliminere fem milliliter albumin fra den spisse siden av egget. Forsegle hullet med tape.Deretter bruker du buet saks for å kutte toppen av eggeskallet og åpne et hull, to centimeter i diameter. Under et stereomikroskop, sjekk utviklingsstadiet av embryoet. Forsegle dette større hullet med tape.Fortsett inkubasjonen ved 38 grader Celsius og 70 prosent relativ fuktighet til E5,5. Før elektroporering, forberede 10 mikroliter av den nevnte plasmid DNA farget med 0,5 mikroliter av rask grønn. Også forberede 10 milliliter autoklavet PBS som inneholder 100 enheter per milliliter penicillin, og 100 mikrogram per milliliter streptomycin.Bruk en mikropipetteprosessor til å tilberede mikropipetter laget av glasskapillærrør. Skjær den distale spissen av mikropipetten til en passende porestørrelse for mengden DNA som skal injiseres. Bruk saks til å kutte det forseglede toppskallet for å gjenåpne et hull, to og en halv centimeter i diameter, og sett eggstabilitetet under stereomikroskopet.Deponer noen dråper av den tilberedte PBS-løsningen i egget. Bruk to fine tang, skrell av den allantoiske membranen som dekker embryoet, vær forsiktig så du ikke forårsaker blødning. Fjern deretter amnionen fra embryoets hode.Mens du snur hodet med en mikrospatula, bruk en mikropipette koblet til et sugerør, for å injisere mellom 0,1 og en mikroliter av det fargede DNA i ventrikulær hulrom i venstre optisk tectum. Plasser et par tang type elektroder rundt målområdet av optisk tectum. Bruk pulsgeneratoren til å lade en forpuls på 30 volt i ett millisekund med et intervall på fem millisekund, og for påfølgende pulser på seks volt i fem millisekunder med et intervall på 10 millisekund.Etter alt dette, forsegle hullet med tape, og fortsett å inkubere ved 38 grader Celsius og 70 prosent relativ fuktighet. Bløtlegg elektrodene i en plastfat fylt med PBS, og bruk en interdental børste til å fjerne albumen. Gjenta prosessen fra det første skallskjæringen til elektroporasjonen for hvert egg.En dag før Flat-Mount Culture, begynte å forberede kodet cellekultur Sett inn ved å legge autoklav til destillert vann til en 10 centimeter celle kulturrett. Float noen cellekultur Setter på vannet. Ved en løsning som inneholder åtte mikrogram per milliliter laminin og 80 mikrogram per milliliter Polly L, og sørg for å dekke innsatsene.Inkuber over natten ved 37 grader Celsius i cellekulturen karbondioksidinkubator. På kulturdagen på E7.0 fjernet laminin- og poly l-lysinløsningen fra Innsatsen. Deretter overfører du innsatsen til en glassbunnsrett fylt med 1,1 milliliter kulturmedium.Overfør parabolen til cellekulturen karbondioksidinkubator ved 37 grader Celsius. Sett en fuktig kammerenhet på et omvendt konfokalt mikroskop med en gassstrøm på 40% oksygen og 5% karbondioksid, og en temperatur på 38 grader Celsius. For å begynne å forberede en vevsprøve på innsatsen, bruk tang til å klemme embryohodet ut i en seks centimeter cellekulturrett som inneholder iskald HBSS.Bruk to fine tang for å isolere det elektroporerte optiske tectumet. Og bruk deretter en plastsørker til å overføre den til en konkav glassfat basert med svart silisium og fylt med iskald HBSS. Kontroller plasseringen av merkingen under fluorescerende stereoskopisk mikroskop.Bruk en mikro kirurgisk kniv, kutt ut det tektale vevet rundt merkingen mens du merker retningen av vevet i tectum. Etter dette bruker du en plastbeholder til å overføre det merkede vevet til innsatsen slik at pinnesiden er festet til innsatsen. Legg det tektale vevet i ønsket retning og fjern overflødig HBSS.Gjenta vevsforberedelsesprosessen for andre vevsprøver beregnet på samme innsats. Legg deretter parabolen i det forhåndsformede kammeret til det inverterte kondikale mikroskopet. Bruk det inverterte konomiske mikroskopet til å kontrollere den fluorescerende merkingen og fokusere det mikroskopiske feltet.Start laserkonferanseenheten. Prøv den konfokale skanningen for å justere retningen og posisjonen til vevet langs x- og y-aksene i feltet. Deretter velger du skannestørrelsen.Bestem intervallet og det totale området for den kondoberte skanningen langs z-aksen. Ta et intervall på fem eller 10 mikrometer for 100 mikrometerområdet. Velg tidsintervallet for den kondoberte bildebehandlingen og den totale bildevarigheten.Når du har satt parameterne for det konfokale kjøreprogrammet, begynner du å avbilde. Når bildet er fullført, kombinerte du de konfokale bildene på en annen C-akse for å produsere z-stack-bilder med endelig fokal justering på hvert tidspunkt. Deretter legger Z-stakkbildene på forskjellige tidspunkter for å konstruere en time-lapse film.I denne studien oppdages cellemigrasjon i overfladiske lag gjennom elektroporasjon i Ovo, flat mount cellekultur og time-lapse confocal imaging. De tangentielt migrerende cellene og kjernene i de overfladiske lagene i optisk tectum ses her null timer, ni timer, 18 timer og 27 timer etter opptakets begynnelsen. En time-lapse film av 10 minutters intervaller over en 28 time og 50 minutters periode, viser massebevegelsen av migrerende celler og deres kjerner.Den sammenslåtte filmen viser tydelig massebevegelsen til de migrerende cellene. Retningen til cellemigrasjonen kan undersøkes ved å fokusere på dispergeringscellene fra det merkede senteret til alle retninger. De klare bildene av atombevegelsen gjør det mulig for automatisk sporing av atommigrasjonen ved hjelp av en partikkelsporingsplugin.Timelige endringer i banene til den tangential migrasjonen kan visualiseres og bevise at spredningen av migrasjon er omnidirectional. Bilder med høyere forstørrelse kan tas i fem minutters intervaller. For å undersøke individuell celleatferd med den sekvensielle morfologiske endringen av den ledende prosessen, etterfølgende prosessen og kjerner.Etter denne prosedyren kan merking av opplysende handlinger utføres. For å svare på flere spørsmål som mekanismene for Aksum veiledning.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Efficient Gene Transfer in Chick Retinas for Primary Cell Culture Studies: An Ex-ovo Electroporation Approach

Efficient Gene Transfer in Chick Retinas for Primary Cell Culture Studies: An Ex-ovo Electroporation Approach

Effektiv Gene Transfer i Chick netthinne for primære cellekulturstudier: An<em&gt; Ex-ovo</em&gt; Electroporation Approach

The cone photoreceptor-enriched cultures derived from embryonic chick retinas have become an indispensable tool for researchers around the world studying ...

Forward Genetic Approach to Uncover Stress Resistance Genes in Mice &#8212; A High-throughput Screen in ES Cells

Forward Genetisk tilnærming til Avdekke Stress resistensgener i Mus - En High-throughput Screen i ES-celler

Phenotype-driven genetic screens in mice is a powerful technique to uncover gene functions, but are often hampered by extremely high costs, which severely ...

Optimization of the Wound Scratch Assay to Detect Changes in Murine Mesenchymal Stromal Cell Migration After Damage by Soluble Cigarette Smoke Extract

Optimalisering av Wound Scratch analysen å oppdage endringer i Murint Mesenchymale stromal Cell Migration Etter Skade ved Løselig sigarettrøyk Extract

Cell migration is vital to many physiological and pathological processes including tissue development, repair, and regeneration, cancer metastasis, and ...

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

Analyserer<em&gt; I Vivo</em&gt; Cell Migration bruker Cell transplantasjoner og Time-lapse Imaging in Sebrafisk embryo

Cell migration is key to many physiological and pathological conditions, including cancer metastasis. The cellular and molecular bases of cell migration ...

Technique to Target Microinjection to the Developing Xenopus Kidney

Technique to Target Microinjection to the Developing Xenopus Kidney

Teknikken til Target Mikroinjeksjon til utviklings<em&gt; Xenopus</em&gt; Nyre

The embryonic kidney of Xenopus&#160;laevis (frog), the pronephros, consists of a single nephron, and can be used as a model for kidney disease. Xenopus ...

Application of Impermeable Barriers Combined with Candidate Factor Soaked Beads to Study Inductive Signals in the Chick

Bruk av Ugjennomtrengelige Barrierer Kombinert med Kandidat Factor Soaked perler å studere Induksjon Signaler i Chick

The chick embryo provides a superb vertebrate model that can be used to dissect developmental questions in a direct way. Its accessibility and robustness ...

Bioengineering of Humanized Bone Marrow Microenvironments in Mouse and Their Visualization by Live Imaging

Bioengineering av humaniserte benmarg mikromiljøer i mus og deres visualisering av levende bildebehandling

Human hematopoietic stem cells (HSCs) reside in the bone marrow (BM) niche, an intricate, multifactorial network of components producing cytokines, growth ...

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualisering av Superior okulær Sulcus under Danio rerio Embryogenesis

Congenital ocular coloboma is a genetic disorder that is typically observed as a cleft in the inferior aspect of the eye resulting from incomplete choroid ...

Visualization and Analysis of Pharyngeal Arch Arteries using Whole-mount Immunohistochemistry and 3D Reconstruction

Visualisering og analyse av farynle arterier ved hjelp av hele mount immunohistokjemi og 3D rekonstruksjon

Improper formation or remodeling of the pharyngeal arch arteries (PAAs) 3, 4, and 6 contribute to some of the most severe forms of congenital heart ...

Dissection, Immunohistochemistry and Mounting of Larval and Adult Drosophila Brains for Optic Lobe Visualization

Dissection, Immunohistochemistry and Mounting of Larval and Adult Drosophila Brains for Optic Lobe Visualization

The Drosophila optic lobe, comprised of four neuropils: the lamina, medulla, lobula and lobula plate, is an excellent model system for exploring the ...