Name: visualization of tangential cell migration in the developing chick optic tectum
Uploaded: 2018-10-24T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualization of Tangential Cell Migration in the Developing Chick Optic Tectum at JoVE.com

Este trabajo fue apoyado por JSP KAKENHI número 15K 06740 a Y.W.

1. Electroporación de Ovo
<ol><li>Preparar el ADN del plásmido de expresión etiquetado fluorescente en alta concentración. Aislar ADN de 200 mL de cultivo bacteriano por el método de lisis alcalina mediante columnas de intercambio según protocolo del fabricante (Tabla de materiales). Mezcla pCAGGS-EGFP y pCAGGS-mCherryNuc a una concentración final de 4 μg/μl cada una. Nota: Purificación de DNA de plásmido libre de endotoxina puede ser preferido para la electroporación.</li>
	<li...

<ol>
	<li>Mar&#237;n, O., Rubenstein, J. L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+migration+in+the+forebrain.">Cell migration in the forebrain.</a> Annual Reviews of Neuroscience. 26, 441-483 (2003).</li><li>Nadarajah, B., Alifragis, P., Wong, R. O. L., Parnavelas, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+migration+in+the+developing+cerebral+cortex:+Observations+based+on+real-time+imaging.">Neuronal migration in the developing cerebral cortex: Observations based on real-time imaging.</a> Cerebral Cortex. 13, 607-611 (2003).</li><li>Tabata, H., Nakajima, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multipolar+migration:+the+third+mode+of+radial+neuronal+migration+in+the+developing+cerebral+cortex.">Multipolar migration: the third mode of radial neuronal migration in the developing cerebral cortex.</a> Journal of Neuroscience. 23, 9996-10001 (2003).</li><li>Martini, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biased+selection+of+leading+process+branches+mediates+chemotaxis+during+tangential+neuronal+migration.">Biased selection of leading process branches mediates chemotaxis during tangential neuronal migration.</a> Development. 136, 41-50 (2009).</li><li>Polleux, F., Whitford, K. L., Dijkhuizen, P. A., Vitalis, T., Ghosh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+cortical+interneuron+migration+by+neurotrophins+and+PI3-kinase+signaling.">Control of cortical interneuron migration by neurotrophins and PI3-kinase signaling.</a> Development. 129, 3147-3160 (2002).</li><li>Watanabe, Y., Yaginuma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tangential+cell+migration+during+layer+formation+of+chick+optic+tectum.">Tangential cell migration during layer formation of chick optic tectum.</a> Development, Growth and Differentiation. 57, 539-543 (2015).</li><li>Watanabe, Y., Sakuma, C., Yaginuma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NRP1-mediated+Sema3A+signals+coordinate+laminar+formation+in+the+developing+chick+optic+tectum.">NRP1-mediated Sema3A signals coordinate laminar formation in the developing chick optic tectum.</a> Development. 141, 3572-3582 (2014).</li><li>Watanabe, Y., Sakuma, C., Yaginuma, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dispersing+movement+of+neuronal+tangential+migration+in+superficial+layers+of+the+developing+chick+optic+tectum.">Dispersing movement of neuronal tangential migration in superficial layers of the developing chick optic tectum.</a> Developmental Biology. 437, 131-139 (2018).</li><li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.">A series of normal stages in the development of the chick embryo.</a> Journal of Morphology. 88, 49-92 (1951).</li><li>Cordelie&#768;res, F. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+cell+tracking+and+analysis+in+phase-contrast+videos+(iTrack4U):+development+of+Java+software+based+on+combined+mean-shift+processes.">Automated cell tracking and analysis in phase-contrast videos (iTrack4U): development of Java software based on combined mean-shift processes.</a> PLOS One. 8, e81266 (2013).</li><li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiji:+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis.">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature Methods. 9, 676-682 (2012).</li></ol>

El protocolo descrito anteriormente está optimizado para detectar la migración celular en capas superficiales6,8. Es aplicable para la detección de capa media migración arroyos (película 5)6,7, cambiando el momento de la electroporación (E5.5 a E4.5) y el inicio de la cultura y la proyección de imagen (E7.0 a E6.0).
El procedimiento pre...

El estudio de la migración de la célula ha sido avanzando con la técnica de avance de la proyección de imagen vivo. Después de etiquetado fluorescente de la célula, el movimiento temporal de células marcadas en una placa de cultivo o en vivo puede grabarse bajo microscopia video. En el estudio del desarrollo neuronal, se han analizado los cambios morfológicos de migración de las células o alarga axones usando proyección de imagen de Time-lapse. Para la proyección de imagen efectiva, es esencial aplicar un método adecuado para la preparación de tejido y etiquetado fluorescente de la célula, basado en el propósito del experimento y el análisis. Para el análisis de migración de la célula en el cerebro en desarrollo, sector cultura se ha utilizado comúnmente para observar la migración de la célula paralela a la sección de corte, como célula radial migración1,2,3. El sistema de cultivo del sector también se utiliza para detectar células tangenciales migración4,5, pero no es adecuado para análisis direccional en casos donde las células dispersan perpendicular a la sección de corte.
El tectum óptico se compone de una estructura multicapa, formada por la migración radial y tangencial de la célula durante el desarrollo embrionario. Formación de la capa tectal depende principalmente de la migración radial de las células precursoras neuronales postmitotic desde la zona ventricular y su destino final en las capas se correlaciona con su fecha de nacimiento en la zona ventricular6. En cuanto a la migración tangencial, habían divulgado previamente dos flujos de migraciones en las capas intermedias y superficiales en un tectum óptico de chick en vías de desarrollo. En las capas medias en E6-E8, las células bipolares con un líder largo proceso y un proceso final fino migran dorsal o ventralmente a lo largo de la Unión de axon de tectal axones eferentes que dorso-ventralmente7. Después de esta migración de axophilic, las células se diferencian en neuronas multipolares situadas en las capas profundas. En las capas superficiales durante E7-E14, migración de las células dispersa horizontalmente por reformar un proceso principal ramificado y dispersión en múltiples direcciones8. Después de la dispersión de la migración, las últimas células eventualmente se diferencian en neuronas superficiales de diferentes morfologías. En ambos casos, una cultura de plano-montaje es eficaz para observar movimiento celular paralela a la superficie pial.
Aquí, presentamos un protocolo para Time-lapse de imágenes para visualizar la migración de la célula tangencial en El tectum óptico polluelo en desarrollo7,8. Combinación de etiquetado celular por electroporación de ovoy una cultura de plano-montaje posterior en la inserción de la cultura de célula permite la detección de migración dirección de movimiento y migración de célula. El objetivo de este método es facilitar la detección de ambos comportamiento de células individuales en el largo plazo y la acción colectiva de un grupo de células en el plano horizontal.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NucleoBond Xtra Midi Plus EF</td>
			<td>MACHEREY-NAGEL</td>
			<td>740422.5</td>
			<td>endotoxin-free plasmid DNA purification kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 ml syringe</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>SS-20ESZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18 gauge needle</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>NN-1838R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green</td>
			<td>Wako</td>
			<td>061-00031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100x penicillin and streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glass capillary tube</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>G-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cell culture insert</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>Millicell CM-ORG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>L2020</td>
			<td>coating of culture insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>poly-L-Lysine</td>
			<td>Peptide Institute</td>
			<td>3075</td>
			<td>coating of culture insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glass bottom dish</td>
			<td>Matsunami</td>
			<td>D11130H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-MEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31985-070</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11765-054</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12483</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chick serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16110082</td>
			<td>culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10xHBSS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14065-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microsurgical knife</td>
			<td>Surgical specialties cooperation</td>
			<td>72-1501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>curved scissors</td>
			<td>AS ONE</td>
			<td>No.11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>micropipette processor</td>
			<td>SUTTER INSTRUMENT</td>
			<td>P97/IVF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>forceps-type electrode</td>
			<td>BEX</td>
			<td>LF646P3x3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pulse generator</td>
			<td>BEX</td>
			<td>CUY21EX</td>
			<td>electroporator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fluorescence stereoscopic microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MZ16F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>inverted fluorescence microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>IX81</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gas controller</td>
			<td>Tokken</td>
			<td>MIGM/OL-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>temperature controller</td>
			<td>Tokai Hit</td>
			<td>MI-IBC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>laser confocal unit</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>FV300</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visualization of tangential cell migration in the developing chick optic tectum

Proyección de imagen de Time-lapse es un método poderoso para analizar el comportamiento de células migratorias. Después de etiquetado fluorescente de la célula, el movimiento de las células marcadas en la cultura puede grabarse bajo microscopia video. Para el análisis de migración de la célula en el cerebro en desarrollo, sector cultura se utiliza comúnmente para observar la migración de la célula paralela a la sección de corte, como la migración de la célula radial. Sin embargo, la información limitada puede obtenerse desde el método de cultura rebanada para analizar la migración de la célula perpendicular a la sección de corte, como migración tangencial. Aquí, presentamos los protocolos para Time-lapse de imágenes para visualizar la migración de la célula tangencial en El tectum óptico de chick en vías de desarrollo. Una combinación de etiquetado celular por electroporación de ovo y una cultura de plano-montaje posterior en la inserción de la cultura de célula permite la detección de movimiento de migración celular en el plano horizontal. Además, nuestro método facilita la detección de comportamiento de células individuales y la acción colectiva de un grupo de células a largo plazo. Potencialmente, este método puede aplicarse para detectar el cambio secuencial de la etiqueta fluorescente micro-estructura, incluyendo la elongación axonal en el desplazamiento de tejido o células neuronal en el tejido no neural.

La figura 2 muestra la migración tangencial superficial visualizada en una cultura de plano-montaje en un tiempo transcurrido (0, 9, 18, 27 h) después del inicio de la grabación. Película 1 es una película de lapso de tiempo de 10 min-intervalos durante un periodo de 28 h y 50 min. El marco está seleccionado para centrarse en la migración de las células de la etiqueta esquina inferior izquierda del cuadro al espacio s...

Watch this Scientific Journal Video about Visualization of Tangential Cell Migration in the Developing Chick Optic Tectum at JoVE.com

Visualization of Tangential Cell Migration in the Developing Chick Optic Tectum

Visualización de la migración celular tangencial en el Tectum óptico de Chick en desarrollo

Describimos los métodos de etiquetado fluorescente tangencial migrar las células por electroporación y para Time-lapse de imágenes del movimiento celular marcada en una cultura de plano-montaje para visualizar migración celular comportamiento en El tectum óptico de chick en desarrollo .

Time-lapse imaging is a powerful method to analyze migrating cell behavior. After fluorescent cell labeling, the movement of the labeled cells in culture ...

Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la biología del desarrollo, como los mecanismos de la migración de células neuronales. La principal ventaja de esta técnica es que se puede detectar la migración celular individual y colectiva a largo plazo. Después de aislar 200 mililitros de cultivo bacteriano por el método de lysis alcalina, mezcle los dos plásmidos, de forma que la concentración final de cada uno sea de cuatro microgramos por microlitro.Incubar los huevos de pollo fértiles horizontalmente a 38 grados centígrados en una humedad relativa del 70%. Después de dos días y medio, utilice una jeringa de 20 mililitros con una aguja de calibre 18 para eliminar cinco mililitros de albúmina del lado puntiagudo del huevo. Cierre el agujero con cinta adhesiva.A continuación, utilice tijeras curvas para cortar la parte superior de la cáscara de huevo y abrir un agujero, de dos centímetros de diámetro. Bajo un estereomicroscopio, compruebe la etapa de desarrollo del embrión. Selle este agujero más grande con cinta adhesiva.Continúe la incubación a 38 grados centígrados y 70 por ciento de humedad relativa hasta E5.5. Antes de la electroporación, preparar 10 microlitros del ADN plásmido mencionado de coloreado con 0,5 microlitros de verde rápido. Además, preparar 10 mililitros de PBS autoclavado que contenga 100 unidades por mililitro de penicilina, y 100 microgramos por mililitro de estreptomicina.Utilice un procesador de micropipetas para preparar micropipetas hechas de tubos capilares de vidrio. Corte la punta distal de la micropipeta a un tamaño de poro adecuado para la cantidad de ADN que se va a inyectar. Utilice tijeras para cortar la carcasa superior sellada para reabrir un agujero, de dos centímetros y medio de diámetro, y colocar el huevo establemente debajo del microscopio estéreo.Depositar unas gotas de la solución de PBS preparada en el huevo. Usando dos fórceps finos, despegue la membrana alantoica que cubre el embrión, teniendo cuidado de no causar una hemorragia. A continuación, retire el amnion de la cabeza del embrión.Al girar la cabeza con una microspatula, utilice una micropipeta conectada a un tubo de aspiración, para inyectar entre 0,1 y un microlitro del ADN de color en la cavidad ventricular del tectum óptico izquierdo. Coloque un par de electrodos tipo fórceps alrededor del área objetivo del tectum óptico. Utilice el generador de pulsos para cargar un pulso previo de 30 voltios durante un milisegundo con un intervalo de cinco milisegundos, y para pulsos posteriores de seis voltios durante cinco milisegundos con un intervalo de 10 milisegundos.Después de todo esto, sellar el agujero con cinta adhesiva, y continuar incubando a 38 grados Celsius y 70 por ciento de humedad relativa. Sumerja los electrodos en un plato de plástico lleno de PBS, y use un cepillo interdental para eliminar el albúmina. Repita el proceso desde el corte inicial de la cáscara hasta la electroporación para cada huevo.Un día antes del Cultivo de Montaje Plano, comenzó a preparar el cultivo celular codificado Insert agregando autoclave al agua destilada a un plato de cultivo celular de 10 centímetros. Flotar algunos insertos de cultivo celular en el agua. En una solución que contiene ocho microgramos por mililitro de laminin, y 80 microgramos por mililitro Polly L, asegurándose de cubrir los insertos.Incubar durante la noche a 37 grados centígrados en la incubadora de dióxido de carbono de cultivo celular. El día del cultivo en E7.0, se quitó la solución de laminina y poli l-lisina del inserto. A continuación, transfiera el Insert a un plato de fondo de vidrio lleno de 1,1 mililitro de medio de cultivo.Transfiera el plato a la incubadora de dióxido de carbono de cultivo celular a 37 grados centígrados. Establezca una unidad de cámara húmeda en un microscopio confocal invertido con un flujo de gas de 40% de oxígeno y 5% de dióxido de carbono, y una temperatura de 38 grados centígrados. Para comenzar a preparar una muestra de tejido en el Inserto, utilice fórceps para pellizcar la cabeza del embrión en un plato de cultivo celular de seis centímetros que contenga HBSS helado.Utilice dos fórceps finos para aislar el tectum óptico electroporado. Y luego usa un gotero de plástico para transferirlo a un plato de vidrio cóncavo a base de silicio negro y lleno de HBSS helado. Compruebe la posición del etiquetado bajo microscopio estereoscópico fluorescente.Con un cuchillo microquirúrgico, corte el tejido tectal que rodea el etiquetado mientras observa la dirección del tejido en el tectum. Después de esto, utilice un gotero de plástico para transferir el tejido etiquetado al inserto de modo que el lado del pasador esté unido al inserto. Poner el tejido tectal en la dirección deseada y eliminar cualquier exceso de HBSS.Repita el proceso de preparación del tejido para cualquier otra muestra de tejido destinada al mismo inserto. A continuación, coloque el plato en la cámara preformada del microscopio confocal invertido. Con el microscopio confocal invertido, compruebe el etiquetado fluorescente y enfoque el campo microscópico.Encienda la unidad confocal láser. Muestree la exploración confocal para ajustar la dirección y la posición del tejido a lo largo de los ejes x e y en el campo. A continuación, seleccione el tamaño de escaneado.Decida el intervalo y el rango total del escaneo confocal a lo largo del eje z. Tome un intervalo de cinco o 10 micrómetros para el rango de 100 micrómetros. Elija el intervalo de tiempo de la imagen confocal y la duración total de la imagen.Después de establecer los parámetros del programa en ejecución confocal, comience la toma de imágenes. Una vez completada la imagen, combine las imágenes confocales en un eje C diferente para producir imágenes de la pila z con el ajuste focal final en cada punto de tiempo. A continuación, añada las imágenes de la pila Z en diferentes puntos de tiempo para construir una película de lapso de tiempo.En este estudio, la migración celular se detecta en capas superficiales a través de la electroporación en Ovo, el cultivo celular de montaje plano y la imagen confocal de lapso de tiempo. Las células que migran tangencialmente y los núcleos en las capas superficiales del tectum óptico se ven aquí cero horas, nueve horas, 18 horas y 27 horas después del inicio de la grabación. Una película de lapso de tiempo de intervalos de 10 minutos durante un período de 28 horas y 50 minutos, muestra el movimiento de masa de las células migratorias y sus núcleos.La película combinada muestra claramente el movimiento de masa de las células migratorias. La direccionalidad de la migración celular se puede examinar centrándose en las celdas dispersas desde el centro etiquetado hasta todas las direcciones. Las imágenes claras del movimiento nuclear, permite el seguimiento automático de la migración nuclear utilizando un plugin de seguimiento de partículas.Los cambios temporales de las trayectorias de la migración tangencial se pueden visualizar y demostrar que la migración de dispersión es omnidireccional. Las imágenes de mayor aumento se pueden tomar en intervalos de cinco minutos. Investigar el comportamiento celular individual con el cambio morfológico secuencial del proceso inicial, el proceso final y los núcleos.Siguiendo este procedimiento, se puede realizar el etiquetado de acciones de iluminación. Con el fin de responder a preguntas adicionales como los mecanismos de la guía De Aksum.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Efficient Gene Transfer in Chick Retinas for Primary Cell Culture Studies: An Ex-ovo Electroporation Approach

Efficient Gene Transfer in Chick Retinas for Primary Cell Culture Studies: An Ex-ovo Electroporation Approach

Transferencia génica eficaz en polluelo retinas para estudios de cultivo celular primario: Un<em&gt; Ex-ovo</em&gt; Enfoque electroporación

The cone photoreceptor-enriched cultures derived from embryonic chick retinas have become an indispensable tool for researchers around the world studying ...

Investigación

Biología del Desarrollo

Forward Genetic Approach to Uncover Stress Resistance Genes in Mice &#8212; A High-throughput Screen in ES Cells

Enfoque genético adelante para descubrir Estrés Los genes de resistencia en ratones - Una pantalla de alto rendimiento en células madre embrionarias

Phenotype-driven genetic screens in mice is a powerful technique to uncover gene functions, but are often hampered by extremely high costs, which severely ...

Optimization of the Wound Scratch Assay to Detect Changes in Murine Mesenchymal Stromal Cell Migration After Damage by Soluble Cigarette Smoke Extract

Optimización del ensayo arañazos herida para detectar cambios en Murino mesenquimales estromales migración de células después de daño por Soluble Extracto humo del cigarrillo

Cell migration is vital to many physiological and pathological processes including tissue development, repair, and regeneration, cancer metastasis, and ...

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

analizando<em&gt; En Vivo</em&gt; Migración de células usando trasplantes de células y time-lapse en embriones de pez cebra

Cell migration is key to many physiological and pathological conditions, including cancer metastasis. The cellular and molecular bases of cell migration ...

Technique to Target Microinjection to the Developing Xenopus Kidney

Technique to Target Microinjection to the Developing Xenopus Kidney

Técnica de microinyección a Target a los países en desarrollo<em&gt; Xenopus</em&gt; riñón

The embryonic kidney of Xenopus&#160;laevis (frog), the pronephros, consists of a single nephron, and can be used as a model for kidney disease. Xenopus ...

Application of Impermeable Barriers Combined with Candidate Factor Soaked Beads to Study Inductive Signals in the Chick

La aplicación de barreras impermeables combinadas con empapó las bolas Factor Candidato para el Estudio de señales inductivas en el polluelo

The chick embryo provides a superb vertebrate model that can be used to dissect developmental questions in a direct way. Its accessibility and robustness ...

Bioengineering of Humanized Bone Marrow Microenvironments in Mouse and Their Visualization by Live Imaging

Bioingeniería de los microambientes humanizados de la médula ósea en el ratón y su visualización por imágenes en directo

Human hematopoietic stem cells (HSCs) reside in the bone marrow (BM) niche, an intricate, multifactorial network of components producing cytokines, growth ...

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualización del surco Ocular Superior durante la embriogénesis de Danio rerio

Congenital ocular coloboma is a genetic disorder that is typically observed as a cleft in the inferior aspect of the eye resulting from incomplete choroid ...

Visualization and Analysis of Pharyngeal Arch Arteries using Whole-mount Immunohistochemistry and 3D Reconstruction

Visualización y análisis de arterias de arco faríngeo utilizando inmunohistoquímica de montaje completo y reconstrucción 3D

Improper formation or remodeling of the pharyngeal arch arteries (PAAs) 3, 4, and 6 contribute to some of the most severe forms of congenital heart ...

Dissection, Immunohistochemistry and Mounting of Larval and Adult Drosophila Brains for Optic Lobe Visualization

Dissection, Immunohistochemistry and Mounting of Larval and Adult Drosophila Brains for Optic Lobe Visualization

The Drosophila optic lobe, comprised of four neuropils: the lamina, medulla, lobula and lobula plate, is an excellent model system for exploring the ...