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•
12:00 min
April 28th, 2019
DOI :
10.3791/58618-v
Chapters
0:04
Title
0:35
Yeast Preparation
2:02
Imaging
4:54
Deconvolution and Bleach Correction
7:39
Movie Generation and Editing to Isolate and Analyze Individual Structures
10:09
Results: Representative 4-Dimensional (4D) Yeast Microscopy
11:24
Conclusion
Transcript
この方法では、酵母細胞の構造を何分間かかまた3次元で追跡し、細胞内小器官やコンパートメントの動態を研究することができます。4Dイメージングは、特に一過性の構造やマーカーに関する細胞内ダイナミクスに関する信頼できる結論を導き出すことができることを保証します。手順を実証することは、私の研究室のポスドクであるナタリー・ジョンソンです。
23°Cで、定義された非蛍光合成の5ミリリットル、またはNSD、培地、良好な高揚質を有する15ミリリットルのバッフルフラスコに関心のある酵母株の一晩培
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Summary
このプロトコルは、多色4D(タイムラプス3D)共焦点顕微鏡を用いた発芽酵母における蛍光標識細胞内コンパートメントの分析について説明する。イメージ投射パラメータは、光の損傷を制限しながら、適切な信号をキャプチャするために選択されます。カスタム ImageJ プラグインを使用すると、ラベル付き構造体を追跡し、定量的に分析できます。
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