Name: behavioral assessments of spontaneous locomotion in a murine mptp-induced parkinson's disease model
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Behavioral Assessments of Spontaneous Locomotion in a Murine MPTP-induced Parkinson's Disease Model at JoVE.com

Unsere Arbeit wird von Tianjin Undergraduate Trainingsprogramme für Innovation und Entrepreneurship (Grant Nr. 63183004) finanziert. Dieses Projekt wurde in der State Key Labor Arzneimittel chemische Biologie an der Nankai Universität initiiert. Die Autoren erklären, dass es keine Interessenkonflikte gibt.

Diese Studie wurde nach den internationalen, nationalen und institutionellen Regeln unter Berücksichtigung Tierversuche durchgeführt. Das Studienprotokoll wurde von den tierischen Ethik-Kommission der Nankai-Universität zugelassen.
1. MPTP und l-Dopa-Verwaltung
Hinweis: Die zehn Wochen alten weibliche BALB/c Mäusen wurden durch das Institut für Zoologie, chinesische Akademie der Wissenschaften zur Verfügung gestellt. Mäuse waren untergebracht sechs pro Käfig u...

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	<li>Dehay, B., Bourdenx, M., Gorry, P., Przedborski, S., Vila, M., Hunot, S., Singleton, A., Olanow, C. W., Merchant, K. M., Bezard, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+-synuclein+for+treatment+of+Parkinson's+disease:+mechanistic+and+therapeutic+considerations.">Targeting -synuclein for treatment of Parkinson's disease: mechanistic and therapeutic considerations.</a> Lancet Neurology. 14, 855-866 (2015).</li><li>Weintraub, D., Comella, C., Horn, L., S, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parkinson's+disease+-+Part+1:+Pathophysiology,+symptoms,+burden,+diagnosis,+and+assessment.">Parkinson's disease - Part 1: Pathophysiology, symptoms, burden, diagnosis, and assessment.</a> American Journal of Managed Care. 14, 40-48 (2008).</li><li>Ismaiel, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metformin,+besides+exhibiting+strong+in+vivo+anti-inflammatory+properties,+increases+mptp-induced+damage+to+the+nigrostriatal+dopaminergic+system.">Metformin, besides exhibiting strong in vivo anti-inflammatory properties, increases mptp-induced damage to the nigrostriatal dopaminergic system.</a> Toxicology and Applied Pharmacology. , 19-30 (2016).</li><li>Bayliss, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ghrelin-AMPK+signaling+mediates+the+neuroprotective+effects+of+calorie+restriction+in+Parkinson's+disease.">Ghrelin-AMPK signaling mediates the neuroprotective effects of calorie restriction in Parkinson's disease.</a> Journal of Neuroscience. 36, 3049-3063 (2016).</li><li>Olanow, C. W., Stern, M. B., Sethi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+scientific+and+clinical+basis+for+the+treatment+of+Parkinson+disease.">The scientific and clinical basis for the treatment of Parkinson disease.</a> Neurology. 72 (21 Supplement 4), (2009).</li><li>Chiba, K., Trevor, A., Castagnoli, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolism+of+the+neurotoxic+tertiary+amine,+MPTP,+by+brain+monoamine+oxidase.">Metabolism of the neurotoxic tertiary amine, MPTP, by brain monoamine oxidase.</a> Biochemical &amp; Biophysical Research Communications. 120 (2), 574-578 (1984).</li><li>Bakay, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biochemical+and+behavioral+correction+of+MPTP+parkinson-like+syndrome+by+fetal+cell+transplantation.">Biochemical and behavioral correction of MPTP parkinson-like syndrome by fetal cell transplantation.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 495 (1), 623-638 (2010).</li><li>Kelly, P. H., Seviour, P. W., Iversen, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amphetamine+and+apomorphine+responses+in+the+rat+following+6-OHDA+lesions+of+the+nucleus+accumbenssepti+and+corpus+striatum.">Amphetamine and apomorphine responses in the rat following 6-OHDA lesions of the nucleus accumbenssepti and corpus striatum.</a> Brain Research. 94 (3), 507-522 (1975).</li><li>Langston, J. W., Irwin, I., Langston, E. B., Forno, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=1-methyl-4-phenylpyridinium+ion+(MPP+):+identification+of+a+metabolite+of+MPTP,+a+toxin+selective+to+the+substantia+nigra.">1-methyl-4-phenylpyridinium ion (MPP+): identification of a metabolite of MPTP, a toxin selective to the substantia nigra.</a> Neuroscience Letters. 48 (1), 87-92 (1984).</li><li>Katila, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metformin+lowers+&#945;-synuclein+phosphorylation+and+upregulates+neurotrophic+factor+in+the+MPTP+mouse+model+of+Parkinson's+disease.">Metformin lowers &#945;-synuclein phosphorylation and upregulates neurotrophic factor in the MPTP mouse model of Parkinson's disease.</a> Neuropharmacology. 125, (2017).</li><li>Goldberg, N. R. S., Haack, A. K., Lim, N. S., Janson, O. K., Meshul, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dopaminergic+and+behavioral+correlates+of+progressive+lesioning+of+the+nigrostriatal+pathway+with+MPTP.">Dopaminergic and behavioral correlates of progressive lesioning of the nigrostriatal pathway with MPTP.</a> Neuroscience. 180, 256-271 (2011).</li><li>Schwarting, R. K., Sedelis, M., Hofele, K., Auburger, G. W., Huston, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain-dependent+recovery+of+open-field+behavior+and+striatal+dopamine+deficiency+in+the+mouse+MPTP+model+of+Parkinson's+disease.">Strain-dependent recovery of open-field behavior and striatal dopamine deficiency in the mouse MPTP model of Parkinson's disease.</a> Neurotoxicity Research. 1 (1), 41 (1999).</li><li>Shiguang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+open+field+test+as+a+method+for+ethology+in+Kunming+mice:+test-retest+reliability.">The open field test as a method for ethology in Kunming mice: test-retest reliability.</a> Chinese Journal of Behavioral Medicine and Brain Science. 19 (12), 1093-1095 (2010).</li><li>Roome, R. B., Vanderluit, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paw-Dragging:+a+Novel,+Sensitive+Analysis+of+the+Mouse+Cylinder+Test.">Paw-Dragging: a Novel, Sensitive Analysis of the Mouse Cylinder Test.</a> Journal of Visualized Experiments. (98), e52701 (2015).</li><li>Cotzias, G. C., Van Woert, M. H., Schiffer, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aromatic+amino+acids+and+modification+of+Parkinsonism.">Aromatic amino acids and modification of Parkinsonism.</a> New England Journal of Medicine. 282, 31-33 (1967).</li><li>Cassady, J. C., Johnson, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive+test+anxiety+and+academic+performance.">Cognitive test anxiety and academic performance.</a> Contemporary Educational Psychology. 27 (2), 270-295 (2002).</li><li>Rogalewski, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Semaphorin+6A+improves+functional+recovery+in+conjunction+with+motor+training+after+cerebral+ischemia.">Semaphorin 6A improves functional recovery in conjunction with motor training after cerebral ischemia.</a> Plos One. 5 (5), 0010737 (2010).</li><li>Chen, W., Qiao, D., Liu, X., Shi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treadmill+exercise+improves+motor+dysfunction+and+hyperactivity+of+the+corticostriatal+glutamatergic+pathway+in+rats+with+6-ohda-induced+parkinson's+disease.">Treadmill exercise improves motor dysfunction and hyperactivity of the corticostriatal glutamatergic pathway in rats with 6-ohda-induced parkinson's disease.</a> Neural Plasticity. 2017, 2583910 (2018).</li><li>Colas-Zelin, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+imposition+of,+but+not+the+propensity+for,+social+subordination+impairs+exploratory+behaviors+and+general+cognitive+abilities.">The imposition of, but not the propensity for, social subordination impairs exploratory behaviors and general cognitive abilities.</a> Behavioural Brain Research. 232 (1), 294-305 (2012).</li><li>Spurney, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+drug+trials+in+the+mdx+mouse:+Assessment+of+reliable+and+sensitive+outcome+measures.">Preclinical drug trials in the mdx mouse: Assessment of reliable and sensitive outcome measures.</a> Muscle Nerve. 39, 591-602 (2009).</li><li>Valle, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+strain,+sex,+and+illumination+on+open-field+behavior+of+rats.">Effects of strain, sex, and illumination on open-field behavior of rats.</a> American Journal of Psychology. 83, 103-111 (1970).</li><li>Tatem, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+Locomotor+Measurements+Using+an+Open+Field+Activity+Monitoring+System+for+Skeletal+Muscle+Diseases.">Behavioral and Locomotor Measurements Using an Open Field Activity Monitoring System for Skeletal Muscle Diseases.</a> Journal of Visualized Experiments. (91), e51785 (2014).</li></ol>

Aufgrund der Zerstörung von dopaminergen Neuronen in der Substantia Nigra des Gehirns verursacht MPTP Parkinson-ähnliche Symptome in Mäusen7. L-Dopa ist das am meisten bevorzugte Medikament für PD seit seiner klinischen Verwendung, weil es hilft bei der Aufrechterhaltung der normaler täglicher Aktivitäten bei Patienten mit Parkinson, mit wirksamen Unterdrückung der motorischen Auffälligkeiten einschließlich Bewegungsarmut und Steifheit15. Die Mäuse behandelt mit M...

Parkinson-Krankheit (PD), eine der häufigsten Erkrankungen bei älteren Menschen, ist eine langfristige Neurodegenerative Erkrankung1. Patienten zeigen immer das Phänomen der Zittern, Steifheit, Langsamkeit der Bewegung und Demenz, die im Laufe der Zeit2verschlechtern. Andere Symptome, einschließlich der sensorischen, sind Schlaf und emotionale Probleme auch allgemein2beobachtet. Die Ursache von Morbus Parkinson ist noch unklar, aber es wird allgemein angenommen, genetische und umweltbedingten Faktoren einzubeziehen, Verlust der dopaminergen Neuronen in der Substantia Nigra3und Entwicklung von Lewy-Körper und Lewy Neuriten in verschiedenen Regionen veranlassen die Gehirn4.
Unter den Studien der PD ist 1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP)5 weit in einige PD Symptome in experimentellen Modellen neu angepasst. Im Jahr 1984 Langston Et Al. zuerst gefunden, dass Injektionen von MPTP in Totenkopfäffchen Parkinsonismus6geführt. Obwohl das MPTP Nagetiere Modell nicht das Vorhandensein von Lewy-Körper, das Biomarker des PD ist zeigt, verursacht MPTP Parkinson-ähnliche Symptome durch die Zerstörung von dopaminergen Neuronen in der Substantia Nigra des Gehirns7. Im Vergleich zu anderen Drogen-Modell für PD wie induziert durch 6-Hydroxydopamine (6-OHDA)8 und 1-Methyl-4-Phenylpyridinium (MPP +)9, Injektion von MPTP ist einfach auszuführen und das MPTP-Modell nimmt weniger Zeit. Mäuse erhalten MPTP Injektionen (20-30 mg/kg/Tag) für sieben Tage und die verhaltensbezogene Tests auf dem achten Tag10durchgeführt werden.
Die Freiland-Test11 wurde zuerst von Calvin S. Hall, einer amerikanischen12entwickelt. In verschiedenen Studien untersuchen wir verschiedene Arten von Verhaltensweisen. In der Forschung die auf Parkinson Erkrankungen konzentriert, Verhaltensweisen wie Fortbewegung Aktivitäten und die Geschwindigkeit der Fortbewegung werden getestet, um festzustellen, ob das Tier bewegen beeinträchtigt ist. Im Vergleich mit anderen Methoden verwendet, um die Einrichtung von PD Tieren testen, Freiland Test ist einfach durchzuführen, weil die benötigte Ausrüstung einfach ist, und Prototyping und Daten-Analyse-Software (z.B. MATLAB, Excel) lässt sich leicht sammeln und grafische Darstellung der Daten. Der Variationskoeffizient ist auch relativ kleine13, was bedeutet, dass das Ergebnis der Freiland-Test zuverlässig ist. Ein weiterer Vorteil gegenüber anderen Methoden ist, dass die Verhaltensweisen, die in diesem Experiment enthalten leicht zu unterscheiden sind; die Mäuse kann entweder laufen, Walken oder still zu stehen. In der Regel kann der Freiland-Test auf Nagetiere verwendet werden, wenn der Forscher braucht, um das Thema Mobilität zu bewerten.
Die Zylinder-Test nennt man auch den Test der asymmetrischen Nutzung der Vorderbeine. Wenn dieser Test zuerst entwickelt wurde, diente es den asymmetrischen Einsatz der Ratte Vorderbeine14zu testen. Hier verwenden wir diesen Test zur Analyse des Tieres Fähigkeit zum ausstrecken und benutze beide seine Vorderbeine um neue Umgebung zu erkunden. Wenn der Substantia Nigra und Corpus Striatum von MPTP im Gehirn beschädigt sind, wird das Tier neigt dazu, den Rücken zu wölben und wird seltener ausstrecken und die unbekannte Umgebung zu erkunden. Dieser Test ist einfach durchzuführen und ein vorläufiges Ergebnis geben kann. Dieser Test hat jedoch hohe interne Variabilität, so ist es in der Regel mit zusammen mit anderen Verhalten Experimente verwendet.
Einnahme von l-Dopa, die auch bekannt als Levodopa oder L-3,4-Dihydroxyphenylalanine ist, ist eine gängige Methode, Parkinson-Erkrankung zu behandeln, da eine Ursache von Morbus Parkinson der Rückgang von Dopamin in ist der. L-Dopa ist die Vorstufe zum Dopamin. Aber im Gegensatz zu Dopamin, kann es die Blut - Hirn-Schranke, was bedeutet, dass es bei Erhöhung der Konzentration von Dopamin im Gehirnbereich effizienter zu überqueren. Nachdem es die Blut - Hirn-Schranke kreuzt, wird durch L-amino Acid Decarboxylase15l-Dopa in Dopamin umgewandelt.
Hier beschreiben wir die Messung und Analyse der motorischen Funktion im MPTP-induzierte-PD-Mäusen mit einem Zylinder Test14 und eine modifizierte Freiland-Test. Wir verwalten l-Dopa als ein Beispiel zeigen, wie man dieses Modell in der Studie von PD Arzneimittel anwenden. Unsere Ergebnisse zeigen, dass MPTP motorischen Defizit induziert, die durch l-Dopa entschärft werden können.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>70% Ethanol</td>
			<td>Ruiboxing Company</td>
			<td>RBX-64175</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera</td>
			<td>BASLER</td>
			<td>acA645-100gm</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cylinder test</td>
			<td>Made in-house at Nankai University</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excel</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Levodopa</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>72816</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matalb 2017a</td>
			<td>Mathworks</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice</td>
			<td>Institute of Zoology, Chinese Academy of Sciences</td>
			<td>Balb/c</td>
			<td>Adult female mice(10 weeks)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MPTP</td>
			<td>Yuanye Biological Technology Company Ltd., Shanghai</td>
			<td>S31504-500mg</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Open field test</td>
			<td>Made in-house at Nankai University</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td>Solelybio</td>
			<td>S-xsgwz-w</td>
			<td>Irrigation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td>Jiangxi Fenglin Medical Application Co.</td>
			<td>hc3824</td>
			<td>Intraperitoneal injection</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

behavioral assessments of spontaneous locomotion in a murine mptp-induced parkinson's disease model

Parkinson-Krankheit (PD) ist eine häufige Neurodegenerative Erkrankung Erkrankung, verursacht das Phänomen von Zittern, Steifheit, Langsamkeit der Bewegung und Demenz. 1-Methyl-4-Phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) kann zu einige Parkinson-ähnlichen Symptomen führen, durch die Zerstörung von dopaminergen Neuronen in der Substantia Nigra des Gehirns. So wurde es zur PD-Modelle in verschiedenen tierexperimentellen Studien zu etablieren. Hier werden Mäuse MPTP Injektionen (20 mg/kg/Tag) für sieben Tage und die verhaltensbezogene Tests werden am achten Tag durchgeführt. Dieses Modell wird in der Studie von PD effizient angepasst. Die Verhaltensstörungen Tests hier gehören die Zylinder-Test und der Freiland-Test. Das Zylinder-Experiment wird verwendet, um die Tiere Fähigkeit, heben Sie ihre Vorderpfoten, wenn Sie in einer anderen Umgebung setzen zu erkennen. Als der PD-Mäusen zeigen wölbte — die Maus wölbt den Rücken – die Anzahl der Pfote Liftings Abnahme. Dieser Test ist einfach auszuführen. Die Freiland-Test wird verwendet, um den Betrag der Zeit verbringen die Mäuse über das laufen, gehen und bleiben unbeweglich zu erkennen. Wir analysieren Bewegungen der Tiere im Freiland mit Software und Daten erhalten. Schließlich verwenden wir l-Dopa, einer der am meisten gebräuchlich PD Drogen, als ein Beispiel zeigen, wie man dieses Modell für die Untersuchung von PD Medikamente anwenden. Unsere Ergebnisse zeigen, dass MPTP Neurotoxizität motorischen Defizit induziert, die durch l-Dopa abgemildert werden können.

In die Zylinder-Test wurde die Abnahme der Hinterreifen gegen die Wand beobachtet bei Mäusen (Gruppe 2) mit MPTP von Tag 1 bis Tag 7 und am 8. Tag verglichen mit Kochsalzlösung behandelten Mäusen (Gruppe 1), Kochsalzlösung behandelt, während eine Erhöhung der Hinterreifen in den Mäusen (Gruppe 3) behandelt mit MP beobachtet wurde TP von Tag 1 bis Tag 7 und l-Dopa am 8. Tag im Vergleich zu den Mäusen (Gruppe 2) mit MPTP von Tag 1 bis Tag 7 und saline am Tag 8 (...

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Behavioral Assessments of Spontaneous Locomotion in a Murine MPTP-induced Parkinson's Disease Model

Verhaltens Bewertungen der spontanen Fortbewegung in einem murinen MPTP-induzierten Parkinson-Erkrankung-Modell

Einrichtung von einem Mausmodell für Parkinson-Erkrankung mit MPTP und Verhaltensstörungen Bewertungen mit Zylinder und Freiland-Tests zur Messung der motorischen Funktion beschrieben. Wir verwenden dann l-Dopa als ein Beispiel zeigen, wie man dieses Modell in der Studie von PD Arzneimittel anwenden.

Parkinson&#8217;s disease (PD) is a common neurodegenerative disorder disease, causing the phenomenon of shaking, rigidity, slowness of movement and ...

In diesem Video stellen wir vor, wie man einen Zylinder- und Open-Field-Test verwendet, um die Motorfunktion im MPTP-Modell der Parkinson-Krankheit zu verengen. Der Hauptvorteil ist, dass die Mäuse nicht vor dem Verhaltenstest trainiert werden müssen. Darüber hinaus ist diese Methode effizient und die Kosten für die Ausrüstung sind niedrig.Personen, die mit Verhaltenstests noch nicht in der Lage sind, die Auswirkungen von Umwelteinflüssen zu unterschätzen. Ruhig zu bleiben und Änderungen im Futter zu vermeiden, wird helfen. Hier wird eine Verhaltensuntersuchung 24 Stunden nach der endgültigen Injektion eines siebentägigen Therapieschemas von MPTP oder Salineninjektionen und 40 Minuten nach intragastrischer Verabreichung von L-DOPA an eine Teilmenge der Tiere durchgeführt.Wenn Verhaltenstests nicht im selben Raum durchgeführt werden, in dem die Tiere untergebracht sind, akklimatieren Sie die Mäuse 30 bis 60 Minuten vor dem Test in den neuen Raum. Beginnen Sie, indem Sie einen transparenten Glaszylinder in der Mitte eines Tisches platzieren. Umgeben Sie den Zylinder auf drei Seiten mit schwarzem Karton, vier bis acht Zentimeter vom Zylinder entfernt, um die Wirkung der Umgebungsbeleuchtung zu reduzieren.Lassen Sie eine Seite des Zylinders zur Videoaufnahme zur Kamera. Befestigen Sie eine Kamera, die eine Pixelauflösung von mindestens einer Million Pixel n. Chr. 40 bis 60 Zentimeter vom Zylinder entfernt hat, um sicherzustellen, dass der gesamte Zylinder im Sichtfeld enthalten ist. Legen Sie eine Maus gleichzeitig in den Zylinder und beginnen Sie sofort mit dem Filmen.Versuchen Sie dabei, Lärm- oder Lichtänderungen zu vermeiden, um das Verhalten der Maus nicht zu beeinflussen. Pfotenaufzüge treten auf, wenn die Maus auf ihren Hinterbeinen nach oben hebt, beide Vorderbeine über Schulterhöhe hebt und landet. Beenden Sie die Dreharbeiten nach drei Minuten und legen Sie die Maus wieder in den heimischen Käfig.Reinigen Sie den Zylinder mit Wasser und sprühen Sie dann 70% Ethnol über die Innenwand, um ihn zu reinigen und Mausdüfte zu entfernen. Wischen Sie den Zylinder trocken, bevor Sie die nächste Maus testen. Sobald das Testen abgeschlossen ist, spielen Sie das Video mit einer Rate von 0,5 mal der regulären Geschwindigkeit ab und zählen Sie die Anzahl der Pfotenaufzüge gegen die Wand jeder Maus.Wenn die Maus ihre Vorderbeine mehrmals ununterbrochen ohne Landung über schulterniveau hebt, sollte sie nur einmal gezählt werden. Führen Sie offene Feldtests während derselben Sitzung wie der Zylindertest durch. Bereiten Sie eine transparente offene FeldReaktionsbox mit einer Holzplatte vor, die je nach Farbe der Maus von einem kontrastierenden schwarzen oder weißen Tuch bedeckt ist.Befestigen Sie eine Kamera über dem Feld in einer Höhe von einem Meter. Passen Sie die Kamera an, um sicherzustellen, dass sich die reaktionsfreie Feldbox direkt in der Mitte des Videos befindet. Legen Sie eine Testmaus in die Box und lassen Sie die Maus sich für etwa eine Minute mit der Umgebung vertraut machen.Zeichnen Sie ein fünfminütiges Video mit der mit dem Computer verbundenen Kamera auf. Reinigen Sie schließlich alle Fäkalien in der offenen Feldreaktionsbox, sprühen Sie 70% Ethanol auf die Box und wischen Sie sie ab. Im Zylindertest wurde bei Mäusen, die mit MPTP behandelt wurden, im Vergleich zu mit saline behandelten Mäusen eine Abnahme der Anzahl der Hintern an der Wand beobachtet.Erhöhte Rückenuntersuchungen wurden bei den MTPT behandelten Mäusen beobachtet, die l-Dopamin am Tag der Prüfung erhielten, verglichen mit den MPTP-behandelten Mäusen, die Saline erhielten. Dieses Bild zeigt die repräsentative Bewegungsablaufverfolgung und die Verteilung von statischer Zeit, Gehzeit und Laufzeit bei Kontrollmäusen, die nicht mit MPTP behandelt wurden. Mäuse, die mit MTPT behandelt wurden, zeigten eine geringere Bewegungsgeschwindigkeit, einen kürzeren Bewegungsabstand, eine längere statische Zeit und eine kürzere Laufzeit als mit Saline behandelte Mäuse, was ein durch MTPT induziertes motorischinduziertes Defizit zeigte.MPTP behandelte Mäuse, die L-Dopamin erhielten, zeigten eine höhere Bewegungsgeschwindigkeit, einen längeren Bewegungsabstand, eine kürzere statische Zeit und eine längere Laufzeit als die Mäuse, die mit nur MPTP behandelt wurden, was darauf hindeutet, dass L-Dopamin das MPTP-induzierte motorische Defizit verringert. Beim Wechsel der getesteten Mäuse räumen Sie den Bereich vollständig aus und sprühen Ethanol, um die Wirkung des Geruchs der ehemaligen Mäuse zu eliminieren. Nach diesem Verfahren können andere Maßnahmen wie der Strahl-Walking-Test, Pole-Test durchgeführt werden.Mit diesen Methoden können Daten in Bezug auf Gleichgewichtskapazität und Motorfähigkeit gewonnen werden. MPTP ist neurotoxisch für Mäuse und Menschen und daher müssen strenge Vorsichtsmaßnahmen getroffen werden, um eine Exposition zu vermeiden. Zusätzliche PSA, wie eine Maske oder ein Beatmungsgerät, sollten getragen werden.

Research

JoVE Journal

Behavior

Assessment of Sensorimotor Function in Mouse Models of Parkinson's Disease

Beurteilung der Sensomotorik in Maus-Modellen der Parkinson-Krankheit

Sensitive and  reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of  potential therapeutic treatments in preclinical trials for many  ...

Forschung

Verhalten

Behavioral Phenotyping of Murine Disease Models with the Integrated Behavioral Station (INBEST)

Behavioral Phenotyping of Murine Disease Models with the Integrated Behavioral Station INBEST

Behavioral Phänotypisierung von murinen Krankheitsmodelle mit dem Integrated Behavioral Station (INBEST)

Due to rapid advances in genetic engineering, small rodents have become the preferred subjects in many disciplines of biomedical research. In studies of ...

Compensatory Limb Use and Behavioral Assessment of Motor Skill Learning Following Sensorimotor Cortex Injury in a Mouse Model of Ischemic Stroke

Ausgleichs Gliedmaßen Bedingungen und Verhaltens Bewertung der Motorik Learning Nach sensomotorischen Kortex Verletzung in einem Maus-Modell der ischämischen Schlaganfall

Mouse models have become increasingly popular in the field of behavioral neuroscience, and specifically in studies of experimental stroke. As models ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Eine Vorgehensweise, um Context-induzierte Erneuerung der Pawlowschen Anlage Alkoholsucht bei Ratten Verhalten beobachten

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

Community-based Adapted Tango Dancing for Individuals with Parkinson's Disease and Older Adults

Community-basierte Angepasst Tango Tanzen für Personen mit Parkinson-Krankheit und ältere Erwachsene

Adapted tango dancing improves mobility and balance in older adults and additional populations with balance impairments. It is composed of very simple ...

Asymmetric Walkway: A Novel Behavioral Assay for Studying Asymmetric Locomotion

Asymmetrische Walkway: Roman Behavioral Assay zur Untersuchung Asymmetrische Locomotion

Behavioral assays are commonly used for the assessment of sensorimotor impairment in the central nervous system (CNS). The most sophisticated methods for ...

Battery of Behavioral Tests Assessing General Locomotion, Muscular Strength, and Coordination in Mice

Batterie des Verhaltens testet Beurteilung der allgemeinen Fortbewegung, Muskelkraft und Koordination bei Mäusen

Behavioral testing is used in pre-clinical trials to assess the phenotypic effects and outcomes that a particular disease or treatment has on the ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

Erkennung von Verhaltensstörungen Defizite bei Ratten nach Schädel-Hirn-Verletzung

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

Automated, Long-term Behavioral Assay for Cognitive Functions in Multiple Genetic Models of Alzheimer's Disease, Using IntelliCage

Automatisiert, langfristige Verhaltensstörungen Assay für kognitive Funktionen in mehreren genetischen Modellen der Alzheimer-Krankheit, mit IntelliCage

Multiple factors&#8212;such as aging and genes&#8212;are frequently associated with cognitive decline. Genetically modified mouse models of cognitive ...