Name: evaluation of the interplay between the complement protein c1q and hyaluronic acid in promoting cell adhesion
Uploaded: 2019-06-15T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Evaluation of the Interplay Between the Complement Protein C1q and Hyaluronic Acid in Promoting Cell Adhesion at JoVE.com

Vi takker Ivan Donati for levering af HA, Leonardo Amadio, Gabriella Zito (Department of Gynaecology af IRCCS "Burlo Garofolo", Trieste, Italien) og Andrea Romano (operative kliniske enhed for anatomi og patologisk histologi, Cattinara Hospital, Trieste, Italien ) til indsamling af vævsprøver. Vi takker også Nicolò Morosini for hjælp i video forberedelse og Alex Coppola, stemmen. Dette arbejde blev støttet af tilskud fra Instituttet for mødres og børns sundhed, IRCCS "Burlo Garofolo", Trieste, Italien (RC20/16) og Fondazione Cassa di Risparmio Trieste til R. Bulla.

Vævsprøver fra patienter blev indsamlet efter informeret samtykke efter godkendelse af de etiske overvejelser i det institutionelle Råd på universitetshospitalet i Trieste, Italien.
1. tumor celle isolation og kultur (dag 1)
<ol><li>Isoler humane Mesotheliom celler fra MPM solide prøver. Vævet skal finjusteres med en fræser for at opnå fragmenter på ca. 2-3 mm2 i størrelse og inkube i 5 ml fordøjelsesvæske, der er sammensat af Hanks ' balanceret salt opløsning (HBSS) ...

<ol>
	<li>Zamboni, F., Vieira, S., Reis, R. L., Oliveira, J. M., Collins, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+potential+of+hyaluronic+acid+in+immunoprotection+and+immunomodulation:+Chemistry,+processing+and+function.">The potential of hyaluronic acid in immunoprotection and immunomodulation: Chemistry, processing and function.</a> Progress in Materials Science. 97, 97-122 (2018).</li><li>Lorusso, G., Ruegg, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tumor+microenvironment+and+its+contribution+to+tumor+evolution+toward+metastasis.">The tumor microenvironment and its contribution to tumor evolution toward metastasis.</a> Histochemistry and Cell Biology. 130 (6), 1091-1103 (2008).</li><li>Ricklin, D., Hajishengallis, G., Yang, K., Lambris, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complement:+a+key+system+for+immune+surveillance+and+homeostasis.">Complement: a key system for immune surveillance and homeostasis.</a> Nature Immunology. 11 (9), 785-797 (2010).</li><li>Bulla, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C1q+acts+in+the+tumour+microenvironment+as+a+cancer-promoting+factor+independently+of+complement+activation.">C1q acts in the tumour microenvironment as a cancer-promoting factor independently of complement activation.</a> Nature Communications. 7, 10346 (2016).</li><li>Winslow, S., Leandersson, K., Edsjo, A., Larsson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+stromal+gene+signatures+in+breast+cancer.">Prognostic stromal gene signatures in breast cancer.</a> Breast Cancer Research. 17, 23 (2015).</li><li>Collins, M. N., Birkinshaw, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyaluronic+acid+solutions:+A+processing+method+for+efficient+chemical+modification.">Hyaluronic acid solutions: A processing method for efficient chemical modification.</a> Journal of Applied Polymer Science. 130 (1), 145-152 (2013).</li><li>Itano, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+primary+structure,+complex+turnover+regulation+and+multiple+roles+of+hyaluronan.">Simple primary structure, complex turnover regulation and multiple roles of hyaluronan.</a> Journal of Biochemistry. 144 (2), 131-137 (2008).</li><li>Agostinis, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+alternative+role+of+C1q+in+cell+migration+and+tissue+remodeling:+contribution+to+trophoblast+invasion+and+placental+development.">An alternative role of C1q in cell migration and tissue remodeling: contribution to trophoblast invasion and placental development.</a> Journal of Immunology. 185 (7), 4420-4429 (2010).</li><li>Agostinis, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complement+Protein+C1q+Binds+to+Hyaluronic+Acid+in+the+Malignant+Pleural+Mesothelioma+Microenvironment+and+Promotes+Tumor+Growth.">Complement Protein C1q Binds to Hyaluronic Acid in the Malignant Pleural Mesothelioma Microenvironment and Promotes Tumor Growth.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1559 (2017).</li><li>Bossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C1q+as+a+unique+player+in+angiogenesis+with+therapeutic+implication+in+wound+healing.">C1q as a unique player in angiogenesis with therapeutic implication in wound healing.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (11), 4209-4214 (2014).</li><li>Hosszu, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+surface+expression+and+function+of+the+macromolecular+c1+complex+on+the+surface+of+human+monocytes.">Cell surface expression and function of the macromolecular c1 complex on the surface of human monocytes.</a> Frontiers in Immunology. 3, 38 (2012).</li><li>Laurent, T. C., Fraser, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyaluronan.">Hyaluronan.</a> Journal of the Federation of American Societies for Experimental Biology. 6 (7), 2397-2404 (1992).</li><li>Gaboriaud, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+crystal+structure+of+the+globular+head+of+complement+protein+C1q+provides+a+basis+for+its+versatile+recognition+properties.">The crystal structure of the globular head of complement protein C1q provides a basis for its versatile recognition properties.</a> Journal of Biological Chemistry. 278 (47), 46974-46982 (2003).</li><li>Lam, J., Truong, N. F., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design+of+cell-matrix+interactions+in+hyaluronic+acid+hydrogel+scaffolds.">Design of cell-matrix interactions in hyaluronic acid hydrogel scaffolds.</a> Acta Biomaterialia. 10 (4), 1571-1580 (2014).</li></ol>

Vi beskriver en nem metode til at undersøge, hvordan komplement komponenten C1q, interagere med hyaluronsyre, er i stand til at moduere opførsel af primærceller isoleret fra humant tumor væv. Både HA og C1q er rigeligt til stede i vævet mikromiljø både under fysiologiske og patologiske betingelser, der deltager i flere celle biologiske processer. For eksempel har C1q vist sig at være til stede i mikromiljøet af placenta, hvor det favoriserer ekstrvillous trofoblast invasion af moderen lærk under placentation<s...

Tumor mikromiljø (TME) påvirker kræft udvikling og progression, da det kan give en eftergivende niche for celle overlevelse, vækst og invasion. Identifikationen af nye nøgleaktører i TME kan være nyttig for opdagelsen af nye molekylære værktøjer til Target terapi. TME omfatter et komplekst og dynamisk netværk af ikke-maligne celler, såsom endotelceller, fibroblaster og celler i immunsystemet, indlejret i den omgivende ekstracellulære matrix (ECM) komponenter, herunder collagens, lamininer, fibronectiner, proteoglycaner og hyaluronans. Både tumor og ikke-tumorceller syntetisere og udskille ECM komponenter sammen med cytokiner, chemokiner, vækstfaktorer og inflammatoriske og matrix remodeling enzymer, der generelt ændre de fysiske, kemiske og signalering egenskaber af TME. Blandt disse bestanddele, hyaluronsyre (HA) er dukket op for at udøve en afgørende rolle i tumor biologi. På trods af sin enkle kemiske sammensætning, HA, sammen med sine HA-bindende molekyler (hyalvedere), kan modulerangiogenese, immunsystemet reaktionsevne og ECM remodeling i en størrelse og koncentration afhængige måde1.
Komplementsystemet (C) er også en del af den lokale TME, som for nylig har fået øget opmærksomhed. C-systemet omfatter et sæt af opløselige og membran bundne proteiner, der er involveret i den første forsvarslinje mod ikke-selv-celler, uønskede værts elementer og patogener. Funktionelt, C forbinder de to-effektor arme af medfødte og adaptive systemer til at fremme enten direkte celle drab eller montering af en inflammatorisk respons2. C aktivering kan undertrykke tumorvækst, ved at ødelægge kræftceller eller hæmme deres outgrowth, men det er blevet stadig tydeligere, at det kan besidde en tumor-fremme aktivitet ved at opretholde kronisk betændelse, fremme oprettelsen af en immunsuppressiv Milieu, inducerende angiogenese og aktivering af kræftrelaterede signalerings veje3. I denne sammenhæng, C1q, den første anerkendelse molekyle af den klassiske vej af C-systemet er dukket op til at udøve vigtige funktioner i tumoren mikromiljø uafhængigt af C aktivering4. C1q har vist sig at være udtrykt lokalt af en række af menneskelige Maligne tumorer, hvor det kan favorisere kræft celle vedhæftning, migration og spredning i tillæg til angiogenese og metastase5. Interessant C1q interagerer med en stor bestanddel af ECM som HA.
Vi udviklede en teknik til at isolere de primære kræftceller fra tumor massen. Desuden har vi skabt matrixen, som kan stimulere tumor mikromiljø, især samspillet mellem C1q og høj molekylvægt hyaluronsyre. C1q bundet til HA var i stand til at fremkalde vedhæftning af tumorceller.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1447px;" width="1445">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">100&#8201;&#181;m pore filter</td>
			<td style="width:311px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:131px;">352360</td>
			<td style="width:676px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Amphotericin B solution (fungizone)</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">1397-89-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">basic FGF</td>
			<td style="width:311px;">Immunological Sciences</td>
			<td style="width:131px;">GRF-15595</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Calcium Chloride</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">C-4901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Collagenase type I</td>
			<td>Worthington Biochemical Corporation, DBA</td>
			<td style="width:131px;">MX1D12644</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">D-Glucose</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">50-99-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">DNase I&#160;</td>
			<td style="width:311px;">Roche</td>
			<td style="width:131px;">10 104 159 001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">EDTA</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">60-00-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:22px;width:330px;">EGF</td>
			<td style="width:311px;">Immunological Sciences</td>
			<td style="width:131px;">GRF-10544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:330px;">FAST DiI</td>
			<td style="width:311px;">Molecular probes, Invitrogen, Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:131px;">D7756</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fetal bovine serum</td>
			<td style="width:311px;">Gibco,&#160; Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:131px;">10270-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Fibronectin</td>
			<td style="width:311px;">Roche</td>
			<td style="width:131px;">11051407001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Flask for cell culture</td>
			<td style="width:311px;">Corning</td>
			<td style="width:131px;">430639</td>
			<td>Sterile, vented</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Gentamicin solution</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">G1397-10ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hank&#8217;s Balanced Salt Solution (HBBS)&#160;</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">H6648</td>
			<td>Supplemented with EDTA, Glucose, penicillin-streptamicin, gentamicin and fungizone</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">High molecular weight hyaluronic acid</td>
			<td style="width:311px;">Kind gift by Prof. Ivan Donati</td>
			<td style="width:131px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Human endothelial serum free medium&#160;</td>
			<td style="width:311px;">Gibco,&#160; Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:131px;">11111-044</td>
			<td>Supplemented with EGF (5&#8201;ng/mL), basic FGF (10&#8201;ng/mL), and&#160; 1% penicillin&#8211;streptomycin (Sigma-Aldrich)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Magnesium Chloride</td>
			<td style="width:311px;">Carlo Erba</td>
			<td style="width:131px;">13446-18-9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Medium 199 with Hank&#8217;s salt</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">M7653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Penicillin-Streptomycin</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">P0781</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:330px;">Time-lapse microscopy&#160;</td>
			<td style="width:311px;">Nikon&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Imaging System BioStation IM-Q</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Titertek Multiskan ELISA Reader</td>
			<td>Flow Labs</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Trypsin</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">T4674</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

evaluation of the interplay between the complement protein c1q and hyaluronic acid in promoting cell adhesion

Det er blevet mere og mere påvist, at tumormikromiljøet spiller en aktiv rolle i neoplasi vækst og metastaser. Gennem forskellige veje, kan tumorceller effektivt rekruttere stromale, immun og endotelceller ved at udskille stimulerende faktorer, chemokiner og cytokiner. Disse celler kan til gengæld ændre mikromiljøets signalerings egenskaber ved at frigive vækstfremmende signaler, metabolitter og ekstracellulære matrixkomponenter for at opretholde høj spredning og metastatisk kompetence. I denne sammenhæng, vi identificere, at komplement komponenten C1q, højt udtrykt lokalt ved en række af menneskelige Maligne tumorer, ved interaktion med den ekstracellulære matrix hyaluronsyre, stærkt påvirker adfærden af primære celler isoleret fra menneskelig tumor Prøver. Her beskriver vi en metode til at teste, hvordan C1q bundet til hyaluronsyre (HA) påvirker tumor celle vedhæftning, underliggende det faktum, at de biologiske egenskaber af centrale komponenter i den ekstracellulære matrix (i dette tilfælde HA) kan formes af bioaktive signaler mod tumor Progression.

HA er et negativt ladet polysaccharid med høj molekylvægt, som består af gentagne (β, 1-4)-D-glucuronsyre-(β, 1-3)-N-acetyl-l-glucosamin disaccharid enheder (figur 1b)7. Forekomsten af binding af HA på 96-brønd pladen samt effektiviteten af dens immobilisering blev testet ved at drage fordel af biotinylated HA (Bio-HA). Forskellige koncentrationer af bio-HA, der spænder fra 10 μg/mL til 1 mg/mL, blev resuspenderet i 100 mM kar...

Watch this Scientific Journal Video about Evaluation of the Interplay Between the Complement Protein C1q and Hyaluronic Acid in Promoting Cell Adhesion at JoVE.com

Evaluation of the Interplay Between the Complement Protein C1q and Hyaluronic Acid in Promoting Cell Adhesion

Komplement komponenten C1q er et Pro-inflammatorisk molekyle, der er stærkt udtrykt i vævs mikromiljøet, som kan interagere med den ekstracellulære matrix. Her beskriver vi en metode til at teste, hvordan C1q bundet til hyaluronsyre påvirker celle vedhæftning.

Evaluering af samspillet mellem komplement protein C1q og hyaluronsyre i fremme celle vedhæftning

It has been increasingly demonstrated that the tumor microenvironment plays an active role in neoplasia growth and metastasis. Through different pathways, ...

En omfattende procedure til vurdering af samspillet mellem komplementproteinet C1q og hyaluronsyre ved fremme af cellevedhæftning. Vi har for nylig defineret, at komplementkomponenten C1q et molekyle af det medfødte immunsystem er stærkt udtrykt i tumoren og moderkagen mikromiljø og er i stand til at interagere med komponenten i den ekstracellulære matrix. I dette tilfælde hyaluronsyre.Vi foreslår en metode til at studere proteiners biologiske funktioner i hele det ekronomiske miljø. For at undersøge disse molekylers evne til at forme celledelingsegenskaberne for ekstracellulære matrixfaktorer. For at undersøge, hvordan denne interaktion kan fornemmes af de celler, der er til stede i miljøvævet, har vi oprettet denne nemme metode, hvor binære celler afledt af humane væv fik lov til at overholde C1q bundet til ekstracellulær matrix, i dette tilfælde hyaluronsyre.For belægning procedure det første skridt er bindingen af høj molekylvægt hyaluronsyre til 96 godt væv belagt mikroplade. Til overfladebehandling fortyndes hyaluronsyre i 0,1 mole carbon buffer PH 9.6 ved en koncentration på 15 mikrogram pr. milliliter. Og forsigtigt pipetning er requited at opnå en homogen løsning.En 100 mikroliter af opløsningen bruges til at belægge brøndene. Pladen overføres derefter ved fire grader Celsius natten over. Næste dag vakuum aspirere de behandlede brønde.Vask én gang med dPBS. Tilføj enten C1q eller BSA i de tilsvarende brønde. C1q er i dag kommercielt tilgængelig i en koncentration på en milligram pr. milliliter, og den fortyndes med en koncentration på 25 mikrogram pr. milliliter.Og dPBS indeholder 0,5% BSA og 0,7 millimoles calcium og magnesium og divalent kationer. BSA LPS gratis anvendes ved en koncentration på 0,5% og dato PBF. Pladen overføres derefter ved fire grader Celsius natten over.C1q dosisafhængige interaktioner med immobiliseret hyaluronsyre bestemmes ved enzymrelateret immuno SA. Celler mærkning med hurtig DiI. Den lipofile sporstof hurtigt DiI bruges til at mærke celler af interesse. Celler, der resuspenderes i dPBS, anvendes i koncentrationen af en million celler pr. milliliter.Hurtig DiI fortyndes en til 100 direkte ind i cellesuspensionen. Celleaffjedringen blandes manuelt og overføres ved 37 grader Celsius i 15 minutter. Efter fem minutters inkubation blandes cellesuspensionen, og denne operation gentages to gange mere.For at fjerne det overskydende hurtige DiI, tilsættes 10 milliliter dPBS. Drej forsigtigt op og ned og centrifuge ved 250 g i syv minutter. Resuspend cell pellet i en milliliter af humant endofilt serumfrit medium ved tilstedeværelse af 0,1% BSA.Celler vedhæftning på hyaluronsyre C1q matricer. Vakuum aspirere dPBS fra de belagte brønde. Fordel 100 mikroliter af mærket celle suspension til belagte brønde.200 mikroliter af mærkede celler er taget fra hinanden i et ependurerør, der skal anvendes til standardkurvegenerering. Inkuber pladen i 35 minutter ved 37 grader Celsius. Tag pladen ud af kuvøsen.Forsigtigt aspirere de ubalancerede celler. Vask én gang med dPBS indeholdende 0,5% BSA og 0,7 millimoles calcium og magnesium. Lys de klæbende celler ved at tilføje 200 mikroliter lysis buffer.Samtidig forberede standardkurven på en til to seriel fortynding af de mærkede celler i lysis buffer. Udfør aflæsningen af florescencesignalet ved det uendelige F 200 T-can-instrument ved hjælp af 544 nanometer som excitation bølgelængde og 590 nanometer som emissionsbølgelængde. repræsentative resultater.Som det fremgår af de repræsentative resultater, er det indlysende, at celle vedhæftning på hyaluronsyre fundet C1q som stærkt forbedret i forhold til HA alene eller HA bundet BSA. Procentdelen af klæbende celler på hver matrix beregnes på grundlag af standardkurven. Konklusioner. I vores eksperimenter først og fremmest evaluerede vi komplementkomponenten C12's evne til at binde den ekstracellulære matrix i dette tilfælde hyaluronsyre ved hjælp af et arisalmetal.For det andet analyserede vi evnen af menneskelige primære celler farves med fluorescerende farvestof til at forfølge bundet hyaluronsyre. Den model, som vi foreslog i denne undersøgelse er en lettere hurtigere og billigere metode i alternativ til 3D-modellen af ekstracellulære matrix stilladser til evaluering af denne cellulære reaktion på en kombination af stimuli.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Measuring the 50% Haemolytic Complement (CH50) Activity of Serum

Measuring the 50% Haemolytic Complement CH50 Activity of Serum

The complement system is a group of proteins that when activated lead to target cell lysis and facilitates phagocytosis through opsonisation. Individual ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

Monitoring Dendritic Cell Migration using 19F / 1H Magnetic Resonance Imaging

Monitoring Dendritic Cell Migration using 19F / 1H Magnetic Resonance Imaging

Continuous  advancements in noninvasive imaging modalities such as magnetic resonance  imaging (MRI) have greatly improved our ability to study ...

Static Adhesion Assay for the Study of Integrin Activation in T Lymphocytes

Static adhæsionsassayet for Studiet af Integrin Aktivering i T-lymfocytter

T lymphocyte adhesion is required for multiple T cell functions, including migration to sites of inflammation and formation of immunological synapses with ...

Assay of Adhesion Under Shear Stress for the Study of T Lymphocyte-Adhesion Molecule Interactions

Analyse af Vedhæftning Under Shear Stress for Studiet af T-lymfocyt-adhæsionsmolekyle Interactions

Overall, T cell adhesion is a critical component of function, contributing to the distinct processes of cellular recruitment to sites of inflammation and ...

Dissecting Multi-protein Signaling Complexes by Bimolecular Complementation Affinity Purification (BiCAP)

Dissecting Multi-protein Signaling Complexes by Bimolecular Complementation Affinity Purification BiCAP

Dissekere multi protein Signaling komplekser af Bimolecular komplementering affinitet rensning (BiCAP)

The assembly of protein complexes is a central mechanism underlying the regulation of many cell signaling pathways. A major focus of biomedical research ...

Dynamic Adhesion Assay for the Functional Analysis of Anti-adhesion Therapies in Inflammatory Bowel Disease

Dynamisk friktionskoefficient Assay for den funktionelle analyse af anti-friktion behandlinger i inflammatorisk tarmsygdom

Gut homing of immune cells is important for the pathogenesis of inflammatory bowel diseases (IBD). Integrin-dependent cell adhesion to addressins is a ...

Evaluation of Host-Pathogen Responses and Vaccine Efficacy in Mice

Evaluering af vært-patogen svar og Vaccine effekt i mus

Vaccines are a 20th century medical marvel. They have dramatically reduced the morbidity and mortality caused by infectious diseases and contributed to a ...

Renal Subcapsular Transplantation of 2'-Deoxyguanosine-Treated Murine Embryonic Thymus in Nude Mice

Renal subkapsulær transplantation af 2 '-Deoxyguanosin-behandlede murine embryonale thymus i Nude mus

The thymus is an important central immune organ, which plays an essential role in the development and differentiation of T cells. Thymus transplantation ...