Name: evaluation of the interplay between the complement protein c1q and hyaluronic acid in promoting cell adhesion
Uploaded: 2019-06-15T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Evaluation of the Interplay Between the Complement Protein C1q and Hyaluronic Acid in Promoting Cell Adhesion at JoVE.com

Vi takker Ivan Donati for å gi av HA, Leonardo Amadio, Gabriella Zito (Department of gynekologi av IRCCS "Burlo Garofolo", Trieste, Italia) og Andrea Romano (operative Clinical Unit of Anatomy og patologiske histologi, Cattinara Hospital, Trieste, Italia ) for Vevsprøve samlingen. Vi takker også Nicolò Morosini for hjelp i videoen forberedelse og Alex Coppola, stemmen. Dette arbeidet ble støttet av tilskudd fra instituttet for mødre-og barnehelse, IRCCS "Burlo Garofolo", Trieste, Italia (RC20/16) og Fondazione Cassa di Risparmio Trieste til R. Bulla.

Vevsprøver fra pasienter ble innhentet etter informert samtykke etter godkjennelse av de etiske betraktninger fra det institusjonelle styret ved Universitetssykehuset i Trieste i Italia.
1. tumor celle isolasjon og kultur (dag 1)
<ol><li>Isoler humant Mesothelioma celler fra MPM solide prøver. Fint hakke vevet med en kutter for å få fragmenter av ca 2-3 mm2 i størrelse og ruge i 5 ml fordøyelsen løsning bestående av Hanks ' balansert salt Solution (HBSS) supplert med 0,5 m...

<ol>
	<li>Zamboni, F., Vieira, S., Reis, R. L., Oliveira, J. M., Collins, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+potential+of+hyaluronic+acid+in+immunoprotection+and+immunomodulation:+Chemistry,+processing+and+function.">The potential of hyaluronic acid in immunoprotection and immunomodulation: Chemistry, processing and function.</a> Progress in Materials Science. 97, 97-122 (2018).</li><li>Lorusso, G., Ruegg, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tumor+microenvironment+and+its+contribution+to+tumor+evolution+toward+metastasis.">The tumor microenvironment and its contribution to tumor evolution toward metastasis.</a> Histochemistry and Cell Biology. 130 (6), 1091-1103 (2008).</li><li>Ricklin, D., Hajishengallis, G., Yang, K., Lambris, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complement:+a+key+system+for+immune+surveillance+and+homeostasis.">Complement: a key system for immune surveillance and homeostasis.</a> Nature Immunology. 11 (9), 785-797 (2010).</li><li>Bulla, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C1q+acts+in+the+tumour+microenvironment+as+a+cancer-promoting+factor+independently+of+complement+activation.">C1q acts in the tumour microenvironment as a cancer-promoting factor independently of complement activation.</a> Nature Communications. 7, 10346 (2016).</li><li>Winslow, S., Leandersson, K., Edsjo, A., Larsson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+stromal+gene+signatures+in+breast+cancer.">Prognostic stromal gene signatures in breast cancer.</a> Breast Cancer Research. 17, 23 (2015).</li><li>Collins, M. N., Birkinshaw, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyaluronic+acid+solutions:+A+processing+method+for+efficient+chemical+modification.">Hyaluronic acid solutions: A processing method for efficient chemical modification.</a> Journal of Applied Polymer Science. 130 (1), 145-152 (2013).</li><li>Itano, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+primary+structure,+complex+turnover+regulation+and+multiple+roles+of+hyaluronan.">Simple primary structure, complex turnover regulation and multiple roles of hyaluronan.</a> Journal of Biochemistry. 144 (2), 131-137 (2008).</li><li>Agostinis, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+alternative+role+of+C1q+in+cell+migration+and+tissue+remodeling:+contribution+to+trophoblast+invasion+and+placental+development.">An alternative role of C1q in cell migration and tissue remodeling: contribution to trophoblast invasion and placental development.</a> Journal of Immunology. 185 (7), 4420-4429 (2010).</li><li>Agostinis, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complement+Protein+C1q+Binds+to+Hyaluronic+Acid+in+the+Malignant+Pleural+Mesothelioma+Microenvironment+and+Promotes+Tumor+Growth.">Complement Protein C1q Binds to Hyaluronic Acid in the Malignant Pleural Mesothelioma Microenvironment and Promotes Tumor Growth.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1559 (2017).</li><li>Bossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C1q+as+a+unique+player+in+angiogenesis+with+therapeutic+implication+in+wound+healing.">C1q as a unique player in angiogenesis with therapeutic implication in wound healing.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (11), 4209-4214 (2014).</li><li>Hosszu, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+surface+expression+and+function+of+the+macromolecular+c1+complex+on+the+surface+of+human+monocytes.">Cell surface expression and function of the macromolecular c1 complex on the surface of human monocytes.</a> Frontiers in Immunology. 3, 38 (2012).</li><li>Laurent, T. C., Fraser, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyaluronan.">Hyaluronan.</a> Journal of the Federation of American Societies for Experimental Biology. 6 (7), 2397-2404 (1992).</li><li>Gaboriaud, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+crystal+structure+of+the+globular+head+of+complement+protein+C1q+provides+a+basis+for+its+versatile+recognition+properties.">The crystal structure of the globular head of complement protein C1q provides a basis for its versatile recognition properties.</a> Journal of Biological Chemistry. 278 (47), 46974-46982 (2003).</li><li>Lam, J., Truong, N. F., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design+of+cell-matrix+interactions+in+hyaluronic+acid+hydrogel+scaffolds.">Design of cell-matrix interactions in hyaluronic acid hydrogel scaffolds.</a> Acta Biomaterialia. 10 (4), 1571-1580 (2014).</li></ol>

Vi beskriver en enkel metode for å undersøke hvordan komplement komponenten C1q, i samspill med hyaluronsyre, er i stand til å modulere atferden til primære celler isolert fra menneskelig tumor vev. Både HA og C1q er rikelig tilstede i vevet mikromiljøet både under fysiologiske og patologiske tilstander, som deltar i flere celle biologiske prosesser. For eksempel har C1q vist seg å være til stede i mikromiljøet av morkaken der det favoriserer extravillous trophoblast invasjon av mors Vertsplanter under placenta...

Svulsten mikromiljøet (TME) påvirker kreftutvikling og progresjon siden det kan gi en ettergivende nisje for celle overlevelse, vekst og invasjon. Identifisering av nye sentrale aktører i TME kan være nyttig for oppdagelsen av nye molekylære verktøy for mål behandling. TME inkluderer et komplekst og dynamisk nettverk av ikke-ondartet celler, slik som endothelial celler, fibroblaster og celler av immunsystemet, innebygd i de omkringliggende ekstracellulære Matrix (ECM) komponenter inkludert kollagen, laminins, fibronectins, proteoglycans og hyaluronans. Både tumor og ikke-tumorceller syntetisere og skiller ut ECM komponenter sammen med cytokiner, chemokiner, vekstfaktorer og inflammatorisk og matrise remodeling enzymer som samlet endre fysiske, kjemiske og signalering egenskaper TME. Blant disse bestanddeler, hyaluronsyre (HA) har dukket opp for å utøve en avgjørende rolle i tumor biologi. Til tross for sin enkle kjemiske sammensetning, HA, sammen med sine HA-bindende molekyler (hyaladherins), kan modulere angiogenese, immunsystemet respons og ECM remodeling i en størrelse og konsentrasjon avhengig måte1.
Komplement (C) systemet er også en del av den lokale TME, som nylig har fått økende oppmerksomhet. C-systemet omfatter et sett av løselige og membran bundne proteiner som er involvert i den første forsvarslinjen mot ikke-selv-celler, uønskede verts elementer og patogener. Funksjonelt, forbinder C de to-effektor armer av medfødte og adaptive systemer for å fremme enten direkte celle drap eller montering av en inflammatorisk respons2. C aktivering kan undertrykke tumor vekst, ved å ødelegge kreftceller eller hemme deres utvekst, men det har blitt stadig klarere at det kan ha en svulst-fremme aktivitet ved å opprettholde kronisk betennelse, fremme etablering av en immunsuppressiv miljø, inducing angiogenese, og aktivere kreft-relaterte signalnettverk trasé3. I denne sammenheng C1q, den første anerkjennelse molekyl av den klassiske veien til C-systemet har dukket opp til å utøve viktige funksjoner i svulsten mikromiljøet uavhengig av C-aktivering4. C1q har vist seg å være uttrykt lokalt av en rekke menneskelige ondartede svulster, hvor det kan favorisere kreftcelle vedheft, migrasjon og spredning i tillegg til angiogenese og metastasering5. Interessant C1q samhandler med en stor bestanddel av ECM som HA.
Vi utviklet en teknikk for å isolere den primære kreftceller fra tumor massen. Videre skapte vi matrisen, som kan stimulere tumor mikromiljøet, spesielt samspillet mellom C1q og høy molekylvekt hyaluronsyre. C1q bundet til HA var i stand til å indusere vedheft av tumorceller.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1447px;" width="1445">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">100&#8201;&#181;m pore filter</td>
			<td style="width:311px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:131px;">352360</td>
			<td style="width:676px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Amphotericin B solution (fungizone)</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">1397-89-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">basic FGF</td>
			<td style="width:311px;">Immunological Sciences</td>
			<td style="width:131px;">GRF-15595</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Calcium Chloride</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">C-4901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Collagenase type I</td>
			<td>Worthington Biochemical Corporation, DBA</td>
			<td style="width:131px;">MX1D12644</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">D-Glucose</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">50-99-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">DNase I&#160;</td>
			<td style="width:311px;">Roche</td>
			<td style="width:131px;">10 104 159 001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">EDTA</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">60-00-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:22px;width:330px;">EGF</td>
			<td style="width:311px;">Immunological Sciences</td>
			<td style="width:131px;">GRF-10544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:330px;">FAST DiI</td>
			<td style="width:311px;">Molecular probes, Invitrogen, Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:131px;">D7756</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fetal bovine serum</td>
			<td style="width:311px;">Gibco,&#160; Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:131px;">10270-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Fibronectin</td>
			<td style="width:311px;">Roche</td>
			<td style="width:131px;">11051407001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Flask for cell culture</td>
			<td style="width:311px;">Corning</td>
			<td style="width:131px;">430639</td>
			<td>Sterile, vented</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Gentamicin solution</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">G1397-10ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hank&#8217;s Balanced Salt Solution (HBBS)&#160;</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">H6648</td>
			<td>Supplemented with EDTA, Glucose, penicillin-streptamicin, gentamicin and fungizone</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">High molecular weight hyaluronic acid</td>
			<td style="width:311px;">Kind gift by Prof. Ivan Donati</td>
			<td style="width:131px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Human endothelial serum free medium&#160;</td>
			<td style="width:311px;">Gibco,&#160; Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:131px;">11111-044</td>
			<td>Supplemented with EGF (5&#8201;ng/mL), basic FGF (10&#8201;ng/mL), and&#160; 1% penicillin&#8211;streptomycin (Sigma-Aldrich)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Magnesium Chloride</td>
			<td style="width:311px;">Carlo Erba</td>
			<td style="width:131px;">13446-18-9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Medium 199 with Hank&#8217;s salt</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">M7653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Penicillin-Streptomycin</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">P0781</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:330px;">Time-lapse microscopy&#160;</td>
			<td style="width:311px;">Nikon&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Imaging System BioStation IM-Q</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Titertek Multiskan ELISA Reader</td>
			<td>Flow Labs</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Trypsin</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">T4674</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

evaluation of the interplay between the complement protein c1q and hyaluronic acid in promoting cell adhesion

Det har blitt stadig demonstrert at tumor mikromiljøet spiller en aktiv rolle i neoplasi vekst og metastasering. Gjennom ulike trasé, kan tumorceller effektivt rekruttere stromal, uimottakelig og endothelial celler ved sekresjon stimulerende faktorer, chemokiner og cytokiner. I sin tur disse cellene kan endre signalering egenskapene til mikromiljøet ved å frigjøre vekst-fremme signaler, metabolitter og ekstracellulære matrise komponenter for å opprettholde høy spredning og metastatisk kompetanse. I denne sammenheng identifiserer vi at komplement komponenten C1q, høyt uttrykt lokalt av en rekke menneskelige ondartede svulster, ved samspill med ekstracellulære matrise hyaluronsyre, sterkt påvirker atferden til primær celler isolert fra menneskelig svulst Prøver. Her beskriver vi en metode for å teste hvordan C1q bundet til hyaluronsyre (HA) virkninger tumor celle vedheft, underliggende det faktum at de biologiske egenskapene til viktige komponenter i ekstracellulære matrise (i dette tilfellet HA) kan formes av bioaktive signaler mot tumor Progresjon.

HA er en negativt ladet høy molekylvekt polysakkarid, som består av repeterende (β, 1-4)-D-glucuronic acid-(β, 1-3)-N-acetyl-D-Glucosamine disakkarid Units (figur 1B)7. Forekomsten av bindingen av HA på 96-brønn plate samt effektiviteten av sine immobilisering ble testet dra nytte av biotinylated HA (bio-HA). Ulike konsentrasjoner av bio-HA, fra 10 μg/mL til 1 mg/mL, ble re-suspendert i 100 mM/bikarbonat-buffer pH 9,6 og inkuber...

Watch this Scientific Journal Video about Evaluation of the Interplay Between the Complement Protein C1q and Hyaluronic Acid in Promoting Cell Adhesion at JoVE.com

Evaluation of the Interplay Between the Complement Protein C1q and Hyaluronic Acid in Promoting Cell Adhesion

Komplement komponenten C1q er en Pro-inflammatorisk molekyl høyt uttrykt i vevet mikromiljøet som kan samhandle med ekstracellulære matrise. Her beskriver vi en metode for å teste hvordan C1q bundet til hyaluronsyre virkninger celle vedheft.

Evaluering av samspillet mellom komplement protein C1q og hyaluronsyre i fremme Cell vedheft

It has been increasingly demonstrated that the tumor microenvironment plays an active role in neoplasia growth and metastasis. Through different pathways, ...

En omfattende prosedyre for å evaluere samspillet mellom komplementproteinet C1q og hyaluronsyre for å fremme celleadhesjon. Vi har nylig definert at komplementkomponenten C1q et molekyl av det medfødte immunsystemet er sterkt uttrykt i svulsten og placenta mikromiljøet og er i stand til å samhandle med komponenten i den ekstracellulære matrisen. I dette tilfellet hyaluronsyre.Vi foreslår en metode for å studere de biologiske funksjonene til proteiner i hele det ekronomiske miljøet. For å undersøke disse molekylenes evne til å forme celledelingsegenskapene til ekstracellulære matrisefaktorer. For å studere hvordan denne interaksjonen kan bli følt av cellene som er tilstede i vevet i miljøet, satte vi opp denne enkle metoden der binære celler avledet fra menneskelig vev fikk lov til å følge C1q bundet til ekstracellulær matrise, i dette tilfellet hyaluronsyre.For beleggprosedyre er det første trinnet bindingen av høymolekylært hyaluronsyre til 96 godt vevbelagt mikroplate. For belegg fortynnes hyaluronsyre i 0,1 mole karbonbuffer PH 9.6 med en konsentrasjon på 15 mikrogram per milliliter. Og forsiktig pipering er requited for å oppnå en homogen løsning.En 100 mikroliter av løsningen brukes til å belegge brønnene. Platen overføres deretter ved fire grader Celsius over natten. Neste dag aspirerer vakuum de behandlede brønnene.Vask én gang med dPBS. Legg til enten C1q eller BSA i de tilsvarende brønnene. C1q er i dag kommersielt tilgjengelig i en konsentrasjon på ett mg per milliliter, og det fortynnes med en konsentrasjon på 25 mikrogram per milliliter.Og dPBS som inneholder 0,5% BSA og 0,7 millimol kalsium og magnesium og divalente casjoner. BSA LPS gratis brukes i konsentrasjonen av 0,5%og dato PBF. Platen overføres deretter ved fire grader Celsius over natten.C1q doseavhengige interaksjoner med immobilisert hyaluronsyre bestemmes av enzymbundet immunsA. Celler merking med rask DiI. Den lipofile tracer rask DiI brukes til å merke cellene av interesse. Celler som brukes på ny bruk i dPBS brukes i konsentrasjonen av en million celler per milliliter.Rask DiI fortynnes en til 100 direkte inn i cellefjæringen. Cellefjæringen blandes manuelt og overføres ved 37 grader Celsius i 15 minutter. Etter fem minutter inkubasjon, bland cellefjæringen og gjenta denne operasjonen to ganger til.For å fjerne overflødig av rask DiI, legg til 10 milliliter dPBS. Drei forsiktig opp og ned og sentrifuger ved 250 g i syv minutter. Resuspend cellepellet i en milliliter humant endofilt serumfritt medium i nærvær av 0,1%BSA.Celler vedheft på hyaluronsyre C1q matriser. Vakuum aspirer dPBS fra de belagte brønnene. Fordel 100 mikroliter merket cellefjæring til de belagte brønnene.200 mikroliter merkede celler tas fra hverandre i et ependurerør som skal brukes til standard kurvegenerering. Inkuber platen i 35 minutter ved 37 grader Celsius. Ta ut platen fra inkubatoren.Aspirer forsiktig de ubalanserte cellene. Vask en gang med dPBS som inneholder 0,5% BSA og 0,7 millimol kalsium og magnesium. Lys tilhengercellene ved å legge til 200 mikroliter lysisbuffer.Samtidig forberede standardkurven på en til to seriell fortynning av de merkede cellene i lysis buffer. Utfør lesingen av florescence signalet på uendelig F 200 T-kan instrument ved hjelp av 544 nanometer som eksitasjon bølgelengde og 590 nanometer som utslipp bølgelengde. Representative resultater.Som vist av de representative resultatene, er det tydelig at celle vedheft på hyaluronsyre fant C1q som sterkt forbedret i forhold til HA alene eller HA bundet BSA. Prosentandelen av følgeceller på hver matrise beregnes på grunnlag av standardkurven. Konklusjoner. I våre eksperimenter evaluerte vi først og fremst komplementkomponenten C12s evne til å binde den ekstracellulære matrisen i dette tilfellet hyaluronsyre ved hjelp av etrisalmetall.For det andre analyserte vi evnen til menneskelige primærceller farget med fluorescerende fargestoff for å forfølge bundet hyaluronsyre. Modellen som vi foreslo i denne studien er en enklere raskere og billigere metode i alternativ til 3D-modellen av ekstracellulære matrisestillas for evalueringen på denne cellulære responsen på en kombinasjon av stimuli.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Measuring the 50% Haemolytic Complement (CH50) Activity of Serum

Measuring the 50% Haemolytic Complement CH50 Activity of Serum

The complement system is a group of proteins that when activated lead to target cell lysis and facilitates phagocytosis through opsonisation. Individual ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

Monitoring Dendritic Cell Migration using 19F / 1H Magnetic Resonance Imaging

Monitoring Dendritic Cell Migration using 19F / 1H Magnetic Resonance Imaging

Continuous  advancements in noninvasive imaging modalities such as magnetic resonance  imaging (MRI) have greatly improved our ability to study ...

Static Adhesion Assay for the Study of Integrin Activation in T Lymphocytes

Statisk feste analysen for Study of inte Activation i T-lymfocytter

T lymphocyte adhesion is required for multiple T cell functions, including migration to sites of inflammation and formation of immunological synapses with ...

Assay of Adhesion Under Shear Stress for the Study of T Lymphocyte-Adhesion Molecule Interactions

Analyse av Adhesjon Under skjærspenning for studier av T-lymfocytter-adhesjonsmolekyl Interactions

Overall, T cell adhesion is a critical component of function, contributing to the distinct processes of cellular recruitment to sites of inflammation and ...

Dissecting Multi-protein Signaling Complexes by Bimolecular Complementation Affinity Purification (BiCAP)

Dissecting Multi-protein Signaling Complexes by Bimolecular Complementation Affinity Purification BiCAP

Dissekere multi protein signalnettverk komplekser av resultatet av dette Complementation affinitet rensing (BiCAP)

The assembly of protein complexes is a central mechanism underlying the regulation of many cell signaling pathways. A major focus of biomedical research ...

Dynamic Adhesion Assay for the Functional Analysis of Anti-adhesion Therapies in Inflammatory Bowel Disease

Dynamisk vedheft analysen for funksjonell analyse av anti-vedheft terapi i inflammatorisk tarmsykdom

Gut homing of immune cells is important for the pathogenesis of inflammatory bowel diseases (IBD). Integrin-dependent cell adhesion to addressins is a ...

Evaluation of Host-Pathogen Responses and Vaccine Efficacy in Mice

Evaluering av Host-patogen svar og vaksinen i mus

Vaccines are a 20th century medical marvel. They have dramatically reduced the morbidity and mortality caused by infectious diseases and contributed to a ...

Renal Subcapsular Transplantation of 2'-Deoxyguanosine-Treated Murine Embryonic Thymus in Nude Mice

Renal Subcapsular transplantasjon av 2 '-Deoxyguanosine-behandlet murine embryonale thymus i Nude mus

The thymus is an important central immune organ, which plays an essential role in the development and differentiation of T cells. Thymus transplantation ...