Name: evaluation of the interplay between the complement protein c1q and hyaluronic acid in promoting cell adhesion
Uploaded: 2019-06-15T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Evaluation of the Interplay Between the Complement Protein C1q and Hyaluronic Acid in Promoting Cell Adhesion at JoVE.com

Vi tackar Ivan Donati för att ge av HA, Leonardo Amadio, Gabriella Zito (Institutionen för gynekologi av IRCCS "Burlo Garofolo", Trieste, Italien) och Andrea Romano (operativa kliniska enheten för anatomi och patologisk histologi, Cattinara Hospital, Trieste, Italien ) för insamling av vävnads prov. Vi tackar också Nicolò Morosini för hjälp i video förberedelse och Alex Coppola, rösten. Detta arbete stöddes av bidrag från Institutet för mödra-och Barna vård, IRCCS "Burlo Garofolo", Trieste, Italien (RC20/16) och Fondazione Cassa di Risparmio Trieste till R. bulla.

Vävnads prov från patienter samlades in efter informerat samtycke efter godkännande av etiska överväganden av institutions styrelsen vid Universitetssjukhuset i Trieste, Italien.
1. tumör cell isolering och kultur (dag 1)
<ol><li>Isolera humana mesoteliom celler från MPM fasta prover. Finhacka vävnaden med en fräs för att få fragment av ca 2-3 mm2 i storlek och inkubera i 5 ml mat smältnings lösning bestående av Hanks bal anse rad saltlösning (Hbss) kompletterad med...

<ol>
	<li>Zamboni, F., Vieira, S., Reis, R. L., Oliveira, J. M., Collins, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+potential+of+hyaluronic+acid+in+immunoprotection+and+immunomodulation:+Chemistry,+processing+and+function.">The potential of hyaluronic acid in immunoprotection and immunomodulation: Chemistry, processing and function.</a> Progress in Materials Science. 97, 97-122 (2018).</li><li>Lorusso, G., Ruegg, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tumor+microenvironment+and+its+contribution+to+tumor+evolution+toward+metastasis.">The tumor microenvironment and its contribution to tumor evolution toward metastasis.</a> Histochemistry and Cell Biology. 130 (6), 1091-1103 (2008).</li><li>Ricklin, D., Hajishengallis, G., Yang, K., Lambris, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complement:+a+key+system+for+immune+surveillance+and+homeostasis.">Complement: a key system for immune surveillance and homeostasis.</a> Nature Immunology. 11 (9), 785-797 (2010).</li><li>Bulla, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C1q+acts+in+the+tumour+microenvironment+as+a+cancer-promoting+factor+independently+of+complement+activation.">C1q acts in the tumour microenvironment as a cancer-promoting factor independently of complement activation.</a> Nature Communications. 7, 10346 (2016).</li><li>Winslow, S., Leandersson, K., Edsjo, A., Larsson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+stromal+gene+signatures+in+breast+cancer.">Prognostic stromal gene signatures in breast cancer.</a> Breast Cancer Research. 17, 23 (2015).</li><li>Collins, M. N., Birkinshaw, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyaluronic+acid+solutions:+A+processing+method+for+efficient+chemical+modification.">Hyaluronic acid solutions: A processing method for efficient chemical modification.</a> Journal of Applied Polymer Science. 130 (1), 145-152 (2013).</li><li>Itano, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+primary+structure,+complex+turnover+regulation+and+multiple+roles+of+hyaluronan.">Simple primary structure, complex turnover regulation and multiple roles of hyaluronan.</a> Journal of Biochemistry. 144 (2), 131-137 (2008).</li><li>Agostinis, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+alternative+role+of+C1q+in+cell+migration+and+tissue+remodeling:+contribution+to+trophoblast+invasion+and+placental+development.">An alternative role of C1q in cell migration and tissue remodeling: contribution to trophoblast invasion and placental development.</a> Journal of Immunology. 185 (7), 4420-4429 (2010).</li><li>Agostinis, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complement+Protein+C1q+Binds+to+Hyaluronic+Acid+in+the+Malignant+Pleural+Mesothelioma+Microenvironment+and+Promotes+Tumor+Growth.">Complement Protein C1q Binds to Hyaluronic Acid in the Malignant Pleural Mesothelioma Microenvironment and Promotes Tumor Growth.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1559 (2017).</li><li>Bossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C1q+as+a+unique+player+in+angiogenesis+with+therapeutic+implication+in+wound+healing.">C1q as a unique player in angiogenesis with therapeutic implication in wound healing.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (11), 4209-4214 (2014).</li><li>Hosszu, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+surface+expression+and+function+of+the+macromolecular+c1+complex+on+the+surface+of+human+monocytes.">Cell surface expression and function of the macromolecular c1 complex on the surface of human monocytes.</a> Frontiers in Immunology. 3, 38 (2012).</li><li>Laurent, T. C., Fraser, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyaluronan.">Hyaluronan.</a> Journal of the Federation of American Societies for Experimental Biology. 6 (7), 2397-2404 (1992).</li><li>Gaboriaud, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+crystal+structure+of+the+globular+head+of+complement+protein+C1q+provides+a+basis+for+its+versatile+recognition+properties.">The crystal structure of the globular head of complement protein C1q provides a basis for its versatile recognition properties.</a> Journal of Biological Chemistry. 278 (47), 46974-46982 (2003).</li><li>Lam, J., Truong, N. F., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design+of+cell-matrix+interactions+in+hyaluronic+acid+hydrogel+scaffolds.">Design of cell-matrix interactions in hyaluronic acid hydrogel scaffolds.</a> Acta Biomaterialia. 10 (4), 1571-1580 (2014).</li></ol>

Vi beskriver en enkel metod för att undersöka hur komplement komponenten C1q, som interagerar med hyaluronsyra, kan modulera beteendet hos primära celler isolerade från mänskliga tumör vävnader. Både HA och C1q är rikligt närvarande i vävnaden mikromiljö både under fysiologiska och sjukdoms tillstånd, deltar i flera cell biologiska processer. Till exempel, C1q har visat sig vara närvarande i mikromiljön av moderkakan där det gynnar extravillous trofoblaster invasion av moderns decidua under placentation<...

Tumören mikromiljö (TME) påverkar cancer utveckling och progression eftersom det kan ge en tillåtande nisch för cell överlevnad, tillväxt och invasion. Identifieringen av nya nyckel aktörer i TME kan vara till nytta för upptäckten av nya molekyl ära verktyg för mål terapi. TME innehåller ett komplext och dynamiskt nätverk av icke-maligna celler, såsom endotelceller, fibroblaster och celler i immun systemet, inbäddade i den omgivande extracellulära matrix (ECM) komponenter inklusive kollagener, lamininer, fibronectiner, proteoglykaner och hyaluronans. Både tumör och icke-tumör celler syntetisera och utsöndra ECM komponenter tillsammans med cytokiner, chemokines, tillväxtfaktorer och inflammatoriska och Matrix remodeling enzymer som totalt förändrar den fysiska, kemiska och signalering egenskaper TME. Bland dessa bestånds delar, hyaluronsyra (HA) har vuxit fram för att utöva en avgörande roll i tumör bio Logi. Trots sin enkla kemiska sammansättning, HA, tillsammans med dess HA-bindande molekyler (hyaladherins), kan modulera angiogenes, immun systemet lyhördhet och ECM remodeling i en storlek och koncentrations beroende sätt1.
Komplement (C) systemet är också en del av den lokala TME, som nyligen har fått ökad uppmärksamhet. C-systemet omfattar en uppsättning lösliga och membran-bundna proteiner som deltar i den första försvars linjen mot icke-Self-celler, oönskade värd element och patogener. Funktionellt, förbinder C de två effektor armarna av medfödda och adaptiva system för att främja antingen direkt cell dödande eller montering av en inflammatorisk reaktion2. C aktivering kan undertrycka tumör tillväxt, genom att förstöra cancer celler eller hämma deras utväxt, men det har blivit allt tydligare att det kan ha en tumör-främjande verksamhet genom att upprätthålla kronisk inflammation, främja inrättandet av en immunosuppressiv miljö, inducera angiogenes och aktivera cancerrelaterade signal vägar3. I detta sammanhang, C1q, den första erkännande molekylen av den klassiska vägen av C-systemet har uppstått för att utöva viktiga funktioner i tumören mikromiljö oberoende av C aktivering4. C1q har visat sig uttryckas lokalt av en rad mänskliga maligna tumörer, där det kan gynna cancer cell adhesion, migration och proliferation utöver angiogenes och metastaser5. Intressant C1q interagerar med en viktig bestånds del i ECM som HA.
Vi utvecklade en teknik för att isolera de primära cancer cellerna från tumör massan. Dessutom skapade vi matrisen, som kan stimulera tumör mikromiljö, särskilt samspelet mellan C1q och hög molekyl vikt hyaluronsyra. C1q bunden till HA kunde inducera vidhäftning av tumör cellerna.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1447px;" width="1445">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">100&#8201;&#181;m pore filter</td>
			<td style="width:311px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:131px;">352360</td>
			<td style="width:676px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Amphotericin B solution (fungizone)</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">1397-89-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">basic FGF</td>
			<td style="width:311px;">Immunological Sciences</td>
			<td style="width:131px;">GRF-15595</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Calcium Chloride</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">C-4901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Collagenase type I</td>
			<td>Worthington Biochemical Corporation, DBA</td>
			<td style="width:131px;">MX1D12644</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">D-Glucose</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">50-99-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">DNase I&#160;</td>
			<td style="width:311px;">Roche</td>
			<td style="width:131px;">10 104 159 001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">EDTA</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">60-00-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:22px;width:330px;">EGF</td>
			<td style="width:311px;">Immunological Sciences</td>
			<td style="width:131px;">GRF-10544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:330px;">FAST DiI</td>
			<td style="width:311px;">Molecular probes, Invitrogen, Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:131px;">D7756</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fetal bovine serum</td>
			<td style="width:311px;">Gibco,&#160; Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:131px;">10270-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Fibronectin</td>
			<td style="width:311px;">Roche</td>
			<td style="width:131px;">11051407001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Flask for cell culture</td>
			<td style="width:311px;">Corning</td>
			<td style="width:131px;">430639</td>
			<td>Sterile, vented</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Gentamicin solution</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">G1397-10ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hank&#8217;s Balanced Salt Solution (HBBS)&#160;</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">H6648</td>
			<td>Supplemented with EDTA, Glucose, penicillin-streptamicin, gentamicin and fungizone</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">High molecular weight hyaluronic acid</td>
			<td style="width:311px;">Kind gift by Prof. Ivan Donati</td>
			<td style="width:131px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Human endothelial serum free medium&#160;</td>
			<td style="width:311px;">Gibco,&#160; Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:131px;">11111-044</td>
			<td>Supplemented with EGF (5&#8201;ng/mL), basic FGF (10&#8201;ng/mL), and&#160; 1% penicillin&#8211;streptomycin (Sigma-Aldrich)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Magnesium Chloride</td>
			<td style="width:311px;">Carlo Erba</td>
			<td style="width:131px;">13446-18-9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Medium 199 with Hank&#8217;s salt</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">M7653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:330px;">Penicillin-Streptomycin</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">P0781</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:330px;">Time-lapse microscopy&#160;</td>
			<td style="width:311px;">Nikon&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Imaging System BioStation IM-Q</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Titertek Multiskan ELISA Reader</td>
			<td>Flow Labs</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Trypsin</td>
			<td style="width:311px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:131px;">T4674</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

evaluation of the interplay between the complement protein c1q and hyaluronic acid in promoting cell adhesion

Det har blivit alltmer visat att tumören mikromiljö spelar en aktiv roll i neoplasi tillväxt och metastaser. Genom olika vägar, kan tumör celler effektivt rekrytera stromal, immun och endotelceller genom att utsöndra stimulatoriska faktorer, chemokiner och cytokiner. I sin tur kan dessa celler ändra signaleringsegenskaper för mikromiljön genom att frigöra tillväxt främjande signaler, metaboliter och extracellulära matrix komponenter för att upprätthålla hög spridning och metastaserande kompetens. I detta sammanhang, vi identifierar att komplement komponenten C1q, högt uttryckt lokalt av en rad mänskliga maligna tumörer, på interagerar med extracellulär matrix hyaluronsyra, påverkar starkt beteendet hos primära celler isolerade från mänsklig tumör Exemplar. Här beskriver vi en metod för att testa hur C1q bunden till hyaluronsyra (HA) påverkar tumör cellernas vidhäftning, underliggande det faktum att de biologiska egenskaperna hos viktiga komponenter i den extracellulära matrisen (i detta fall HA) kan formas av bioaktiva signaler mot tumör Progression.

HA är en negativt laddad hög molekyl vikt polysackanod, som består av upprepande (β, 1-4)-D-glukuronsyra-(β, 1-3)-N-acetyl-D-glukosamin disackarid enheter (figur 1b)7. Förekomsten av bindningen av HA på 96-brunnen plattan samt effektiviteten i dess immobilisering testades dra nytta av biotinylated HA (bio-HA). Olika koncentrationer av bio-HA, alltifrån 10 μg/mL till 1 mg/mL, återsuspenderas i 100 mM karbonat/bikarbonatbuffert...

Watch this Scientific Journal Video about Evaluation of the Interplay Between the Complement Protein C1q and Hyaluronic Acid in Promoting Cell Adhesion at JoVE.com

Evaluation of the Interplay Between the Complement Protein C1q and Hyaluronic Acid in Promoting Cell Adhesion

Komplement komponenten C1q är en Pro-inflammatorisk molekyl som uttrycks högt i den vävnads mikromiljö som kan interagera med den extracellulära matrisen. Här beskriver vi en metod för att testa hur C1q bunden till hyaluronsyra påverkar cellernas vidhäftning.

Utvärdering av samspelet mellan komplement proteinet C1q och hyaluronsyra för att främja celladhesion

It has been increasingly demonstrated that the tumor microenvironment plays an active role in neoplasia growth and metastasis. Through different pathways, ...

Ett omfattande förfarande för att utvärdera samspelet mellan komplementproteinet C1q och hyaluronsyra för att främja celladhesion. Vi har nyligen definierat att komplementkomponenten C1q en molekyl av det medfödda immunsystemet är högt uttryckt i tumör- och moderkakans mikromiljö och kan interagera med komponent i den extracellulära matrisen. I detta fall, hyaluronsyra.Vi föreslår en metod för att studera proteiners biologiska funktioner i hela den ekronomiska miljön. För att undersöka dessa molekylers förmåga att forma celldelningsegenskaperna hos extracellulära matrisfaktorer. För att studera hur denna interaktion kan kännas av de celler som finns i vävnaden i miljön, vi ställa in denna enkla metod där binära celler som härrör från mänskliga vävnader tilläts att hålla sig till C1q bunden till extracellulär matris, i detta fall hyaluronsyra.För beläggning förfarande det första steget är bindningen av hög molekylvikt hyaluronsyra till 96 väl vävnad belagda mikroplatta. För beläggning späds hyaluronsyra i 0,1 molkolbuffert PH 9,6 vid en koncentration av 15 mikrogram per milliliter. Och försiktigt pipeting är requited att uppnå en homogen lösning.En 100 mikroliter av lösningen används för att belägga brunnarna. Plattan överförs sedan vid fyra grader Celsius över natten. Nästa dag vakuum aspirate de behandlade brunnarna.Tvätta en gång med dPBS. Lägg till antingen C1q eller BSA i motsvarande brunnar. C1q är numera kommersiellt tillgänglig vid en koncentration av ett milligram per milliliter och det späds ut vid en koncentration av 25 mikrogram per milliliter.Och dPBS som innehåller 0,5%BSA och 0,7 millimoles kalcium och magnesium och divalent katjoner. BSA LPS gratis används vid koncentrationen av 0,5%och datum PBF. Plattan överförs sedan vid fyra grader Celsius över natten.C1q dos beroende interaktioner med immobiliserade hyaluronsyra bestäms av enzym länkade immun SA. Celler som etiketterar med snabb DiI. Den lipofila spårämne snabb DiI används för att märka cellerna av intresse. Celler som återanvänds i dPBS används vid koncentrationen av en miljon celler per milliliter.Fast DiI späds ut en till 100 direkt in i cellupphängningen. Cellupphängningen blandas manuellt och överförs vid 37 grader Celsius i 15 minuter. Efter fem minuters inkubering, blanda cellupphängningen och upprepa denna operation två gånger till.För att ta bort överskottet av snabb DiI, tillsätt 10 milliliter dPBS. Pivot försiktigt upp och ner och centrifug vid 250 g i sju minuter. Resuspend cell pelleten i en milliliter av mänskliga enophilical serum fria medium i närvaro av 0,1%BSA.Celler vidhäftning på hyaluronsyra C1q matriser. Vakuum aspirera dPBS från de belagda brunnarna. Fördela 100 mikroliter av märkt cellsuspension till de belagda brunnarna.200 mikroliter av märkta celler tas isär i ett ependurerör som ska användas för standardkurvagenerering. Inkubera plattan i 35 minuter vid 37 grader Celsius. Ta ut plattan från inkubatorn.Aspirera försiktigt de obalanserade cellerna. Tvätta en gång med dPBS som innehåller 0,5%BSA och 0,7 millimols kalcium och magnesium. Lys de vidhäftande cellerna genom att lägga till 200 mikroliter av lysbuffert.Samtidigt förbereda standardkurvan på en till två serieutspädning av de märkta cellerna i lysbuffert. Utför avläsningen av florescencesignalen vid oändligt F 200 T-can-instrument med hjälp av 544 nanometer som excitationsvåglängd och 590 nanometer som emissionsvåglängd. Representativa resultat.Som framgår av de representativa resultaten, är det uppenbart att celladhesion på hyaluronsyra hittade C1q som starkt förstärkt i jämförelse med HA ensam eller HA bundna BSA. Procenten av vidhäftande celler på varje matris beräknas på grundval av standardkurvan. Slutsatser. I våra experiment först av allt utvärderade vi förmågan hos komplementkomponenten C12 att binda den extracellulära matrisen i detta fall hyaluronsyra med hjälp av en arisal metall.För det andra vi analyserat förmåga mänskliga primära celler färgas med fluorescerande färgämne att fullfölja bundna hyaluronsyra. Den modell som vi föreslog i denna studie är en enklare snabbare och billigare metod i alternativ till 3D-modellen av extracellulära matrisställningar för utvärderingen på denna cellulära svar på en kombination av stimuli.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

Utarmning av specifika cellpopulationer med Komplettera Utarmning

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Measuring the 50% Haemolytic Complement (CH50) Activity of Serum

Measuring the 50% Haemolytic Complement CH50 Activity of Serum

Mätning av 50% Hemolytisk Komplement (CH 50) Aktivitet av serum

The complement system is a group of proteins that when activated lead to target cell lysis and facilitates phagocytosis through opsonisation. Individual ...

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Använda Bioluminescent Imaging för att undersöka synergi mellan Streptococcus pneumoniae Och influensa A-virus i modersmjölksersättning Möss

During the 1918 influenza virus pandemic, which killed approximately 50 million people worldwide, the majority of fatalities were not the result of ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

Introduktion Shear stress i studien av bakteriell vidhäftning

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

Monitoring Dendritic Cell Migration using 19F / 1H Magnetic Resonance Imaging

Monitoring Dendritic Cell Migration using 19F / 1H Magnetic Resonance Imaging

Övervakning dendritceller Migration hjälp<sup&gt; 19</sup&gt; F /<sup&gt; 1</sup&gt; H Magnetic Resonance Imaging

Continuous  advancements in noninvasive imaging modalities such as magnetic resonance  imaging (MRI) have greatly improved our ability to study ...

Static Adhesion Assay for the Study of Integrin Activation in T Lymphocytes

Statisk vidhäftning analys för studier av Grin Aktivering i T-lymfocyter

T lymphocyte adhesion is required for multiple T cell functions, including migration to sites of inflammation and formation of immunological synapses with ...

Assay of Adhesion Under Shear Stress for the Study of T Lymphocyte-Adhesion Molecule Interactions

Analys av vidhäftning under Shear stress för studier av T-lymfocyter-adhesionsmolekyl interaktioner

Overall, T cell adhesion is a critical component of function, contributing to the distinct processes of cellular recruitment to sites of inflammation and ...

Dissecting Multi-protein Signaling Complexes by Bimolecular Complementation Affinity Purification (BiCAP)

Dissecting Multi-protein Signaling Complexes by Bimolecular Complementation Affinity Purification BiCAP

Dissekera multi signalering proteinkomplex av Bimolecular komplettering affinitet rening (BiCAP)

The assembly of protein complexes is a central mechanism underlying the regulation of many cell signaling pathways. A major focus of biomedical research ...

Dynamic Adhesion Assay for the Functional Analysis of Anti-adhesion Therapies in Inflammatory Bowel Disease

Dynamiska vidhäftning test för funktionell analys av anti vidhäftning terapier vid inflammatorisk tarmsjukdom

Gut homing of immune cells is important for the pathogenesis of inflammatory bowel diseases (IBD). Integrin-dependent cell adhesion to addressins is a ...

Evaluation of Host-Pathogen Responses and Vaccine Efficacy in Mice

Utvärdering av värd-patogen svaren och vaccinets effekt hos möss

Vaccines are a 20th century medical marvel. They have dramatically reduced the morbidity and mortality caused by infectious diseases and contributed to a ...