Name: in vivo targeted expression of optogenetic proteins using silk/aav films
Uploaded: 2019-02-26T14:00:00
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저자 대 제이 바스 케 스, D. 카 플 란과 C. Preda 시 약 및 유용한 지도, 그리고 vivo에서 화상 진 찰에 대 한 B. 사바 티 니 및 C. 하 비의 실험실에 대 한 감사 하 고 싶습니다. 현미경 M. Ocana 지원 부분에서 신경 이미징 센터는 국립 연구소의 신경 장애의 신경 생물학 이미징 센터에 의해 가능 하 게 되었다 고 치기 (NINDS) P30 코어 센터 (NS072030)를 부여 합니다. GVR 호 가족 재단, 낸시 Lurie 마크 재단과 NIH 교부 금, NINDS R21NS093498, U01NS108177 및 W.G.R에 NINDS R35NS097284과 C.H.C.에는 NIH 박사 후 친목 F32NS101889이이 작업 지원

동물을 포함 하는 모든 실험 동물 관리 미국 NIH 관리 및 실험 동물의 사용에 대 한 가이드에 설명 된 다음 지침에 하버드 상임 위원회에 의해 승인 하는 프로토콜에 따라 수행 했다. 성인 C57BL/6 마우스 중 섹스 (나이의 6-15 주)의 모든 실험을 위해 사용 되었다.
1. 수성 실크 Fibroin을 구하십시오
<ol><li>준비 하거나 수성 실크 fibroin (5-7.5 %w / v)을 구입 합니다.</li>
</ol><p class=...

<ol>
	<li>Klapoetke, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Independent+optical+excitation+of+distinct+neural+populations.">Independent optical excitation of distinct neural populations.</a> Nature Methods. 11 (3), 338-346 (2014).</li><li>Tervo, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Designer+AAV+Variant+Permits+Efficient+Retrograde+Access+to+Projection+Neurons.">A Designer AAV Variant Permits Efficient Retrograde Access to Projection Neurons.</a> Neuron. 92 (2), 372-382 (2016).</li><li>Jackman, S. 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I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+induction+of+astrocytic+gliosis+generates+deficits+in+neuronal+inhibition.">Selective induction of astrocytic gliosis generates deficits in neuronal inhibition.</a> Nature Neuroscience. 13 (5), 584-591 (2010).</li><li>Hines, D. J., Kaplan, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+controlled+release+from+silk+fibroin+films.">Mechanisms of controlled release from silk fibroin films.</a> Biomacromolecules. 12 (3), 804-812 (2011).</li><li>Hu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+silk+material+structure+by+temperature-controlled+water+vapor+annealing.">Regulation of silk material structure by temperature-controlled water vapor annealing.</a> Biomacromolecules. 12 (5), 1686-1696 (2011).</li><li>Rockwood, D. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Materials+fabrication+from+Bombyx+mori+silk+fibroin.">Materials fabrication from Bombyx mori silk fibroin.</a> Nature Protocols. 6 (10), 1612-1631 (2011).</li><li>Yucel, T., Cebe, P., Kaplan, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vortex-induced+injectable+silk+fibroin+hydrogels.">Vortex-induced injectable silk fibroin hydrogels.</a> Biophysical Journal. 97 (7), 2044-2050 (2009).</li><li>Wang, X., Kluge, J. A., Leisk, G. G., Kaplan, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonication-induced+gelation+of+silk+fibroin+for+cell+encapsulation.">Sonication-induced gelation of silk fibroin for cell encapsulation.</a> Biomaterials. 29 (8), 1054-1064 (2008).</li><li>Lee, J., Park, S. H., Seo, I. H., Lee, K. J., Ryu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+and+repeatable+fabrication+of+high+A/R+silk+fibroin+microneedles+using+thermally-drawn+micromolds.">Rapid and repeatable fabrication of high A/R silk fibroin microneedles using thermally-drawn micromolds.</a> European Journal of Biopharmaceutics. 94, 11-19 (2015).</li></ol>

실크/optogentic 단백질의 표현 대상으로 AAV를 사용 하 여 현재 사용 중인 접근법의 한계를 극복 한다. 많은 연구에서는 성공적으로 AAV 주사를 사용 하 여 optogenetic 단백질을 표현 하기 위해, 비록 식 광 섬유의 끝에, 테이퍼 섬유의 길이 주변 지역 그리고 미소 렌즈의 보기 영역에 맞게 도전 이다. 광학 부품 및 optogenetic 식 사이의 부정합, 인해 stereotaxic 주사 신뢰할 수 있는, 수 고 많은 실험 실패. 실크...

지난 10 년간 모니터링 및 신경 활동1조작에 대 한 설계 빛에 민감한 단백질의 폭발을 생산 하고있다. 바이러스는 뇌에서 이러한 optogenetic 도구를 표현 하기 위한 탁월한 유연성을 제공 합니다. 유전자 변형 동물에 비해, 바이러스까지 쉽게 생산, 수송, 저장, 최신 optogenetic 도구 빠른 구현을 허용 하는. 식 유전자 뚜렷한 신경 인구를 대상 수 있습니다 그리고 역행 수송을 위해 고안 된 바이러스도 대상으로 신경 연결2를 기반으로 식에 사용할 수 있습니다.
바이러스는 일반적으로 시간이 많이 걸리는 및 어려운 수 stereotaxic 주사와 함께 도입 됩니다. 정확 하 게 작은 영역을 대상으로 어려울 수 있습니다, 하지만 종종 넓은 지역에 식 운전 많은 주사. 또한, 광학 장치 이후에 빛 vivo에서제공 하는 두뇌에 심은 경우는 임 플 란 트 정렬 되어야 합니다 제대로 바이러스 주입으로. 여기, 이식된 장치 실크 fibroin 영화3를 사용 하 여 주위 조직에 바이러스 성 벡터를 제공 하기 위한 쉽게 구현 하는 방법을 설명 합니다. 실크 fibroin 상용, 신경 조직에 의해 잘 용납 이며 다양 한 특성을 가진 재료를 생산 하는데 사용 될 수 있습니다. 실크 영화 microinjection 펫 같은 일반적인 실험실 장비를 사용 하 여 임 플 란 트에 적용할 수 또는 펫 손. 실크/AAV 영화 두 수술 절차에 대 한 요구를 제거 하 고 바이러스 중재 식 광학 임 플 란 트에 제대로 정렬입니다. 결과 식이 섬유, 그리고 stereotaxic 주사 보다 섬유 트랙을 따라 덜 원치 않는 식에는 결과의 끝에 제한 됩니다.
대상된 표현의 끝에 작은 섬유 생산, 뿐만 아니라 실크/AAV 영화를 광범위 하 게 사용할 수 있습니다 (> 3 m m 직경) 두개골 창 아래 피 질 식. 형광 활동 센서의 2 광자 영상 vivo에서 감각 및 인지 처리 운전에 신경 활동의 역할을 평가 하기 위한 필수적인 도구 되고있다. 그러나, 동일한 드라이브에 광범위 한 대뇌 피 질의 영역, 자주 경험 식 여러 주사를 수행 합니다. 이러한 주사 매우 시간이 오래 걸릴 수 있으며 보기의 필드에 걸쳐 일치 하지 않는 식으로 이어질 수 있습니다. 반면, 실크/AAV 코팅 두개골 윈도우는 매우 쉽게 제조, 크게 수술에 필요한 시간을 줄일 수 및 가장 눈에 띄게 표현 수백 미크론 대뇌 피 질의 표면 아래 드라이브.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Aqueous silk fibroin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>5154-20ML</td>
			<td>Aqueous Silk Fibroin (5% w/v) for making films</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microinjector to deposit silk/AAV</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>3-000-207</td>
			<td>Nanoject III nanoliter injector</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Manipulator to hold implants</td>
			<td>Narashige</td>
			<td>MM-33</td>
			<td>Micromanipulator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscope to visualize silk deposits</td>
			<td>AmScope</td>
			<td>SM-6TX-FRL</td>
			<td>3.5X-45X Trinocular articulating zoom microscope with ring light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum chamber to store implants</td>
			<td>Ablaze</td>
			<td>N/A</td>
			<td>3.5 Quart Vacuum Vac Degassing Chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optional, implant holder for storage</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To store premade optical fibers, drill a grid of ~4 mm-deep holes with a diameter just larger than the ferrule diameter into a plastic block.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical fiber</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>FT200EMT</td>
			<td>&#216;200 &#181;m Core Multimode Optical Fiber for fiber implants</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ferrules</td>
			<td>Kientec</td>
			<td>FZI-LC-230</td>
			<td>LC Zirconia Ferrule for fiber implants</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Various materials for manufacturing chronic fiber implants</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For detailed procedure, see Ung K, Arenkiel BR. Fiber-optic implantation for chronic optogenetic stimulation of brain tissue. Journal of visualized experiments: JoVE. 2012(68).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tapered fiber implants</td>
			<td>Optogenix</td>
			<td>Lambda-B</td>
			<td>Tapered fiber implants</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GRIN lenses</td>
			<td>GoFoton</td>
			<td>CLH-100-WD002-002-SSI-GF3</td>
			<td>GRIN lenses</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small glass cranial windows</td>
			<td>Warner</td>
			<td>64-0726 (CS-3R-0)</td>
			<td>Small round cover glass, #0 thickness</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large glass cranial windows</td>
			<td>Warner</td>
			<td>64-0731 (CS-5R-0)</td>
			<td>Small round cover glass, #0 thickness</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Various materials for manufacturing cranial windows</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For detailed procedure, see Goldey GJ et al. Removable cranial windows for long-term imaging in awake mice. Nature protocols. 2014 Nov;9(11):2515.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo targeted expression of optogenetic proteins using silk/aav films

드라이브 동작 출력 하기 위해서는 프로세스 정보를 크게 조작 하 고 신경 비보의 활동을 모니터링에 대 한 최근 개발 된 광학 방법으로 지원 되었습니다 어떻게 신경 회로 이해 하는 탐구. 두 가지 주요 구성 요소에 의존 하는 이러한 유형의 실험: 두뇌에 광 액세스를 제공 하는 1) 이식 장치 및 신경 흥분을 변경 또는 신경 활동의 판독을 제공 하는 2) 빛에 민감한 단백질. 빛에 민감한 단백질을 표현 하는 방법의 수 있지만 바이러스 성 벡터의 stereotaxic 주입은 현재 가장 유연한 접근 식 유전, 해부학, 그리고 시간적 정밀도로 제어할 수 있기 때문에. 바이러스 성 벡터의 위대한 유틸리티에 불구 하 고 제공 하는 바이러스 광학 임 플 란 트 포즈의 사이트에 수많은 도전을. Stereotaxic 바이러스 주사는 수술 수술 시간을 증가, 연구, 비용 증가 및 동물의 건강에 위험이 포즈를 요구 하 고 있다. 주입 주사기와 높은 titer 바이러스의 bolus의 갑작스러운 납품으로 인 한 면역성 염증 주변 조직은 물리적으로 손상 될 수 있습니다. 작은 영역을 대상으로 주사 광학 임 플 란 트를 정렬 하는 것은 특히 어려운 뇌에 깊은. 이러한 과제를 극복 하기 위해 여러 유형의 영화 실크 fibroin 및 Adeno 관련 바이러스 (AAV) 벡터의 구성된으로 광학 임 플 란 트를 코팅 하는 방법을 설명 합니다. Fibroin, 누에나방, 누에고치에서 파생 된 폴리머 캡슐화 할 수 있습니다 및 생체를 보호 하 고 수용 성 필름에서 도자기까지 양식에 처리할 수 있습니다. 뇌에 이식, 실크/AAV 코팅 식이 필요한 곳에 정확 하 게 운전 하는 광학 요소와 주변 뇌 사이의 인터페이스에서 바이러스를 해제 합니다. 이 메서드는 쉽게 구현 되며 크게 신경 회로 기능 vivo에서 연구를 촉진 하는 약속.

평가 식에서 실크/AAV 영화의 성공, 우리 끼얹는다 동물 이식 후 2-3 주 하 고 관심의 영역에서 두뇌 분할 영역을 준비. Fluorophore 태그 optogenetic 단백질 (YFP ChR2)의 형광 이미지 (그림 1D) 표현의 넓이의 측정을 제공합니다. 일반적인 광학 섬유 (230 µ m 직경) 쉽게 200을 수용할 수 있는 실크/AAV의 nL. 연습, 경험 이식된 섬유 (그림 5)의 신...

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In Vivo Targeted Expression of Optogenetic Proteins Using Silk/AAV Films

Vivo에서 실크/AAV 영화를 사용 하 여 Optogenetic 단백질의 표적으로 표현

여기, 우리는 바이러스 성 식 벡터 실크 fibroin 영화를 사용 하 여 뇌에 전달 하는 방법을 제시. 이 메서드는 식 벡터 실크/AAV 코팅된 광섬유, 광섬유 테이퍼 및 두개골 창 사용의 대상된 배달 수 있습니다.

The quest to understand how neural circuits process information in order to drive behavioral output has been greatly aided by recently-developed optical ...

이 방법은 시스템 신경 과학 분야의 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 신경 앙상블의 활동이 뇌의 감각 및 인지 처리를 지원하는 방법과 같은. 이 기술의 주요 장점은 별도의 바이러스 주입 절차를 요구하지 않고, 관심의 뇌 영역에 찬 rhodopsin 및 GCaMP 같은 광유전학 적 단백질의 정확한 타겟팅을 용이하게한다는 것입니다.이 방법의 시각적 데모는 실크와 바이러스를 작은 광학 임플란트에 증착하는 것이 재현 가능한 결과를 달성하기 위해 몇 가지 연습을 할 수 있기 때문에 중요합니다. 먼저, 200 마이크로리터 PCR 튜브에서 AAV와 5~7%의 수성 실크 섬유신을 1대 1 비율로 혼합한다. 부드럽게 철저하게 AAV와 섬유를 혼합하기 위해 여러 번 용액을 피펫.실크/AAV를 증착하려면 파이펫 막힘으로 인한 손실을 수용하기 위해 섬유 임플란트 수에 필요한 용액의 양을 주입 파이펫으로 적재합니다. 다음으로, 마이크로인젝터가 장착된 스테레오탁스 장치에 ferrule 홀더를 장착합니다. 페룰 홀더를 마이크로인젝터 위에 놓고 아래에서 실크/AAV 혼합물을 적용합니다.분사 파이펫이 광섬유 표면의 중심을 만지거나 거의 닿을 때까지 기동하고 실크/AAV 용액의 10~20나노리터를 배출합니다. 그런 다음 파이펫을 철회합니다. 다음으로, 약 1 분 이내에 평평한 필름에 건조 액체 돔으로 나타나는 평평한 표면에 실크 / AAV의 볼러스를 관찰한다.원하는 양의 실크/AAV가 증착될 때까지 이전 단계를 반복합니다. 여러 개의 임플란트를 준비할 때 실크/AAV 용액을 한 임플란트에 적용한 다음 다른 임플란트를 코팅한 다음 첫 번째 임플란트로 돌아갑니다. 1시간 동안 건조한 후 전체 페룰 홀더를 진공 챔버에 넣고 밤새 약 125도, 섭씨 4도에 진공 데리케이트를 진공 데리케이트에 넣습니다.다음 날, 고출력 현미경으로 생성된 실크 필름의 모양과 위치를 평가한다. 필름이 광학 섬유 표면의 끝에 국한되어 있는지, 상대적으로 얇고 대칭적이지 확인합니다. 테이퍼 광섬유 코팅의 경우, 테이퍼의 시작 부분에 광학 섬유의 측면에 실크 / AAV 사출 파이펫을 배치하여 파이펫이 광섬유에 닿는지 확인합니다.실크/AAV의 20나노리터를 배출하여 코팅 공정을 시작하여 액적이 광섬유에 부착되어 섬유및 파이펫의 인터페이스에 남아 있는지 확인합니다. 실크/AAV가 건조할 때 액적을 섬유 팁 의 끝쪽으로 부드럽게 심고, 파이펫 팁을 막히지 않도록 건조 물방울과 접촉하여 사출 파이펫을 유지합니다. 첫 번째 볼루스가 거의 완전히 건조되면 다른 20 나노 리터를 꺼내 테이퍼를 따라 물방울을 계속 사수하십시오.소량의 실크/AAV를 배출하고 용액을 테이퍼 의 측면까지 점진적으로 건조시킴으로써 이전 단계를 반복하십시오. 건조 후, 고출력 현미경으로 생성된 실크 필름의 모양과 위치를 평가한다. GRIN 렌즈 임플란트코팅의 경우, GRIN 렌즈 임플란트에 단 하나의 주사로 실크/AAV를 증착하십시오.건조 후, 필름이 렌즈의 표면을 커버할 수 있도록 고출력 현미경으로 생성된 실크 필름의 모양과 위치를 평가한다. 유리 두개골 창을 코팅하기 위해 실크/AAV 5마이크로리터 액정을 3mm 원형 커버 슬립 표면에 손으로 피펫하여 액적이 유리 표면 전체를 덮습니다. 건조 후, 장치를 이식하기 전에 냉각 된 진공 건조기125 및 섭씨 4도에 실크 / AAV 코팅 광섬유를 보관하십시오.형광소 태그가 붙은 광유전학 단백질의 형광 이미지는 실크/AAV 필름의 발현 정도의 척도를 제공했으며, 전형적인 광섬유는 실크/AAV의 200나노리터를 쉽게 수용할 수 있다. 실험을 통해 이식된 섬유의 끝 부분에 대해 매우 신뢰할 수 있는 발현을 달성할 수 있습니다. 코팅 된 두개골 창의 두 가지 가능한 문제는 표현이 충분하지 않으며 녹지 않는 실크 필름이 시야를 모호하게합니다.발현을 증가시키기 위해, 동절제술은 창을 이식하기 전에 수행될 수 있고, 및/또는 필름에 바이러스의 양을 증가시킬 수 있다. 실크와 스톡 티터 AAV의 1~4개의 혼합물을 사용하여 최상의 표현을 달성했습니다. 코팅된 창문의 실크의 양은 섬유 임플란트보다 10~100배 더 많으며, 필름은 조직에 덜 내장되어 있어 실크 필름을 용해시킬 수 있는 동일한 수준의 프로테오리틱 활동에 노출되지 않을 수 있다.그러나, 일부 실크의 존재는 창 아래 표정을 달성 하는 데 필수적 이다, 바이러스 혼자 만든 필름 수술 하는 동안 중간 액체에 의해 씻겨 있기 때문에 가능성이. 이 절차를 시도하는 동안 실크 코팅 임플란트를 우리가 설명하는 방식으로 준비하고 저장하는 것이 중요합니다. 부적절한 보관은 실크 필름의 특성을 변경하거나 바이러스 성 발현 벡터의 효능을 감소시킬 수 있습니다.이 기술은 신경 활동이 마우스, 쥐, 또는 비인간 영장류와 같은 포유동물의 두뇌에 있는 감각 및 인식 처리를 어떻게 유도하는지 탐구하는 시스템 신경 과학의 필드에 있는 연구원을 위한 중대한 유용할 수 있습니다. 바이러스 성 발현 벡터로 작업하는 것은 장갑, 고글 및 실험실 코트와 같은 위험하고 개인 보호 장비가 될 수 있다는 것을 잊지 마십시오.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In Vivo Targeted Expression of Optogenetic Proteins Using Silk/AAV Films

Selective Viral Transduction of Adult-born Olfactory Neurons for Chronic in vivo Optogenetic Stimulation

Selective Viral Transduction of Adult-born Olfactory Neurons for Chronic in vivo Optogenetic Stimulation

만성에 대한 성인 태어나 강한 뉴런의 선택 바이러스성 전달 생체내에 Optogenetic의 자극

Local interneurons are continuously regenerated in the olfactory bulb of adult rodents1-3. In this process, called adult neurogenesis, neural stem cells ...

연구

신경과학

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

역행 형광 라벨이 확인 된 신경 세포의 표적 세포 외 단일 단위 기록을 허용<em&gt; 생체 내</em

The overall goal of this method is to record single-unit responses from an identified population of neurons. In vivo electrophysiological recordings from ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

초음파 혈액 - 뇌 장벽 파괴 및 망간 향상된 MRI를 사용하여 기능성 Neuroimaging

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Optogenetic Activation of Zebrafish Somatosensory Neurons using ChEF-tdTomato

요리사 tdTomato를 사용하여 Zebrafish Somatosensory의 뉴런의 Optogenetic 활성화

Larval  zebrafish are emerging as a model for describing the development and function  of simple neural circuits. Due to their  external fertilization, ...

Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster

Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster

의 이스케이프 문제의 Optogenetic의 자극<em&gt; Drosophila melanogaster</em

A  growing number of genetically encoded tools are becoming available that allow non-invasive  manipulation of the neural activity of specific neurons in ...

A Method for High Fidelity Optogenetic Control of Individual Pyramidal Neurons In vivo

A Method for High Fidelity Optogenetic Control of Individual Pyramidal Neurons In vivo

개별 피라미드 뉴런의 고 충실도 Optogenetic 제어하는​​ 방법<em&gt; 생체 내</em

Optogenetic methods  have emerged as a powerful tool for elucidating neural circuit activity  underlying a diverse set of behaviors across a broad range ...

In vivo Optogenetic Stimulation of the Rodent Central Nervous System

In vivo Optogenetic Stimulation of the Rodent Central Nervous System

설치류 중추 신경계의 생체 Optogenetic 자극

The ability to probe defined neural circuits in awake, freely-moving animals with cell-type specificity, spatial precision, and high temporal resolution ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

동시<em&gt; 생체</em두 망막의&gt; 기능 테스트로<em&gt; 생체</em&gt; 전위도 시스템

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...

Ex Vivo Optogenetic Dissection of Fear Circuits in Brain Slices

Ex Vivo Optogenetic Dissection of Fear Circuits in Brain Slices

뇌 조각의 공포 회로의 예 생체 Optogenetic 해부

Optogenetic approaches are now widely used to study the function of neural populations and circuits by combining targeted expression of light-activated ...

Determining Cell-surface Expression and Endocytic Rate of Proteins in Primary Astrocyte Cultures Using Biotinylation

Biotinylation을 사용하여 기본 Astrocyte 문화에서 단백질의 세포 표면 표현 및 Endocytic 속도를 결정

Cell-surface proteins mediate a wide array of functions. In many cases, their activity is regulated by endocytic processes that modulate their levels at ...