Name: diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5
Uploaded: 2019-04-26T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

ويشكر المؤلفون وييبينغ تانغ علي مساعدته الكبيرة في توفير مختبر التصوير. وهذه المادة مدعومة ببحوث الرفاه العام ، ووردت أموال خاصه من الصحة الوطنية وتنظيم الاسره في الصين (المنحة رقم 201402007).

تمت الموافقة علي هذا البروتوكول من قبل مجلس أخلاقيات البحوث في مستشفي الاتحاد بجامعه هوازهونغ للعلوم والتكنولوجيا.
1. خزعة شفط المستقيم
<ol><li>اجراء خزعة شفط المستقيم من قبل جراح الأطفال المدربين تدريبا جيدا ومساعد باستخدام Rbi2 شفط المستقيم خزعة النظام بعد الحصول علي موافقه ...

<ol>
	<li>Tam, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hirschsprung's+disease:+A+bridge+for+science+and+surgery.">Hirschsprung's disease: A bridge for science and surgery.</a> Journal of Pediatric Surgery. 51 (1), 18-22 (2016).</li><li>Heanue, T. A., Pachnis, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enteric+nervous+system+development+and+Hirschsprung's+disease:+advances+in+genetic+and+stem+cell+studies.">Enteric nervous system development and Hirschsprung's disease: advances in genetic and stem cell studies.</a> Nature Reviews Neuroscience. 8 (6), 466-479 (2007).</li><li>Setiadi, J. A., Dwihantoro, A., Iskandar, K., Heriyanto, D. S., Gunadi, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+the+hematoxylin+and+eosin+staining+in+patients+with+suspected+Hirschsprung+disease.">The utility of the hematoxylin and eosin staining in patients with suspected Hirschsprung disease.</a> BMC Surgery. 17 (1), 71 (2017).</li><li>Agrawal, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+histochemistry+(AChE)+-+A+helpful+technique+in+the+diagnosis+and+in+aiding+the+operative+procedures+of+Hirschsprung+disease.">Acetylcholinesterase histochemistry (AChE) - A helpful technique in the diagnosis and in aiding the operative procedures of Hirschsprung disease.</a> Diagnostic Pathology. 10 (1), 208 (2015).</li><li>Kacar, A., Arikok, A. T., Azili, M. N., Ekberli Agirbas, G., Tiryaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry+in+Hirschsprung's+disease:+An+adjunct+to+formalin-based+diagnosis.">Calretinin immunohistochemistry in Hirschsprung's disease: An adjunct to formalin-based diagnosis.</a> The Turkish Journal of Gastroenterology. 23 (3), 226-233 (2012).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S100+and+protein+gene+product+9.5+immunostaining+of+rectal+suction+biopsies+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung'+disease.">S100 and protein gene product 9.5 immunostaining of rectal suction biopsies in the diagnosis of Hirschsprung' disease.</a> American Journal of Translational Research. 8 (7), 3159 (2016).</li><li>Takawira, C., D'Agostini, S., Shenouda, S., Persad, R., Sergi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+procedures+update+on+Hirschsprung+disease.">Laboratory procedures update on Hirschsprung disease.</a> Journal of Pediatric Gastroenterology &amp; Nutrition. 60 (5), 598 (2015).</li><li>Meier-Ruge, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+activity+in+suction+biopsies+of+the+rectum+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Acetylcholinesterase activity in suction biopsies of the rectum in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pediatric Surgery. 7 (1), 11-17 (1972).</li><li>Barshack, I., Fridman, E., Goldberg, I., Chowers, Y., Kopolovic, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+loss+of+calretinin+expression+indicates+aganglionosis+in+Hirschsprung's+disease.">The loss of calretinin expression indicates aganglionosis in Hirschsprung's disease.</a> Journal of Clinical Pathology. 57 (7), 712-716 (2004).</li><li>Kapur, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+We+Stop+Looking?+Immunohistochemistry+and+the+Diagnosis+of+Hirschsprung+Disease.">Can We Stop Looking? Immunohistochemistry and the Diagnosis of Hirschsprung Disease.</a> American Journal of Clinical Pathology. 126 (1), 9-12 (2006).</li><li>Guinardsamuel, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry:+a+simple+and+efficient+tool+to+diagnose+Hirschsprung+disease.">Calretinin immunohistochemistry: a simple and efficient tool to diagnose Hirschsprung disease.</a> Modern Pathology. 22 (10), 1379-1384 (2009).</li><li>Robey, S. S., Kuhajda, F. P., Yardley, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoperoxidase+stains+of+ganglion+cells+and+abnormal+mucosal+nerve+proliferations+in+Hirschsprung's+disease.">Immunoperoxidase stains of ganglion cells and abnormal mucosal nerve proliferations in Hirschsprung's disease.</a> Human Pathology. 19 (4), 432-437 (1988).</li><li>Monforte-Mu&#241;oz, H., Gonzalez-Gomez, I., Rowland, J. M., Landing, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+submucosal+nerve+trunk+caliber+in+aganglionosis:+a+&amp;#34;positive&amp;#34;+and+objective+finding+in+suction+biopsies+and+segmental+resections+in+Hirschsprung's+disease.">Increased submucosal nerve trunk caliber in aganglionosis: a &amp;#34;positive&amp;#34; and objective finding in suction biopsies and segmental resections in Hirschsprung's disease.</a> Archives of Pathology &amp; Laboratory Medicine. 122 (8), 721-725 (1998).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Sams, V. R., Bobrow, L. G., Happerfield, L., Keeling, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+PGP9.5+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Evaluation of PGP9.5 in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pathology. 168 (1), 55 (1992).</li><li>Huang, Y., Anupama, B., Zheng, S., Xiao, X., Chen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+of+enteric+nerve+markers+and+nerve+innervation+in+total+colonic+aganglionosis.">The expression of enteric nerve markers and nerve innervation in total colonic aganglionosis.</a> International Journal of Surgical Pathology. 19 (3), 303 (2011).</li></ol>

هنا وصفنا اجراء باستخدام ثلاثه أجسام مضاده مناعي مختلفه لوصمه عار أقسام RBS لتشخيص هد. وكانت حساسية بروتوكول التشخيص لدينا 96.49 ٪ (95 ٪ CI ، 0.88-0.99) ، وكانت الخصوصية 100 ٪ (95 ٪ CI ، 0.97-1.00).
الخطوات الأكثر اهميه في البروتوكول هي RSB ورد فعل مستضد الأجسام المضادة. يحدد حجم الخزعة دقه التلطيخ...

مرض هيرشسبرونغ (HD) هو اضطراب الأمعاء المعوية الخلقية الشائعة التي تتميز بعدم وجود خلايا العقدة في أجزاء مختلفه من الأمعاء البعيدة1. يتم تشكيل الجهاز العصبي المعوي البشري عندما يتم الانتهاء من غزو الخلايا العصبية الجنينية. إذا كان هناك اضطراب في العملية وفشل الغزو لإكمال ، والأمعاء البعيدة من الوليد يصبح عقد2. وتسمي هذه الحالة المميتة المحتملة بمرض هيرشسبرونغ. ان الانتشار والحركية ونمو الأمعاء هي المكونات الثلاثة الرئيسية للاستعمار الناجح.
التقليدية الهيسوكسيلين و ايوسين (H & E) تلطيخ من خزعة تحت المخاطية محدوده لا يمكن ان تصل إلى مرضيه من نتيجة كما H & E تلطيخ من نسيج كامل السماكة التي تم الحصول عليها من الجراحة. بالاضافه إلى ذلك ، استيل (وجع) تلطيخ انسجه شفط المستقيم من الصعب نظريا نظرا لحساسيته غير كافيه ، وهو 91 ٪ ، ومعالجه معقده من الأقسام المجمدة3،4. عده علامات مناعي أخرى من الخلايا العقديه وألياف العصبية التي يمكن ان تكون ملطخه في formalin-الثابتة والعينات المضمنة البارافين تصبح تدريجيا التشخيص هد السائد. كالريتينين هو بروتين ملزم بفيتامين د يعتمد علي الكالسيوم ولا يتم التعبير عنه في الضفيرة المعوية وشبه المخاطية للأجزاء المصابة بالدقة العالية5. يتم التعبير عن البروتين S100 في الخلايا المستمدة من القمه العصبية ، مثل ألياف العصبية والخلايا الدليج ، والتي غالبا ما تقدم تضخم العصبية في الانسجه تحت المخاطية من الشرائح HD المتضررة6. بروتين الجينات المنتج 9.5 (PGP 9.5) البقع بشكل موثوق ألياف العصبية والخلايا العقديه. PGP 9.5 تلطيخ بمثابه تكمله لتلطيخ كالريتينين ، وخصوصا في حالات معزولة هيبوجانجيوسيس. تلطيخ مزدوجة مع S100 و PGP 9.5 يمكن ان تقلل من معدل كاذبه سالبه وزيادة الحساسية. وكشرط أساسي ، تهدف الدراسة الحالية إلى ضمان الخصوصية الكافية والحساسية العالية لهذه الطريقة التشخيصية الجديدة. استخدم بروتوكولنا الجديد جميع العلامات الثلاثة للتمييز بين الأمعاء الغليظة وألياف العصبية المفرطة. وقد اجري مختبرنا دراسة مرتقبه ل318 طفلا ونشرت سابقا بدون بروتوكول مفصل7. يتم مناقشه البروتوكول المفصل والاحتياطات في هذه المقالة. اي الولدان الذين يعانون من مشكله التغوط الشديد منذ الولادة أو الأطفال المصابين بالإمساك المزمن باستثناء الامراض الشائعة الأخرى هي المرشحين المحتملين لخزعة شفط المستقيم (RSB). لدينا بروتوكول رواية مناسبه لتلطيخ ليس فقط RSBs ولكن أيضا كامل سمك الخزعات أو العينات الجراحية لاجراء التشخيص النهائي.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>calretinin antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MAB-0716 170416405c</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S-100 antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>Kit-0007</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGP9.5 antibody</td>
			<td>Shanghai long island antibody Co. Ltd</td>
			<td>R-0457-03</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enhancer reagent</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-A 170416405a</td>
			<td>antibody: secondary antibody A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Rabbit/Mouse IgG Secondary Antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-B</td>
			<td>antibody: secondary antibody B</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB staining kit (containing reagent A B and C)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>DAB-0031</td>
			<td>staining kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat incubator</td>
			<td>Shanghai yiheng instrument Co. Ltd</td>
			<td>DHP-9082</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rbi2 suction rectal biopsy system</td>
			<td>Aus Systems Pty Ltd, South Australia, Australia</td>
			<td>CP1200 HP1000 SS1000</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>leica RM2016</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>citric acid sodium citrate buffer(100X)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MVS-0101</td>
			<td>antigen retrieval buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pathological tissue dehydrator</td>
			<td>wuhan junjie electronic Co. Ltd</td>
			<td>JT-12F</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5

مرض هيرشسبرونغ (HD) هو مرض معوي خلقي يتجلى سريريا كعدم قدره علي اجتياز المينيوم عند الرضع أو كامساك طويل الأجل عند الأطفال. خزعة شفط المستقيم (RSB) لتحديد عدم وجود خلايا العقدة وتضخم العصبية هو الاختبار الأكثر دقه لتشخيص HD في الوقت الحاضر. تلطيخ الهييوكسيلين التقليدية-ايوسين يفتقر إلى الحساسية والخصوصية. لا يمكن استخدامها علي نطاق واسع لتلطيخ استيل بسبب عمليه معقده. لدينا بروتوكول رواية من المناعي لكالريتينين ، S100 البروتين ، والبروتين الجينات المنتج 9.5 (PGP 9.5) ، والتي أجريناها علي RSBs ، معارض عاليه الحساسية ومعدلات الخصوصية من 96.49 ٪ (95 ٪ فاصل الثقة ، 0.88-0.99) و 100 ٪ (95 ٪ الثقة الفاصل الزمني ، 0.97-1.00) ، علي التوالي. الشرائح HD المتضررة غالبا ما تكون موجودة كغياب للتعبير عن كالريتينين, S100 البروتين, و PGP 9.5, وهي علامات لتضخم العصبية في الانسجه تحت المخاطية. يصف هذا البروتوكول عمليه التشغيل التفصيلية لطريقه التشخيص الجديدة هذه.

في المجموع ، 318 المرضي المسجلين في دراستنا. خضع كل من المرضي RSB ، وكانت ملطخه الانسجه لكالريتينين ، S100 ، و PGP 9.5. وكان التشخيص علي أساس بروتوكول روايتنا HD في الحالات 97 ، غير HD في 213 الحالات ، ويشتبه HD في 8 حالات. ومن بين المرضي الجراحيين 132 ، تم تشخيص 99 المرضي مع هد عن طريق تحصين ا...

Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5

يصف هذا البروتوكول عمليه الخزعات شفط المستقيم المناعي لكالريتينين ، S100 البروتين ، والبروتين المنتج الجينات 9.5. هذه الطريقة التشخيصية المساعد الرواية لمرض هيرشسبرونغ لديها حساسية المفضلة ومعدلات الخصوصية.

تشخيص مرض هيرشسبرونغ من خلال الخزعات شفط المستقيم المناعي لكالريتينين ، S100 البروتين والبروتين الجينات المنتج 9.5

Hirschsprung&#39;s disease (HD) is a congenital intestinal disease that is clinically manifested as an inability to pass meconium in infants or as ...

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة في تشخيص مرض هيرشسبرونغ. الأسلوب والوظائف لهذه التقنية، إذا كنت تتبع بروتوكول، يعرض حساسية عالية ومعدلات التحديد التي عملية في نفس الوقت. إثبات الإجراء سيكون (ميجينغ فانغ) ، فني من مختبريتبدأ عن طريق تحديد الخزعات شفط المستقيم في خمسة أضعاف حجم الأنسجة في 4٪ شبهformaldehyde لمدة ست ساعات في درجة حرارة الغرفة. يجفف الأنسجة الثابتة في مجفف الأنسجة المرضية لمدة 11 ساعة وتضمين أنسجة خزعة شفط المستقيم المعالجة في كتل البارافين. تقليم كتل على microtome حتى يتعرض لها جزء كامل من مستوى الأنسجة.ثم استخدام microtome للحصول على 0.4 ميكرومتر أقسام من الأنسجة المضمنة. وضع في 45 إلى 50 درجة مئوية المياه للسماح المقاطع لتنتشر في خطة مسطحة. نقل المقاطع بالارض على الشرائح الزجاجية وخبز لهم في فرن درجة مئوية 60 لمدة ثلاث إلى خمس ساعات.ضع الشرائح منزوعة الوبافينيف إلى تغييرين لمدة 15 دقيقة من الزيلين متبوعين برطوبة في غمرات الإيثانول المتتابعة لمدة خمس دقائق. ثم شطف الشرائح في المياه النقية التناضح العكسي لمدة خمس دقائق إضافية. لاسترجاع المستضد، ضع الشرائح في جرة كوبلين تلطيخ من حل استرجاع ووضع جرة في حمام محمّد من الماء المغلي.بعد 20 دقيقة، والسماح للجرة لتبرد إلى درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق وشطف بلطف الشرائح مع برنامج تلفزيوني. ثم استخدام علامة مبيدة للماء لتطويق كل قسم الأنسجة ووضع الشرائح في مربع الرطب. لمنع أي بيروكسيدات، إضافة اثنين أو ثلاثة قطرات من 3٪ محلول بيروكسيد الهيدروجين على كل الأنسجة ووضع الشرائح في 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة.في نهاية الحضانة، شطف الشرائح مع ثلاثة خمس دقائق PBS يغسل تليها عرقلة مع 5٪ البوم مصل البقر لمدة 20 دقيقة في 37 درجة مئوية. المقبل، والتخلص من الألبومين مصل البقر الزائد وتسمية الخلايا مع 50 ميكرولترات من الأجسام المضادة الأولية من الفائدة في 4 درجات مئوية بين عشية وضحاها. في صباح اليوم التالي ، شطف الشرائح مع ثلاث غسلات لمدة ثلاث دقائق في برنامج تلفزيوني وإضافة 50 ميكرولترات من محسن البوليمر إلى كل شريحة.بعد 20 دقيقة في 37 درجة مئوية، وغسل الشرائح ثلاث مرات في برنامج تلفزيوني وإضافة 50 ميكرولترات من الأجسام المضادة الثانوية B إلى كل قسم الأنسجة. بعد 30 دقيقة في 37 درجة مئوية، شطف المقاطع مع ثلاثة يغسل لمدة خمس دقائق في برنامج تلفزيوني وإضافة قطرة من حل العمل DAB الطازجة المعدة لكل شريحة. عندما يتم الكشف عن المستوى المناسب من تلطيخ البني عن طريق المجهر الخفيفة، شطف الشرائح في برنامج تلفزيوني لمدة خمس دقائق ووصمة عار مضادة للنيات مع قطرة واحدة من الهماوكسيلين لمدة دقيقة واحدة.إزالة وصمة عار الزائدة تحت عدد قليل من الماء لمدة 30 إلى 40 ثانية تقريبا تليها غسل 25 إلى 30 ثانية في برنامج تلفزيوني جديد. التفريق بين الأنسجة في 1٪ من حمض الهيدروكلوريك الإيثانول لمدة 10 ثوان تليها غسل برنامج تلفزيوني لمدة دقيقة واحدة. قم بتجفيف الشرائح مع الانغماس لمدة خمس دقائق في الترتيب العكسي للترطيب وتعريض الشرائح لتغييرين لمدة خمس دقائق من الزيلين.ثم قم بتركيب زلة الغطاء باستخدام التركيبة فائقة التنظيف وتسمح للشرائح بالجفاف قبل التصور على المجهر الخفيف. في هذه الدراسة التمثيلية لـ 318 مريضًا من مرضى خزعة القسم المستقيمي ، تم تشخيص 99 مريضًا في البداية عن طريق خزعة قسم المستقيم. وقد لوحظ العديد من خلايا العقدة التي تعبر عن كالريتينين في خزعات الأنسجة العادية.ومع ذلك، لم يتم الكشف عن خلايا العقد في أي منطقة من الأنسجة من شرائح المرض هيرشسبرونغ. S-100 وPGP9.5 كشفت مناعة جذوع الأعصاب المتضخمة في submucosa من الأنسجة المريضة مع تلطيخ الحبيبية فقط من بعض الأغصان العصبية الصغيرة لوحظ في الأمعاء العادية. أثناء محاولة هذا الإجراء، من المهم أن نتذكر أن تولي اهتماما لتفاصيل مثل حجم الخزعات شفط المستقيم وسمك المقاطع.بعد أن يتم إلغاء تجزئة هذا الأسلوب ، فإن هذه التقنية تمهد الطريق لإجراء أبحاث في مجال جراحة الأطفال لدعم تشخيص مرض هيرشسبرونغ.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Selection of Aptamers for Amyloid &beta;-Protein, the Causative Agent of Alzheimer&#39;s Disease

Selection of Aptamers for Amyloid ÃƒÅ½Ã‚Â²-Protein, the Causative Agent of Alzheimer's Disease

اختيار الأبتامرات للبروتين اميلويد - β ، والمسبب لمرض الزهايمر

Alzheimer's disease (AD) is a progressive, age-dependent, neurodegenerative disorder with an insidious course that renders its presymptomatic diagnosis ...

Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication

الحبل الشوكي الكهربية ثانيا : خارج الخلية التصنيع الكهربائي شفط

Development of neural circuitries and locomotion can be studied using neonatal rodent spinal cord central pattern generator (CPG) behavior. We demonstrate ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

كشف عن نقص الأكسجة Microregional في اللحاء المخي الفأر بواسطة التصوير ثنائي الفوتون من الإسفار NADH الذاتية

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Sequential Photo-bleaching to Delineate Single Schwann Cells at the Neuromuscular Junction

صور متتابعة تبيض لتحديد خلايا شوان واحدة عند تقاطع الاعصاب

Sequential photo-bleaching provides a non-invasive way to label individual SCs at the NMJ. The NMJ is the largest synapse of the mammalian nervous system ...

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange ABE

الكشف عن بروتين Palmitoylation في الخلايا العصبية قرن آمون بواسطة مثقف مناعي والبورصات الأسيل، البيوتين (آبي)

Palmitoylation is a post-translational lipid  modification involving the attachment of a 16-carbon saturated fatty acid,  palmitate, to cysteine residues ...

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

الكشف عن<em&gt; في الموقع</em&gt; مجمعات البروتين البروتين في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; اليرقية الموصل العصبي العضلي عن طريق القرب ربط الفحص

Discs large (Dlg) is a conserved member of the membrane-associated guanylate kinase family, and serves as a major scaffolding protein at the larval ...

The Neuromuscular Junction: Measuring Synapse Size, Fragmentation and Changes in Synaptic Protein Density Using Confocal Fluorescence Microscopy

على الموصل العصبي العضلي: قياس المشبك الحجم، التغييرات تجزئة ومتشابك الكثافة البروتين عن طريق متحد البؤر مضان المجهر

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. ...

Immunostaining of Biocytin-filled and Processed Sections for Neurochemical Markers

المناعية الأقسام مملوءة Biocytin والمجهزة لالكيميائية العصبية علامات

Electrophysiological recordings of cells using the patch clamp technique have allowed for the identification of different neuronal types based on firing ...

Bioluminescence Imaging of Neuroinflammation in Transgenic Mice After Peripheral Inoculation of Alpha-Synuclein Fibrils

التصوير تلألؤ بيولوجي من Neuroinflammation في الفئران المعدلة وراثيا بعد الطرفية تلقيح ألفا Synuclein الألياف

To study the prion-like behavior of misfolded alpha-synuclein, mouse models are needed that allow fast and simple transmission of alpha-synuclein ...

Live Images of GLUT4 Protein Trafficking in Mouse Primary Hypothalamic Neurons Using Deconvolution Microscopy

صور حية من GLUT4 البروتين الاتجار بالماوس الخلايا العصبية طائي الأولية باستخدام الفحص المجهري Deconvolution

Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is a global health crisis which is characterized by insulin signaling impairment and chronic inflammation in peripheral ...