Name: diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5
Uploaded: 2019-04-26T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

Forfatterne takker Weibing tang for hans store hjælp med at levere optagelserne Lab. Denne artikel er støttet af den offentlige Velfærdsforskning, og særlige midler blev modtaget fra den nationale sundhed og familieplanlægning i Kina (Grant No. 201402007).

Denne protokol blev godkendt af Forskningsetiske nævn på EU-hospitalet på Huazhong University of Science and Technology.
1. rektal suge biopsi
<ol><li>Udfør rektal suge biopsi af en veltrænet pædiatrisk kirurg og en assistent ved hjælp af en Rbi2 sugerektal biopsi system efter at have indhentet informeret samtykke fra værgen.<ol>
<li>Udfør RSB på patienter, der har følgende indikationer: manglende evne til at passere blandet mekoniumprøve udtaget hos spædbørn eller langvarig op...

<ol>
	<li>Tam, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hirschsprung's+disease:+A+bridge+for+science+and+surgery.">Hirschsprung's disease: A bridge for science and surgery.</a> Journal of Pediatric Surgery. 51 (1), 18-22 (2016).</li><li>Heanue, T. A., Pachnis, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enteric+nervous+system+development+and+Hirschsprung's+disease:+advances+in+genetic+and+stem+cell+studies.">Enteric nervous system development and Hirschsprung's disease: advances in genetic and stem cell studies.</a> Nature Reviews Neuroscience. 8 (6), 466-479 (2007).</li><li>Setiadi, J. A., Dwihantoro, A., Iskandar, K., Heriyanto, D. S., Gunadi, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+the+hematoxylin+and+eosin+staining+in+patients+with+suspected+Hirschsprung+disease.">The utility of the hematoxylin and eosin staining in patients with suspected Hirschsprung disease.</a> BMC Surgery. 17 (1), 71 (2017).</li><li>Agrawal, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+histochemistry+(AChE)+-+A+helpful+technique+in+the+diagnosis+and+in+aiding+the+operative+procedures+of+Hirschsprung+disease.">Acetylcholinesterase histochemistry (AChE) - A helpful technique in the diagnosis and in aiding the operative procedures of Hirschsprung disease.</a> Diagnostic Pathology. 10 (1), 208 (2015).</li><li>Kacar, A., Arikok, A. T., Azili, M. N., Ekberli Agirbas, G., Tiryaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry+in+Hirschsprung's+disease:+An+adjunct+to+formalin-based+diagnosis.">Calretinin immunohistochemistry in Hirschsprung's disease: An adjunct to formalin-based diagnosis.</a> The Turkish Journal of Gastroenterology. 23 (3), 226-233 (2012).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S100+and+protein+gene+product+9.5+immunostaining+of+rectal+suction+biopsies+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung'+disease.">S100 and protein gene product 9.5 immunostaining of rectal suction biopsies in the diagnosis of Hirschsprung' disease.</a> American Journal of Translational Research. 8 (7), 3159 (2016).</li><li>Takawira, C., D'Agostini, S., Shenouda, S., Persad, R., Sergi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+procedures+update+on+Hirschsprung+disease.">Laboratory procedures update on Hirschsprung disease.</a> Journal of Pediatric Gastroenterology &amp; Nutrition. 60 (5), 598 (2015).</li><li>Meier-Ruge, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+activity+in+suction+biopsies+of+the+rectum+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Acetylcholinesterase activity in suction biopsies of the rectum in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pediatric Surgery. 7 (1), 11-17 (1972).</li><li>Barshack, I., Fridman, E., Goldberg, I., Chowers, Y., Kopolovic, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+loss+of+calretinin+expression+indicates+aganglionosis+in+Hirschsprung's+disease.">The loss of calretinin expression indicates aganglionosis in Hirschsprung's disease.</a> Journal of Clinical Pathology. 57 (7), 712-716 (2004).</li><li>Kapur, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+We+Stop+Looking?+Immunohistochemistry+and+the+Diagnosis+of+Hirschsprung+Disease.">Can We Stop Looking? Immunohistochemistry and the Diagnosis of Hirschsprung Disease.</a> American Journal of Clinical Pathology. 126 (1), 9-12 (2006).</li><li>Guinardsamuel, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry:+a+simple+and+efficient+tool+to+diagnose+Hirschsprung+disease.">Calretinin immunohistochemistry: a simple and efficient tool to diagnose Hirschsprung disease.</a> Modern Pathology. 22 (10), 1379-1384 (2009).</li><li>Robey, S. S., Kuhajda, F. P., Yardley, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoperoxidase+stains+of+ganglion+cells+and+abnormal+mucosal+nerve+proliferations+in+Hirschsprung's+disease.">Immunoperoxidase stains of ganglion cells and abnormal mucosal nerve proliferations in Hirschsprung's disease.</a> Human Pathology. 19 (4), 432-437 (1988).</li><li>Monforte-Mu&#241;oz, H., Gonzalez-Gomez, I., Rowland, J. M., Landing, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+submucosal+nerve+trunk+caliber+in+aganglionosis:+a+&amp;#34;positive&amp;#34;+and+objective+finding+in+suction+biopsies+and+segmental+resections+in+Hirschsprung's+disease.">Increased submucosal nerve trunk caliber in aganglionosis: a &amp;#34;positive&amp;#34; and objective finding in suction biopsies and segmental resections in Hirschsprung's disease.</a> Archives of Pathology &amp; Laboratory Medicine. 122 (8), 721-725 (1998).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Sams, V. R., Bobrow, L. G., Happerfield, L., Keeling, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+PGP9.5+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Evaluation of PGP9.5 in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pathology. 168 (1), 55 (1992).</li><li>Huang, Y., Anupama, B., Zheng, S., Xiao, X., Chen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+of+enteric+nerve+markers+and+nerve+innervation+in+total+colonic+aganglionosis.">The expression of enteric nerve markers and nerve innervation in total colonic aganglionosis.</a> International Journal of Surgical Pathology. 19 (3), 303 (2011).</li></ol>

Her beskrev vi en procedure, hvor der blev brugt tre forskellige immunohistokemiske antistoffer til at plette RBS-sektioner til diagnosticering af HS. Følsomheden af vores diagnostiske protokol var 96,49% (95% CI, 0,88-0,99), og specificiteten var 100% (95% CI, 0,97-1,00).
De mest kritiske trin i protokollen er RSB og antigen-antistof reaktion. Størrelsen af Biopsien afgør nøjagtigheden af farvning. En lille biopsi vil ikke give nok væv til at foretage en præcis diagnose, mens en stor bi...

Hirschsprungs sygdom (HD) er en almindelig medfødt tarmsygdom karakteriseret ved mangel på ganglion celler i forskellige segmenter af den distale tarmkanalen1. Det humane enteriske nervesystem dannes, når invasionen af de embryonale neurale celler er afsluttet. Hvis der er en forstyrrelse af processen og invasionen undlader at fuldføre, den distale tarm af den nyfødte bliver aganglionic2. Denne potentielt dødelige tilstand kaldes Hirschsprungs sygdom. Spredning, motilitet, og tarm vækst er de tre vigtigste elementer i vellykket kolonisering.
Traditionelle hæmatatoxylin og eosin (H & E) farvning af en begrænset submucosavævet biopsi kan ikke opnå så tilfredsstillende resultat som H & E farvning af et væv af fuld tykkelse opnået ved kirurgi. Desuden, acetylcholinesterase (AChE) farvning af rektal sugevæv er teoretisk udfordrende på grund af sin utilstrækkelige følsomhed, som er 91%, og kompleks forarbejdning af frosne afsnit3,4. Flere andre immunohistokemiske markører af ganglion celler og nervefibre, der kan farves i formalin-faste og paraffin-indlejrede prøver er gradvist ved at blive mainstream HD diagnostik. Calretinin er et vitamin D-afhængigt calcium bindende protein, der ikke udtrykkes i den myenteriske og submucosale plexus af HS-påvirkede segmenter5. S100 protein udtrykkes i celler afledt af neurale crest, såsom nervefibre og gliale celler, som ofte præsenterer neurale hypertrofi i submucosale væv af HS-påvirkede segmenter6. Protein genprodukt 9,5 (PGP 9.5) pålideligt pletter nervefibre og ganglion celler; PGP 9.5 farvning fungerer som et supplement til calretinin farvning, især i tilfælde af isolerede hypoganglionosis. Dobbelt farvning med S100 og PGP 9.5 kan mindske den falsk-negative hastighed og øge følsomheden. Som en forudsætning har den nuværende undersøgelse til formål at sikre tilstrækkelig specificitet og høj følsomhed af denne nye diagnosemetode. Vores roman protokol brugte alle tre markører for forskelsbehandling af aganglioniske tarm og hypertrofisk nervefibre. En prospektiv undersøgelse af 318 børn blev udført af vores laboratorium og tidligere udgivet uden en detaljeret protokol7. Den detaljerede protokol og forholdsregler er beskrevet i denne artikel. Nyfødte, der har lidt et alvorligt afføring, siden fødslen eller børn med kronisk forstoppelse, bortset fra andre almindelige sygdomme, er potentielle kandidater til rektal sugebiopsi (RSB). Vores roman protokol er velegnet til farvning ikke kun RSBs, men også fuld-tykkelse biopsier eller kirurgiske prøver til at foretage en endelig diagnose.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>calretinin antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MAB-0716 170416405c</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S-100 antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>Kit-0007</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGP9.5 antibody</td>
			<td>Shanghai long island antibody Co. Ltd</td>
			<td>R-0457-03</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enhancer reagent</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-A 170416405a</td>
			<td>antibody: secondary antibody A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Rabbit/Mouse IgG Secondary Antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-B</td>
			<td>antibody: secondary antibody B</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB staining kit (containing reagent A B and C)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>DAB-0031</td>
			<td>staining kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat incubator</td>
			<td>Shanghai yiheng instrument Co. Ltd</td>
			<td>DHP-9082</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rbi2 suction rectal biopsy system</td>
			<td>Aus Systems Pty Ltd, South Australia, Australia</td>
			<td>CP1200 HP1000 SS1000</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>leica RM2016</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>citric acid sodium citrate buffer(100X)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MVS-0101</td>
			<td>antigen retrieval buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pathological tissue dehydrator</td>
			<td>wuhan junjie electronic Co. Ltd</td>
			<td>JT-12F</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5

Hirschsprungs sygdom (HD) er en medfødt tarmsygdom, der er klinisk manifesteret som en manglende evne til at passere blandet mekoniumprøve udtaget hos spædbørn eller som langvarig forstoppelse hos børn. Rektal sugebiopsi (RSB) til bestemmelse af fravær af ganglion celler og neurale hypertrofi er den mest præcise test til diagnosticering af HS i øjeblikket. Traditionel hæmatooxylin-eosin farvning mangler følsomhed og specificitet. Acetylcholinesterase farvning kan ikke være almindeligt anvendt på grund af sin komplekse proces. Vores roman protokol af immun farvning for calretinin, S100 protein, og protein gen produkt 9,5 (PGP 9.5), som vi udførte på RSBs, udviser høj følsomhed og specificitet satser på 96,49% (95% konfidensinterval, 0,88-0,99) og 100% (95% tillid interval, 0,97-1,00). De HD-påvirkede segmenter ofte til stede som fraværet af udtrykket calretinin, S100 protein, og PGP 9.5, som er markører for neurale hypertrofi i submucosavævet væv. Denne protokol beskriver den detaljerede drifts proces for denne nye diagnosemetode.

I alt 318 patienter blev indskrevet i vores undersøgelse. Alle patienterne gennemgik RSB, og vævene blev plettet for calretinin, S100 og PGP 9.5. Diagnosen baseret på vores roman protokol var HD i 97 tilfælde, ikke-HD i 213 tilfælde, og mistænkt HD i 8 tilfælde. Blandt de 132 kirurgiske patienter blev 99 patienter diagnosticeret med HS ved immunofarvning af prøver af fuld tykkelse efter operationen. S100 og PGP 9.5 farvning viste, at 92% og 93% af de 99 patienter, henholdsvis havd...

Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5

Denne protokol beskriver processen med immunofarvning rektal suge biopsier for calretinin, S100 protein, og protein gen produkt 9,5. Denne roman adjuverende diagnostisk metode for Hirschsprungs sygdom har at foretrække følsomhed og specificitet satser.

Diagnosticering af Hirschsprungs sygdom ved immunofarvning rektal suge biopsier for Calretinin, S100 protein og protein gen produkt 9,5

Hirschsprung&#39;s disease (HD) is a congenital intestinal disease that is clinically manifested as an inability to pass meconium in infants or as ...

Denne metode kan hjælpe med at besvare spørgsmål i diagnosticering af Hirschsprungs sygdom. Metoden og funktionerne i denne teknik, hvis du følger protokollen, udviser høj følsomhed og specificitetshastigheder, der behandles på samme tid. Demonstration af proceduren vil være Mijing Fang, en tekniker fra mit laboratorium.Begynd med at fastsætte rektal sugebiopsier i fem gange mængden af vævet i 4% paraformaldehyd i seks timer ved stuetemperatur. Dehydrer de faste væv i en patologisk væv dehydrator i 11 timer og integrere de forarbejdede rektal suge biopsi væv i paraffin blokke. Trim blokkene på en mikrotom, indtil en komplet del plan af vævet er udsat.Brug derefter mikrotomen til at opnå en 0,4 mikrometersektioner af det indlejrede væv. Placer i 45 til 50 grader Celsius vand for at tillade sektioner til at sprede sig til en flad plan. Overfør de flade sektioner på glasdias og bag dem i en 60 grader Celsius ovn i tre til fem timer.Placer de deparaffiniserede dias i to 15-minutters ændringer af xylen efterfulgt af deres hydrering i sekventielle fem minutters ethanol nedsænkning. Skyl derefter diasene i omvendt osmose renset vand i yderligere fem minutter. For antigen hentning, placere dias i en Coplin farvning krukke med hentning løsning og placere krukken i et forvarmet bad af kogende vand.Efter 20 minutter skal glasset køle af til stuetemperatur i ca. 10 minutter og forsigtigt skylles med LYSglasset med PBS. Brug derefter en hydrofobe markør til at omringe hver vævssektion og placere objektglassene i en våd boks. For at blokere eventuelle peroxidater, tilsæt to eller tre dråber 3% hydrogenperoxid opløsning på hvert væv og placere dias på 37 grader Celsius i 20 minutter.Ved inkubationens afslutning skylles objektglassene med tre fem minutters PBS-vaske efterfulgt af blokering med 5 % kvægserumalbumin i 20 minutter ved 37 grader Celsius. Dernæst kasseres det overskydende kvægserumalbumin og mærke cellerne med 50 mikroliter af det primære antistof af interesse ved 4 grader Celsius natten over. Næste morgen skylles objektglassene med tre tre minutters vaske i PBS, og tilsæt 50 mikroliter polymerforstærker til hvert dias.Efter 20 minutter ved 37 grader Celsius vaskes diasene tre gange i PBS, og der tilsættes 50 mikroliter sekundært antistof B til hver vævssektion. Efter 30 minutter ved 37 grader Celsius skylles sektionerne med tre fem minutters vask i PBS og tilsæt en dråbe frisklavet DAB-arbejdsløsning til hvert dias. Når det passende niveau af brun farvning detekteres ved let mikroskopi, skylles objektglassene i PBS i fem minutter, og kernerne modvirkes med en dråbe hæmatoxylin i et minut.Fjern den overskydende plet under en strøm af vand i ca. 30 til 40 sekunder efterfulgt af en 25 til 30 sekunders vask i frisk PBS. Differentiere væv i 1%saltsyre ethanol i 10 sekunder efterfulgt af en et-minutters PBS vask. Dehydrer dias med fem minutters nedsænkning i omvendt rækkefølge af hydrering og udsætte dias til to fem minutters ændringer af xylen.Monter derefter dækslet ved hjælp af ultraren montering, og lad objektglassene tørre, før de visualiseres på et let mikroskop. I denne repræsentative undersøgelse af 318 rektal sektion biopsi patienter, 99 patienter blev oprindeligt diagnosticeret ved rektal sektion biopsi. Mange ganglion celler, som udtrykker calretinin blev observeret i normale væv biopsier.Der blev imidlertid ikke påvist ganglionceller i noget område af vævet fra Hirschsprungs sygdomssegmenter. S-100 og PGP9.5 immunostaining afslørede hypertrophied nerve kufferter i submucosa af det syge væv med kun granuleret farvning af nogle små nerve kviste observeret i den normalt innervated tarmen. Mens du forsøger denne procedure, er det vigtigt at huske at være opmærksom på detaljer som størrelsen af rektal suge biopsier og tykkelsen af sektioner.Efter det er defragmenteret, denne teknik vil bane vejen for forsker inden for pædiatrisk kirurgi til at støtte en diagnose af Hirschsprungs sygdom.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Selection of Aptamers for Amyloid &beta;-Protein, the Causative Agent of Alzheimer&#39;s Disease

Selection of Aptamers for Amyloid ÃƒÅ½Ã‚Â²-Protein, the Causative Agent of Alzheimer's Disease

Alzheimer's disease (AD) is a progressive, age-dependent, neurodegenerative disorder with an insidious course that renders its presymptomatic diagnosis ...

Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication

Development of neural circuitries and locomotion can be studied using neonatal rodent spinal cord central pattern generator (CPG) behavior. We demonstrate ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

Påvisning af Microregional Hypoxia i mus hjernebarken ved to-foton Imaging af endogent NADH Fluorescens

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Sequential Photo-bleaching to Delineate Single Schwann Cells at the Neuromuscular Junction

Sekventiel fotoblegende at afgrænse Single Schwann-celler ved den neuromuskulære overgang

Sequential photo-bleaching provides a non-invasive way to label individual SCs at the NMJ. The NMJ is the largest synapse of the mammalian nervous system ...

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange ABE

Påvisning af protein palmitoylering i dyrkede hippocampale neuroner ved immunopræcipitation og Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Palmitoylation is a post-translational lipid  modification involving the attachment of a 16-carbon saturated fatty acid,  palmitate, to cysteine residues ...

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Påvisning af<em&gt; In Situ</em&gt; Protein-protein-komplekser på<em&gt; Drosophila</em&gt; Larve Neuromuskulær Junction Brug Proximity ligeringsassayet

Discs large (Dlg) is a conserved member of the membrane-associated guanylate kinase family, and serves as a major scaffolding protein at the larval ...

The Neuromuscular Junction: Measuring Synapse Size, Fragmentation and Changes in Synaptic Protein Density Using Confocal Fluorescence Microscopy

Den neuromuskulære forbindelse: Måling Synapse Størrelse, fragmentering og ændringer i Synaptic Protein Density Brug Konfokal Fluorescens mikroskopi

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. ...

Immunostaining of Biocytin-filled and Processed Sections for Neurochemical Markers

Immunfarvning af biocytin-fyldte og Forarbejdede Sektioner til Neurokemiske Markers

Electrophysiological recordings of cells using the patch clamp technique have allowed for the identification of different neuronal types based on firing ...

Bioluminescence Imaging of Neuroinflammation in Transgenic Mice After Peripheral Inoculation of Alpha-Synuclein Fibrils

Bioluminescens Billeddannelse af Neuroinflammation i transgene mus efter perifer Inokulering af alfa-synuclein Fibriller

To study the prion-like behavior of misfolded alpha-synuclein, mouse models are needed that allow fast and simple transmission of alpha-synuclein ...

Live Images of GLUT4 Protein Trafficking in Mouse Primary Hypothalamic Neurons Using Deconvolution Microscopy

Levende billeder af GLUT4 Protein handel med musen primære hypothalamus neuroner ved hjælp af Deconvolution mikroskopi

Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is a global health crisis which is characterized by insulin signaling impairment and chronic inflammation in peripheral ...