Name: diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5
Uploaded: 2019-04-26T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

De auteurs bedanken Weibing Tang voor zijn grote hulp bij het verstrekken van de filmen Lab. Dit artikel wordt gesteund door het openbare welzijns onderzoek, en de speciale fondsen werden ontvangen van de nationale gezondheid en de familie planning van China (toelage nr. 201402007).

Dit protocol werd goedgekeurd door de onderzoek Ethiekraad van het ziekenhuis van de Unie van Huazhong Universiteit van wetenschap en technologie.
1. rectale zuig biopsie
<ol><li>Voer de rectale zuig biopsie door een goed opgeleide pediatrische chirurg en een assistent met behulp van een Rbi2 zuig rectale biopsie systeem na het verkrijgen van geïnformeerde toestemming van de voogd.<ol>
<li>Voer RSB op patiënten die de volgende indicaties hebben: onvermogen om meconium te passeren bij zuige...

<ol>
	<li>Tam, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hirschsprung's+disease:+A+bridge+for+science+and+surgery.">Hirschsprung's disease: A bridge for science and surgery.</a> Journal of Pediatric Surgery. 51 (1), 18-22 (2016).</li><li>Heanue, T. A., Pachnis, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enteric+nervous+system+development+and+Hirschsprung's+disease:+advances+in+genetic+and+stem+cell+studies.">Enteric nervous system development and Hirschsprung's disease: advances in genetic and stem cell studies.</a> Nature Reviews Neuroscience. 8 (6), 466-479 (2007).</li><li>Setiadi, J. A., Dwihantoro, A., Iskandar, K., Heriyanto, D. S., Gunadi, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+the+hematoxylin+and+eosin+staining+in+patients+with+suspected+Hirschsprung+disease.">The utility of the hematoxylin and eosin staining in patients with suspected Hirschsprung disease.</a> BMC Surgery. 17 (1), 71 (2017).</li><li>Agrawal, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+histochemistry+(AChE)+-+A+helpful+technique+in+the+diagnosis+and+in+aiding+the+operative+procedures+of+Hirschsprung+disease.">Acetylcholinesterase histochemistry (AChE) - A helpful technique in the diagnosis and in aiding the operative procedures of Hirschsprung disease.</a> Diagnostic Pathology. 10 (1), 208 (2015).</li><li>Kacar, A., Arikok, A. T., Azili, M. N., Ekberli Agirbas, G., Tiryaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry+in+Hirschsprung's+disease:+An+adjunct+to+formalin-based+diagnosis.">Calretinin immunohistochemistry in Hirschsprung's disease: An adjunct to formalin-based diagnosis.</a> The Turkish Journal of Gastroenterology. 23 (3), 226-233 (2012).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S100+and+protein+gene+product+9.5+immunostaining+of+rectal+suction+biopsies+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung'+disease.">S100 and protein gene product 9.5 immunostaining of rectal suction biopsies in the diagnosis of Hirschsprung' disease.</a> American Journal of Translational Research. 8 (7), 3159 (2016).</li><li>Takawira, C., D'Agostini, S., Shenouda, S., Persad, R., Sergi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+procedures+update+on+Hirschsprung+disease.">Laboratory procedures update on Hirschsprung disease.</a> Journal of Pediatric Gastroenterology &amp; Nutrition. 60 (5), 598 (2015).</li><li>Meier-Ruge, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+activity+in+suction+biopsies+of+the+rectum+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Acetylcholinesterase activity in suction biopsies of the rectum in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pediatric Surgery. 7 (1), 11-17 (1972).</li><li>Barshack, I., Fridman, E., Goldberg, I., Chowers, Y., Kopolovic, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+loss+of+calretinin+expression+indicates+aganglionosis+in+Hirschsprung's+disease.">The loss of calretinin expression indicates aganglionosis in Hirschsprung's disease.</a> Journal of Clinical Pathology. 57 (7), 712-716 (2004).</li><li>Kapur, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+We+Stop+Looking?+Immunohistochemistry+and+the+Diagnosis+of+Hirschsprung+Disease.">Can We Stop Looking? Immunohistochemistry and the Diagnosis of Hirschsprung Disease.</a> American Journal of Clinical Pathology. 126 (1), 9-12 (2006).</li><li>Guinardsamuel, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry:+a+simple+and+efficient+tool+to+diagnose+Hirschsprung+disease.">Calretinin immunohistochemistry: a simple and efficient tool to diagnose Hirschsprung disease.</a> Modern Pathology. 22 (10), 1379-1384 (2009).</li><li>Robey, S. S., Kuhajda, F. P., Yardley, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoperoxidase+stains+of+ganglion+cells+and+abnormal+mucosal+nerve+proliferations+in+Hirschsprung's+disease.">Immunoperoxidase stains of ganglion cells and abnormal mucosal nerve proliferations in Hirschsprung's disease.</a> Human Pathology. 19 (4), 432-437 (1988).</li><li>Monforte-Mu&#241;oz, H., Gonzalez-Gomez, I., Rowland, J. M., Landing, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+submucosal+nerve+trunk+caliber+in+aganglionosis:+a+&amp;#34;positive&amp;#34;+and+objective+finding+in+suction+biopsies+and+segmental+resections+in+Hirschsprung's+disease.">Increased submucosal nerve trunk caliber in aganglionosis: a &amp;#34;positive&amp;#34; and objective finding in suction biopsies and segmental resections in Hirschsprung's disease.</a> Archives of Pathology &amp; Laboratory Medicine. 122 (8), 721-725 (1998).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Sams, V. R., Bobrow, L. G., Happerfield, L., Keeling, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+PGP9.5+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Evaluation of PGP9.5 in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pathology. 168 (1), 55 (1992).</li><li>Huang, Y., Anupama, B., Zheng, S., Xiao, X., Chen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+of+enteric+nerve+markers+and+nerve+innervation+in+total+colonic+aganglionosis.">The expression of enteric nerve markers and nerve innervation in total colonic aganglionosis.</a> International Journal of Surgical Pathology. 19 (3), 303 (2011).</li></ol>

Hier hebben we beschreven een procedure met behulp van drie verschillende immunohistochemische antistoffen aan RBS secties vlek voor de diagnose van HD. De gevoeligheid van ons diagnostisch protocol was 96,49% (95% CI, 0.88-0.99), en de specificiteit was 100% (95% CI, 0.97-1.00).
De meest kritieke stappen van het protocol zijn RSB en antigeen-antilichaam reactie. De grootte van de biopsie bepaalt de nauwkeurigheid van de kleuring. Een kleine biopsie zal niet genoeg weefsel om een precieze diag...

De ziekte van Hirschsprung (HD) is een gemeenschappelijke aangeboren darm darmaandoening die wordt gekenmerkt door een gebrek aan ganglioncellen in verschillende segmenten van het distale darmkanaal1. De menselijke enterische zenuwstelsel wordt gevormd wanneer de invasie van de embryonale neurale cellen is voltooid. Als er een storing van het proces is en de invasie niet voltooit, wordt de distale darm van pasgeboren aganglionic2. Deze potentieel fatale aandoening heet de ziekte van Hirschsprung. Proliferatie, beweeglijkheid, en darm groei zijn de drie belangrijkste componenten van succesvolle kolonisatie.
Traditionele hematoxyline en eosine (H & E) kleuring van een beperkte submucosale biopsie kan niet bereiken als bevredigend van een resultaat als H & E kleuring van een full-dikte weefsel verkregen uit een operatie. Bovendien, acetylcholinesterase (pijn) kleuring van rectale zuig weefsel is theoretisch uitdagende vanwege de onvoldoende gevoeligheid, die is 91%, en complexe verwerking van bevroren secties3,4. Verschillende andere immunohistochemische markers van ganglioncellen en zenuwvezels die kunnen worden gekleurd in formaline-vaste en paraffine-embedded specimens zijn geleidelijk aan steeds de mainstream HD diagnostiek. Calretinin is een vitamine D-afhankelijke calcium-bindende eiwit dat niet wordt uitgedrukt in de myenteric en submucosale plexus van HD-getroffen segmenten5. S100 eiwit wordt uitgedrukt in cellen afgeleid van de neurale kuif, zoals zenuwvezels en glial cellen, die vaak aanwezig neurale hypertrofie in de submucosale weefsel van HD-getroffen segmenten6. Proteïne gen product 9,5 (PGP 9.5) betrouwbare vlekken zenuwvezels en ganglioncellen; PGP 9.5 kleuring fungeert als een aanvulling op calretinin kleuring, vooral in geval van geïsoleerde hypoganglionosis. De dubbele kleuring met S100 en PGP 9.5 kan het vals-negatieve tarief verminderen en de gevoeligheid verhogen. Als voorwaarde, de huidige studie is gericht op een adequate specificiteit en hoge gevoeligheid van deze nieuwe diagnostische methode te waarborgen. Onze nieuwe protocol gebruikt alle drie de markers voor de discriminatie van aganglionic darm en hypertrofische zenuwvezels. Een prospectieve studie van 318 kinderen werd uitgevoerd door ons lab en eerder gepubliceerd zonder een gedetailleerd protocol7. Het gedetailleerde protocol en de voorzorgsmaatregelen worden besproken in dit artikel. Elke pasgeborenen die leed aan een ernstige ontlasting probleem sinds de geboorte of kinderen met chronische constipatie met uitzondering van andere gemeenschappelijke ziekten zijn potentiële kandidaten voor rectale zuig biopsie (RSB). Onze nieuwe protocol is geschikt voor het bevlekken van niet alleen RSBs, maar ook full-dikte biopten of chirurgische specimens om een definitieve diagnose te stellen.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>calretinin antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MAB-0716 170416405c</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S-100 antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>Kit-0007</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGP9.5 antibody</td>
			<td>Shanghai long island antibody Co. Ltd</td>
			<td>R-0457-03</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enhancer reagent</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-A 170416405a</td>
			<td>antibody: secondary antibody A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Rabbit/Mouse IgG Secondary Antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-B</td>
			<td>antibody: secondary antibody B</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB staining kit (containing reagent A B and C)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>DAB-0031</td>
			<td>staining kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat incubator</td>
			<td>Shanghai yiheng instrument Co. Ltd</td>
			<td>DHP-9082</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rbi2 suction rectal biopsy system</td>
			<td>Aus Systems Pty Ltd, South Australia, Australia</td>
			<td>CP1200 HP1000 SS1000</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>leica RM2016</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>citric acid sodium citrate buffer(100X)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MVS-0101</td>
			<td>antigen retrieval buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pathological tissue dehydrator</td>
			<td>wuhan junjie electronic Co. Ltd</td>
			<td>JT-12F</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5

De ziekte van Hirschsprung (HD) is een aangeboren darmziekte die klinisch manifesteert zich als een onvermogen om meconium door te geven bij zuigelingen of als langdurige constipatie bij kinderen. Rectale zuig biopsie (RSB) om de afwezigheid van ganglioncellen en neurale hypertrofie te bepalen is de meest accurate test voor de diagnose van HD op dit moment. Traditionele hematoxyline-eosine kleuring ontbreekt gevoeligheid en specificiteit. Acetylcholinesterase kleuring kan niet op grote schaal worden gebruikt vanwege zijn complexe proces. Onze nieuwe protocol van immunokleuring voor calretinin, S100 Protein, en Protein Gene product 9,5 (PGP 9.5), die we uitgevoerd op RSBs, vertoont hoge gevoeligheid en specificiteit van 96,49% (95% betrouwbaarheidsinterval, 0.88-0.99) en 100% (95% vertrouwen interval, 0.97-1.00), respectievelijk. De HD-getroffen segmenten vaak aanwezig als de afwezigheid van de expressie van calretinin, S100 Protein, en PGP 9.5, die markers van neurale hypertrofie in de submucosale weefsel. Dit protocol beschrijft het gedetailleerde werkproces van deze nieuwe diagnostische methode.

In totaal werden 318 patiënten ingeschreven in onze studie. Alle patiënten onderging RSB, en de weefsels werden gekleurd voor calretinin, S100, en PGP 9.5. De diagnose op basis van onze nieuwe protocol was HD in 97 gevallen, niet-HD in 213 gevallen, en vermoed HD in 8 gevallen. Onder de 132 chirurgische patiënten, 99 patiënten werden gediagnosticeerd met HD door immunokleuring van volledige dikte specimens na de operatie. S100 en PGP 9.5 kleuring bleek dat 92% en 93% van de 99 patiën...

Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5

Dit protocol beschrijft het proces van immunokleuring rectale zuig biopten voor calretinin, S100 proteïne, en proteïne gen product 9,5. Deze nieuwe adjuvante diagnostische methode voor de ziekte van Hirschsprung heeft de voorkeur gevoeligheid en specificiteit tarieven.

Diagnose van de ziekte van Hirschsprung door immunokleuring rectale zuig biopten voor Calretinin, S100 proteïne en eiwit gen product 9,5

Hirschsprung&#39;s disease (HD) is a congenital intestinal disease that is clinically manifested as an inability to pass meconium in infants or as ...

Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van vragen bij de diagnose van de ziekte van Hirschsprung. De methode en functies van deze techniek, als je protocol volgt, vertoont een hoge gevoeligheid en de specificiteit tarieven die proces op hetzelfde moment. Het aantonen van de procedure zal Mijing Fang zijn, een technicus van mijn laboratorium.Begin met het bevestigen van de rectale zuigbiopsieën in vijf keer het volume van het weefsel in 4% paraformaldehyde gedurende zes uur bij kamertemperatuur. Dehydrateer de vaste weefsels in een pathologische weefseldehydrator gedurende 11 uur en verdun de verwerkte rectale zuigbiopsieweefsels in paraffineblokken. Trim de blokken op een microtome tot een volledig sectievlak van het weefsel wordt blootgesteld.Gebruik vervolgens de microtome om een 0,4 micrometer secties van het ingebedde weefsel te verkrijgen. Plaats in 45 tot 50 graden Celsius water om de secties te verspreiden in een vlak plan. Breng de afgeplatte secties op glazen platen en bak ze in een 60 graden Celsius oven voor drie tot vijf uur.Plaats de gedeparaffiniseerde dia's in twee 15 minuten durende veranderingen van xyleen, gevolgd door hun hydratatie in opeenvolgende vijf minuten ethanol onderdompees. Spoel vervolgens de glijbanen in omgekeerde osmose gezuiverd water voor een extra vijf minuten. Voor antigeen ophalen, plaats de glijbanen in een Coplin kleurpot van retrieval oplossing en plaats de pot in een voorverwarmd bad van kokend water.Laat de pot na 20 minuten ongeveer 10 minuten afkoelen tot kamertemperatuur en spoel de glijbanen voorzichtig af met PBS. Gebruik vervolgens een hydrofobe marker om elke weefselsectie te omsingelen en de glijbanen in een natte doos te plaatsen. Om eventuele peroxidaties te blokkeren, voeg twee of drie druppels van 3% waterstofperoxide oplossing op elk weefsel en plaats de dia's op 37 graden Celsius gedurende 20 minuten.Aan het einde van de incubatie, spoel de dia's met drie vijf minuten PBS wast, gevolgd door het blokkeren met 5% runder serum albumine gedurende 20 minuten op 37 graden Celsius. Gooi vervolgens het overtollige runderserum albumine weg en label de cellen met 50 microliter van het primaire antilichaam van belang bij 4 graden Celsius 's nachts. De volgende ochtend, spoel de dia's met drie drie minuten wasbeurten in PBS en voeg 50 microliters van polymeer versterker aan elke dia.Na 20 minuten bij 37 graden Celsius, was de dia's drie keer in PBS en voeg 50 microliter secundaire antilichaam B aan elke weefselsectie. Na 30 minuten bij 37 graden Celsius spoel je de secties af met drie wasbeurten van vijf minuten in PBS en voeg je een druppel vers bereide DAB-werkoplossing toe aan elke dia. Wanneer het juiste niveau van bruine vlekken wordt gedetecteerd door lichte microscopie, spoel de dia's in PBS gedurende vijf minuten en tegen vlek de kernen met een druppel hematoxylin gedurende een minuut.Verwijder de overtollige vlek onder een straaltje water gedurende ongeveer 30 tot 40 seconden, gevolgd door een 25 tot 30 seconden wassen in verse PBS. Onderscheid de weefsels in 1%zoutzuur ethanol gedurende 10 seconden, gevolgd door een PBS-wasbeurt van één minuut. Dehydrateer de dia's met vijf minuten onderdompeinaties in de omgekeerde volgorde van hydratatie en stel de dia's bloot aan twee veranderingen van xyleen van vijf minuten.Monteer vervolgens de cover slip met behulp van ultra-schone montage en laat de dia's te drogen voordat hun visualisatie op een lichtmicroscoop. In deze representatieve studie van 318 rectale sectie biopsie patiënten, 99 patiënten werden in eerste instantie gediagnosticeerd door rectale sectie biopsie. Veel ganglion cellen die calretinine uitdrukken werden waargenomen in normale weefselbiopten.Er werden echter geen ganglioncellen gedetecteerd in enig gebied van het weefsel uit de ziektesegmenten van de Hirschsprung. S-100 en PGP9.5 immunostaining onthulden hypertrofie zenuwstammen in de submucosa van het zieke weefsel met slechts korrelige vlekken van enkele kleine zenuwtakjes waargenomen in de normaal binnenverdende darm. Tijdens een poging tot deze procedure, is het belangrijk om te onthouden om aandacht te besteden aan details zoals de grootte van rectale zuigbiopsieën en dikte van secties.Nadat het is gedefragmenteerd, zal deze techniek de weg vrijmaken voor onderzoeken op het gebied van pediatrische chirurgie ter ondersteuning van een diagnose van de ziekte van Hirschsprung.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Selection of Aptamers for Amyloid &beta;-Protein, the Causative Agent of Alzheimer&#39;s Disease

Selection of Aptamers for Amyloid &#946;-Protein, the Causative Agent of Alzheimer's Disease

Selectie van Aptameren voor amyloid β-eiwit, de verwekker van de ziekte van Alzheimer

Alzheimer's disease (AD) is a progressive, age-dependent, neurodegenerative disorder with an insidious course that renders its presymptomatic diagnosis ...

Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication

Spinal Cord Elektrofysiologie II: Extracellulaire Suction Elektrode Fabrication

Development of neural circuitries and locomotion can be studied using neonatal rodent spinal cord central pattern generator (CPG) behavior. We demonstrate ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

Detectie van Microregional Hypoxie in Mouse Cerebral Cortex door twee-foton Imaging van endogene NADH fluorescentie

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Sequential Photo-bleaching to Delineate Single Schwann Cells at the Neuromuscular Junction

Sequential Photo-bleken om Single Schwann cellen afbakenen op de neuromusculaire junctie

Sequential photo-bleaching provides a non-invasive way to label individual SCs at the NMJ. The NMJ is the largest synapse of the mammalian nervous system ...

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange ABE

Detectie van eiwit palmitoylering in gekweekte hippocampale neuronen door immunoprecipitatie en Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Palmitoylation is a post-translational lipid  modification involving the attachment of a 16-carbon saturated fatty acid,  palmitate, to cysteine residues ...

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Detectie van<em&gt; In Situ</em&gt; Eiwit-eiwit complexen in de<em&gt; Drosophila</em&gt; Larvale Neuromusculaire Junction Met behulp van Proximity ligatiebepaling

Discs large (Dlg) is a conserved member of the membrane-associated guanylate kinase family, and serves as a major scaffolding protein at the larval ...

The Neuromuscular Junction: Measuring Synapse Size, Fragmentation and Changes in Synaptic Protein Density Using Confocal Fluorescence Microscopy

De neuromusculaire junctie: Meten Synapse Maat, Fragmentatie en Veranderingen in Synaptic Protein dichtheid met behulp van confocale fluorescentie microscopie

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. ...

Bioluminescence Imaging of Neuroinflammation in Transgenic Mice After Peripheral Inoculation of Alpha-Synuclein Fibrils

Bioluminescentie beeldvorming van ontstekingsprocessen in transgene muizen Na Perifere Enten van alfa-synucleine fibrillen

To study the prion-like behavior of misfolded alpha-synuclein, mouse models are needed that allow fast and simple transmission of alpha-synuclein ...

Live Images of GLUT4 Protein Trafficking in Mouse Primary Hypothalamic Neurons Using Deconvolution Microscopy

Live beelden van GLUT4 eiwit mensenhandel muis primaire hypothalame neuronen met behulp van deconvolutie microscopie

Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is a global health crisis which is characterized by insulin signaling impairment and chronic inflammation in peripheral ...

Quantitative Autoradiographic Method for Determination of Regional Rates of Cerebral Protein Synthesis In Vivo

Kwantitatieve autoradiografische methode voor de bepaling van de regionale tarieven van cerebrale eiwitsynthese in vivo

Protein synthesis is required for development and maintenance of neuronal function and is involved in adaptive changes in the nervous system. Moreover, it ...