Name: diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5
Uploaded: 2019-04-26T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

המחברים מודים לweibing טאנג על עזרתו הגדולה במתן מעבדת הצילום. מאמר זה נתמך על ידי מחקר הרווחה הציבורית, וקרנות מיוחדות התקבלו מן הבריאות הלאומית ותכנון המשפחה של סין (גרנט No. 201402007).

פרוטוקול זה אושר על ידי מועצת האתיקה המחקר של בית החולים האיחוד של האוניברסיטה של Huazhong המדע והטכנולוגיה.
1. שאיבה רקטלית ביופסיה
<ol><li>בצע את ביופסיה שאיבה פי הטבעת על ידי מנתח ילדים מיומן היטב עוזר באמצעות מערכת Rbi2 יניקה ביופסיה רקטלית לאחר קבלת הסכמה מושכלת מהשומר.<ol>
<li>לבצ...

<ol>
	<li>Tam, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hirschsprung's+disease:+A+bridge+for+science+and+surgery.">Hirschsprung's disease: A bridge for science and surgery.</a> Journal of Pediatric Surgery. 51 (1), 18-22 (2016).</li><li>Heanue, T. A., Pachnis, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enteric+nervous+system+development+and+Hirschsprung's+disease:+advances+in+genetic+and+stem+cell+studies.">Enteric nervous system development and Hirschsprung's disease: advances in genetic and stem cell studies.</a> Nature Reviews Neuroscience. 8 (6), 466-479 (2007).</li><li>Setiadi, J. A., Dwihantoro, A., Iskandar, K., Heriyanto, D. S., Gunadi, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+the+hematoxylin+and+eosin+staining+in+patients+with+suspected+Hirschsprung+disease.">The utility of the hematoxylin and eosin staining in patients with suspected Hirschsprung disease.</a> BMC Surgery. 17 (1), 71 (2017).</li><li>Agrawal, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+histochemistry+(AChE)+-+A+helpful+technique+in+the+diagnosis+and+in+aiding+the+operative+procedures+of+Hirschsprung+disease.">Acetylcholinesterase histochemistry (AChE) - A helpful technique in the diagnosis and in aiding the operative procedures of Hirschsprung disease.</a> Diagnostic Pathology. 10 (1), 208 (2015).</li><li>Kacar, A., Arikok, A. T., Azili, M. N., Ekberli Agirbas, G., Tiryaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry+in+Hirschsprung's+disease:+An+adjunct+to+formalin-based+diagnosis.">Calretinin immunohistochemistry in Hirschsprung's disease: An adjunct to formalin-based diagnosis.</a> The Turkish Journal of Gastroenterology. 23 (3), 226-233 (2012).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S100+and+protein+gene+product+9.5+immunostaining+of+rectal+suction+biopsies+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung'+disease.">S100 and protein gene product 9.5 immunostaining of rectal suction biopsies in the diagnosis of Hirschsprung' disease.</a> American Journal of Translational Research. 8 (7), 3159 (2016).</li><li>Takawira, C., D'Agostini, S., Shenouda, S., Persad, R., Sergi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+procedures+update+on+Hirschsprung+disease.">Laboratory procedures update on Hirschsprung disease.</a> Journal of Pediatric Gastroenterology &amp; Nutrition. 60 (5), 598 (2015).</li><li>Meier-Ruge, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+activity+in+suction+biopsies+of+the+rectum+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Acetylcholinesterase activity in suction biopsies of the rectum in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pediatric Surgery. 7 (1), 11-17 (1972).</li><li>Barshack, I., Fridman, E., Goldberg, I., Chowers, Y., Kopolovic, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+loss+of+calretinin+expression+indicates+aganglionosis+in+Hirschsprung's+disease.">The loss of calretinin expression indicates aganglionosis in Hirschsprung's disease.</a> Journal of Clinical Pathology. 57 (7), 712-716 (2004).</li><li>Kapur, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+We+Stop+Looking?+Immunohistochemistry+and+the+Diagnosis+of+Hirschsprung+Disease.">Can We Stop Looking? Immunohistochemistry and the Diagnosis of Hirschsprung Disease.</a> American Journal of Clinical Pathology. 126 (1), 9-12 (2006).</li><li>Guinardsamuel, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry:+a+simple+and+efficient+tool+to+diagnose+Hirschsprung+disease.">Calretinin immunohistochemistry: a simple and efficient tool to diagnose Hirschsprung disease.</a> Modern Pathology. 22 (10), 1379-1384 (2009).</li><li>Robey, S. S., Kuhajda, F. P., Yardley, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoperoxidase+stains+of+ganglion+cells+and+abnormal+mucosal+nerve+proliferations+in+Hirschsprung's+disease.">Immunoperoxidase stains of ganglion cells and abnormal mucosal nerve proliferations in Hirschsprung's disease.</a> Human Pathology. 19 (4), 432-437 (1988).</li><li>Monforte-Mu&#241;oz, H., Gonzalez-Gomez, I., Rowland, J. M., Landing, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+submucosal+nerve+trunk+caliber+in+aganglionosis:+a+&amp;#34;positive&amp;#34;+and+objective+finding+in+suction+biopsies+and+segmental+resections+in+Hirschsprung's+disease.">Increased submucosal nerve trunk caliber in aganglionosis: a &amp;#34;positive&amp;#34; and objective finding in suction biopsies and segmental resections in Hirschsprung's disease.</a> Archives of Pathology &amp; Laboratory Medicine. 122 (8), 721-725 (1998).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Sams, V. R., Bobrow, L. G., Happerfield, L., Keeling, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+PGP9.5+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Evaluation of PGP9.5 in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pathology. 168 (1), 55 (1992).</li><li>Huang, Y., Anupama, B., Zheng, S., Xiao, X., Chen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+of+enteric+nerve+markers+and+nerve+innervation+in+total+colonic+aganglionosis.">The expression of enteric nerve markers and nerve innervation in total colonic aganglionosis.</a> International Journal of Surgical Pathology. 19 (3), 303 (2011).</li></ol>

כאן תיארנו הליך באמצעות שלושה נוגדנים אימונוהיסטוכימיה שונים כדי להכתים סעיפים RBS לאבחון של HD. הרגישות של פרוטוקול האבחון שלנו היה 96.49% (95% CI, 0.88-0.99), והספציפיות היתה 100% (95% CI, 0.97-1.00).
הצעדים הקריטיים ביותר של הפרוטוקול הם התגובה RSB ונוגדן אנטיגן. גודל הביופסיה קובע את הדיוק של הה?...

מחלת הירשפרונג (HD) היא הפרעת מעיים שכיחה בבטן מולדת המאופיינת בהעדר תאים גנגליון בחלקים שונים של מערכת העיכול1. מערכת העצבים האנושית נוצר כאשר הפלישה של התאים העצביים העובריים הושלמה. אם יש הפרעה של התהליך ואת הפלישה נכשל להשלים, המעי המרוחק של היילוד הופך aganglionic2. המצב הקטלני הזה נקרא מחלת הירשפרונג. התפשטות, תנועתיות וגידול במעיים הם שלושת המרכיבים העיקריים של הקולוניזציה המוצלחת.
המטאוקסילין מסורתית ו אאוזין (H & E) כתמים של ביופסיה מוגבלת submucosal לא יכול להגיע כגורם משביע רצון של התוצאה כמו H & E כתמים של רקמה בעובי מלא שהתקבלו מהניתוח. בנוסף, אצטילכולין אסטראז (כאב) כתמים של רקמת שאיבה רקטלית הוא מאתגר תיאורטית בשל הרגישות שלה מספיק, שהוא 91%, ועיבוד מורכב של סעיפים קפואים3,4. מספר סמנים אימונוהיסטוכימיה אחרים של תאים גנגליון וסיבי עצב שניתן לוכתם ב-formalin קבוע ו פרפין מוטבע דגימות בהדרגה להפוך את האבחון המיינסטרים HD. Calretinin הוא ויטמין D תלויי-חלבון מחייב סידן שאינו מתבטא במיקלעת myenteric ו submucosal של מקטעים מושפעים HD5. חלבון S100 מתבטא בתאים הנגזרים מהרכס העצבי, כגון סיבי עצב ותאי גליה, אשר לעתים קרובות מציגים היפרפרס עצביים ברקמת המשנה של מקטעים מושפעים של HD6. גן חלבון מוצר 9.5 (PGP 9.5) כתמים באופן אמין סיבי עצב ו גנגליון תאים; PGP 9.5 כתמים מעשים כתוספת calretinin כתמים, במיוחד במקרים של היפוגנגלארי מבודדים. מכתים כפול עם S100 ו PGP 9.5 יכול להקטין את שיעור שלילי שלילית ולהגדיל את הרגישות. כתנאי מוקדם, המחקר הנוכחי שואפת להבטיח ספציפיות הולם רגישות גבוהה של שיטה זו אבחון הרומן. הפרוטוקול הרומן שלנו השתמש בכל שלושת הסמנים לאפליה של aganglionic מעי וסיבי עצב יפרטרופית. מחקר פוטנציאלי של 318 ילדים בוצע על ידי המעבדה שלנו ופורסם בעבר ללא פרוטוקול מפורט7. הפרוטוקול המפורט ואמצעי הזהירות נדונים במאמר זה. כל neonates שסבלו מבעיית הצואה חמור מאז הלידה או הילדים עם עצירות כרונית למעט מחלות נפוצות אחרות הם מועמדים פוטנציאליים ביופסיה שאיבה רקטלית (RSB). הפרוטוקול הרומן שלנו מתאים לצביעת לא רק RSBs אלא גם ביופסיות בעובי מלא או דגימות כירורגי כדי לבצע אבחנה סופית.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>calretinin antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MAB-0716 170416405c</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S-100 antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>Kit-0007</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGP9.5 antibody</td>
			<td>Shanghai long island antibody Co. Ltd</td>
			<td>R-0457-03</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enhancer reagent</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-A 170416405a</td>
			<td>antibody: secondary antibody A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Rabbit/Mouse IgG Secondary Antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-B</td>
			<td>antibody: secondary antibody B</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB staining kit (containing reagent A B and C)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>DAB-0031</td>
			<td>staining kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat incubator</td>
			<td>Shanghai yiheng instrument Co. Ltd</td>
			<td>DHP-9082</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rbi2 suction rectal biopsy system</td>
			<td>Aus Systems Pty Ltd, South Australia, Australia</td>
			<td>CP1200 HP1000 SS1000</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>leica RM2016</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>citric acid sodium citrate buffer(100X)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MVS-0101</td>
			<td>antigen retrieval buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pathological tissue dehydrator</td>
			<td>wuhan junjie electronic Co. Ltd</td>
			<td>JT-12F</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5

מחלת הירשפרונג (HD) היא מחלת מעיים מולדת אשר מתבטאת קלינית כחוסר יכולת לעבור meconium בתינוקות או עצירות לטווח ארוך אצל ילדים. ביופסיה שאיבה רקטלית (RSB) כדי לקבוע את העדר של תאים גנגליון והיפרפרס עצביים הוא המבחן המדויק ביותר עבור האבחנה של HD כיום. המטאוקסילין המסורתי-אאוזין מכתים חסר רגישות וספציפיות. כתמים אצטילכולין אסטראז לא ניתן להשתמש באופן נרחב עקב התהליך המורכב שלה. הפרוטוקול הרומן שלנו של כתמים עבור calretinin, חלבון S100, וחלבון מוצר גן 9.5 (PGP 9.5), אשר אנו מתנהלים על RSBs, תצוגות רגישות גבוהה ושיעורי ספציפיות של 96.49% (95% מרווח ביטחון, 0.88-0.99) ו 100% (95% ביטחון מרווח, 0.97-1.00), בהתאמה. מקטעים מושפעים HD לעתים קרובות להציג כהעדר הביטוי של calretinin, S100 חלבון, ו PGP 9.5, אשר הם סמנים של היפרפרס עצבי ברקמת submucosal. פרוטוקול זה מתאר את תהליך ההפעלה המפורט של שיטת אבחון חדשה זו.

בסך הכל, 318 חולים נרשמו במחקר שלנו. כל החולים עברו RSB, ואת הרקמות היו מוכתם calretinin, S100, ו PGP 9.5. האבחנה המבוססת על הפרוטוקול הרומן שלנו היה HD ב 97 מקרים, non-HD במקרים 213, וחשד HD ב 8 מקרים. בין 132 חולים כירורגי, 99 חולים אובחנו עם HD על ידי כתמים חיסוני של דגימות מלאות בעובי לאחר הניתוח. S100 ...

Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5

פרוטוקול זה מתאר את תהליך העיבוד החיסוני שאיבה רקטלית ביופסיה עבור calretinin, S100 חלבון, חלבון מוצר גן 9.5. שיטת האבחון החדשנית של מחלת הירשפרונג מעדיפה רגישות ותעריפים מסוימים.

האבחון של מחלת הירשפרונג על-ידי חיסוני שאיבה רקטלי ביופסיות עבור Calretinin, S100 חלבון וחלבון מוצר גן 9.5

Hirschsprung&#39;s disease (HD) is a congenital intestinal disease that is clinically manifested as an inability to pass meconium in infants or as ...

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות באבחון מחלת הירשפרונג. השיטה והפונקציות של טכניקה זו, אם אתה עוקב אחר הפרוטוקול, מפגין רגישות גבוהה ואת שיעורי הספציפיות אשר מעבדים בו זמנית. הדגמת ההליך תהיה מייז'ינג פאנג, טכנאי מהמעבדה שלי.התחל על ידי תיקון ביופסיות יניקה רקטלית בחמש פעמים את נפח הרקמה ב 4% paraformaldehyde במשך שש שעות בטמפרטורת החדר. לייבש את הרקמות הקבועות במייבש רקמה פתולוגי במשך 11 שעות ולהטמיע את רקמות ביופסיה יניקה רקטלי מעובד בלוקים פרפין. חותכים את הבלוקים על microtome עד מישור קטע שלם של הרקמה נחשפת.לאחר מכן השתמש במיקרוטום כדי להשיג 0.4 מקטעי מיקרומטר של הרקמה המוטבעת. מניחים במים של 45 עד 50 מעלות צלזיוס כדי לאפשר לחלקים להתפשט לתוכנית שטוחה. מעבירים את החלקים השטוחים על מגלשות זכוכית ואופים אותם בתנור של 60 מעלות במשך שלוש עד חמש שעות.מניחים את השקופיות deparaffinized לתוך שני שינויים של 15 דקות של קצילן ואחריו הידרציה שלהם ברצף חמש דקות אתנול טבילות. לאחר מכן לשטוף את המגלשות במים מטוהרים אוסמוזה הפוכה במשך חמש דקות נוספות. לאחזור אנטיגן, מניחים את המגלשות בצנצנת מכתים קופלין של פתרון אחזור ומ מניחים את הצנצנת באמבטיה שחומם מראש של מים רותחים.לאחר 20 דקות, אפשר לצנצנת להתקרר לטמפרטורת החדר במשך כ -10 דקות ולשטוף בעדינות את השקופיות עם PBS. לאחר מכן השתמשו בסמן הידרופובי כדי להקיף כל קטע רקמה ולהמקם את השקופיות בקופסה רטובה. כדי לחסום את כל peroxidates, להוסיף שתיים או שלוש טיפות של 3% פתרון מי חמצן על כל רקמה ולמקום את השקופיות ב 37 מעלות צלזיוס במשך 20 דקות.בסוף הדגירה, לשטוף את המגלשות עם שלוש שטיפות PBS חמש דקות ואחריו חסימה עם אלבומין סרום 5% bovine במשך 20 דקות ב 37 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, השלך את אלבומין סרום השד העודף ותייג את התאים עם 50 מיקרוליטרים של הנוגדן העיקרי של עניין ב 4 מעלות צלזיוס לילה. למחרת בבוקר, לשטוף את השקופיות עם שלוש דקות לשטוף PBS ולהוסיף 50 microliters של משפר פולימר לכל שקופית.לאחר 20 דקות ב 37 מעלות צלזיוס, לשטוף את המגלשות שלוש פעמים PBS ולהוסיף 50 microliters של נוגדן משני B לכל קטע רקמה. לאחר 30 דקות ב 37 מעלות צלזיוס, לשטוף את החלקים עם שלוש שטיפות חמש דקות PBS ולהוסיף טיפה של פתרון עבודה DAB מוכן טרי לכל שקופית. כאשר הרמה המתאימה של כתמים חומים מזוהה על ידי מיקרוסקופיה קלה, לשטוף את השקופיות PBS במשך חמש דקות וכתם מונה הגרעינים עם טיפה אחת של hematoxylin במשך דקה אחת.הסר את הכתם העודף תחת טפטוף של מים במשך כ 30 עד 40 שניות ואחריו לשטוף 25 עד 30 השני PBS טרי. להבדיל את הרקמות 1% אתנול חומצה הידרוכלורית במשך 10 שניות ואחריו לשטוף PBS דקה אחת. ייבשו את השקופיות עם טבילות של חמש דקות בסדר ההפוך של הידרציה וחשפו את השקופיות לשני שינויים של חמש דקות של קצילן.לאחר מכן תן את החלקת המכסה באמצעות הרכבה נקייה במיוחד ואפשר לשקופיות להתייבש לפני ההדמיה שלהן במיקרוסקופ קל. במחקר מייצג זה של 318 חולי ביופסיה סעיף רקטלי, 99 חולים אובחנו בתחילה על ידי ביופסיה סעיף רקטלי. תאי גנגליון רבים המבטאים קלרטינין נצפו בביופסיות רקמות תקינות.עם זאת, לא זוהו תאי גנגליון בשום אזור של הרקמה ממקטעי המחלה של הירשפרונג. S-100 ו PGP9.5 immunostaining גילה גזעי עצבים היפרטרופיים בתת-מוזה של הרקמה המחלה עם כתמים פרטניים בלבד של כמה זרדים עצביים קטנים שנצפו במעי הפנימי בדרך כלל. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור לשים לב לפרטים כמו גודל ביופסיות יניקה רקטלי ועובי של חלקים.לאחר איחוי, טכניקה זו תסלול את הדרך למחקרים בתחום ניתוחי ילדים לתמיכה באבחון מחלת הירשפרונג.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Selection of Aptamers for Amyloid &beta;-Protein, the Causative Agent of Alzheimer&#39;s Disease

Selection of Aptamers for Amyloid ÃƒÅ½Ã‚Â²-Protein, the Causative Agent of Alzheimer's Disease

מבחר Aptamers עבור חלבון β עמילואיד, הסוכן סיבתי של מחלת אלצהיימר

Alzheimer's disease (AD) is a progressive, age-dependent, neurodegenerative disorder with an insidious course that renders its presymptomatic diagnosis ...

Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication

חוט השדרה Electrophysiology II: ייצור תאי אלקטרודה יניקה

Development of neural circuitries and locomotion can be studied using neonatal rodent spinal cord central pattern generator (CPG) behavior. We demonstrate ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

זיהוי של היפוקסיה Microregional בקליפת עכבר מוחין על ידי הדמיה של שני הפוטונים אנדוגני NADH Fluorescence

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Sequential Photo-bleaching to Delineate Single Schwann Cells at the Neuromuscular Junction

תמונה רציפה-הלבנה להתוות תאי שווא יחידים בצומת Neuromuscular

Sequential photo-bleaching provides a non-invasive way to label individual SCs at the NMJ. The NMJ is the largest synapse of the mammalian nervous system ...

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange ABE

איתור של palmitoylation חלבון בנוירונים ביפוקמפוס מתורבתים ידי immunoprecipitation וacyl-Exchange ביוטין (אייב)

Palmitoylation is a post-translational lipid  modification involving the attachment of a 16-carbon saturated fatty acid,  palmitate, to cysteine residues ...

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

זיהוי של<em&gt; באתר</em&gt; מכלולי חלבון-חלבון ב<em&gt; דרוזופילה</em&gt; הזחל Neuromuscular צומת שימוש סמיכות קשירת Assay

Discs large (Dlg) is a conserved member of the membrane-associated guanylate kinase family, and serves as a major scaffolding protein at the larval ...

The Neuromuscular Junction: Measuring Synapse Size, Fragmentation and Changes in Synaptic Protein Density Using Confocal Fluorescence Microscopy

Neuromuscular צומת: גודל סינפסה מדידה, שינויי פיצול ובצפיפות חלבון Synaptic שימוש Confocal מיקרוסקופ פלואורסצנטי

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. ...

Immunostaining of Biocytin-filled and Processed Sections for Neurochemical Markers

Immunostaining סעיפים Biocytin מלא ומעובד מרקרים הנוירוכימיים

Electrophysiological recordings of cells using the patch clamp technique have allowed for the identification of different neuronal types based on firing ...

Bioluminescence Imaging of Neuroinflammation in Transgenic Mice After Peripheral Inoculation of Alpha-Synuclein Fibrils

הדמית פליטת אור של neuroinflammation בעכברים טרנסגניים לאחר היקפיים הרכבה של אלפא-Synuclein סיבים

To study the prion-like behavior of misfolded alpha-synuclein, mouse models are needed that allow fast and simple transmission of alpha-synuclein ...

Live Images of GLUT4 Protein Trafficking in Mouse Primary Hypothalamic Neurons Using Deconvolution Microscopy

תמונות בשידור חי של GLUT4 חלבון בבני אדם העכבר נוירונים היפותלמי העיקרי באמצעות מיקרוסקופ Deconvolution

Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is a global health crisis which is characterized by insulin signaling impairment and chronic inflammation in peripheral ...