Name: diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5
Uploaded: 2019-04-26T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

Forfatterne takker Weibing tang for sin store hjelp i å gi filming Lab. Denne artikkelen er støttet av offentlig velferd Research, og spesielle midler ble mottatt fra den nasjonale helse og familieplanlegging av Kina (Grant no. 201402007).

Denne protokollen ble godkjent av forskningsetikk styret ved Union Hospital of Huazhong University of Science and Technology.
1. rektal sug biopsi
<ol><li>Utfør rektal sug biopsi av en godt trent pediatrisk kirurg og en assistent ved hjelp av en Rbi2 sug rektal biopsi system etter innhente informert samtykke fra verge.<ol>
<li>Utfør RSB på pasienter som har følgende indikasjoner: manglende evne til å passere mekonium hos spedbarn eller lang tids oppblåsthet med eller uten forstoppelse ...

<ol>
	<li>Tam, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hirschsprung's+disease:+A+bridge+for+science+and+surgery.">Hirschsprung's disease: A bridge for science and surgery.</a> Journal of Pediatric Surgery. 51 (1), 18-22 (2016).</li><li>Heanue, T. A., Pachnis, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enteric+nervous+system+development+and+Hirschsprung's+disease:+advances+in+genetic+and+stem+cell+studies.">Enteric nervous system development and Hirschsprung's disease: advances in genetic and stem cell studies.</a> Nature Reviews Neuroscience. 8 (6), 466-479 (2007).</li><li>Setiadi, J. A., Dwihantoro, A., Iskandar, K., Heriyanto, D. S., Gunadi, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+the+hematoxylin+and+eosin+staining+in+patients+with+suspected+Hirschsprung+disease.">The utility of the hematoxylin and eosin staining in patients with suspected Hirschsprung disease.</a> BMC Surgery. 17 (1), 71 (2017).</li><li>Agrawal, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+histochemistry+(AChE)+-+A+helpful+technique+in+the+diagnosis+and+in+aiding+the+operative+procedures+of+Hirschsprung+disease.">Acetylcholinesterase histochemistry (AChE) - A helpful technique in the diagnosis and in aiding the operative procedures of Hirschsprung disease.</a> Diagnostic Pathology. 10 (1), 208 (2015).</li><li>Kacar, A., Arikok, A. T., Azili, M. N., Ekberli Agirbas, G., Tiryaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry+in+Hirschsprung's+disease:+An+adjunct+to+formalin-based+diagnosis.">Calretinin immunohistochemistry in Hirschsprung's disease: An adjunct to formalin-based diagnosis.</a> The Turkish Journal of Gastroenterology. 23 (3), 226-233 (2012).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S100+and+protein+gene+product+9.5+immunostaining+of+rectal+suction+biopsies+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung'+disease.">S100 and protein gene product 9.5 immunostaining of rectal suction biopsies in the diagnosis of Hirschsprung' disease.</a> American Journal of Translational Research. 8 (7), 3159 (2016).</li><li>Takawira, C., D'Agostini, S., Shenouda, S., Persad, R., Sergi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+procedures+update+on+Hirschsprung+disease.">Laboratory procedures update on Hirschsprung disease.</a> Journal of Pediatric Gastroenterology &amp; Nutrition. 60 (5), 598 (2015).</li><li>Meier-Ruge, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+activity+in+suction+biopsies+of+the+rectum+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Acetylcholinesterase activity in suction biopsies of the rectum in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pediatric Surgery. 7 (1), 11-17 (1972).</li><li>Barshack, I., Fridman, E., Goldberg, I., Chowers, Y., Kopolovic, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+loss+of+calretinin+expression+indicates+aganglionosis+in+Hirschsprung's+disease.">The loss of calretinin expression indicates aganglionosis in Hirschsprung's disease.</a> Journal of Clinical Pathology. 57 (7), 712-716 (2004).</li><li>Kapur, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+We+Stop+Looking?+Immunohistochemistry+and+the+Diagnosis+of+Hirschsprung+Disease.">Can We Stop Looking? Immunohistochemistry and the Diagnosis of Hirschsprung Disease.</a> American Journal of Clinical Pathology. 126 (1), 9-12 (2006).</li><li>Guinardsamuel, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry:+a+simple+and+efficient+tool+to+diagnose+Hirschsprung+disease.">Calretinin immunohistochemistry: a simple and efficient tool to diagnose Hirschsprung disease.</a> Modern Pathology. 22 (10), 1379-1384 (2009).</li><li>Robey, S. S., Kuhajda, F. P., Yardley, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoperoxidase+stains+of+ganglion+cells+and+abnormal+mucosal+nerve+proliferations+in+Hirschsprung's+disease.">Immunoperoxidase stains of ganglion cells and abnormal mucosal nerve proliferations in Hirschsprung's disease.</a> Human Pathology. 19 (4), 432-437 (1988).</li><li>Monforte-Mu&#241;oz, H., Gonzalez-Gomez, I., Rowland, J. M., Landing, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+submucosal+nerve+trunk+caliber+in+aganglionosis:+a+&amp;#34;positive&amp;#34;+and+objective+finding+in+suction+biopsies+and+segmental+resections+in+Hirschsprung's+disease.">Increased submucosal nerve trunk caliber in aganglionosis: a &amp;#34;positive&amp;#34; and objective finding in suction biopsies and segmental resections in Hirschsprung's disease.</a> Archives of Pathology &amp; Laboratory Medicine. 122 (8), 721-725 (1998).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Sams, V. R., Bobrow, L. G., Happerfield, L., Keeling, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+PGP9.5+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Evaluation of PGP9.5 in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pathology. 168 (1), 55 (1992).</li><li>Huang, Y., Anupama, B., Zheng, S., Xiao, X., Chen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+of+enteric+nerve+markers+and+nerve+innervation+in+total+colonic+aganglionosis.">The expression of enteric nerve markers and nerve innervation in total colonic aganglionosis.</a> International Journal of Surgical Pathology. 19 (3), 303 (2011).</li></ol>

Her har vi beskrevet en prosedyre som bruker tre forskjellige immunhistokjemiske antistoffer for å flekk RBS seksjoner for diagnostisering av HS. Følsomheten til vår diagnostiske protokoll var 96,49% (95% CI, 0.88-0.99), og spesifisitet var 100% (95% CI, 0.97-1.00).
De mest kritiske trinnene i protokollen er RSB og antigen-antistoff reaksjon. Størrelsen på biopsi bestemmer nøyaktigheten av farging. En liten biopsi vil ikke gi nok vev til å gjøre en presis diagnose, mens en stor biopsi ...

Hirschsprung ' s sykdom (HD) er en felles medfødt tarm uorden preget av mangel på Ganglion celler i ulike segmenter av den, den er i den forskjellige tarmkanalen1. Den menneskelige enteric nervesystemet dannes når invasjonen av embryonale nevrale celler er fullført. Hvis det er en forstyrrelse av prosessen og invasjonen ikke klarer å fullføre, blir den som går i tarmen til den nyfødte aganglioniske2. Denne potensielt fatale tilstanden kalles Hirschsprung ' s sykdom. Spredning, motilitet, og gut vekst er de tre viktigste komponentene i vellykket kolonisering.
Tradisjonelle hematoksylin og eosin (H & E) farging av en begrenset submucosal biopsi kan ikke oppnå så tilfredsstillende resultat som H & E farging av en full-tykkelse vev innhentet fra kirurgi. I tillegg acetylkolinesterase (smerte) farging av rektal suge vev er teoretisk utfordrende på grunn av sin utilstrekkelig følsomhet, som er 91%, og kompleks behandling av frosne seksjoner3,4. Flere andre immunhistokjemiske markører av Ganglion celler og nervefibre som kan beiset i formalin-fast og parafin-embedded eksemplarer er gradvis blitt mainstream HD-diagnostikk. Calretinin er et vitamin D-avhengig kalsium-bindende protein som ikke er uttrykt i myenteric og submucosal plexus av HD-berørte segmenter5. S100 protein uttrykkes i celler avledet fra neural Crest, som nervefibre og gliacellene celler, som ofte presenterer neural hypertrofi i submucosal vev av HD-berørte segmenter6. Protein gen produkt 9,5 (PGP 9.5) pålitelig flekker nervefibre og Ganglion celler; PGP 9.5 farging fungerer som et supplement til calretinin farging, spesielt i tilfeller av isolerte hypoganglionosis. Dobbel farging med S100 og PGP 9.5 kan redusere falske negative rate og øke følsomheten. Som en forutsetning, den nåværende studien tar sikte på å sikre tilstrekkelig spesifisitet og høy følsomhet for denne romanen diagnostisk metode. Vår roman protokollen brukte alle tre markører for diskriminering av aganglioniske tarmen og hypertrofisk nervefibre. En fremtidig studie av 318 barn ble utført av vår Lab og tidligere publisert uten en detaljert protokoll7. Den detaljerte protokollen og forholdsregler er diskutert i denne artikkelen. Eventuelle nyfødte som led av en alvorlig avføring problem siden fødselen eller barn med kronisk forstoppelse unntatt andre vanlige sykdommer er potensielle kandidater for rektal sug biopsi (RSB). Vår romanen protokollen er egnet for farging ikke bare RSBs men også full-tykkelse biopsier eller kirurgiske prøver å lage en endelig diagnose.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>calretinin antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MAB-0716 170416405c</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S-100 antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>Kit-0007</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGP9.5 antibody</td>
			<td>Shanghai long island antibody Co. Ltd</td>
			<td>R-0457-03</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enhancer reagent</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-A 170416405a</td>
			<td>antibody: secondary antibody A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Rabbit/Mouse IgG Secondary Antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-B</td>
			<td>antibody: secondary antibody B</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB staining kit (containing reagent A B and C)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>DAB-0031</td>
			<td>staining kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat incubator</td>
			<td>Shanghai yiheng instrument Co. Ltd</td>
			<td>DHP-9082</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rbi2 suction rectal biopsy system</td>
			<td>Aus Systems Pty Ltd, South Australia, Australia</td>
			<td>CP1200 HP1000 SS1000</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>leica RM2016</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>citric acid sodium citrate buffer(100X)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MVS-0101</td>
			<td>antigen retrieval buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pathological tissue dehydrator</td>
			<td>wuhan junjie electronic Co. Ltd</td>
			<td>JT-12F</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5

Hirschsprung ' s sykdom (HD) er en medfødt intestinal sykdom som er klinisk manifestert som en manglende evne til å passere mekonium hos spedbarn eller som langsiktig forstoppelse hos barn. Rektal sug biopsi (RSB) for å fastslå fraværet av Ganglion celler og neural hypertrofi er den mest nøyaktige testen for diagnostisering av HS i dag. Tradisjonelle hematoksylin-eosin farging mangler følsomhet og spesifisitet. Acetylkolinesterase farging kan ikke brukes mye på grunn av den kompliserte prosessen. Vår roman protokoll av immunostaining for calretinin, S100 protein, og protein genet produkt 9,5 (PGP 9.5), som vi gjennomførte på RSBs, utstillinger høy følsomhet og spesifisitet priser på 96,49% (95% tillit intervall, 0.88-0.99) og 100% (95% tillit intervall, 0.97-1.00), henholdsvis. De HD-berørte segmentene ofte til stede som fravær av uttrykk for calretinin, S100 protein, og PGP 9.5, som er markører for neural hypertrofi i submucosal vev. Denne protokollen beskriver den detaljerte operasjons prosessen for denne nye diagnostiske metoden.

Til sammen ble 318 pasienter innrullert i vår studie. Alle pasientene gjennomgikk RSB, og vevet ble beiset for calretinin, S100, og PGP 9.5. Diagnosen er basert på vår romanen protokollen var HD i 97 tilfeller, ikke-HD i 213 tilfeller, og mistenkt HD i 8 tilfeller. Blant de 132 kirurgiske pasientene ble 99 pasienter diagnostisert med HS ved immunostaining av prøver av full tykkelse etter operasjonen. S100 og PGP 9.5 farging viste at 92% og 93% av 99 pasienter, henholdsvis, hadde hyper...

Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5

Denne protokollen beskriver prosessen med immunostaining rektal sug biopsier for calretinin, S100 protein, og protein gen produkt 9,5. Denne romanen adjuvant diagnostisk metode for Hirschsprung ' s sykdom har å foretrekke følsomhet og spesifisitet priser.

Diagnostisering av Hirschsprung ' s Disease av Immunostaining rektal sug biopsier for Calretinin, S100 protein og protein Gene produkt 9,5

Hirschsprung&#39;s disease (HD) is a congenital intestinal disease that is clinically manifested as an inability to pass meconium in infants or as ...

Denne metoden kan bidra til å svare på spørsmål i diagnosen Hirschsprungs sykdom. Metoden og funksjonene til denne teknikken, hvis du følger protokollen, viser høy følsomhet og spesifisitetshastigheter som behandler samtidig. Å demonstrere prosedyren vil være Mijing Fang, en tekniker fra laboratoriet mitt.Begynn med å fikse rektal sugebiopsier i fem ganger volumet av vevet i 4% paraformaldehyd i seks timer ved romtemperatur. Dehydrere de faste vevene i en patologisk vevdehydrator i 11 timer og legg inn det behandlede rektal sugebiopsivevet i parafinblokker. Trim blokkene på en mikrotom til en komplett seksjonplan av vevet er utsatt.Bruk deretter mikrotomen til å få en 0,4 mikrometerseksjoner av det innebygde vevet. Plasser i 45 til 50 grader Celsius vann for å tillate seksjonene å spre seg til en flat plan. Overfør de flate delene på glasssklier og stek dem i en 60 graders Celsius-ovn i tre til fem timer.Plasser deparaffiniserte lysbildene i to 15-minutters endringer av xylen etterfulgt av deres hydrering i sekvensielle fem minutters etanol nedsenking. Skyll deretter lysbildene i omvendt osmose renset vann i ytterligere fem minutter. For antigenhenting, legg lysbildene i en Coplin-fargingskrukke med gjenfinningsløsning og legg krukken i et forvarmet bad med kokende vann.Etter 20 minutter, la krukken avkjøles til romtemperatur i ca 10 minutter og skyll forsiktig lysbildene med PBS. Bruk deretter en hydrofob markør til å omringe hver vevseksjon og plassere lysbildene i en våt boks. For å blokkere eventuelle peroksidater, legg til to eller tre dråper 3% hydrogenperoksidoppløsning på hvert vev og plasser lysbildene ved 37 grader Celsius i 20 minutter.På slutten av inkubasjonen, skyll lysbildene med tre fem minutters PBS vasker etterfulgt av blokkering med 5% storfe serum albumin i 20 minutter ved 37 grader Celsius. Deretter kaster du overflødig storfe serum albumin og merke cellene med 50 mikroliter av det primære antistoffet av interesse ved 4 grader Celsius over natten. Neste morgen, skyll lysbildene med tre tre minutters vasker i PBS og tilsett 50 mikroliter polymerforsterker til hvert lysbilde.Etter 20 minutter ved 37 grader Celsius, vask lysbildene tre ganger i PBS og tilsett 50 mikroliter sekundært antistoff B til hver vevseksjon. Etter 30 minutter ved 37 grader Celsius, skyll seksjonene med tre fem minutters vasker i PBS og legg til en dråpe nylaget DAB-arbeidsløsning til hvert lysbilde. Når riktig nivå av brun farging oppdages ved lett mikroskopi, skyll lysbildene i PBS i fem minutter og motvirke flekken kjernene med en dråpe hematoksylin i ett minutt.Fjern overflødig flekk under en dråpe vann i ca 30 til 40 sekunder etterfulgt av en 25 til 30 sekunders vask i frisk PBS. Differensier vevet i 1% saltsyre etanol i 10 sekunder etterfulgt av en ett minutt PBS vask. Dehydrere lysbildene med fem minutters nedsenking i omvendt rekkefølge av hydrering og utsette lysbildene til to fem minutters endringer av xylen.Monter deretter dekselet slip ved hjelp av ultra-ren montering og la lysbildene tørke før visualiseringen på et lett mikroskop. I denne representative studien av 318 rektalseksjonsbiopsipasienter ble 99 pasienter først diagnostisert ved rektalseksjonsbiopsi. Mange ganglionceller som uttrykker kalretin ble observert i normale vevsbiopsier.Imidlertid ble ingen ganglionceller oppdaget i noe område av vevet fra Hirschsprungs sykdomssegmenter. S-100 og PGP9.5 immunstaining avslørte hypertrophied nervestammer i submucosa av det syke vevet med bare granulær farging av noen små nervekvister observert i normalt innervatet tarm. Mens du prøver denne prosedyren, er det viktig å huske å ta hensyn til detaljer som størrelsen på rektal sugebiopsier og tykkelsen på seksjoner.Etter at den er defragmentert, vil denne teknikken bane vei for undersøkelser innen pediatrisk kirurgi for å støtte en diagnose av Hirschsprungs sykdom.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Selection of Aptamers for Amyloid &beta;-Protein, the Causative Agent of Alzheimer&#39;s Disease

Selection of Aptamers for Amyloid &#946;-Protein, the Causative Agent of Alzheimer's Disease

Alzheimer's disease (AD) is a progressive, age-dependent, neurodegenerative disorder with an insidious course that renders its presymptomatic diagnosis ...

Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication

Development of neural circuitries and locomotion can be studied using neonatal rodent spinal cord central pattern generator (CPG) behavior. We demonstrate ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

Påvisning av Microregional Hypoksi i Mus Cerebral Cortex av to-foton Imaging av endogen NADH Fluorescence

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Sequential Photo-bleaching to Delineate Single Schwann Cells at the Neuromuscular Junction

Sekvensiell Foto bleking å avgrense Enkelt Schwann celler på nevromuskulær Junction

Sequential photo-bleaching provides a non-invasive way to label individual SCs at the NMJ. The NMJ is the largest synapse of the mammalian nervous system ...

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange ABE

Påvisning av Protein palmitoylation i Cultured hippocampus neurons ved Immunoutfellingsanalyse og Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Palmitoylation is a post-translational lipid  modification involving the attachment of a 16-carbon saturated fatty acid,  palmitate, to cysteine residues ...

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Påvisning av<em&gt; In Situ</em&gt; Protein-protein komplekser på<em&gt; Drosophila</em&gt; Larve Nevromuskulær Junction hjelp Proximity Ligation analysen

Discs large (Dlg) is a conserved member of the membrane-associated guanylate kinase family, and serves as a major scaffolding protein at the larval ...

The Neuromuscular Junction: Measuring Synapse Size, Fragmentation and Changes in Synaptic Protein Density Using Confocal Fluorescence Microscopy

Nevromuskulære krysset: Måling Synapse Størrelse, fragmentering og endringer i Synaptic Protein Tetthet Bruke Confocal Fluorescensmikroskopi

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. ...

Bioluminescence Imaging of Neuroinflammation in Transgenic Mice After Peripheral Inoculation of Alpha-Synuclein Fibrils

Bioluminesens Imaging av nevroinflammasjon i transgene mus etter Peripheral Inokulering av Alfa synukleinfibriller

To study the prion-like behavior of misfolded alpha-synuclein, mouse models are needed that allow fast and simple transmission of alpha-synuclein ...

Live Images of GLUT4 Protein Trafficking in Mouse Primary Hypothalamic Neurons Using Deconvolution Microscopy

Live bilder av GLUT4 Protein menneskehandel musen primære hypothalamus nevroner bruker Deconvolution mikroskopi

Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is a global health crisis which is characterized by insulin signaling impairment and chronic inflammation in peripheral ...

Quantitative Autoradiographic Method for Determination of Regional Rates of Cerebral Protein Synthesis In Vivo

Kvantitativ Autoradiographic metode for fastsettelse av regionale priser på cerebral protein syntese in vivo

Protein synthesis is required for development and maintenance of neuronal function and is involved in adaptive changes in the nervous system. Moreover, it ...