Name: diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5
Uploaded: 2019-04-26T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

Авторы благодарят Вэйбинг Танг за его большую помощь в обеспечении лаборатории съемок. Эта статья поддержана исследованием общественного благосостояния, и специальные фонды были получены от национального запланирования здоровья и семьи Кита (Грант No. 201402007).

Этот протокол был одобрен Советом по этике исследований в больнице союза Huazhong университета науки и техники.
1. ректальная всасывающая биопсия
<ol><li>Выполните ректальное всасывание биопсии хорошо обученный детский хирург и помощник с помощью Rbi2 всасывания ректальной био...

<ol>
	<li>Tam, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hirschsprung's+disease:+A+bridge+for+science+and+surgery.">Hirschsprung's disease: A bridge for science and surgery.</a> Journal of Pediatric Surgery. 51 (1), 18-22 (2016).</li><li>Heanue, T. A., Pachnis, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enteric+nervous+system+development+and+Hirschsprung's+disease:+advances+in+genetic+and+stem+cell+studies.">Enteric nervous system development and Hirschsprung's disease: advances in genetic and stem cell studies.</a> Nature Reviews Neuroscience. 8 (6), 466-479 (2007).</li><li>Setiadi, J. A., Dwihantoro, A., Iskandar, K., Heriyanto, D. S., Gunadi, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+the+hematoxylin+and+eosin+staining+in+patients+with+suspected+Hirschsprung+disease.">The utility of the hematoxylin and eosin staining in patients with suspected Hirschsprung disease.</a> BMC Surgery. 17 (1), 71 (2017).</li><li>Agrawal, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+histochemistry+(AChE)+-+A+helpful+technique+in+the+diagnosis+and+in+aiding+the+operative+procedures+of+Hirschsprung+disease.">Acetylcholinesterase histochemistry (AChE) - A helpful technique in the diagnosis and in aiding the operative procedures of Hirschsprung disease.</a> Diagnostic Pathology. 10 (1), 208 (2015).</li><li>Kacar, A., Arikok, A. T., Azili, M. N., Ekberli Agirbas, G., Tiryaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry+in+Hirschsprung's+disease:+An+adjunct+to+formalin-based+diagnosis.">Calretinin immunohistochemistry in Hirschsprung's disease: An adjunct to formalin-based diagnosis.</a> The Turkish Journal of Gastroenterology. 23 (3), 226-233 (2012).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S100+and+protein+gene+product+9.5+immunostaining+of+rectal+suction+biopsies+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung'+disease.">S100 and protein gene product 9.5 immunostaining of rectal suction biopsies in the diagnosis of Hirschsprung' disease.</a> American Journal of Translational Research. 8 (7), 3159 (2016).</li><li>Takawira, C., D'Agostini, S., Shenouda, S., Persad, R., Sergi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+procedures+update+on+Hirschsprung+disease.">Laboratory procedures update on Hirschsprung disease.</a> Journal of Pediatric Gastroenterology &amp; Nutrition. 60 (5), 598 (2015).</li><li>Meier-Ruge, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+activity+in+suction+biopsies+of+the+rectum+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Acetylcholinesterase activity in suction biopsies of the rectum in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pediatric Surgery. 7 (1), 11-17 (1972).</li><li>Barshack, I., Fridman, E., Goldberg, I., Chowers, Y., Kopolovic, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+loss+of+calretinin+expression+indicates+aganglionosis+in+Hirschsprung's+disease.">The loss of calretinin expression indicates aganglionosis in Hirschsprung's disease.</a> Journal of Clinical Pathology. 57 (7), 712-716 (2004).</li><li>Kapur, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+We+Stop+Looking?+Immunohistochemistry+and+the+Diagnosis+of+Hirschsprung+Disease.">Can We Stop Looking? Immunohistochemistry and the Diagnosis of Hirschsprung Disease.</a> American Journal of Clinical Pathology. 126 (1), 9-12 (2006).</li><li>Guinardsamuel, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry:+a+simple+and+efficient+tool+to+diagnose+Hirschsprung+disease.">Calretinin immunohistochemistry: a simple and efficient tool to diagnose Hirschsprung disease.</a> Modern Pathology. 22 (10), 1379-1384 (2009).</li><li>Robey, S. S., Kuhajda, F. P., Yardley, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoperoxidase+stains+of+ganglion+cells+and+abnormal+mucosal+nerve+proliferations+in+Hirschsprung's+disease.">Immunoperoxidase stains of ganglion cells and abnormal mucosal nerve proliferations in Hirschsprung's disease.</a> Human Pathology. 19 (4), 432-437 (1988).</li><li>Monforte-Mu&#241;oz, H., Gonzalez-Gomez, I., Rowland, J. M., Landing, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+submucosal+nerve+trunk+caliber+in+aganglionosis:+a+&amp;#34;positive&amp;#34;+and+objective+finding+in+suction+biopsies+and+segmental+resections+in+Hirschsprung's+disease.">Increased submucosal nerve trunk caliber in aganglionosis: a &amp;#34;positive&amp;#34; and objective finding in suction biopsies and segmental resections in Hirschsprung's disease.</a> Archives of Pathology &amp; Laboratory Medicine. 122 (8), 721-725 (1998).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Sams, V. R., Bobrow, L. G., Happerfield, L., Keeling, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+PGP9.5+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Evaluation of PGP9.5 in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pathology. 168 (1), 55 (1992).</li><li>Huang, Y., Anupama, B., Zheng, S., Xiao, X., Chen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+of+enteric+nerve+markers+and+nerve+innervation+in+total+colonic+aganglionosis.">The expression of enteric nerve markers and nerve innervation in total colonic aganglionosis.</a> International Journal of Surgical Pathology. 19 (3), 303 (2011).</li></ol>

Здесь мы описали процедуру с использованием трех различных иммуногинахимических антител, чтобы испачкать секции РБС для диагностики БГ. Чувствительность нашего диагностического протокола составила 96,49% (95% CI, 0.88-0.99), а специфика составила 100% (95% ДИ, 0.97-в).
Самыми критически...

Гиршпрунга болезнь (HD) является распространенным врожденным кишечным расстройством кишечника характеризуется отсутствием ганглиозных клеток в различных сегментах дистальной желудочно-кишечного тракта1. Нервной системы человека кишечной формируется, когда вторжение в эмбриональных нервных клеток завершена. Если есть нарушение процесса и вторжение не удается завершить, дистальной кишечник новорожденного становится аангликаноническим2. Это потенциально смертельное состояние называется болезнью Гиршпрунга. Пролиферация, подвижность, и рост кишки три основных компонента успешной колонизации.
Традиционный гематоксифлин и ээин (H & E) окрашивание ограниченной субмукосной биопсии не может достигать удовлетворительного результата, так как окрашивание H & E полной толщины ткани, полученной от хирургии. Дополнительно, ацетилхолинэстеразы (боль) окрашивание ткани ректальной всасывающей является теоретически сложной задачей из-за его недостаточной чувствительности, которая составляет 91%, а сложная обработка замороженных разделов3,4. Несколько других иммуногинохимических маркеров ганглиозных клеток и нервных волокон, которые могут быть окрашены в формалин-фиксированной и парафин-встроенные образцы постепенно становится основной HD диагностики. Кальретиноин-это витамин D-зависимый кальций-связывающий белок, который не выражается в миокишечной и субслизистой сплетении HD-пораженные сегменты5. Белок S100 выражается в клетках, полученных от нейронных гребня, таких как нервные волокна и глиальных клеток, которые часто присутствуют нейронная гипертрофия в submucosal ткани HD-пострадавших сегментов6. Белок ген продукт 9,5 (PGP 9,5) надежно окрашивает нервные волокна и ганглиозных клеток; PGP 9,5 окрашивание выступает в качестве дополнения к кальретиноин окрашивание, особенно в случаях изолированных гипогантоз. Двойное окрашивание с S100 и PGP 9,5 может уменьшить ложноотрицательные скорости и увеличить чувствительность. В качестве предварительного условия, текущее исследование направлено на обеспечение адекватной специфичности и высокой чувствительностью этого романа диагностического метода. Наш Роман протокол использовал все три маркеры для дискриминации аглионинического кишечника и гипертрофических нервных волокон. Проспективное исследование 318 детей было выполнено нашей лабораторией и ранее Опубликовано без подробного протокола7. Подробный протокол и меры предосторожности обсуждаются в этой статье. Любые новорожденные, которые страдали от тяжелой дефекации с момента рождения или дети с хроническими запорами, исключая другие распространенные заболевания, являются потенциальными кандидатами для биопсии ректальной кишки (RSB). Наш Роман протокол подходит для окрашивания не только RSBs, но и полной толщины биопсии или хирургических образцов, чтобы сделать окончательный диагноз.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>calretinin antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MAB-0716 170416405c</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S-100 antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>Kit-0007</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGP9.5 antibody</td>
			<td>Shanghai long island antibody Co. Ltd</td>
			<td>R-0457-03</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enhancer reagent</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-A 170416405a</td>
			<td>antibody: secondary antibody A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Rabbit/Mouse IgG Secondary Antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-B</td>
			<td>antibody: secondary antibody B</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB staining kit (containing reagent A B and C)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>DAB-0031</td>
			<td>staining kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat incubator</td>
			<td>Shanghai yiheng instrument Co. Ltd</td>
			<td>DHP-9082</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rbi2 suction rectal biopsy system</td>
			<td>Aus Systems Pty Ltd, South Australia, Australia</td>
			<td>CP1200 HP1000 SS1000</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>leica RM2016</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>citric acid sodium citrate buffer(100X)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MVS-0101</td>
			<td>antigen retrieval buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pathological tissue dehydrator</td>
			<td>wuhan junjie electronic Co. Ltd</td>
			<td>JT-12F</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5

Гиршпрунга болезнь (HD) является врожденным кишечным заболеванием, которое клинически проявляется как неспособность пройти мекония у младенцев или как долгосрочный Запор у детей. Ректальное всасывание биопсии (RSB), чтобы определить отсутствие ганглиозных клеток и нейронная гипертрофия является наиболее точным испытанием для диагностики HD в настоящее время. Традиционный гематоксифлин-ээин окрашивание не имеет чувствительности и специфичности. Окрашивание ацетилхолинэстеразы не может быть широко использовано из-за его сложного процесса. Наш Роман протокол иммуноокрашивания для calretinin, белок S100, и белок гена продукта 9,5 (PGP 9,5), который мы провели на РСБС, экспонаты высокой чувствительности и специфичности ставки 96,49% (95% доверительный интервал, 0.88-0.99) и 100% (95% доверия интервал, 0.97-в), соответственно. В HD-пострадавших сегментов часто присутствуют как отсутствие экспрессии calretinin, белок S100, и PGP 9,5, которые являются маркерами нейронной гипертрофии в субслизистой ткани. Этот протокол описывает подробный операционный процесс этого нового диагностического метода.

Всего в нашем исследовании было зачислено 318 пациентов. Все пациенты прошли RSB, и ткани были окрашены для calretinin, S100, и PGP 9,5. Диагноз основан на нашем романе протокол HD в 97 случаях, не HD в 213 случаях, и подозреваемых в HD 8 случаев. Среди 132 хирургических пациентов, 99 пациентов б...

Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5

Этот протокол описывает процесс иммуноокрашивания ректального всасывания биопсии для calretinin, белок S100, и гена белка продукта 9,5. Этот роман адъювантной диагностический метод для болезни Гиршпрунга имеет предпочтительнее чувствительность и специфичность ставок.

Диагностика болезни Гиршпрунга путем иммуноокрашивания ректальное всасывание биопсии для Calretinin, S100 белка и белка гена продукта 9,5

Hirschsprung&#39;s disease (HD) is a congenital intestinal disease that is clinically manifested as an inability to pass meconium in infants or as ...

Этот метод может помочь ответить на вопросы в диагностике болезни Гиршпрунга. Метод и функции этого метода, если следовать протоколу, демонстрируют высокую чувствительность и скорость специфичности, которые обработать в то же время. Демонстрацией процедуры будет Mijing Fang, техник из моей лаборатории.Начните с фиксации биопсии всасывания прямой кишки в пять раз больше объема ткани в 4%paraformaldehyde в течение шести часов при комнатной температуре. Обезвоживание фиксированных тканей в обезвоживании патологических тканей в течение 11 часов и вставлять обработанные ткани ректального всасывания биопсии в парафиновых блоков. Обрезать блоки на микротоме до полного участка плоскости ткани подвергается.Затем используйте микротом для получения 0,4 микрометровых секций встроенной ткани. Поместите в 45 до 50 градусов по Цельсию воды, чтобы разделы распространяться в плоский план. Перенесите сплющенные секции на стеклянные горки и выпекайте их в духовке 60 градусов по Цельсию в течение трех-пяти часов.Поместите депарафинизированные слайды в два 15-минутных изменения ксилена с последующим их гидратацией в последовательных пятиминутных погружениях этанола. Затем промыть горки в обратном осмоса очищенной воды в течение еще пяти минут. Для поиска антигена поместите слайды в банку coplin окрашивания раствора поиска и поместите банку в разогретую ванну с кипящей водой.Через 20 минут дайте банку остыть до комнатной температуры в течение 10 минут и аккуратно промойте горки с помощью PBS. Затем используйте гидрофобный маркер, чтобы окружить каждую секцию ткани и поместить слайды во влажную коробку. Чтобы блокировать любые пероксидаты, добавьте две или три капли 3%перекиси водорода раствора на каждой ткани и поместите слайды при 37 градусов по Цельсию в течение 20 минут.В конце инкубации, промыть слайды с тремя пятиминутными PBS моет с последующим блокированием с 5%бычьей сыворотки альбумин в течение 20 минут при 37 градусов по Цельсию. Затем отбросьте избыток альбумин сыворотки крупного рогатого скота и обозначить клетки 50 микролитров первичного антитела, представляющих интерес при 4 градусах Цельсия в одночасье. На следующее утро, промыть слайды с трех трехминутных моет в PBS и добавить 50 микролитров полимерного усилителя для каждого слайда.Через 20 минут при 37 градусах по Цельсию, мыть слайды три раза в PBS и добавить 50 микролитров вторичного антитела B к каждой части ткани. Через 30 минут при 37 градусах по Цельсию, промойте секции с тремя пятиминутными моет в PBS и добавить каплю свежеприготовленного DAB рабочего решения для каждого слайда. Когда соответствующий уровень коричневого окрашивания обнаруживается световой микроскопии, промыть слайды в PBS в течение пяти минут и счетчик пятно ядер с одной каплей гематоксилина в течение одной минуты.Удалите избыток пятна под струйкой воды в течение примерно 30 до 40 секунд, а затем от 25 до 30 секунд мыть в свежем PBS. Дифференцируйте ткани в 1% этанола соляной кислоты в течение 10 секунд с последующим одноминутным промывки PBS. Обезвоживайте горки пятиминутными погружениями в обратном порядке гидратации и подвергайте слайды двум пятиминутным изменениям ксилена.Затем смонтировать крышку скольжения с помощью ультра-чистой монтажа и позволить слайды высохнуть до их визуализации на световом микроскопе. В этом репрезентативном исследовании 318 пациентов биопсии ректальной секции, 99 пациентов были первоначально диагностированы ректальной биопсии секции. Многие клетки ганглия, которые выражают кальцинин были замечены в нормальной биопсии тканей.Однако, никакие клетки ганглия не были обнаружены в любой области ткани от сегментов болезни Hirschsprung. S-100 и PGP9.5 иммуностимулирования показали гипертрофированных нервных стволов в submucosa больной ткани только гранулированное окрашивание некоторых мелких нервных веток наблюдается в обычно иннерватированный кишечник. При попытке этой процедуры, важно помнить, чтобы обратить внимание на детали, такие как размер ректальной биопсии всасывания и толщина секций.После того, как он дефрагментирован, этот метод проложит путь для исследований в области детской хирургии, чтобы поддержать диагноз болезни Гиршпрунга.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Selection of Aptamers for Amyloid &beta;-Protein, the Causative Agent of Alzheimer&#39;s Disease

Selection of Aptamers for Amyloid ÃƒÅ½Ã‚Â²-Protein, the Causative Agent of Alzheimer's Disease

Выбор Аптамеры для β-амилоида белка, возбудитель болезни Альцгеймера

Alzheimer's disease (AD) is a progressive, age-dependent, neurodegenerative disorder with an insidious course that renders its presymptomatic diagnosis ...

Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication

Спинной мозг электрофизиологии II: внеклеточной изготовление электродов Всасывающая

Development of neural circuitries and locomotion can be studied using neonatal rodent spinal cord central pattern generator (CPG) behavior. We demonstrate ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

Обнаружение микрорегиональном Гипоксия в мышь коры головного мозга на два фотона изображений эндогенной флуоресценции NADH

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Sequential Photo-bleaching to Delineate Single Schwann Cells at the Neuromuscular Junction

Последовательное фото-отбеливание разграничить отдельные клетки шванновских в нервно-мышечном соединении

Sequential photo-bleaching provides a non-invasive way to label individual SCs at the NMJ. The NMJ is the largest synapse of the mammalian nervous system ...

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange ABE

Обнаружение белка Palmitoylation в культуре нейронов гиппокампа на Иммунопреципитация и ацил-биотин бирже (ABE)

Palmitoylation is a post-translational lipid  modification involving the attachment of a 16-carbon saturated fatty acid,  palmitate, to cysteine residues ...

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Обнаружение<em&gt; На месте</em&gt; белок-белковых комплексов в<em&gt; Drosophila</em&gt; Личинок нервно-мышечного соединения, используя Пробирной Расстояние Лигирование

Discs large (Dlg) is a conserved member of the membrane-associated guanylate kinase family, and serves as a major scaffolding protein at the larval ...

The Neuromuscular Junction: Measuring Synapse Size, Fragmentation and Changes in Synaptic Protein Density Using Confocal Fluorescence Microscopy

Нервно-мышечном соединении: Synapse размер измерение, фрагментации и изменения в синаптической белка плотности с использованием конфокальной флуоресцентной микроскопии

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. ...

Immunostaining of Biocytin-filled and Processed Sections for Neurochemical Markers

Иммуноокрашивание Biocytin заполненных и переработанным секций для нейрохимических маркеров

Electrophysiological recordings of cells using the patch clamp technique have allowed for the identification of different neuronal types based on firing ...

Bioluminescence Imaging of Neuroinflammation in Transgenic Mice After Peripheral Inoculation of Alpha-Synuclein Fibrils

Биолюминесценция Визуализация нейровоспаления у трансгенных мышей после инокуляции периферической альфа-синуклеина фибрилл

To study the prion-like behavior of misfolded alpha-synuclein, mouse models are needed that allow fast and simple transmission of alpha-synuclein ...

Live Images of GLUT4 Protein Trafficking in Mouse Primary Hypothalamic Neurons Using Deconvolution Microscopy

Изображения в реальном времени GLUT4 белка оборота первичной нейронов гипоталамуса мыши с помощью микроскопии деконволюция

Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is a global health crisis which is characterized by insulin signaling impairment and chronic inflammation in peripheral ...