Name: diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5
Uploaded: 2019-04-26T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

Författarna tackar Weibing Tang för hans stora hjälp att tillhandahålla inspelningen labbet. Denna artikel stöds av Public välfärd Research, och särskilda medel mottogs från den nationella hälso-och familje planering i Kina (Grant No. 201402007).

Detta protokoll godkändes av forsknings etiska nämnden vid Union Hospital of Huazhong University of Science and Technology.
1. rektal sug biopsi
<ol><li>Utför rektal sug biopsi av en välutbildad barn kirurg och en assistent med hjälp av en Rbi2 sug rektal biopsi system efter att få informerat samtycke från förmyndaren.<ol>
<li>Utför RSB på patienter som har följande indikationer: oförmåga att passera Mekonium hos spädbarn eller långvarig uppblåsthet med eller utan förstoppni...

<ol>
	<li>Tam, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hirschsprung's+disease:+A+bridge+for+science+and+surgery.">Hirschsprung's disease: A bridge for science and surgery.</a> Journal of Pediatric Surgery. 51 (1), 18-22 (2016).</li><li>Heanue, T. A., Pachnis, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enteric+nervous+system+development+and+Hirschsprung's+disease:+advances+in+genetic+and+stem+cell+studies.">Enteric nervous system development and Hirschsprung's disease: advances in genetic and stem cell studies.</a> Nature Reviews Neuroscience. 8 (6), 466-479 (2007).</li><li>Setiadi, J. A., Dwihantoro, A., Iskandar, K., Heriyanto, D. S., Gunadi, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+the+hematoxylin+and+eosin+staining+in+patients+with+suspected+Hirschsprung+disease.">The utility of the hematoxylin and eosin staining in patients with suspected Hirschsprung disease.</a> BMC Surgery. 17 (1), 71 (2017).</li><li>Agrawal, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+histochemistry+(AChE)+-+A+helpful+technique+in+the+diagnosis+and+in+aiding+the+operative+procedures+of+Hirschsprung+disease.">Acetylcholinesterase histochemistry (AChE) - A helpful technique in the diagnosis and in aiding the operative procedures of Hirschsprung disease.</a> Diagnostic Pathology. 10 (1), 208 (2015).</li><li>Kacar, A., Arikok, A. T., Azili, M. N., Ekberli Agirbas, G., Tiryaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry+in+Hirschsprung's+disease:+An+adjunct+to+formalin-based+diagnosis.">Calretinin immunohistochemistry in Hirschsprung's disease: An adjunct to formalin-based diagnosis.</a> The Turkish Journal of Gastroenterology. 23 (3), 226-233 (2012).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Jiang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S100+and+protein+gene+product+9.5+immunostaining+of+rectal+suction+biopsies+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung'+disease.">S100 and protein gene product 9.5 immunostaining of rectal suction biopsies in the diagnosis of Hirschsprung' disease.</a> American Journal of Translational Research. 8 (7), 3159 (2016).</li><li>Takawira, C., D'Agostini, S., Shenouda, S., Persad, R., Sergi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+procedures+update+on+Hirschsprung+disease.">Laboratory procedures update on Hirschsprung disease.</a> Journal of Pediatric Gastroenterology &amp; Nutrition. 60 (5), 598 (2015).</li><li>Meier-Ruge, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholinesterase+activity+in+suction+biopsies+of+the+rectum+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Acetylcholinesterase activity in suction biopsies of the rectum in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pediatric Surgery. 7 (1), 11-17 (1972).</li><li>Barshack, I., Fridman, E., Goldberg, I., Chowers, Y., Kopolovic, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+loss+of+calretinin+expression+indicates+aganglionosis+in+Hirschsprung's+disease.">The loss of calretinin expression indicates aganglionosis in Hirschsprung's disease.</a> Journal of Clinical Pathology. 57 (7), 712-716 (2004).</li><li>Kapur, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+We+Stop+Looking?+Immunohistochemistry+and+the+Diagnosis+of+Hirschsprung+Disease.">Can We Stop Looking? Immunohistochemistry and the Diagnosis of Hirschsprung Disease.</a> American Journal of Clinical Pathology. 126 (1), 9-12 (2006).</li><li>Guinardsamuel, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calretinin+immunohistochemistry:+a+simple+and+efficient+tool+to+diagnose+Hirschsprung+disease.">Calretinin immunohistochemistry: a simple and efficient tool to diagnose Hirschsprung disease.</a> Modern Pathology. 22 (10), 1379-1384 (2009).</li><li>Robey, S. S., Kuhajda, F. P., Yardley, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoperoxidase+stains+of+ganglion+cells+and+abnormal+mucosal+nerve+proliferations+in+Hirschsprung's+disease.">Immunoperoxidase stains of ganglion cells and abnormal mucosal nerve proliferations in Hirschsprung's disease.</a> Human Pathology. 19 (4), 432-437 (1988).</li><li>Monforte-Mu&#241;oz, H., Gonzalez-Gomez, I., Rowland, J. M., Landing, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+submucosal+nerve+trunk+caliber+in+aganglionosis:+a+&amp;#34;positive&amp;#34;+and+objective+finding+in+suction+biopsies+and+segmental+resections+in+Hirschsprung's+disease.">Increased submucosal nerve trunk caliber in aganglionosis: a &amp;#34;positive&amp;#34; and objective finding in suction biopsies and segmental resections in Hirschsprung's disease.</a> Archives of Pathology &amp; Laboratory Medicine. 122 (8), 721-725 (1998).</li><li>Bachmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+panel+for+the+diagnosis+of+Hirschsprung&#39;s+disease+using+antibodies+to+MAP2,+calretinin,+GLUT1+and+S100.">Immunohistochemical panel for the diagnosis of Hirschsprung&#39;s disease using antibodies to MAP2, calretinin, GLUT1 and S100.</a> Histopathology. 66 (6), 824-835 (2015).</li><li>Sams, V. R., Bobrow, L. G., Happerfield, L., Keeling, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+PGP9.5+in+the+diagnosis+of+Hirschsprung's+disease.">Evaluation of PGP9.5 in the diagnosis of Hirschsprung's disease.</a> Journal of Pathology. 168 (1), 55 (1992).</li><li>Huang, Y., Anupama, B., Zheng, S., Xiao, X., Chen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+of+enteric+nerve+markers+and+nerve+innervation+in+total+colonic+aganglionosis.">The expression of enteric nerve markers and nerve innervation in total colonic aganglionosis.</a> International Journal of Surgical Pathology. 19 (3), 303 (2011).</li></ol>

Här beskrev vi ett förfarande med tre olika immunhistokemiska anti kroppar för att färga RBS-sektioner för diagnos av HS. Känsligheten hos vårt diagnostiska protokoll var 96,49% (95% CI, 0,88-0,99), och specificiteten var 100% (95% CI, 0,97-1.00).
De mest kritiska stegen i protokollet är RSB och antigen-antikroppsreaktion. Storleken på biopsi bestämmer noggrannheten av färgning. En liten biopsi kommer inte att ge tillräckligt med vävnad för att göra en exakt diagnos, medan en st...

Hirschsprungs sjukdom (HD) är en vanlig medfödd tarm sjukdom som kännetecknas av brist på ganglionceller i olika segment av den distala tarm kanalen1. Det mänskliga enteriska nerv systemet bildas när invasionen av embryonala neurala celler är avslutad. Om det finns en störning av processen och invasionen Miss lyckas med att slutföra, den distala tarmen av nyfödda blir aganglionic2. Detta potentiellt dödliga tillstånd kallas Hirschsprungs sjukdom. Proliferation, motilitet, och gut tillväxt är de tre huvud komponenterna i framgångs rik kolonisering.
Traditionell hematoxylin och eosin (H & E) färgning av en begränsad submukosala biopsi kan inte uppnå så tillfredsställande av ett resultat som H & E färgning av en full-tjocklek vävnad som erhållits från kirurgi. Dessutom, acetylkolinesteras (värk) färgning av rektal sugvävnad är teoretiskt utmanande på grund av dess otillräckliga känslighet, som är 91%, och komplex bearbetning av frysta avsnitt3,4. Flera andra immunhistokemiska markörer av ganglionceller och nerv fibrer som kan färgas i Formalinfixerade och paraffin-inbäddade preparat blir successivt mainstream HD-diagnostik. Calretinin är ett vitamin D-beroende kalcium-bindande protein som inte uttrycks i myenteric och submukosala plexus av HS-drabbade segment5. S100 protein uttrycks i celler som härrör från neurala Crest, såsom nerv fibrer och gliaceller, som ofta närvarande neurala hypertrofi i submukosala vävnad av HS-drabbade segment6. Protein gen produkt 9,5 (PGP 9.5) fläckar tillförlitligt nerv fibrer och ganglionceller; PGP 9.5 färgning fungerar som ett komplement till calretinin färgning, särskilt i fall av isolerad hypoganglionosis. Dubbel färgning med S100 och PGP 9.5 kan minska den falskt negativa hastigheten och öka känsligheten. Som en förutsättning, den aktuella studien syftar till att säkerställa adekvat specificitet och hög känslighet för denna nya diagnostiska metod. Vårt nya protokoll använde alla tre markörer för diskriminering av aganglionic tarm och hypertrofiska nerv fibrer. En prospektiv studie av 318 barn utfördes av vårt labb och tidigare publicerats utan ett detaljerat protokoll7. Det detaljerade protokollet och försiktighets åtgärderna diskuteras i den här artikeln. Alla nyfödda som drabbats av ett allvarligt defekation problem sedan födseln eller barn med kronisk förstoppning exklusive andra vanliga sjukdomar är potentiella kandidater för rektal sugbiopsi (RSB). Vårt nya protokoll lämpar sig för färgning inte bara RSBs utan även full-tjocklek biopsier eller kirurgiska prover för att göra en slutlig diagnos.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>calretinin antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MAB-0716 170416405c</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S-100 antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>Kit-0007</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PGP9.5 antibody</td>
			<td>Shanghai long island antibody Co. Ltd</td>
			<td>R-0457-03</td>
			<td>antibody: primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enhancer reagent</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-A 170416405a</td>
			<td>antibody: secondary antibody A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Rabbit/Mouse IgG Secondary Antibody</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>KIT-9902-B</td>
			<td>antibody: secondary antibody B</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB staining kit (containing reagent A B and C)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>DAB-0031</td>
			<td>staining kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat incubator</td>
			<td>Shanghai yiheng instrument Co. Ltd</td>
			<td>DHP-9082</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rbi2 suction rectal biopsy system</td>
			<td>Aus Systems Pty Ltd, South Australia, Australia</td>
			<td>CP1200 HP1000 SS1000</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>leica RM2016</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>citric acid sodium citrate buffer(100X)</td>
			<td>MXB Biotechnologies</td>
			<td>MVS-0101</td>
			<td>antigen retrieval buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pathological tissue dehydrator</td>
			<td>wuhan junjie electronic Co. Ltd</td>
			<td>JT-12F</td>
			<td>instrument</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

diagnosis of hirschsprung's disease by immunostaining rectal suction biopsies for calretinin, s100 protein and protein gene product 9.5

Hirschsprungs sjukdom (HD) är en medfödd tarm sjukdom som är kliniskt manifesterad som en oförmåga att passera Mekonium hos spädbarn eller som långtids förstoppning hos barn. Rektalsugbiopsi (RSB) för att bestämma frånvaron av ganglionceller och neurala hypertrofi är det mest exakta testet för diagnos av HS för närvarande. Traditionell hematoxylin-eosin färgning saknar känslighet och specificitet. Acetylkolinesteras färgning kan inte användas i stor utsträckning på grund av dess komplexa process. Vårt nya protokoll immuninfärgning för calretinin, S100 protein och protein gen produkt 9,5 (PGP 9.5), som vi genomförde på RSBs, uppvisar hög känslighet och specificitet på 96,49% (95% KONFIDENS intervall, 0,88-0,99) och 100% (95% konfidensgrad intervallet, 0,97-1,00). De HD-drabbade segmenten förekommer ofta som frånvaron av uttrycket av calretinin, S100 protein, och PGP 9.5, som är markörer för neurala hypertrofi i submukosala vävnad. Detta protokoll beskriver den detaljerade processen för denna nya diagnostiska metod.

Totalt inkluderades 318 patienter i vår studie. Alla patienter genomgick RSB, och vävnaderna färgas för calretinin, S100, och PGP 9.5. Diagnosen baserad på vårt nya protokoll var HD i 97 fall, non-HD i 213 fall, och misstänkt HD i 8 fall. Bland de 132 kirurgiska patienterna diagnostiserades 99 patienter med HS genom immuninfärgning av full huds prov efter kirurgi. S100 och PGP 9.5-färgning visade att 92% respektive 93% av de 99 patienterna hade hypertrophied nerv stammar. Den and...

Watch this Scientific Journal Video about Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5 at JoVE.com

Diagnosis of Hirschsprung's Disease by Immunostaining Rectal Suction Biopsies for Calretinin, S100 Protein and Protein Gene Product 9.5

Detta protokoll beskriver processen för immunofärgning rektal sug biopsier för calretinin, S100 protein, och protein gen produkt 9,5. Denna roman adjuvant diagnostisk metod för Hirschsprungs sjukdom har att föredra känslighet och specificitet priser.

Diagnos av Hirschsprungs sjukdom genom Immuninfärgning rektal sug biopsier för Calretinin, S100 protein och protein Gene produkt 9,5

Hirschsprung&#39;s disease (HD) is a congenital intestinal disease that is clinically manifested as an inability to pass meconium in infants or as ...

Denna metod kan hjälpa till att besvara frågor i diagnos av Hirschsprungs sjukdom. Metoden och funktionerna i denna teknik, om du följer protokollet, uppvisar hög känslighet och specificitetsfrekvenser som bearbetar samtidigt. Demonstrera förfarandet kommer att Mijing Fang, en tekniker från mitt laboratorium.Börja med att fixera rektalsugningsbiopsierna i fem gånger vävnadens volym i 4%paraformaldehyd i sex timmar vid rumstemperatur. Dehydrate de fasta vävnaderna i en patologisk vävnad dehydrator i 11 timmar och bädda in den bearbetade rektalkapslar sugbiopsi vävnader i paraffin block. Trimma blocken på en mikrotom tills ett komplett sektionsplan av vävnaden exponeras.Använd sedan mikrotomen för att få en 0,4 mikrometer avsnitt av den inbäddade vävnaden. Placera i 45 till 50 grader Celsius vatten så att sektionerna att sprida sig till en platt plan. Överför de tillplattade sektionerna på glasglas och grädda dem i en 60 graders Celsius ugn i tre till fem timmar.Placera deparaffinerade bilderna i två 15-minuters ändringar av xylen följt av deras hydrering i sekventiell fem minuters etanol nedsänkning. Skölj sedan diabilderna i omvänd osmos renat vatten i ytterligare fem minuter. För antigen hämtning, placera bilderna i en Coplin färgning burk hämtningslösning och placera burken i ett förvärmt bad av kokande vatten.Låt burken svalna till rumstemperatur i ca 10 minuter och skölj försiktigt av objektglasen med PBS. Använd sedan en hydrofoba markör för att omringa varje vävnadssektion och placera bilderna i en våt låda. För att blockera alla peroxidater, tillsätt två eller tre droppar av 3%väteperoxidlösning på varje vävnad och placera bilderna på 37 grader Celsius i 20 minuter.I slutet av inkubationen sköljer du objektglasen med tre femminuters PBS-tvättar följt av blockering med 5%bovint serumalbumin i 20 minuter vid 37 grader Celsius. Därefter kassera överskottet nötkreatur serum albumin och märka cellerna med 50 mikroliter av den primära antikroppen av intresse vid 4 grader Celsius över natten. Nästa morgon, skölja diabilderna med tre tre minuters tvättar i PBS och tillsätt 50 mikroliter av polymerförstärkare till varje objektglas.Efter 20 minuter vid 37 grader Celsius, tvätta objektglasen tre gånger i PBS och tillsätt 50 mikroliter sekundär antikropp B till varje vävnadssektion. Efter 30 minuter vid 37 grader Celsius, skölj sektionerna med tre fem minuters tvättar i PBS och tillsätt en droppe nyberedda DAB arbetslösning till varje objektglas. När lämplig nivå av brunfärgning detekteras genom lätt mikroskopi, skölj objektglasen i PBS i fem minuter och motverka fläcken av kärnorna med en droppe hematoxylin i en minut.Ta bort överskottet fläcken under en rännil av vatten i cirka 30 till 40 sekunder följt av en 25 till 30 sekunders tvätt i färska PBS. Differentiera vävnaderna i 1%saltsyra etanol i 10 sekunder följt av en minut PBS tvätt. Torka av bilderna med fem minuters nedsänkning i omvänd ordning av hydrering och exponera diabilder till två fem minuters ändringar av xylen.Montera sedan luckan med hjälp av ultraren montering och låt objektglasen torka innan de visualiseras på ett ljusmikroskop. I denna representativa studie av 318 rektalkapslar avsnitt biopsi patienter, 99 patienter diagnostiserades ursprungligen genom rektalkapslar avsnitt biopsi. Många ganglion celler som uttrycker calretinin observerades i normala vävnad tarmbiopsier.Inga ganglion celler upptäcktes dock i något område av vävnad från Hirschsprungs sjukdom segment. S-100 och PGP9.5 immunfärgning avslöjade hypertrophied nerv stammar i submucosa av den sjuka vävnaden med endast granulat färgning av vissa små nerv kvistar observerats i normalt innervated tarmen. Samtidigt försöker detta förfarande, är det viktigt att komma ihåg att uppmärksamma detaljer som storlek rektalkapslar sugbiopsier och tjocklek av sektioner.Efter det är defragmenterad, kommer denna teknik bana väg för forskningar inom barnkirurgi för att stödja en diagnos av Hirschsprungs sjukdom.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Selection of Aptamers for Amyloid &beta;-Protein, the Causative Agent of Alzheimer&#39;s Disease

Selection of Aptamers for Amyloid ÃƒÅ½Ã‚Â²-Protein, the Causative Agent of Alzheimer's Disease

Val av aptamers för Amyloid β-protein, vilka smittämnen av Alzheimers sjukdom

Alzheimer's disease (AD) is a progressive, age-dependent, neurodegenerative disorder with an insidious course that renders its presymptomatic diagnosis ...

Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication

Ryggmärgen Elektrofysiologi II: Extracellulär Sug elektrod Fabrication

Development of neural circuitries and locomotion can be studied using neonatal rodent spinal cord central pattern generator (CPG) behavior. We demonstrate ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

Detektion av Microregional hypoxi i mus Cerebral Cortex med två-foton Imaging av endogen NADH fluorescens

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Sequential Photo-bleaching to Delineate Single Schwann Cells at the Neuromuscular Junction

Sekventiell fotoblekningsreaktion att avgränsa Single Schwann celler vid den neuromuskulära förbindelsen

Sequential photo-bleaching provides a non-invasive way to label individual SCs at the NMJ. The NMJ is the largest synapse of the mammalian nervous system ...

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange ABE

Detektering av protein palmitoylering i odlade hippocampus neuroner genom immunprecipitation och Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Palmitoylation is a post-translational lipid  modification involving the attachment of a 16-carbon saturated fatty acid,  palmitate, to cysteine residues ...

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Detection of In Situ Protein-protein Complexes at the Drosophila Larval Neuromuscular Junction Using Proximity Ligation Assay

Detektion av<em&gt; In situ</em&gt; Protein-proteinkomplex på<em&gt; Drosophila</em&gt; Larv Neuromuskulära förbindelsen Använda Proximity Ligation Assay

Discs large (Dlg) is a conserved member of the membrane-associated guanylate kinase family, and serves as a major scaffolding protein at the larval ...

The Neuromuscular Junction: Measuring Synapse Size, Fragmentation and Changes in Synaptic Protein Density Using Confocal Fluorescence Microscopy

Den neuromuskulära förbindelsen: Mäta Synapse Storlek, fragmentering och Förändringar i Synaptic Protein Densitet Använda Confocal fluorescensmikroskopi

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. ...

Immunostaining of Biocytin-filled and Processed Sections for Neurochemical Markers

Immunfärgning av biocytin fyllda och bearbetade Sektioner neurokemiska markörer

Electrophysiological recordings of cells using the patch clamp technique have allowed for the identification of different neuronal types based on firing ...

Bioluminescence Imaging of Neuroinflammation in Transgenic Mice After Peripheral Inoculation of Alpha-Synuclein Fibrils

Bioluminescence avbildning av Neuroinflammation i transgena möss efter perifer ympning av alfa-synuklein fibriller

To study the prion-like behavior of misfolded alpha-synuclein, mouse models are needed that allow fast and simple transmission of alpha-synuclein ...

Live Images of GLUT4 Protein Trafficking in Mouse Primary Hypothalamic Neurons Using Deconvolution Microscopy

Levande bilder av GLUT4 Protein människohandel mus primära hypotalamus nervceller använder Deconvolution mikroskopi

Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is a global health crisis which is characterized by insulin signaling impairment and chronic inflammation in peripheral ...