Name: autoradiography as a simple and powerful method for visualization and characterization of pharmacological targets
Uploaded: 2019-03-12T15:00:00
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काम lundbeck फाउंडेशन (अनुदान R133-A12270) और novo nordisk फाउंडेशन (अनुदान NNF0C0028664) द्वारा समर्थित किया गया था । लेखकों [3एच] रेडियोलिगंड की आपूर्ति के लिए डॉ aleš मारेक धन्यवाद.

सभी पशु हैंडलिंग डेनिश पशु प्रयोग निरीक्षणालय से दिशा निर्देशों के अनुपालन में किया गया था ।
नोट: प्रोटोकॉल यहां वर्णित ऊतक तैयारी को शामिल किया गया (यानी, माउस मस्तिष्क ऊतक), एक नई प्रयोग?...

एक स्वतः आदिलेखी परख की गुणवत्ता अक्सर रेडियोलिगंड की संवेदनशीलता से निर्धारित होता है । एक प्रमुख योगदान कारक चयनित रेडियोआइसोटोप है, जो ज्ञात लिगन्स की उपलब्धता द्वारा या विशिष्ट लेबलिंग तकनीकों ?...

स्वत आदिचित्रण एक विधि है जो रेडियोधर्मी क्षय की छवियों को प्रदान करता है । तकनीक नियमित रूप से एक रेडियोलॉजिकल यौगिक और इसके लक्ष्य के बीच एक विशिष्ट औषधीय संपर्क के आधार पर विट्रो में ब्याज की एक प्रोटीन के ऊतक वितरण का अध्ययन करने के लिए प्रयोग किया जाता है । यह लक्ष्य के लिए लिगल की चयनीयता के बारे में प्रत्यक्ष जानकारी प्रदान करता है । इन विट्रो स्वतः आदिचित्रण का उपयोग रेडियोलीगन्स के औषधीय बाध्यकारी मापदंडों के मात्रात्मक निर्धारण के लिए भी किया जा सकता है, जैसे वियोजन स्थिरांक (Kd) और बाइंडिंग साइटों का घनत्व (Bmax), साथ ही निर्धारित करने के लिए निषेध स्थिरांक (Ki) प्रतिस्पर्धा लिगंडस1,2. पारंपरिक homogenate रेडियोलिगंड बंधन की तुलना में, स्वत आदिचित्रण के लिए स्थानिक शरीर रचना विज्ञान कल्पना और क्षेत्रीय अभिव्यक्ति3पैटर्न के संक्षिप्त विवरण देने में सक्षम होने का फायदा है । स्वतः आदिचित्रण की विधि इसलिए immunocytochemistry के लिए एक प्रासंगिक विकल्प है, विशेष रूप से एक मान्य एंटीबॉडी के अभाव में. स्वत आदिचित्रण आसानी से एक मानक रेडियोआइसोटोप प्रयोगशाला में आवश्यक औषधीय विशिष्टता, ऊतक वर्गों की तैयारी के लिए एक माइक्रोटोम cryostat करने के लिए उपयोग, और एक उपयुक्त इमेजिंग के साथ एक उपयुक्त रेडियोलिगंड की उपलब्धता को देखते हुए कार्यान्वित किया जाता है डिवाइस है कि संबंधित ऊतक वर्गों में रेडियोधर्मिता के वितरण का विश्लेषण करने में सक्षम है. विशेष रूप से, रेडियोलिगंड के लिए एक महत्वपूर्ण चयन मापदंड गैर-लक्षित साइटों के लिए बाध्यकारी की एक सीमित मात्रा है । यह अन्य प्रोटीन, झिल्ली या सामग्री जैसे प्लास्टिक या फिल्टर के लिए हो सकता है, और सामूहिक रूप से गैर-विशिष्ट बाध्यकारी के रूप में संदर्भित किया जाता है । आमतौर पर, गैर विशिष्ट बाध्यकारी गैर है, लेकिन संतृप्त किया जा सकता है अगर यह एक विशिष्ट बंद लक्ष्य प्रोटीन शामिल है । सही विशिष्ट बाध्यकारी मान्य करने का सबसे अच्छा तरीका है लक्ष्य की कमी ऊतकों की तुलना करने के लिए है, उदा, आनुवंशिक रूप से इंजीनियर (नॉक आउट) ऊतक4.
यहां, इस पद्धति को स्तनधारी मस्तिष्क में γ-हाइड्रोक्सीब्यूटिरिक एसिड (ghb) के लिए उच्च-संबध बाइंडिंग साइट के ऑटोराडियोग्राफिक लक्षण वर्णन के साथ सचित्र है । ghb और उसके बाध्यकारी साइट के बीच औषधीय बातचीत को समझना ghb के रूप में प्रासंगिकता का है दोनों narcolepsy और शराब5के उपचार में एक चिकित्सकीय उपयोगी दवा है, लेकिन यह भी स्तनधारी मस्तिष्क का एक प्राकृतिक घटक और एक मनोरंजक औषध६. उच्च बंधुत्व ghb बाध्यकारी साइटों पहले [3ज] का उपयोग कर वर्णित किया गया ghb चूहा मस्तिष्क के लिए बाध्यकारी7homogenate । पिछले कुछ वर्षों में, [3ज] ghb और एनालॉग [3एच] ncs-३८२ के साथ आगे स्वतः आदिचित्रण अध्ययन चूहा8,9,10, माउस9 के अग्र मस्तिष्क क्षेत्रों में बाध्यकारी साइटों की एक उच्च घनत्व से पता चला है , सुअर11और बंदर/ हालांकि, आणविक पहचान और इन बाध्यकारी साइटों की सटीक कार्यात्मक प्रासंगिकता मायावी बनी हुई है ।
आगे बाध्यकारी साइटों की विशेषता के इरादे के साथ, और ghb की शारीरिक भूमिका पर अध्ययन की सुविधा के लिए, कई विभिंन बंधुता के साथ संपंन आइसोटोप शामिल रेडियोलीगन्स विकसित किया गया है ([3ज] ghb, [3 h] ncs-३८२, [3h] हॉपीसीए और [१२५I] bnoph-ghb)13,14,15,16(17में समीक्षित) (चित्रा 1) । चयनात्मक उच्च-अपनत्व रेडियोलीगन्स के संयोजन और बाध्यकारी साइटों की एक बहुत ही उच्च ऊतक घनत्व भास्वर इमेजिंग तकनीक का उपयोग कर उच्च गुणवत्ता वाले चित्रों के उत्पादन के लिए अनुमति दी है9,11. एक स्वतः एडिग्राफिक प्रयोग और एक उदाहरण की स्थापना में व्यावहारिक अंक की रूपरेखा के साथ साथ विवरण उदाहरण के लिए, चर्चा अनुभाग मैं जोर देंगे) radionuclide के विकल्प, द्वितीय) परख शर्तों के विकल्प, और iii) फ़ॉस्फ़र का उपयोग एक्स-रे फिल्म बनाम इमेजिंग प्लेट्स । इस पत्र का समग्र लक्ष्य ऊतक वितरण और प्रोटीन लक्ष्यों के औषधीय विश्लेषण के बारे में सूचित करने के लिए ऑटोएडिग्राफी तकनीक पर तकनीकी, methodological और वैज्ञानिक विवरण प्रदान करना है ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Absolute ethanol</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>107017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A6283</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BAS-TR2040 Imaging Plate</td>
			<td>GE Healthcare Life Science</td>
			<td>28956481</td>
			<td>20x40 cm - Sensitive to tritium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cresyl violet acetate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C5042-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPX (non-aqueous mounting medium for microscopy)</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>100579</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O.C.T. Compound, 12 x 125 mL</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4583</td>
			<td>Tissue-Tek</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>16005-1KG-R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost Plus slides</td>
			<td>VWR</td>
			<td>631-9483</td>
			<td>microscope slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek Manual Slide Staining Set</td>
			<td>Sakura Finetek Denmark ApS</td>
			<td>4451</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tritium Standard on Glas</td>
			<td>American Radiolabeld Chemicals, Inc.</td>
			<td>ART 0123</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene substitute</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A5597</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

autoradiography as a simple and powerful method for visualization and characterization of pharmacological targets

इन विट्रो स्वरलिपि का उद्देश्य प्रयोगात्मक पशुओं के साथ-साथ मनुष्यों से ऊतक में रुचि के एक प्रोटीन के संरचनात्मक वितरण की कल्पना करना है । विधि अपने जैविक लक्ष्य के लिए एक रेडियोलिगंड के विशिष्ट बंधन पर आधारित है । इसलिए, जमे हुए ऊतक वर्गों radioligand समाधान के साथ incubated हैं, और बाद में लक्ष्य के लिए बाध्यकारी रेडियोधर्मी क्षय का पता लगाने के द्वारा स्थानीयकृत है, उदाहरण के लिए, सहज फिल्म या भास्वर इमेजिंग प्लेटों का उपयोग करके. परिणामस्वरूप डिजिटल स्वतः adiograms उल्लेखनीय स्थानिक संकल्प है, जो परिमाणन और रेडियोलीजिंड के स्थानीयकरण अलग संरचनात्मक संरचनाओं में बाध्यकारी सक्षम बनाता है प्रदर्शन । इसके अलावा, परिमाणन वियोजन स्थिरांक (kd), निषेध स्थिरांक (ki) और साथ ही चयनित ऊतकों में बाइंडिंग साइटों (Bmax) के घनत्व के माध्यम से संलग्नी अपनत्व के औषधीय लक्षण वर्णन के लिए अनुमति देता है । इस प्रकार, विधि दोनों लक्ष्य स्थानीयकरण और संलग्नी चयनीयता के बारे में जानकारी प्रदान करता है । यहां, तकनीक उच्च संबध γ-hydroxybutyric एसिड (ghb) स्तनधारी मस्तिष्क ऊतक में बाध्यकारी साइटों की स्वतः आदिलेखी लक्षण वर्णन के साथ उदाहरण है, methodological बाध्यकारी परख के बारे में विचार पर विशेष जोर के साथ पैरामीटर्स, रेडियोलिगंड और डिटेक्शन विधि का चयन ।

वर्णित प्रोटोकॉल का उपयोग करते हुए, उच्च-बंधुत्व ghb बाइंडिंग साइटों का संरचनात्मक वितरण, माउस मस्तिष्क में, जो कि कोरोनल, समतलीय और क्षैतिज वर्गों में काटा गया था, रेडियोलाबटेंड ghb एनालॉग [3...

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Autoradiography as a Simple and Powerful Method for Visualization and Characterization of Pharmacological Targets

स्वरांकन चित्रण और औषधीय लक्ष्यों के लक्षण वर्णन के लिए एक सरल और शक्तिशाली विधि के रूप में

स्वतः आदिचित्रण की विधि का प्रयोग नियमित रूप से गुणात्मक या मात्रात्मक भेषजगुण के निर्धारण के लिए रेडियोलीगन्स के ऊतक वर्गों के लिए बाध्यकारी अध्ययन के लिए किया जाता है ।

In vitro autoradiography aims to visualize the anatomical distribution of a protein of interest in tissue from experimental animals as well as humans. The ...

ऑटोरेडियोग्राफी लक्ष्य के लिए विशिष्ट रेडियोलिगंड का उपयोग करके ऊतकों में प्रोटीन बाध्यकारी साइटों के वितरण का अध्ययन करने के लिए एक शक्तिशाली और सरल तकनीक है। यह इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री का भी उपयुक्त विकल्प है। यह तकनीक डिजिटल छवियों के माध्यम से स्थानिक संकल्प के साथ प्रोटीन अभिव्यक्ति की कल्पना करती है जो पारंपरिक फिल्म एक्सपोजर की तुलना में तेज है।इसका उपयोग प्रोटीन लक्ष्यों के औषधीय विश्लेषण के लिए भी किया जा सकता है। विधि में कांच पर चढ़कर माउस ऊतक शामिल हैं, लेकिन अन्य प्रजातियों में या यहां तक कि कवरस्लिप पर उगाई जाने वाली कोशिकाओं तक बढ़ाया जा सकता है। प्रक्रिया का प्रदर्शन Nane Griem-Krey, मेरी प्रयोगशाला में एक पीएचडी के छात्र द्वारा किया जाएगा ।शुरू करने के लिए, पाउडर सूखी बर्फ में ऊतक जलमग्न करने के लिए यह फ्रीज तस्वीर । जमे हुए ऊतक को सीधे क्रायोस्टेट में स्थानांतरित करें जो शून्य से 20 डिग्री सेल्सियस तक सेट है। ऊतक को 20 मिनट के लिए क्रायोस्टेट में शून्य से 20 डिग्री सेल्सियस तक ले जाने दें।फिर क्रायोस्टेट के बाहर एम्बेडिंग माध्यम के साथ ऊतक धारक को कवर करें और वांछित अभिविन्यास में जमे हुए ऊतक नमूने को जल्दी से रखें जबकि एम्बेडिंग माध्यम अभी भी तरल है। ऊतक धारक को क्रायोस्टेट में वापस स्थानांतरित करें और सख्त के लिए शून्य से 10 डिग्री सेल्सियस नीचे तापमान के लिए एम्बेडिंग माध्यम का पर्दाफाश करें। क्रियोस्टेट के माइक्रोटॉम में टिश्यू होल्डर को पोजीशन करें।ढलान वाले वर्गों से बचने के लिए ऊतक के अभिविन्यास को समायोजित करें। वांछित मोटाई के वर्गों में एक स्टीरियोटैक्सिक एटलस के मार्गदर्शन के साथ ऊतक को काटें और यदि आवश्यक हो तो एक छोटे ब्रश के साथ अनुभाग को प्रकट करें। गल एक माइक्रोस्कोप स्लाइड पर अनुभाग माउंट ।फिर क्रमिक रूप से वांछित तकनीकी पुनरावृत्ति के लिए ब्याज के क्षेत्र से वर्गों को इकट्ठा करें। आगे की हैंडलिंग से पहले एक घंटे के लिए हवा सूखने के लिए स्लाइड पर वर्गों की अनुमति दें । एक प्रमाणित रेडियोधर्मिता प्रयोगशाला में, प्रायोगिक स्थितियों के साथ स्लाइड लेबल करने के लिए एक पेंसिल का उपयोग करें।स्लाइड्स में है क्षैतिज प्लास्टिक ट्रे में। ध्यान से स्लाइड पर घुड़सवार वर्गों के लिए प्रश्न में लक्ष्य के लिए समायोजित एसए बफर की एक उपयुक्त मात्रा लागू करें । सुनिश्चित करें कि प्रत्येक अनुभाग पूरी तरह से कवर किया गया है।गैर-विशिष्ट बाध्यकारी के निर्धारण के लिए, अवेलेबल यौगिक की प्रासंगिक एकाग्रता के साथ एसए बफर का पूरक करें। फिर वाष्पीकरण से बचने के लिए ट्रे को ढक्कन से ढक दें। 20 आरपीएम के लिए सेट प्लेट शेकर पर 30 मिनट के लिए एक प्रासंगिक तापमान पर पूर्व-इनक्यूबेट।इसके बाद, प्रत्येक स्लाइड से प्री-इनक्यूबेशन तरल डाल दें और स्लाइड्स को प्लास्टिक ट्रे में वापस स्थानांतरित करें। एसए बफर में रेडियोलिगंड की प्रासंगिक एकाग्रता के साथ तुरंत वर्गों को पूरी तरह से कवर करें। गैर-विशिष्ट बाध्यकारी के निर्धारण के लिए, अवेलेबल यौगिक की प्रासंगिक एकाग्रता के साथ रेडियोलिगांग समाधान को पूरक करें।20 आरपीएम पर लगातार कोमल मिलाते हुए के साथ वांछित परिस्थितियों में ढक्कन और इनक्यूबेट के साथ ट्रे को कवर करें। इसके बाद, इनक्यूबेशन समाधान को बंद करें और स्लाइड को माइक्रोस्कोप स्लाइड रैक में स्थानांतरित करें। तुरंत स्लाइड्स धो लें।GHB प्रोटोकॉल के लिए, 20 सेकंड के लिए बर्फ ठंड एसए बफर के साथ दो बार धोने और फिर बर्फ ठंड आसुत पानी से भरा ट्रे में स्लाइड रैक सूई द्वारा दो बार कुल्ला । कम से कम एक घंटे के लिए रैक और हवा सूखी में खड़ी स्लाइड स्थिति। फिर स्लाइडों को कमरे के तापमान पर रात भर के निर्धारण के लिए पैराफॉर्मलडिहाइड युक्त फिक्सेटर में स्थानांतरित करें।अगले दिन, स्लाइड्स को कमरे के तापमान पर सिलिका जेल युक्त एक डेसीकेटर बॉक्स में स्थानांतरित करें। नमी खत्म करने के लिए तीन घंटे तक डेसीकेटर बॉक्स में स्लाइड्स छोड़ दें। सबसे पहले, वर्गों को एक विकिरण परिरक्षित इमेजिंग प्लेट कैसेट में रखें, ऊतक का सामना करना पड़ रहा है।रेडियोलिगांगड बाइंडिंग के बाद के मात्राकरण के लिए हर कैसेट में एक रेडियोधर्मी माइक्रोस्केल शामिल करें। उपयोग से तुरंत पहले, ट्राइटियम-संवेदनशील फॉस्फोर इमेजिंग प्लेट को फॉस्फोर इमेजिंग मशीन में लोड करें और इसे मिटाने के निर्माता के निर्देशों के अनुसार दृश्यमान अवरक्त प्रकाश में बेनकाब करें। फिर फास्फोर इमेजिंग मशीन से इमेजिंग प्लेट निकालें और तुरंत इसे कैसेट में वर्गों पर रखें।सुनिश्चित करें कि कैसेट पूरी तरह से बंद है। प्रकाश से परिरक्षित होने के दौरान कमरे के तापमान पर अनुकूलित एक्सपोजर समय के लिए फॉस्फोर इमेजिंग प्लेट में अनुभागों का पर्दाफाश करें। एक्सपोजर के बाद, ध्यान से अंधेरे में कैसेट खोलें और तुरंत इमेजिंग प्लेट को फॉस्फोर इमेजर के अंधेरे बॉक्स में स्थानांतरित करें।डिजिटल छवि प्राप्त करने के लिए संभव उच्चतम संकल्प पर प्लेट स्कैन करें। शुरू करने के लिए, एक उपयुक्त छवि विश्लेषण कार्यक्रम खोलें। मेनू आइटम क्षेत्र निर्धारण का चयन करके प्रत्येक अंशांकन मानक के लिए सापेक्ष ऑप्टिकल घनत्व निर्धारित करें।क्षेत्र निर्माण के लिए उपकरण का चयन करें और रेडियोधर्मी माइक्रोस्केल के प्रत्येक बिंदु के लिए समान आकार के क्षेत्र का चयन करने के लिए इसका इस्तेमाल करते हैं। मेनू आइटम लेबल के तहत नंबर पर क्लिक करके प्रत्येक चयनित क्षेत्र को एक नंबर असाइन करें। अंशांकन मानक के प्रत्येक बिंदु के लिए आयुध मूल्यों का निर्यात करने के लिए फ़ाइल निर्यात और फिर 2डी क्षेत्र रिपोर्ट पर क्लिक करें।मालिकाना इमेजिंग सॉफ्टवेयर में, हर वर्ग में रुचि के क्षेत्र का चयन करने के लिए एक क्षेत्र निर्माण उपकरण का उपयोग करें और ऑटोरेडियोग्राम के मात्राकरण का प्रदर्शन शुरू करने के लिए इसके ODs को मापने के लिए। ब्याज और प्रतिलिपि के क्षेत्र के लिए एक टेम्पलेट बनाकर हर अनुभाग में एक ही क्षेत्र का चयन करें और प्रत्येक ऑटोरेडियोग्राम में मस्तिष्क शरीर रचना विज्ञान में मामूली विविधताओं के लिए इसे समायोजित करें। इसके बाद, चयनित क्षेत्रों के रॉड मूल्यों और आकारों को स्प्रेडशीट में निर्यात करने के लिए फ़ाइल निर्यात 2D क्षेत्र रिपोर्ट पर क्लिक करें।पाठ प्रोटोकॉल में उल्लिखित रेडियोलिगांग के बंधन का निर्धारण करें। इस अध्ययन में, उच्च आत्मीयता जीएचबी बाध्यकारी साइटों के शारीरिक वितरण को माउस मस्तिष्क में रेडियोलेबल जीएचबी एनालॉग रेडियोधर्मी होपीसीए के साथ कल्पना की जाती है जिसे कोरोनल, सगिटल और क्षैतिज वर्गों में काटा गया था। हिप्पोकैम्पस और कॉर्टेक्स में बाध्यकारी के उच्च स्तर को देखा जाता है जबकि स्ट्राटम में निचले बाध्यकारी स्तर देखे जाते हैं और सेरिबैलम में कोई बाध्यकारी नहीं पाया जाता है।जैसा कि यहां दिखाया गया है, विभिन्न विमानों का उपयोग करके शारीरिक संरचनाओं की कल्पना की जा सकती है और शारीरिक अखंडता को क्रेसिल वायलेट स्टेनिंग द्वारा समर्थित किया जा सकता है। चूहे, माउस और सुअर के प्रतिनिधि ऑटोरेडियोग्राम स्तनधारी मस्तिष्क में उच्च आत्मीयता जीएचबी बाध्यकारी साइटों के विकासवादी संरक्षण को दर्शाते हैं। रेडियोधर्मी HOCPCA बाध्यकारी साइटों उन दोनों के बीच सकल मस्तिष्क शरीर रचना विज्ञान की तुलना को सक्षम करने के सभी तीन प्रजातियों में पाया जाता है ।उच्च आत्मीयता जीएचबी बाध्यकारी साइटों की जांच जीएचबी रेडियोलिगांगों के साथ की जाती है जो बाध्यकारी साइटों के लिए विभिन्न समानताएं प्रदर्शित करती हैं लेकिन तुलनीय विशिष्ट गतिविधियों। रेडियोधर्मी HOCPCA शोर अनुपात के लिए एक उच्च संवेदनशीलता और उत्कृष्ट संकेत के साथ संपन्न है । रेडियोधर्मी एनसीएस-382 की कम संवेदनशीलता के कारण, बाध्यकारी के समान स्तर प्राप्त करने के लिए उच्च रेडियोलिगांग सांद्रता का उपयोग किया जाना चाहिए।यहां तक कि रेडियोधर्मी जीएचबी के लिए तुलनीय बाध्यकारी स्तर प्राप्त करने के लिए उच्च रेडियोलिगांग सांद्रता आवश्यक हैं। हालांकि, उच्च रेडियोलिगांग सांद्रता भी शोर अनुपात के लिए एक फलस्वरूप कम संकेत के साथ गैर विशिष्ट बाध्यकारी के स्तर में वृद्धि हुई है । शोर अनुपात के लिए सबसे अच्छा संकेत प्राप्त करने के लिए रेडियोलीगॉन्ड एकाग्रता, धोने और एक्सपोजर समय जैसी परख स्थितियों को अनुकूलित करना महत्वपूर्ण है और इससे पहले प्लेट को मिटाना याद रखना भी बहुत महत्वपूर्ण है।प्रक्रिया को वीवो स्थितियों में विस्तारित किया जा सकता है ताकि एक जीवित जानवर में यौगिक बाध्यकारी के बारे में एक विचार प्राप्त किया जा सके जो खोज परियोजनाओं के लिए उपयोगी हो सकता है। प्रमाणित पूर्ण रेडियोधर्मी सामग्री के साथ एक प्रयोगशाला में काम करने के लिए और रेडियोधर्मिता या पैराफॉर्मलडिहाइड से निपटने के दौरान सुरक्षात्मक कपड़े पहनने के लिए याद रखें।

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A Simple Composite Phenotype Scoring System for Evaluating Mouse Models of Cerebellar Ataxia

अनुमस्तिष्क गतिभंग के माउस मॉडल का मूल्यांकन करने के लिए एक सरल समग्र Phenotype स्कोरिंग सिस्टम

We describe a protocol for the rapid and sensitive quantification of disease severity in mouse models of cerebella ataxia. It is derived from previously ...

Novel Apparatus and Method for Drug Reinforcement

उपन्यास और औषधि सुदृढीकरण के लिए उपकरण की विधि

Animal models of reinforcement have proven to be useful for understanding the neurobiological mechanisms underlying drug addiction.  Operant drug ...

The Vermicelli and Capellini Handling Tests: Simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice

सेंवई और Capellini हैंडलिंग टेस्ट: चूहों और चूहों में निपुण forepaw समारोह के सरल मात्रात्मक उपायों

Previous characterizations of rodent eating behavior have revealed that they use coordinated forepaw movements to manipulate food pieces. We have extended ...

Automated Interactive Video Playback for Studies of Animal Communication

पशु संचार के अध्ययन के लिए स्वचालित इंटरएक्टिव वीडियो प्लेबैक

Video playback is a widely-used technique for the controlled manipulation and presentation of visual signals in animal communication. In particular, ...

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

में Proprioceptors का विज़ुअलाइज़ेशन<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; लार्वा और pupae

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other ...

Visualization and Genetic Manipulation of Dendrites and Spines in the Mouse Cerebral Cortex and Hippocampus using In utero Electroporation

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और माउस मस्तिष्क प्रांतस्था और हिप्पोकैम्पस का उपयोग में Dendrites और कांटा के आनुवंशिक हेरफेर विज़ुअलाइज़ेशन<em&gt; Utero में</em&gt; Electroporation

In utero electroporation (IUE) has become a powerful technique to study the development of different regions of the embryonic nervous system 1-5. To date ...

Ex utero Electroporation and Whole Hemisphere Explants: A Simple Experimental Method for Studies of Early Cortical Development

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पूर्व utero electroporation और पूरे गोलार्ध explants: प्रारंभिक Cortical विकास के अध्ययन के लिए एक सरल प्रयोगात्मक विधि

Cortical development involves complex interactions between neurons and non-neuronal elements including precursor cells, blood vessels, meninges and ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

चूहे में ठंड संवेदनशीलता और अनुकूलन के निर्धारण के लिए एक सरल और सस्ता तरीका

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Live Imaging of Nicotine Induced Calcium Signaling and Neurotransmitter Release Along Ventral Hippocampal Axons

निकोटीन प्रेरित कैल्शियम संकेतन और उदर Hippocampal Axons साथ neurotransmitter रिहाई के रहते इमेजिंग

Sustained enhancement of axonal signaling and increased neurotransmitter release by the activation of pre-synaptic nicotinic acetylcholine receptors ...

A Simple Alternative to Stereotactic Injection for Brain Specific Knockdown of miRNA

MiRNA के मस्तिष्क विशिष्ट पछाड़ना के लिए stereotactic इंजेक्शन के लिए एक आसान विकल्प

MicroRNAs (miRNAs) are key regulators of gene expression.  In the brain, vital processes like neurodevelopment and neuronal functions depend on the ...