Name: using microarrays to interrogate microenvironmental impact on cellular phenotypes in cancer
Uploaded: 2019-05-21T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer at JoVE.com

وقد تم دعم هذا العمل من قبل مكتبة الصندوق المشترك للشبكات (LINCS) منحة HG008100 (J.W.G., L.M.H., وJ.E.K).

ملاحظة: ويرد في الرسم التخطيطي للتدفق المبين في الشكل 1عرض عام للعملية MEMA بأكملها، بما في ذلك الوقت المقدر. هذا البروتوكول تفاصيل تصنيع MEMAs في لوحات 8-جيدا. قد يتم تكييف البروتوكول للوحات أو شرائح أخرى.
1. إعداد البروتين، ومخفف، وتلطيخ المخازن المؤقتة</...

<ol>
	<li>Hanahan, D., Coussens, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accessories+to+the+crime:+functions+of+cells+recruited+to+the+tumor+microenvironment.">Accessories to the crime: functions of cells recruited to the tumor microenvironment.</a> Cancer Cell. 21 (3), 309-322 (2012).</li><li>Quail, D. F., Joyce, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironmental+regulation+of+tumor+progression+and+metastasis.">Microenvironmental regulation of tumor progression and metastasis.</a> Nature Medicine. 19 (11), 1423-1437 (2013).</li><li>Hughes, C. S., Postovit, L. M., Lajoie, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrigel:+a+complex+protein+mixture+required+for+optimal+growth+of+cell+culture.">Matrigel: a complex protein mixture required for optimal growth of cell culture.</a> Proteomics. 10 (9), 1886-1890 (2010).</li><li>LaBarge, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+mammary+progenitor+cell+fate+decisions+are+products+of+interactions+with+combinatorial+microenvironments.">Human mammary progenitor cell fate decisions are products of interactions with combinatorial microenvironments.</a> Integrative Biology (Cambridge). 1 (1), 70-79 (2009).</li><li>Watson, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironment-Mediated+Mechanisms+of+Resistance+to+HER2+Inhibitors+Differ+between+HER2++Breast+Cancer+Subtypes.">Microenvironment-Mediated Mechanisms of Resistance to HER2 Inhibitors Differ between HER2+ Breast Cancer Subtypes.</a> Cell Systems. 6 (3), 329-342 (2018).</li><li>Ranga, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+niche+microarrays+for+systems-level+analyses+of+cell+fate.">3D niche microarrays for systems-level analyses of cell fate.</a> Nature Communications. 5, 4324 (2014).</li><li>Malta, D. F. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+microarrays+to+study+inductive+signaling+for+endoderm+specification.">Extracellular matrix microarrays to study inductive signaling for endoderm specification.</a> Acta Biomater. 34, 30-40 (2016).</li><li>Kamentsky, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+structure,+function+and+compatibility+for+CellProfiler:+modular+high-throughput+image+analysis+software.">Improved structure, function and compatibility for CellProfiler: modular high-throughput image analysis software.</a> Bioinformatics. 27 (8), 1179-1180 (2011).</li><li>Gagnon-Bartsch, J. A., Jacob, L., Speed, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Removing+Unwanted+Variation+from+High+Dimensional+Data+with+Negative+Controls.">Removing Unwanted Variation from High Dimensional Data with Negative Controls.</a> University of California, Berkeley, Department of Statistics, University of California, Berkeley. , (2013).</li><li>Allan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OMERO:+flexible,+model-driven+data+management+for+experimental+biology.">OMERO: flexible, model-driven data management for experimental biology.</a> Nature Methods. 9 (3), 245-253 (2012).</li><li>Simian, M., Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids:+A+historical+perspective+of+thinking+in+three+dimensions.">Organoids: A historical perspective of thinking in three dimensions.</a> Journal of Cell Biology. 216 (1), 31-40 (2017).</li><li>Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+differentiated+state+of+normal+and+malignant+cells+or+how+to+define+a+"normal"+cell+in+culture.">The differentiated state of normal and malignant cells or how to define a "normal" cell in culture.</a> International Review of Cytology. 70, 27-100 (1981).</li><li>Serban, M. A., Prestwich, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modular+extracellular+matrices:+solutions+for+the+puzzle.">Modular extracellular matrices: solutions for the puzzle.</a> Methods. 45 (1), 93-98 (2008).</li><li>Kaylan, K. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+lung+tumor+cell+drug+responses+as+a+function+of+matrix+context+and+genotype+using+cell+microarrays.">Mapping lung tumor cell drug responses as a function of matrix context and genotype using cell microarrays.</a> Integrative Biology (Cambridge). 8 (12), 1221-1231 (2016).</li><li>Lin, C. H., Jokela, T., Gray, J., LaBarge, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combinatorial+Microenvironments+Impose+a+Continuum+of+Cellular+Responses+to+a+Single+Pathway-Targeted+Anti-cancer+Compound.">Combinatorial Microenvironments Impose a Continuum of Cellular Responses to a Single Pathway-Targeted Anti-cancer Compound.</a> Cell Reports. 21 (2), 533-545 (2017).</li><li>Gjorevski, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Designer+matrices+for+intestinal+stem+cell+and+organoid+culture.">Designer matrices for intestinal stem cell and organoid culture.</a> Nature. 539 (7630), 560-564 (2016).</li></ol>

كانت أهمية "الأبعاد" والسياق عاملاً محفزاً في تطوير أنظمة الثقافة المختبرية كأدوات في توصيف الخلايا السرطانية من خلال تفاعلها مع البيئة الدقيقة11،وقدرة المختبر نظم الثقافة لتقليد البيئة في الجسم الحي هو القوة الدافعة وراء السعي لتحسين تلك النظم الثقافية. في النظم المختبرية،...

يبقى زراعة خطوط الخلايا السرطانية على البلاستيك في الطبقات الأحادية ثنائية الأبعاد (ثنائية الأبعاد) واحدة من خيول العمل الرئيسية للباحثين عن السرطان. ومع ذلك، يتم الاعتراف بشكل متزايد البيئة الدقيقة لقدرتها على التأثير على الأنماط الظاهرية الخلوية. في السرطان، ومن المعروف أن البيئة الدقيقة الورم تؤثر على السلوكيات الخلوية متعددة، بما في ذلك النمو، والبقاء على قيد الحياة، والغزو، والاستجابة للعلاج1،2. عادة ما تفتقر ثقافات الخلايا أحادية الطبقة التقليدية إلى تأثيرات البيئة الدقيقة، مما أدى إلى تطوير تجارب ثلاثية الأبعاد (ثلاثية الأبعاد) أكثر تعقيداً لزراعة الخلايا، بما في ذلك مستخلصات غشاء الطابق السفلي النقي المتاحة تجارياً. ومع ذلك، فإن هذه المصفوفات النقية عادة ما تكون معقدة للاستخدام وتعاني من مشاكل تقنية مثل تقلب الدفعة3 والتركيبات المعقدة3. ونتيجة لذلك، قد يكون من الصعب تعيين وظيفة لبروتينات محددة قد تؤثر على الأنماط الظاهرية الخلوية3.
لمعالجة هذه القيود، قمنا بتطوير تقنية microarray microenvironment (MEMA)، مما يقلل من البيئة الدقيقة وصولا ً إلى تركيبات بسيطة من المصفوفة خارج الخلية (ECM) وبروتينات عامل النمو القابلة للذوبان4،5 . منصة MEMA تمكن من تحديد العوامل البيئية الصغرية المهيمنة التي تؤثر على سلوك الخلايا. باستخدام تنسيق صفيف، يمكن وضع حد لآلاف المجموعات من عوامل البيئة الدقيقة في تجربة واحدة. ال [مّا] يوصف هنا يستجوب ~2,500 مختلفة فريدة [ميكروفيول] شروط. البروتينات ECM المطبوعة في لوحات جيدا تشكل منصات النمو التي يمكن أن تكون المستزرعة الخلايا. يتم إضافة الأربطة القابلة للذوبان إلى الآبار الفردية، مما يخلق بيئات صغيرة مؤتلفة فريدة من نوعها (ECM + ligand) على كل بقعة مختلفة تتعرض لها الخلايا. يتم زراعة الخلايا لعدة أيام، ثم ثابتة، ملطخة، وصورة لتقييم الأنماط الظاهرية الخلوية نتيجة للتعرض لهذه تركيبات البيئة الدقيقة المحددة. وبما أن البيئات الدقيقة هي تركيبات بسيطة، فمن السهل تحديد البروتينات التي تدفع التغيرات الفينوتية الرئيسية في الخلايا. وقد استخدمت MEMAs بنجاح لتحديد العوامل التي تؤثر على الأنماط الظاهرية الخلويةالمتعددة، بما في ذلك تلك التي تدفع قرارات مصير الخلية والاستجابة للعلاج 4،5،6،7. ويمكن التحقق من صحة هذه الاستجابات في تجارب بسيطة 2D ومن ثم يمكن تقييمها في ظل ظروف أن يلخص بشكل أكمل تعقيد البيئة الدقيقة الورم. منصة MEMA قابلة للتكيف إلى حد كبير مع مجموعة متنوعة من أنواع الخلايا ونقاط النهاية، شريطة أن تتوفر علامات حيوية فينوتيبيك جيدة.

using microarrays to interrogate microenvironmental impact on cellular phenotypes in cancer

فهم تأثير البيئة الدقيقة على النمط الظاهري للخلايا مشكلة صعبة بسبب الخليط المعقد من كل من عوامل النمو القابلة للذوبان والبروتينات المرتبطة بالمصفوفة في البيئة الدقيقة في الجسم الحي. وعلاوة على ذلك، فإن الكواشف المتاحة بسهولة لنمذجة البيئات الدقيقة في المختبر تستخدم عادة خليطا معقدا من البروتينات التي يتم تعريفها بشكل غير كامل وتعاني من تقلب الدفعة إلى الدفعية. تسمح منصة microarray microenvironment (MEMA) بتقييم الآلاف من التركيبات البسيطة من بروتينات البيئة الدقيقة لتأثيرها على الأنماط الظاهرية الخلوية في اختبار واحد. يتم إعداد MEMAs في لوحات جيدا، والذي يسمح بإضافة الأربطة الفردية لفصل الآبار التي تحتوي على مصفوفة مصفوفة مصفوفة مصفوفة مصفوفة (ECM) البروتينات. مزيج من الرباط القابلة للذوبان مع كل ECM المطبوعة تشكل مزيجا فريدا من نوعه. يحتوي اختبار MEMA النموذجي على أكثر من 2500 بيئة صغيرة مؤتلفة فريدة من نوعها تتعرض لها الخلايا في اختبار واحد. كحالة اختبار، تم طلاء خط خلايا سرطان الثدي MCF7 على منصة MEMA. وقد حدد تحليل هذا التحليل العوامل التي تعزز وتعوق نمو وانتشار هذه الخلايا. منصة MEMA مرنة للغاية ويمكن تمديدها للاستخدام مع المسائل البيولوجية الأخرى خارج أبحاث السرطان.

ولتبسيط الآثار البيئية الدقيقة على نمو الخلايا وانتشارها وتحديد الظروف التي تعزز أو تمنع نمو الخلايا وانتشارها، تم زرع خط خلايا سرطان الثدي MCF7 على مجموعة من ثمانية من الاتفاقيات البيئية المتوسطة والمتوسطة 8 الآبار على النحو المبين في البروتوكول. وقد عرّض هذا التقييم الخلايا إلى 48 جهازاً ...

Watch this Scientific Journal Video about Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer at JoVE.com

Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer

الغرض من الطريقة المعروضة هنا هو إظهار كيف يمكن تصنيع النُفَج ّة الدقيقة للبيئة الدقيقة (MEMA) واستخدامها لاستجواب تأثير آلاف البيئات الدقيقة المؤتلفة البسيطة على النمط الظاهري للخلايا المستزرعة.

استخدام المصفوفات الدقيقة لاستجواب الأثر البيئي الدقيق على الأنماط الظاهرية الخلوية في السرطان

Understanding the impact of the microenvironment on the phenotype of cells is a difficult problem due to the complex mixture of both soluble growth ...

دراسة البيئة الدقيقة الورم أمر صعب بسبب تعقيده. لقد قمنا بتطوير microvirarrays البيئة الدقيقة التي تتكون من بيئات صغيرة بسيطة combinatorial التي تسمح بتحديد الدوافع الرئيسية للنمط الظاهري الخلايا السرطانية. الميزة الرئيسية لمنصة MEMA هي أنه نظرًا لأن ظروف البيئة الدقيقة محددة جميعًا ، فمن السهل تحديد عوامل البيئة الدقيقة التي تحرك الأنماط الظاهرية من الاهتمام.منصة MEMA قابلة للتطبيق على نطاق واسع في النظم الأخرى غير السرطانية، بما في ذلك سلالات الخلايا الأولية والخلايا الجذعية. هناك عدد من الحيل الهندسية والخطوات التي قمنا بتطويرها لتسريع العمل على مقاعد البدلاء الرطب وتبسيط البروتوكول. للبدء، استخدم طابعة دبوس اللمس لطباعة خليط طباعة المصفوفة خارج الخلية في بقع فيدوسي في لوحات ثمانية-جيدا.استخدم دبابيس قطرها 350 ميكرومتر مرتبة في تكوين رأس طباعة أربع مرات وسبع لطباعة المصفوفة خارج الخلية للميكراتوميات البيئة الدقيقة. يتم طباعة كتلة الكولاجين على MEMAs كشبكات. توفر الآبار المملوءة بـ PBS رطوبة إضافية لمنع جفاف لوحة مصدر خليط المصفوفة الخارجية الخلية.اطبع الصفيفات في اللوحات ذات الثمانية بئر كـ 20 عموداً بـ 35 صفاً، وذلك لما مجموعه 700 نقطة. بعد الطباعة، لوحات تخزين في مجفف لمدة لا تقل عن ثلاثة أيام قبل الاستخدام. أولاً، تصميم تخطيط لوحة 96-well مع التباعد الذي يسمح باستخدام ماصة متعددة القنوات مع أربع نصائح متباعدة، بحيث يمكن معالجة العديد من لوحات MEMA في وقت واحد.ثم استرداد اليغاندات من الثلاجة، وذوبان الجليد في غطاء محرك تدفق لامينار. نفض الغبار لفترة وجيزة وتدور أسفل كل أنبوب. استخدم المخزن المؤقت الموصى به من قبل الشركة المصنعة لتخفيف الأربطة إلى مخزون عامل 200 مرة.Pipette 10 ميكروليترس من كل 200 مرة الأسهم يغاند في المقابلة جيدا داخل لوحة 96 جيدا. استخدام فيلم الختم لختم لوحات وتخزينها في ناقص-20 درجة مئوية. جعل لوحات العلاج ligand على دفعات، والتقاط جميع البيانات الوصفية لتحليل المصب.قبل الخلايا الاستزراع، حظر MEMAs مع ميليلترتين في بئر من المخزن المؤقت حظر nonfouling لمدة 20 دقيقة. استخدام Y-المقسم مع اثنين من ماصات باستور لpirate العازلة سد في آبار متعددة في وقت واحد، ومن ثم ثلاثة أضعاف غسل الآبار مع برنامج تلفزيوني. لمنع جفاف، وترك حجم النهائي من برنامج تلفزيوني في الآبار حتى جاهزة لطلاء الخلية.قبل تجربة MEMA كاملة، تحسين تركيز البذر الخلايا MCF7 عن طريق إجراء تجربة المعايرة الخلية. بقعة مثالية، كما هو مبين هنا، لديها ما يكفي من أرقام الخلايا لاستخراج البيانات، ولكن ليس الكثير أن البقعة هي التقاء مفرط. في MEMA، التعرق المتبقية PBS وبذر MCF7 الخلايا في 30، 000 إلى 35،000 الخلايا في بئر في مليلتر اثنين من البذور المتوسطة.ضع MEMA في حاضنة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. بعد التصاق بين عشية وضحاها في الحاضنة، التعرق المتوسطة واستبدالها بمليلترين من متوسطة النمو المخفضة لعزل التأثير المحفز للليغانات المحددة. ثم ذوبان لوحة علاج ligand المجمدة سابقا على الجليد.ذاب جهاز الطرد المركزي لوحة في 200 مرة ز لمدة دقيقة واحدة. نقل 200 ميكرولترات من المتوسط من كل بئر في لوحة الثقافة MEMA إلى البئر المناسبة في لوحة علاج الليجندة. الميette صعودا وهبوطا لخلط ليجند مع المتوسطة، ونقل هذا الخليط مرة أخرى إلى البئر المناسبة في لوحة الثقافة MEMA.صخرة طفيفة باليد وإعادة لوحات MEMA إلى الحاضنة لثقافة مزيج ليجند-ECM في 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون. بعد 71 ساعة، أضف 100 مرة وحدة EdU إلى آبار MEMA لتركيز نهائي من 10 ميكرومولار. احتضانه لمدة ساعة أخرى في 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون.بعد الحضانة النهائية، اتعرق الآبار. قم بإصلاح MEMAs في مليلترين في بئر 2٪ PFA لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. ثم الطامح PFA من الآبار.Permeabilize مع ملليلترين في بئر من 0.1٪ السطحي غير الأيوني لمدة 15 دقيقة. التعرق السطحي، ومن ثم غسل الآبار مع ملليلتر اثنين من برنامج تلفزيوني وبرنامج تلفزيوني-T، بالتسلسل. بعد ذلك، إضافة 1.5 ملليلتر من الكواشف EdU الكشف عن التفاعل إلى كل بئر.احتضان لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة، هزاز ومحمية من الضوء. ثم إخماد رد الفعل مع 1.5 ملليلتر مخزن التبريد التجاري في البئر. التعرق مرة أخرى، ويغسل مع برنامج تلفزيوني-T قبل احتضان مع تركيزات محسنة من البقع أو الأجسام المضادة.احتضان آبار MEMA مع الأجسام المضادة الأولية في عازلة تلطيخ، هزاز في أربع درجات مئوية بين عشية وضحاها. بعد احتضان الأجسام المضادة الأولية، وغسل الآبار مع برنامج تلفزيوني تليها برنامج تلفزيوني-T. إضافة الأجسام المضادة الثانوية في 0.5 ميكروغرام لكل ملليلتر DAPI، المخفف في عازلة تلطيخ.احتضان، هزاز لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة في الظلام. غسل الآبار مرتين مع ملليلتر اثنين في بئر من برنامج تلفزيوني، وتركها في المليلترين النهائي من برنامج تلفزيوني. لصورة ملطخة MEMA، وضعه على مرحلة المجهر من نظام التصوير الآلي مع قنوات الكشف الفلورسنت المناسبة.إخراج بيانات الصورة الناتجة إلى نظام إدارة الصور. قطع الخلايا وحساب مستويات الكثافة باستخدام CellProfiler. في هذا البروتوكول، تشير ملفات تعريف دورة الخلية لقيم كثافة DAPI binned مقابل عدد الخلايا من لوحة ثمانية جيداً إلى خلايا في مرحلة G1 مقابل G2.وهذا يتوافق مع اثنين من محتوى nDNA في الخلايا في مرحلة النمو المبكر، وأربعة محتوى nDNA في الخلايا على وشك الخضوع للتصلب. ويظهر تأثير البيئة الدقيقة لليغانندات و ECM على كل من رقم الخلية وEU التأسيس. يشير اللون الأحمر إلى ارتفاع عدد الخلايا، كما أن اللون الأزرق هو رقم الخلية الأدنى.العديد من الآثار هي التي تحركها يغاند، كما لم تؤثر حالة ECM بقوة رقم الخلية أو الإيجابية EdU. Natagen 1 هو استثناء واضح، كما أن وجود هذا جزيء ECM يمنع ربط الخلايا ونمو MCF7. يغاندس مثل FGF6 و neuregulin-1 ألفا تعزيز عدد الخلايا ومعدلات عالية من دمج EdU، في حين أن يغاندس مثل أمفيريغولين ونيوريغولين-1 SMDF تمنع ربط الخلايا ونمو الخلايا.مثال على خلايا MCF7 المتنامية على بقعة MEMA تعامل مع neuregulin-1 ألفا يظهر معدلات عالية من دمج EdU، المشار إليها من قبل النوى الوردي. في هذه الصورة، البقعة الخضراء هي قناع الخلية، والأزرق هو DAPI. منذ تجربة MEMA كاملة مكلفة، من المهم جداً تنفيذ خطوات التحسين، مثل خلايا ومصل المعايرة، قبل إجراء التجربة الكاملة.مرة واحدة يتم تحديد الظروف الدقيقة البيئة من الفائدة باستخدام منصة MEMA، يمكن دراسة يغاندس محددة والبروتينات مصفوفة خارج الخلية في أكثر عمقا باستخدام التقليدية 2D و 3D نظم الخلية ثقافة.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

ال<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; تخيلي ورم القرص نموذج: التصور والكمي للالتعبير الجيني وغزو الورم عن طريق الفسيفساء الوراثية

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

Intracarotid حقن الخلية السرطانية لإنتاج نماذج الماوس من الدماغ الانبثاث

Metastasis, the spread and growth of malignant cells at secondary sites within a patient&#39;s body, accounts for &#62; 90% of cancer-related mortality. ...

Counting Proteins in Single Cells with Addressable Droplet Microarrays

عد البروتينات في الخلايا المفردة مع الحبرية عنونة [ميكروارس]

Often cellular behavior and cellular responses are analyzed at the population level where the responses of many cells are pooled together as an average ...

Using the Dot Assay to Analyze Migration of Cell Sheets

باستخدام المقايسة دوت لتحليل هجرة أوراق الخلية

Although complex organisms appear static, their tissues are under a continuous turnover. As cells age, die, and are replaced by new cells, cells move ...

Using 22C3 Anti-PD-L1 Antibody Concentrate on Biopsy and Cytology Samples from Non-small Cell Lung Cancer Patients

3 22 باستخدام الأجسام المضادة-PD-L1 تركز على خزعة وعينات عنق من مرضى سرطان الرئة من الخلايا غير الصغيرة

Pembrolizumab monotherapy has been approved for the first- and second-line treatment of patients with PD-L1-expressing advanced non-small cell lung cancer ...

Acellular and Cellular Lung Model to Study Tumor Metastasis

نموذج الرئة اللاخلوي والخلوية لدراسة ورم خبيث

It is difficult to isolate tumor cells at different points of tumor progression. We created an ex vivo lung model that can show the interaction of tumor ...

Elastic Staining on Paraffin-embedded Slides of pT3N0M0 Gastric Cancer Tissue

تلطيخ مطاطي على الشرائح جزءا لا يتجزأ من البارافين من أنسجة سرطان المعدة pT3N0M0

The elastic lamina, which is usually located in the sub-mesothelial layer, adjacent to the peritoneum mesothelial cells, is amphiphilic on hematoxylin and ...

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array (HMCA)-based Plates

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array HMCA-based Plates

تحليل لغزو خلايا السرطان والمنتشر لمكافحة المخدرات فحص استخدام صفيف المائية الصغيرة-الدائرة (همكا)-على أساس لوحات

Cancer metastasis is known to cause 90% of cancer lethality. Metastasis is a multistage process which initiates with the penetration/invasion of tumor ...

Characterize Disease-related Mutants of RAF Family Kinases by Using a Set of Practical and Feasible Methods

تميز المسوخ ذات الصلة بالأمراض من Kinases الأسرة سلاح الجو الملكي البريطاني باستخدام مجموعة من الأساليب العملية والممكنة

The rapidly accelerated fibrosarcoma (RAF) family kinases play a central role in cell biology and their dysfunction leads to cancers and developmental ...

Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter

تحديد منظمي عوامل النسخ باستخدام فحص متوسط الإنتاجية للمكتبات المصصفوفة ومراسل ثنائي لوسيفراز القائم

Transcription factors can alter the expression of numerous target genes that influence a variety of downstream processes making them good targets for ...