Name: using microarrays to interrogate microenvironmental impact on cellular phenotypes in cancer
Uploaded: 2019-05-21T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af NIH Common fund library for Network Cellular signaturer (LINCS) Grant HG008100 (J.W.G., L.M.H. og J. E. K).

Bemærk: En oversigt over hele MEMA-processen, herunder Anslået tid, er skitseret i det flowdiagram, der vises i figur 1. Denne protokol beskriver fremstillingen af MEMAs i 8-brønd plader. Protokollen kan tilpasses til andre plader eller dias.
1. fremstilling af protein-, fortyndings-og farvnings buffere
<ol><li>Ækvibrere hætteglas med ECMs, ligands og cytokiner til rumtemperatur (RT) og centrifugeres kortvarigt. Tilføj passende volumen af ...

<ol>
	<li>Hanahan, D., Coussens, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accessories+to+the+crime:+functions+of+cells+recruited+to+the+tumor+microenvironment.">Accessories to the crime: functions of cells recruited to the tumor microenvironment.</a> Cancer Cell. 21 (3), 309-322 (2012).</li><li>Quail, D. F., Joyce, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironmental+regulation+of+tumor+progression+and+metastasis.">Microenvironmental regulation of tumor progression and metastasis.</a> Nature Medicine. 19 (11), 1423-1437 (2013).</li><li>Hughes, C. S., Postovit, L. M., Lajoie, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrigel:+a+complex+protein+mixture+required+for+optimal+growth+of+cell+culture.">Matrigel: a complex protein mixture required for optimal growth of cell culture.</a> Proteomics. 10 (9), 1886-1890 (2010).</li><li>LaBarge, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+mammary+progenitor+cell+fate+decisions+are+products+of+interactions+with+combinatorial+microenvironments.">Human mammary progenitor cell fate decisions are products of interactions with combinatorial microenvironments.</a> Integrative Biology (Cambridge). 1 (1), 70-79 (2009).</li><li>Watson, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironment-Mediated+Mechanisms+of+Resistance+to+HER2+Inhibitors+Differ+between+HER2++Breast+Cancer+Subtypes.">Microenvironment-Mediated Mechanisms of Resistance to HER2 Inhibitors Differ between HER2+ Breast Cancer Subtypes.</a> Cell Systems. 6 (3), 329-342 (2018).</li><li>Ranga, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+niche+microarrays+for+systems-level+analyses+of+cell+fate.">3D niche microarrays for systems-level analyses of cell fate.</a> Nature Communications. 5, 4324 (2014).</li><li>Malta, D. F. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+microarrays+to+study+inductive+signaling+for+endoderm+specification.">Extracellular matrix microarrays to study inductive signaling for endoderm specification.</a> Acta Biomater. 34, 30-40 (2016).</li><li>Kamentsky, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+structure,+function+and+compatibility+for+CellProfiler:+modular+high-throughput+image+analysis+software.">Improved structure, function and compatibility for CellProfiler: modular high-throughput image analysis software.</a> Bioinformatics. 27 (8), 1179-1180 (2011).</li><li>Gagnon-Bartsch, J. A., Jacob, L., Speed, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Removing+Unwanted+Variation+from+High+Dimensional+Data+with+Negative+Controls.">Removing Unwanted Variation from High Dimensional Data with Negative Controls.</a> University of California, Berkeley, Department of Statistics, University of California, Berkeley. , (2013).</li><li>Allan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OMERO:+flexible,+model-driven+data+management+for+experimental+biology.">OMERO: flexible, model-driven data management for experimental biology.</a> Nature Methods. 9 (3), 245-253 (2012).</li><li>Simian, M., Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids:+A+historical+perspective+of+thinking+in+three+dimensions.">Organoids: A historical perspective of thinking in three dimensions.</a> Journal of Cell Biology. 216 (1), 31-40 (2017).</li><li>Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+differentiated+state+of+normal+and+malignant+cells+or+how+to+define+a+"normal"+cell+in+culture.">The differentiated state of normal and malignant cells or how to define a "normal" cell in culture.</a> International Review of Cytology. 70, 27-100 (1981).</li><li>Serban, M. A., Prestwich, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modular+extracellular+matrices:+solutions+for+the+puzzle.">Modular extracellular matrices: solutions for the puzzle.</a> Methods. 45 (1), 93-98 (2008).</li><li>Kaylan, K. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+lung+tumor+cell+drug+responses+as+a+function+of+matrix+context+and+genotype+using+cell+microarrays.">Mapping lung tumor cell drug responses as a function of matrix context and genotype using cell microarrays.</a> Integrative Biology (Cambridge). 8 (12), 1221-1231 (2016).</li><li>Lin, C. H., Jokela, T., Gray, J., LaBarge, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combinatorial+Microenvironments+Impose+a+Continuum+of+Cellular+Responses+to+a+Single+Pathway-Targeted+Anti-cancer+Compound.">Combinatorial Microenvironments Impose a Continuum of Cellular Responses to a Single Pathway-Targeted Anti-cancer Compound.</a> Cell Reports. 21 (2), 533-545 (2017).</li><li>Gjorevski, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Designer+matrices+for+intestinal+stem+cell+and+organoid+culture.">Designer matrices for intestinal stem cell and organoid culture.</a> Nature. 539 (7630), 560-564 (2016).</li></ol>

Betydningen af "dimensionalitet" og sammenhæng har været en motiverende faktor i udviklingen af in vitro-kultur systemer som redskaber til karakterisering af kræftceller gennem deres interaktion med mikromiljøet11, og evnen til in vitro- kultur systemer til at efterligne in vivo miljøet er en drivkraft bag jagten på at forbedre disse kultur systemer. In vitro-systemer, dog fortsat betydelige værktøjer til kræftforskning netop på grund af deres evne til at opløse den komplekse in vivo si...

Dyrkning af Cancer cellelinjer på plastik i to-dimensionelle (2D) monolag er fortsat en af de store arbejdsheste for kræftforskere. Men, mikromiljøet er i stigende grad anerkendt for sin evne til at påvirke cellulære fænotyper. I kræft, tumor mikromiljø er kendt for at påvirke flere cellulære adfærd, herunder vækst, overlevelse, invasion, og respons på terapi1,2. Traditionelle enkeltlags cellekulturer typisk mangler mikromiljø påvirkninger, som har ført til udviklingen af mere komplekse tredimensionelle (3D) assays at dyrke celler, herunder kommercielt tilgængelige renset kælder membran ekstrakter. Men disse rensede matricer er typisk komplicerede at bruge og lider af tekniske problemer såsom batch variation3 og komplekse kompositioner3. Som et resultat, det kan være vanskeligt at tildele funktion til specifikke proteiner, der kan påvirke cellulære fænotyper3.
For at imødegå disse begrænsninger har vi udviklet mikromiljømikrosystemet (mema) teknologi, som reducerer mikromiljøet ned til enkle kombinationer af ekstracellulære matrix (ECM) og opløselige vækstfaktor proteiner4,5 . MEMA-platformen gør det muligt at identificere dominerende mikromiljømæssige faktorer, der påvirker cellernes opførsel. Ved at bruge et array-format kan tusindvis af kombinationer af mikromiljø faktorer blive analyseret i et enkelt eksperiment. MEMA beskrevet her forhør ~ 2.500 forskellige unikke mikromiljø betingelser. ECM proteiner trykt i brønden plader form vækst puder på hvilke celler kan dyrkes. Opløselige ligander tilsættes til individuelle brønde, hvilket skaber unikke kombinatoriske mikromiljøer (ECM + ligand) på hvert andet sted, som cellerne er eksponeret for. Celler dyrkes i flere dage, derefter fast, plettet, og afbildet at vurdere cellulære fænotyper som følge af eksponering for disse specifikke mikromiljø kombinationer. Da mikromiljøer er enkle kombinationer, er det ligetil at identificere proteiner, der kører store fænotypiske ændringer i celler. Memas er blevet brugt med succes til at identificere faktorer, der påvirker flere cellulære fænotyper, herunder dem, der drev celle skæbne beslutninger og reaktion på terapi4,5,6,7. Disse reaktioner kan valideres i simple 2D eksperimenter og kan derefter vurderes under forhold, der mere fuldstændigt rekapitulere kompleksiteten af tumor mikromiljø. MEMA platformen er meget tilpasningsdygtig til en række forskellige celletyper og endepunkter, forudsat at gode fænotypiske biomarkører er tilgængelige.

using microarrays to interrogate microenvironmental impact on cellular phenotypes in cancer

Forståelse af mikromiljøets indvirkning på fænotype af celler er et vanskeligt problem på grund af den komplekse blanding af både opløselige vækstfaktorer og matrix-associerede proteiner i mikromiljøet in vivo. Endvidere, let tilgængelige reagenser til modellering af mikromiljøer in vitro typisk udnytter komplekse blandinger af proteiner, der er ufuldstændigt defineret og lider af batch til batch variabilitet. Micro Environment microarray (MEMA) platformen giver mulighed for vurdering af tusindvis af enkle kombinationer af mikromiljø proteiner for deres indvirkning på cellulære fænotyper i en enkelt analyse. Memas er tilberedt i brønd plader, som tillader tilsætning af individuelle ligander til at adskille brønde, der indeholder klædt ekstracellulære matrix (ECM) proteiner. Kombinationen af det opløselige ligand med hver trykt ECM danner en unik kombination. En typisk MEMA-analyse indeholder mere end 2.500 unikke kombinatoriske mikromiljøer, som cellerne eksponeres for i en enkelt analyse. Som en test Case, brystkræft cellelinje MCF7 blev belagt på MEMA platformen. Analysen af denne analyse identificerede faktorer, der både forbedrer og hæmmer væksten og spredningen af disse celler. MEMA platformen er meget fleksibel og kan udvides til brug med andre biologiske spørgsmål ud over kræftforskning.

For at forenkle mikromiljømæssige påvirkninger af cellevækst og-spredning og for at identificere forhold, der fremmede eller hæmmede cellevækst og-spredning, blev brystkræft celle linjen MCF7 seedet på et sæt af otte 8-godt MEMAs som beskrevet i protokollen. Denne analyse eksponerede cellerne til 48 forskellige ECMs og 57 forskellige ligands, for i alt 2736 kombinatoriske mikromiljømæssige forhold. Efter 71 h i kulturen blev cellerne pulseret med EdU, fikseret, gennemsyret og plettet med DAPI, reaktionen for E...

Watch this Scientific Journal Video about Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer at JoVE.com

Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer

Formålet med den metode, der præsenteres her, er at vise, hvordan mikromiljø mikroarrays (MEMA) kan fremstilles og bruges til at afhøre virkningen af tusindvis af enkle kombinatoriske mikromiljøer på Fænotypen af dyrkede celler.

Brug af Mikroarrays til at afhøre mikromiljø påvirkning af cellulære Phenotyper i Cancer

Understanding the impact of the microenvironment on the phenotype of cells is a difficult problem due to the complex mixture of both soluble growth ...

Undersøgelse af tumor mikromiljø er vanskeligt på grund af dens kompleksitet. Vi har udviklet mikromiljø mikroarrays bestående af enkle kombinatoriske mikromiljøer, der gør det muligt at identificere de vigtigste drivkræfter for tumorcellefænotyper. Den største fordel ved MEMA-platformen er, at fordi mikromiljøbetingelserne alle er defineret, er det ligetil at identificere mikromiljøfaktorer, der driver fænotyper af interesse.MEMA-platformen er bredt anvendelig i andre ikke-kræftsystemer, herunder primære cellestammer og stamceller. Der er en række tekniske tricks og trin, som vi har udviklet til at fremskynde den våde bænk arbejde og forenkle protokollen. Til at begynde, skal du bruge en touch pin printer til at udskrive ekstracellulære matrix print blanding i fiducial pletter i otte-brønd plader.Brug 350-mikrometer diameter stifter arrangeret i en fire gange syv print hoved konfiguration til at udskrive den ekstracellulære matrix for mikromiljø microarrays. Kollagenblokken udskrives på MMA'er som gitter. PBS-fyldte brønde giver ekstra fugtighed for at forhindre udtørring af den ekstracellulære matrixprintblandingskildeplade.Udskriv arrays i de otte-brønd plader som 20 kolonner med 35 rækker, for i alt 700 pletter. Efter udskrivning opbevares pladerne i en ekssiccator i mindst tre dage før brug. Først skal du designe en 96-brønd plade layout med afstand, der giver mulighed for brug af en multi-kanal pipette med fire afstand tips, således at behandlingen af mange MEMA plader kan gøres på én gang.Derefter hente ligands fra fryseren, og tø i is i en laminar flow hætte. Svirp og drej kortvarigt ned hvert rør. Brug producentens anbefalede buffer til at fortynde liganerne til et 200-gange arbejdslager.Pipette 10 mikroliter af hver 200-gange ligand bestand i den tilsvarende godt inden for 96-brønd plade. Brug forsegling film til at forsegle pladerne og gemme dem på minus-20 grader Celsius. Lav ligandbehandlingsplader i batches, og optag alle metadata til downstream-analyse.Før dyrkning celler, blokere MEMAs med to milliliter per brønd af nonfouling blokering buffer i 20 minutter. Brug en Y-splitter med to Pasteur pipetter til at aspirere blokerende buffer i flere brønde på én gang, og derefter tredoble vaske brøndene med PBS. For at undgå udsivning skal du lade det sidste volumen af PBS i brøndene, indtil det er klar til cellebelægning.Før et fuldt MEMA-eksperiment optimeres MCF7-cellesåningskoncentrationen ved at udføre et celletitreringseksperiment. Et ideelt sted, som vist her, har tilstrækkelige celletal til at udtrække data, men ikke så mange, at stedet er alt for sammenløbet. I MEMA, aspirere de resterende PBS og frø MCF7 celler på 30, 000 til 35, 000 celler per brønd i to milliliter såning medium.Placer MEMA i en kuvøse på 37 grader Celsius. Efter vedhæftning natten over i inkubatoren, aspirere mediet og erstatte med to milliliter reduceret vækstmedium for at isolere de stimulerende virkninger af specifikke ligands. Tø derefter en tidligere frossen ligandbehandlingsplade op på is.Centrifuge optøet plade ved 200 gange g i et minut. Overfør 200 mikroliter af medium fra hver brønd i MEMA-kulturpladen til den passende brønd i ligandbehandlingspladen. Pipette op og ned for at blande ligaden med mediet, og overføre denne blanding tilbage til den relevante brønd i MEMA kulturpladen.Let rock i hånden og returnere MEMA plader til inkubatoren til kultur ligand-ECM kombination ved 37 grader Celsius og 5% kuldioxid. Efter 71 timer tilsættes 100 gange EdU til MEMA-brøndene for en endelig koncentration på 10 mikromolar. Inkuber det i en anden time ved 37 grader Celsius og 5% kuldioxid.Efter den endelige inkubation, aspirere brøndene. Fix MEMAs i to milliliter pr. brønd på 2% PFA i 15 minutter ved stuetemperatur. Derefter aspirere PFA fra brøndene.Permeabilize med to milliliter pr brønd på 0,1% nonionisk overfladeaktivt stof i 15 minutter. Aspirere det overfladeaktive stof, og vask derefter brøndene med to milliliter PBS og PBS-T, sekventielt. Derefter tilsættes 1,5 milliliter EdU-detektionsreaktionsreagenser til hver brønd.Inkuber i en time ved stuetemperatur, rokkende og beskyttet mod lys. Sluk derefter reaktionen med 1,5 milliliter kommerciel dæmpning buffer per brønd. Aspirere igen, og vask med PBS-T før inkubering med optimerede koncentrationer af pletter eller antistoffer.Inkuber MEMA brønde med primære antistoffer i farvning buffer, vuggende ved fire grader Celsius natten over. Efter primær antistofinkubation vaskes brønde med PBS efterfulgt af PBS-T. Tilsæt sekundære antistoffer i 0,5 mikrogram pr. milliliter DAPI, fortyndet i farvningsbuffer.Inkuber, vuggende i en time ved stuetemperatur i mørke. Vask brønde to gange med to milliliter pr. brønd PBS, og lad dem være i de sidste to milliliter PBS. For at afbilde mema, der er plettet, skal du placere den på mikroskopstadiet i et automatiseret billedsystem med passende fluorescerende detektionskanaler.Output resulterende billeddata til et billedstyringssystem. Segmentere celler og beregne intensitetsniveauer ved hjælp af CellProfiler. I denne protokol angiver cellecyklusprofiler for binned DAPI-intensitetsværdier i forhold til celletal fra en otte-brønds plade celler i G1 versus G2-cellecyklusfasen.Dette svarer til to nDNA indhold i celler i den tidlige vækstfase, og fire nDNA indhold i celler ved at gennemgå mitose. Virkningen af mikromiljø af ligands og ECM på både cellenummer og EdU-inkorporering vises. Rød angiver højere celletal, og blå er lavere celletal.Mange af virkningerne er ligand-drevet, som ECM betingelse ikke stærkt indvirkning cellenummer eller EdU positivitet. Natagen 1 er en klar undtagelse, da tilstedeværelsen af dette ECM-molekyle hæmmer cellebinding og vækst af MCF7. Ligands såsom FGF6 og neuregulin-1 alpha forbedre celletal og har høje satser for EdU inkorporering, mens ligaander såsom amphiregulin og neuregulin-1 SMDF hæmmer cellebinding og vækst af celler.Et eksempel på MCF7 celler vokser på en MEMA plet behandlet med neuregulin-1 alpha viser høje satser for EdU inkorporering, angivet med pink kerner. I dette billede er grøn pletcellemaske, og blå er DAPI. Da et fuldt MEMA-eksperiment er dyrt, er det meget vigtigt at udføre optimeringstrin, såsom celle- og serumtitreringer, før det fulde eksperiment udføres.Når mikromiljøforhold af interesse er identificeret ved hjælp af MEMA-platformen, kan de specifikke ligands og ekstracellulære matrixproteiner undersøges mere indgående ved hjælp af traditionelle 2D- og 3D-cellekultursystemer.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

Det<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginære Disc Tumor Model: Visualisering og Kvantificering af genekspression og tumorindtrængen Brug Genetic Mosaics

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

Intracarotid Cancer Cell injektion til Produce musemodeller for hjernemetastaser

Metastasis, the spread and growth of malignant cells at secondary sites within a patient&#39;s body, accounts for &#62; 90% of cancer-related mortality. ...

Counting Proteins in Single Cells with Addressable Droplet Microarrays

Counting proteiner i enkelt celler med adresserbare Droplet Microarrays

Often cellular behavior and cellular responses are analyzed at the population level where the responses of many cells are pooled together as an average ...

Using the Dot Assay to Analyze Migration of Cell Sheets

Ved hjælp af Dot analyse til at analysere Migration af celle ark

Although complex organisms appear static, their tissues are under a continuous turnover. As cells age, die, and are replaced by new cells, cells move ...

Using 22C3 Anti-PD-L1 Antibody Concentrate on Biopsy and Cytology Samples from Non-small Cell Lung Cancer Patients

Ved hjælp af 22C 3 Anti-PD-L1 antistof koncentrere sig om biopsi og cytologi prøver fra patienter med ikke-småcellet lungecancer

Pembrolizumab monotherapy has been approved for the first- and second-line treatment of patients with PD-L1-expressing advanced non-small cell lung cancer ...

Acellular and Cellular Lung Model to Study Tumor Metastasis

Acellulær og cellulære Lung Model til at studere Tumor metastaser

It is difficult to isolate tumor cells at different points of tumor progression. We created an ex vivo lung model that can show the interaction of tumor ...

Elastic Staining on Paraffin-embedded Slides of pT3N0M0 Gastric Cancer Tissue

Elastisk farvning på paraffin-indlejrede slides af pT3N0M0 gastrisk Cancer væv

The elastic lamina, which is usually located in the sub-mesothelial layer, adjacent to the peritoneum mesothelial cells, is amphiphilic on hematoxylin and ...

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array (HMCA)-based Plates

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array HMCA-based Plates

Analyse af kræft celle Invasion og anti-metastatisk stof Screening ved hjælp af Hydrogel mikro-kammer Array (HMCA)-baseret plader

Cancer metastasis is known to cause 90% of cancer lethality. Metastasis is a multistage process which initiates with the penetration/invasion of tumor ...

Characterize Disease-related Mutants of RAF Family Kinases by Using a Set of Practical and Feasible Methods

Karakterisere sygdomsrelaterede mutanter af RAF-familie kinaser ved hjælp af et sæt praktiske og gennemførlige metoder

The rapidly accelerated fibrosarcoma (RAF) family kinases play a central role in cell biology and their dysfunction leads to cancers and developmental ...

Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter

Identifikation af Transskription Factor Regulators ved hjælp af Medium-Throughput Screening af Arrayed Biblioteker og en Dual-Luciferase-baserede Reporter

Transcription factors can alter the expression of numerous target genes that influence a variety of downstream processes making them good targets for ...