Name: using microarrays to interrogate microenvironmental impact on cellular phenotypes in cancer
Uploaded: 2019-05-21T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer at JoVE.com

Dit werk werd ondersteund door de NIH common Fund Library van Network Cellular signaturen (LINCS) Grant HG008100 (J.W.G., L.M.H. en J. E. K).

Opmerking: Een overzicht van het gehele MEMA-proces, inclusief de geschatte tijd, wordt beschreven in het stroomdiagram in Figuur 1. Dit protocol Details de fabricage van MEMAs in 8-well platen. Het protocol kan worden aangepast voor andere platen of dia's.
1. bereiding van eiwitten, verdunningsmiddelen en kleurings buffers
<ol><li>Evenwichts flacons met ECMs, liganden en cytokines op kamertemperatuur (RT) en centrifugeer kort. Voeg het juiste v...

<ol>
	<li>Hanahan, D., Coussens, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accessories+to+the+crime:+functions+of+cells+recruited+to+the+tumor+microenvironment.">Accessories to the crime: functions of cells recruited to the tumor microenvironment.</a> Cancer Cell. 21 (3), 309-322 (2012).</li><li>Quail, D. F., Joyce, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironmental+regulation+of+tumor+progression+and+metastasis.">Microenvironmental regulation of tumor progression and metastasis.</a> Nature Medicine. 19 (11), 1423-1437 (2013).</li><li>Hughes, C. S., Postovit, L. M., Lajoie, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrigel:+a+complex+protein+mixture+required+for+optimal+growth+of+cell+culture.">Matrigel: a complex protein mixture required for optimal growth of cell culture.</a> Proteomics. 10 (9), 1886-1890 (2010).</li><li>LaBarge, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+mammary+progenitor+cell+fate+decisions+are+products+of+interactions+with+combinatorial+microenvironments.">Human mammary progenitor cell fate decisions are products of interactions with combinatorial microenvironments.</a> Integrative Biology (Cambridge). 1 (1), 70-79 (2009).</li><li>Watson, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironment-Mediated+Mechanisms+of+Resistance+to+HER2+Inhibitors+Differ+between+HER2++Breast+Cancer+Subtypes.">Microenvironment-Mediated Mechanisms of Resistance to HER2 Inhibitors Differ between HER2+ Breast Cancer Subtypes.</a> Cell Systems. 6 (3), 329-342 (2018).</li><li>Ranga, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+niche+microarrays+for+systems-level+analyses+of+cell+fate.">3D niche microarrays for systems-level analyses of cell fate.</a> Nature Communications. 5, 4324 (2014).</li><li>Malta, D. F. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+microarrays+to+study+inductive+signaling+for+endoderm+specification.">Extracellular matrix microarrays to study inductive signaling for endoderm specification.</a> Acta Biomater. 34, 30-40 (2016).</li><li>Kamentsky, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+structure,+function+and+compatibility+for+CellProfiler:+modular+high-throughput+image+analysis+software.">Improved structure, function and compatibility for CellProfiler: modular high-throughput image analysis software.</a> Bioinformatics. 27 (8), 1179-1180 (2011).</li><li>Gagnon-Bartsch, J. A., Jacob, L., Speed, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Removing+Unwanted+Variation+from+High+Dimensional+Data+with+Negative+Controls.">Removing Unwanted Variation from High Dimensional Data with Negative Controls.</a> University of California, Berkeley, Department of Statistics, University of California, Berkeley. , (2013).</li><li>Allan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OMERO:+flexible,+model-driven+data+management+for+experimental+biology.">OMERO: flexible, model-driven data management for experimental biology.</a> Nature Methods. 9 (3), 245-253 (2012).</li><li>Simian, M., Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids:+A+historical+perspective+of+thinking+in+three+dimensions.">Organoids: A historical perspective of thinking in three dimensions.</a> Journal of Cell Biology. 216 (1), 31-40 (2017).</li><li>Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+differentiated+state+of+normal+and+malignant+cells+or+how+to+define+a+"normal"+cell+in+culture.">The differentiated state of normal and malignant cells or how to define a "normal" cell in culture.</a> International Review of Cytology. 70, 27-100 (1981).</li><li>Serban, M. A., Prestwich, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modular+extracellular+matrices:+solutions+for+the+puzzle.">Modular extracellular matrices: solutions for the puzzle.</a> Methods. 45 (1), 93-98 (2008).</li><li>Kaylan, K. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+lung+tumor+cell+drug+responses+as+a+function+of+matrix+context+and+genotype+using+cell+microarrays.">Mapping lung tumor cell drug responses as a function of matrix context and genotype using cell microarrays.</a> Integrative Biology (Cambridge). 8 (12), 1221-1231 (2016).</li><li>Lin, C. H., Jokela, T., Gray, J., LaBarge, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combinatorial+Microenvironments+Impose+a+Continuum+of+Cellular+Responses+to+a+Single+Pathway-Targeted+Anti-cancer+Compound.">Combinatorial Microenvironments Impose a Continuum of Cellular Responses to a Single Pathway-Targeted Anti-cancer Compound.</a> Cell Reports. 21 (2), 533-545 (2017).</li><li>Gjorevski, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Designer+matrices+for+intestinal+stem+cell+and+organoid+culture.">Designer matrices for intestinal stem cell and organoid culture.</a> Nature. 539 (7630), 560-564 (2016).</li></ol>

Het belang van "dimensionaliteit" en context is een motiverende factor geweest in de ontwikkeling van in-vitro cultuur systemen als hulpmiddelen bij de karakterisering van kankercellen door hun interactie met de micro-omgeving11, en het vermogen van in vitro cultuur systemen die de in vivo-omgeving nabootsen, zijn een drijvende kracht achter de zoektocht naar verbetering van die cultuur systemen. In-vitro systemen blijven echter belangrijke instrumenten voor kankeronderzoek, juist vanwege hun verm...

Het kweken van kanker cellijnen op plastic in tweedimensionale (2D) monolagen blijft een van de belangrijkste werkpaarden voor kanker onderzoekers. Echter, de micro-omgeving wordt steeds meer erkend voor haar vermogen om cellulaire fenotypes beïnvloeden. Bij kanker, de tumor micro omgeving is bekend dat het beïnvloeden van meerdere cellulaire gedrag, met inbegrip van de groei, overleving, invasie, en reactie op therapie1,2. Traditionele monolaag celculturen hebben doorgaans geen invloed op de micro-omgeving, wat heeft geleid tot de ontwikkeling van complexere driedimensionale (3D) assays om cellen te kweken, inclusief in de handel verkrijgbare gezuiverde kelder membraan extracten. Echter, deze gezuiverde matrices zijn meestal ingewikkeld om te gebruiken en lijden aan technische problemen zoals batch variabiliteit3 en complexe composities3. Als gevolg hiervan kan het moeilijk zijn om functie toe te wijzen aan specifieke eiwitten die invloed kunnen hebben op cellulaire fenotypes3.
Om deze beperkingen aan te pakken, hebben we de micro Environment Microarray (MEMA) technologie ontwikkeld, die de micro-omgeving verlaagt tot eenvoudige combinaties van extracellulaire matrix (ECM) en oplosbare groeifactor eiwitten4,5 . Het MEMA-platform maakt identificatie mogelijk van dominante micro-omgevingsfactoren die van invloed zijn op het gedrag van cellen. Met behulp van een array-indeling, kunnen duizenden combinaties van micro-omgevingsfactoren worden getest in één experiment. De MEMA hier beschreven ondervraagt ~ 2.500 verschillende unieke micro voorwaarden. ECM-eiwitten gedrukt in goed platen vormen groei pads waarop cellen kunnen worden gekweekt. Oplosbare liganden worden toegevoegd aan individuele putten, waardoor unieke combinatorische micro-omgevingen (ECM + ligand) worden gemaakt op elke andere plek waar de cellen worden blootgesteld. Cellen worden meerdere dagen gecultiveerde, vervolgens vast, gekleurd en afbeelding gemaakt om cellulaire fenotypes te beoordelen als gevolg van blootstelling aan deze specifieke combinaties van micro omgevingen. Omdat de micro-omgevingen eenvoudige combinaties zijn, is het eenvoudig om eiwitten te identificeren die belangrijke fenotypische veranderingen in cellen stimuleren. Mema's zijn met succes gebruikt voor het identificeren van factoren die invloed hebben op meerdere cellulaire fenotypes, met inbegrip van die die de beslissingen van de cel van het lot stimuleren en de respons op therapie4,5,6,7. Deze antwoorden kunnen worden gevalideerd in eenvoudige 2D-experimenten en kunnen vervolgens worden beoordeeld onder omstandigheden die meer volledig even de complexiteit van de tumor-micro omgeving. Het MEMA-platform is zeer aanpasbaar aan een verscheidenheid aan celtypen en eindpunten, op voorwaarde dat er goede fenotypische biomarkers beschikbaar zijn.

using microarrays to interrogate microenvironmental impact on cellular phenotypes in cancer

Het begrijpen van de impact van de micro-omgeving op het fenotype van cellen is een moeilijk probleem vanwege het complexe mengsel van zowel oplosbare groeifactoren als matrix-geassocieerde eiwitten in de micro-omgeving in vivo. Bovendien, gemakkelijk beschikbare reagentia voor het modelleren van micro-omgevingen in vitro meestal gebruik maken van complexe mengsels van eiwitten die zijn niet volledig gedefinieerd en lijden aan batch variabiliteit. Het micro Environment Microarray-platform (MEMA) maakt het mogelijk om duizenden eenvoudige combinaties van micro-milieu proteïnen te beoordelen voor hun impact op cellulaire fenotypes in één enkele test. De mema's worden bereid in goed platen, die het mogelijk maakt de toevoeging van individuele liganden om putten met opgesteld extracellulaire matrix (ECM) eiwitten scheiden. De combinatie van de oplosbare ligand met elke gedrukte ECM vormt een unieke combinatie. Een typische MEMA-test bevat meer dan 2.500 unieke combinatorische micro-omgevingen waarin cellen worden blootgesteld aan een enkelvoudige test. Als test case werd de borstkanker cellijn MCF7 verguld op het MEMA-platform. Analyse van deze assay geïdentificeerd factoren die zowel verbeteren en remmen van de groei en de proliferatie van deze cellen. Het MEMA-platform is zeer flexibel en kan worden uitgebreid voor gebruik met andere biologische vragen buiten kankeronderzoek.

Om de micro-milieueffecten op celgroei en proliferatie te vereenvoudigen en om voorwaarden te identificeren die de celgroei en-proliferatie bevorderen of remmen, werd de borstkanker cellijn MCF7 op een set van acht 8-goed-Mema's, zoals beschreven in het Protocol, gesebeerd. Deze test blootgestelde de cellen aan 48 verschillende ECMs en 57 verschillende liganden, voor een totaal van 2736 combinatorische micromilieuvoor waarden. Na 71 h in de cultuur werden cellen gepulseerd met EdU, vast, doordrongen en gekleurd met DAPI,...

Watch this Scientific Journal Video about Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer at JoVE.com

Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer

Het doel van de hier gepresenteerde methode is om te laten zien hoe micro Environment micro arrays (MEMA) kunnen worden gefabriceerd en gebruikt voor het ondervragen van de impact van duizenden eenvoudige combinatorische micro-omgevingen op het fenotype van gekweekte cellen.

Micro arrays gebruiken om micro-milieueffecten te ondervragen op cellulaire fenotypes bij kanker

Understanding the impact of the microenvironment on the phenotype of cells is a difficult problem due to the complex mixture of both soluble growth ...

Het bestuderen van de tumor micro-omgeving is moeilijk vanwege de complexiteit. We hebben micro-milieumicroarrays ontwikkeld die bestaan uit eenvoudige combinatorische micro-omgevingen die het mogelijk maken belangrijke drivers van tumorcelfenotypen te identificeren. Het grote voordeel van het MEMA-platform is dat omdat de micro-omgevingscondities allemaal zijn gedefinieerd, het eenvoudig is om micro-omgevingsfactoren te identificeren die fenotypes van belang stimuleren.Het MEMA-platform is breed toepasbaar in andere niet-kankersystemen, waaronder primaire celstammen en stamcellen. Er zijn een aantal technische trucs en stappen die we hebben ontwikkeld om de natte bank werk te versnellen en het protocol te vereenvoudigen. Om te beginnen, gebruik maken van een touch pin printer om extracellulaire matrix print mengsel af te drukken in fiduciale vlekken in acht-well platen.Gebruik pinnen met een diameter van 350 micrometer in een vier-keer-zeven printkopconfiguratie om de extracellulaire matrix voor de micro-milieumicroarrays af te drukken. Het collageenblok wordt op MEMA's afgedrukt als raster. De met PBS gevulde putten zorgen voor extra vochtigheid om uitdroging van de extracellulaire matrixprintmengselbronplaat te voorkomen.Print de arrays in de acht-well platen als 20 kolommen door 35 rijen, voor een totaal van 700 plekken. Na het afdrukken, bewaar platen in een desiccator voor een minimum van drie dagen voorafgaand aan het gebruik. Ontwerp eerst een 96-putplaatlay-out met afstand die het gebruik van een multi-channel pipet met vier gesprede tips mogelijk maakt, zodat de behandeling van veel MEMA-platen in één keer kan worden gedaan.Haal dan de liganden uit de vriezer, en ontdooien in ijs in een laminaire stroomkap. Kort flick en spin naar beneden elke buis. Gebruik de aanbevolen buffer van de fabrikant om de liganden te verdunnen tot een 200-voudig werkvoorraad.Pipette 10 microliter van elke 200-keer ligand voorraad in de overeenkomstige goed binnen de 96-put plaat. Gebruik afdichtingsfolie om de platen te verzegelen en bewaar ze op min-20 graden Celsius. Maak ligand behandelingsplaten in batches en leg alle metadata vast voor downstream-analyse.Voordat de cellen worden geculenturing, blokkeer de MEMA's met twee milliliters per put van niet-bezielende blokkeringsbuffer gedurende 20 minuten. Gebruik een Y-splitter met twee Pasteur pipetten om blokkerende buffer in meerdere putten tegelijk aan tezuilen en vervolgens de putten te wassen met PBS. Om uitdroging te voorkomen, laat u het uiteindelijke volume van PBS in de putten tot het klaar is voor celbeplating.Voordat u een volledig MEMA-experiment uitvoert, optimaliseert u de concentratie van MCF7-celzaaien door een celtration-experiment uit te voeren. Een ideale plek, zoals hier getoond, heeft voldoende celnummers om gegevens te extraheren, maar niet zo veel dat de plek overdreven confluent is. In de MEMA, aspirate de resterende PBS en zaad MCF7 cellen op 30,000 tot 35.000 cellen per put in twee milliliters van zaaien medium.Plaats de MEMA in een couveuse op 37 graden Celsius. Na hechting 's nachts in de couveuse, aspirate het medium en vervangen door twee milliliter van verminderde groei medium om de stimulerende impact van specifieke liganden te isoleren. Ontdooi vervolgens een eerder bevroren ligandbehandelingsplaat op ijs.Centrifuge ontdooide plaat op 200 keer g gedurende een minuut. Breng 200 microliter medium van elke put in de MEMA-kweekplaat over naar de juiste put in de ligandbehandelingsplaat. Pipet op en neer om de ligand met het medium te mengen en dit mengsel terug te brengen naar de juiste put in de MEMA-cultuurplaat.Licht gesteente met de hand en breng de MEMA-platen terug naar de couveuse om de ligand-ECM-combinatie te verkrachteren bij 37 graden Celsius en 5% kooldioxide. Voeg na 71 uur 100 keer EdU toe aan de MEMA-putten voor een uiteindelijke concentratie van 10 micromolar. Broed het nog een uur bij 37 graden Celsius en 5% kooldioxide.Na de laatste incubatie, aspirate de putten. Fix MEMAs in twee milliliter per put van 2%PFA gedurende 15 minuten bij kamertemperatuur. Dan aspirate de PFA uit de putten.Permeabiliseren met twee milliliter per put van 0,1% nonionische oppervlakteactieve gedurende 15 minuten. Aspirate de oppervlakteactieve, en dan was de putten met twee milliliter PBS en PBS-T, sequentieel. Voeg daarna 1,5 milliliter EdU-detectiereactiereagentia toe aan elke put.Een uur lang uitbroeden bij kamertemperatuur, schommelend en beschermd tegen licht. Dan blus de reactie met 1,5 milliliter commerciële blusbuffer per put. Spoel opnieuw aan en was met PBS-T voorafgaand aan het uitbroeden met geoptimaliseerde concentraties vlekken of antilichamen.Incubeer MEMA putten met primaire antilichamen in kleuring buffer, schommelen op vier graden Celsius 's nachts. Na primaire antilichaam incubatie, was putten met PBS, gevolgd door PBS-T. Voeg secundaire antilichamen toe in 0,5 microgram per milliliter DAPI, verdund in kleuringbuffer.Incubeer, schommelen voor een uur op kamertemperatuur in het donker. Was putten twee keer met twee milliliter per put van PBS, en laat ze in de laatste twee milliliter PBS. Om beeld bevlekte MEMA, plaats het op de microscoop stadium van een geautomatiseerd beeldvormingssysteem met de juiste tl-detectie kanalen.Resulterende beeldgegevens naar een beeldbeheersysteem. Segmenteer cellen en bereken intensiteitsniveaus met CellProfiler. In dit protocol geven celcyclusprofielen van binned DAPI-intensiteitswaarden versus celtellingen van één acht-putplaat cellen aan in G1 versus G2-celcyclusfase.Dit komt overeen met twee nDNA-gehalte in cellen in de vroege groeifase, en vier nDNA-inhoud in cellen die op het punt staan mitose te ondergaan. De impact van de micro-omgeving van liganden en ECM op zowel celnummer als EdU-integratie wordt weergegeven. Rood geeft een hoger celnummer aan en blauw is een lager celnummer.Veel van de effecten zijn ligand-gedreven, omdat de ECM-aandoening geen sterk effect had op celnummer of EdU-positiviteit. Natagen 1 is een duidelijke uitzondering, omdat de aanwezigheid van dit ECM-molecuul de celbinding en groei van MCF7 remt. Liganden zoals FGF6 en neuregulin-1 alpha verbeteren het celaantal en hebben hoge percentages EdU-integratie, terwijl liganden zoals amphiregulin en neuregulin-1 SMDF celbinding en groei van cellen remmen.Een voorbeeld van MCF7 cellen groeien op een MEMA plek behandeld met neuregulin-1 alpha toont hoge tarieven van EdU integratie, aangegeven door roze kernen. In deze afbeelding is groene vlek een celmasker en blauw IS DAPI. Aangezien een volledig MEMA-experiment duur is, is het erg belangrijk om optimalisatiestappen uit te voeren, zoals cel- en serumtitraties, voordat het volledige experiment wordt uitgevoerd.Zodra micro-milieuomstandigheden van belang worden geïdentificeerd met behulp van het MEMA-platform, kunnen de specifieke liganden en extracellulaire matrixeiwitten dieper worden bestudeerd met behulp van traditionele 2D- en 3D-celkweeksystemen.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

De<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginal Disc Tumor Model: visualisatie en kwantificering van genexpressie en Tumor Invasiviteit met behulp van genetische Mozaïeken

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

Intracarotid Cancer Cell Injection aan muismodellen van Brain metastase Produce

Metastasis, the spread and growth of malignant cells at secondary sites within a patient&#39;s body, accounts for &#62; 90% of cancer-related mortality. ...

Counting Proteins in Single Cells with Addressable Droplet Microarrays

Tellen van eiwitten in afzonderlijke cellen met adresseerbare Droplet Microarrays

Often cellular behavior and cellular responses are analyzed at the population level where the responses of many cells are pooled together as an average ...

Using the Dot Assay to Analyze Migration of Cell Sheets

Met behulp van de Dot-Assay voor het analyseren van de migratie van cel bladen

Although complex organisms appear static, their tissues are under a continuous turnover. As cells age, die, and are replaced by new cells, cells move ...

Using 22C3 Anti-PD-L1 Antibody Concentrate on Biopsy and Cytology Samples from Non-small Cell Lung Cancer Patients

Met behulp van 22C 3 Anti-PD-L1 antilichaam concentreren op biopsie en cytologie monsters van niet-kleincellige longkanker kankerpatiënten

Pembrolizumab monotherapy has been approved for the first- and second-line treatment of patients with PD-L1-expressing advanced non-small cell lung cancer ...

Acellular and Cellular Lung Model to Study Tumor Metastasis

Acellulair en cellulaire Lung Model studie Tumor uitzaaiingen

It is difficult to isolate tumor cells at different points of tumor progression. We created an ex vivo lung model that can show the interaction of tumor ...

Elastic Staining on Paraffin-embedded Slides of pT3N0M0 Gastric Cancer Tissue

Elastische kleuring op paraffine-ingesloten Dia's van pT3N0M0 maagkanker weefsel

The elastic lamina, which is usually located in the sub-mesothelial layer, adjacent to the peritoneum mesothelial cells, is amphiphilic on hematoxylin and ...

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array (HMCA)-based Plates

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array HMCA-based Plates

Analyse van kanker cel invasie en anti-metastatische Drug Screening met behulp van Hydrogel Micro-kamer Array (HMCA)-op basis van platen

Cancer metastasis is known to cause 90% of cancer lethality. Metastasis is a multistage process which initiates with the penetration/invasion of tumor ...

Characterize Disease-related Mutants of RAF Family Kinases by Using a Set of Practical and Feasible Methods

Karakteriseren ziekte-gerelateerde mutanten van RAF familie kinasen met behulp van een set van praktische en haalbare methoden

The rapidly accelerated fibrosarcoma (RAF) family kinases play a central role in cell biology and their dysfunction leads to cancers and developmental ...

Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter

Identificatie van Transcription Factor Regulators met behulp van Medium-Throughput Screening van arrayed bibliotheken en een Dual-Luciferase-Based Reporter

Transcription factors can alter the expression of numerous target genes that influence a variety of downstream processes making them good targets for ...