Name: using microarrays to interrogate microenvironmental impact on cellular phenotypes in cancer
Uploaded: 2019-05-21T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer at JoVE.com

עבודה זו נתמכת על ידי ספריית הקרן המשותפת של NIH של הרשת חתימות סלולריות (LINCS) גרנט HG008100 (J.W.G., L.M.H., ו-J. E. K).

הערה: מבט כולל על תהליך MEMA כולו, כולל זמן משוער, מתואר בדיאגרמת הזרימה המוצגת באיור 1. פרוטוקול זה מפרט את הייצור של MEMAs בצלחות בנות 8. הפרוטוקול עשוי להיות מותאם עבור לוחות אחרים או שקופיות.
1. הכנת מאגרי חלבונים, מדלל וכתמים
<ol><li>מבחנות של ECMs, ליגניות, ...

<ol>
	<li>Hanahan, D., Coussens, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accessories+to+the+crime:+functions+of+cells+recruited+to+the+tumor+microenvironment.">Accessories to the crime: functions of cells recruited to the tumor microenvironment.</a> Cancer Cell. 21 (3), 309-322 (2012).</li><li>Quail, D. F., Joyce, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironmental+regulation+of+tumor+progression+and+metastasis.">Microenvironmental regulation of tumor progression and metastasis.</a> Nature Medicine. 19 (11), 1423-1437 (2013).</li><li>Hughes, C. S., Postovit, L. M., Lajoie, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrigel:+a+complex+protein+mixture+required+for+optimal+growth+of+cell+culture.">Matrigel: a complex protein mixture required for optimal growth of cell culture.</a> Proteomics. 10 (9), 1886-1890 (2010).</li><li>LaBarge, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+mammary+progenitor+cell+fate+decisions+are+products+of+interactions+with+combinatorial+microenvironments.">Human mammary progenitor cell fate decisions are products of interactions with combinatorial microenvironments.</a> Integrative Biology (Cambridge). 1 (1), 70-79 (2009).</li><li>Watson, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironment-Mediated+Mechanisms+of+Resistance+to+HER2+Inhibitors+Differ+between+HER2++Breast+Cancer+Subtypes.">Microenvironment-Mediated Mechanisms of Resistance to HER2 Inhibitors Differ between HER2+ Breast Cancer Subtypes.</a> Cell Systems. 6 (3), 329-342 (2018).</li><li>Ranga, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+niche+microarrays+for+systems-level+analyses+of+cell+fate.">3D niche microarrays for systems-level analyses of cell fate.</a> Nature Communications. 5, 4324 (2014).</li><li>Malta, D. F. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+microarrays+to+study+inductive+signaling+for+endoderm+specification.">Extracellular matrix microarrays to study inductive signaling for endoderm specification.</a> Acta Biomater. 34, 30-40 (2016).</li><li>Kamentsky, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+structure,+function+and+compatibility+for+CellProfiler:+modular+high-throughput+image+analysis+software.">Improved structure, function and compatibility for CellProfiler: modular high-throughput image analysis software.</a> Bioinformatics. 27 (8), 1179-1180 (2011).</li><li>Gagnon-Bartsch, J. A., Jacob, L., Speed, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Removing+Unwanted+Variation+from+High+Dimensional+Data+with+Negative+Controls.">Removing Unwanted Variation from High Dimensional Data with Negative Controls.</a> University of California, Berkeley, Department of Statistics, University of California, Berkeley. , (2013).</li><li>Allan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OMERO:+flexible,+model-driven+data+management+for+experimental+biology.">OMERO: flexible, model-driven data management for experimental biology.</a> Nature Methods. 9 (3), 245-253 (2012).</li><li>Simian, M., Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids:+A+historical+perspective+of+thinking+in+three+dimensions.">Organoids: A historical perspective of thinking in three dimensions.</a> Journal of Cell Biology. 216 (1), 31-40 (2017).</li><li>Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+differentiated+state+of+normal+and+malignant+cells+or+how+to+define+a+"normal"+cell+in+culture.">The differentiated state of normal and malignant cells or how to define a "normal" cell in culture.</a> International Review of Cytology. 70, 27-100 (1981).</li><li>Serban, M. A., Prestwich, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modular+extracellular+matrices:+solutions+for+the+puzzle.">Modular extracellular matrices: solutions for the puzzle.</a> Methods. 45 (1), 93-98 (2008).</li><li>Kaylan, K. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+lung+tumor+cell+drug+responses+as+a+function+of+matrix+context+and+genotype+using+cell+microarrays.">Mapping lung tumor cell drug responses as a function of matrix context and genotype using cell microarrays.</a> Integrative Biology (Cambridge). 8 (12), 1221-1231 (2016).</li><li>Lin, C. H., Jokela, T., Gray, J., LaBarge, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combinatorial+Microenvironments+Impose+a+Continuum+of+Cellular+Responses+to+a+Single+Pathway-Targeted+Anti-cancer+Compound.">Combinatorial Microenvironments Impose a Continuum of Cellular Responses to a Single Pathway-Targeted Anti-cancer Compound.</a> Cell Reports. 21 (2), 533-545 (2017).</li><li>Gjorevski, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Designer+matrices+for+intestinal+stem+cell+and+organoid+culture.">Designer matrices for intestinal stem cell and organoid culture.</a> Nature. 539 (7630), 560-564 (2016).</li></ol>

חשיבותה של "ממדי" והקשר היה גורם מניע בפיתוח במערכות תרבות מבחנה ככלים לאפיון תאים סרטניים באמצעות האינטראקציה שלהם עם המיקרו-סביבה11, והיכולת של מבחנה מערכות תרבות לחקות את הסביבה vivo הוא כוח המניע מאחורי החיפוש כדי לשפר את מערכות התרבות. אולם, במערכות חוץ גופית, נותרו כלים משמ...

Culturing של שורות תאים סרטניים על פלסטיק דו מימדי (2D) monolayers נשאר אחד הסוסים העיקריים עבודה עבור חוקרי סרטן. עם זאת, המיקרו-סביבה מוכרת יותר ויותר בשל יכולתה להשפיע על פנוטיפים סלולריים. בסרטן, מיקרוסביבה הגידול ידוע להשפיע על התנהגויות סלולר מרובות, כולל צמיחה, הישרדות, פלישה, ותגובה לטיפול1,2. תרביות תאים מסורתיים בדרך כלל חוסר השפעות מיקרו הסביבה, אשר הובילה לפיתוח של מורכב יותר תלת-מימדי (3d) בחני לגדול תאים, כולל מסחרית זמין מרתף מטוהרים מתחת תמציות קרום. עם זאת, אלה מטריצות מטוהרים הם בדרך כלל מורכבים להשתמש וסובלים מבעיות טכניות כגון השתנות אצווה3 וקומפוזיציות מורכבות3. כתוצאה מכך, זה יכול להיות קשה להקצות פונקציה חלבונים ספציפיים שעשויים להשפיע על פנוטיפים סלולריים3.
כדי לטפל במגבלות אלה, פיתחנו את הטכנולוגיה microenvironment מיקרו-הסביבה (mema), אשר מפחית את המיקרו-סביבה עד שילובים פשוטים של מטריקס מטריצה (ecm) ומסיס גורם צמיחה חלבונים4,5 . פלטפורמת MEMA מאפשרת זיהוי של גורמים מיקרוסביבתיים דומיננטי המשפיעים על התנהגות של תאים. באמצעות תבנית מערך, ניתן לקבל בניסוי אחד אלפי שילובים של גורמי מיקרו-סביבה. MEMA תיאר כאן חוקר שערים ~ 2,500 שונים בתנאים מיקרו סביבה ייחודית. חלבונים מסוג ECM המודפסים בלוחות הגידול של הטופס שעליהם יכולים להיות מתורבתים. ליגפות מסיסים מתווספים לבארות בודדות, ויוצרות קומבינטורית מיקרו-סביבות ייחודיות (ECM + ligands) בכל נקודה שונה אליה נחשפים התאים. תאים הם מתורבתים במשך מספר ימים, לאחר מכן קבוע, מוכתם, והתמונה כדי להעריך פנוטיפים הסלולר כתוצאה של חשיפה אלה שילובים ספציפיים מיקרו הסביבה. מאז המיקרוסביבות הם שילובים פשוטים, זה פשוט לזהות חלבונים כי כונן שינויים פנוטימית עיקריים בתאים. Memas השתמשו בהצלחה כדי לזהות גורמים המשפיעים על מספר פנוטיפים סלולריים, כולל אלה כי כונן החלטות הגורל תא תגובה לטיפול4,5,6,7. תגובות אלה ניתן לאמת בניסויים 2D פשוטים ולאחר מכן ניתן להעריך בתנאים כי יותר לכידה מלאה של המורכבות של מיקרוסביבה הגידול. פלטפורמת MEMA היא להתאים מאוד למגוון של סוגי תאים ונקודות קצה, בתנאי כי בסמנים פנוטיפים טובים זמינים.

using microarrays to interrogate microenvironmental impact on cellular phenotypes in cancer

הבנת ההשפעה של המיקרוסביבה על הפנוטיפ של התאים היא בעיה קשה בשל התערובת המורכבת של שני גורמי גדילה מסיסים וחלבונים הקשורים מטריקס ב מיקרוסביבה ב vivo. יתר על כן, ריאגנטים זמין עבור מידול של מיקרו סביבות בתוך החוץ בדרך כלל לנצל תערובות מורכבות של חלבונים כי הם מוגדרים לחלוטין וסובלים אצווה להשתנות אצווה. פלטפורמת המיקרו-מיקרו של הסביבה (MEMA) מאפשרת הערכה של אלפי שילובים פשוטים של חלבונים מיקרוסביבתיים להשפעה שלהם על הפנוטיפים הסלולריים בתוך שיטת יחיד. MEMAs מוכנים צלחות היטב, אשר מאפשר תוספת של ליגונים בודדים להפריד בארות המכילות מטריקס מוליכי הרכב (ECM) חלבונים. השילוב של הליטרים מסיסים עם כל ECM מודפס יוצר שילוב ייחודי. שיטת MEMA טיפוסית מכילה יותר מ-2,500 מיקרוסביבות קומבינטורית ייחודיות שתאים חשופים אליהם בתוך שיטת יחיד. כמקרה מבחן, סרטן השד התאים קו MCF7 היה מצופה על פלטפורמת MEMA. ניתוח זה מזוהה גורמים שניהם לשפר ולעכב את הצמיחה והתפשטות של תאים אלה. פלטפורמת MEMA היא גמישה מאוד והוא יכול להיות מורחב לשימוש עם שאלות ביולוגיות אחרות מעבר למחקר הסרטן.

כדי לפשט השפעות מיקרוסביבתיות על צמיחת תאים והתפשטות ועל מנת לזהות תנאים שקידמו או מעכבות את צמיחת התאים וההפצה, התאים הסרטניים בסרטן השד MCF7 הופרה על סט של שמונה 8-טוב MEMAs כפי שמתואר בפרוטוקול. שיטת הפעולה חשפה את התאים ל-48 ECMs שונים ו57 ליגפות שונות, עבור סך של 2736 קומבינטורית מיקרו תנאים סביב?...

Watch this Scientific Journal Video about Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer at JoVE.com

Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer

מטרת השיטה המוצגת כאן היא להראות כיצד מיקרומערכים מיקרואקולוגיה (MEMA) ניתן לזייף ולהשתמש כדי לחקור את ההשפעה של אלפי קומבינטורית מיקרו סביבות פשוטות על הפנוטיפ של תאים מתורבתים.

שימוש במיקרו מערכים לחקור השפעה מיקרוסביבתית על פנוטיפים סלולריים בסרטן

Understanding the impact of the microenvironment on the phenotype of cells is a difficult problem due to the complex mixture of both soluble growth ...

קשה לחקור את המיקרו-וירוס של הגידול בשל מורכבותו. פיתחנו מיקרו-וירוסים מיקרו-וירוסים המורכבים ממיקרו-וירוסים קומבינטוריים פשוטים המאפשרים זיהוי של מניעים עיקריים של פנוטיפים של תאי הגידול. היתרון העיקרי של פלטפורמת MEMA הוא כי בגלל תנאי microenvironment מוגדרים כל, זה פשוט לזהות גורמי microenvironment המניעים פנוטיפים של עניין.פלטפורמת MEMA ישימה באופן נרחב במערכות אחרות שאינן סרטן, כולל זני תאים ראשוניים ותאי גזע. ישנם מספר טריקים הנדסיים וצעדים שפיתחנו כדי להאיץ את עבודת הספסל הרטוב ולפשט את הפרוטוקול. כדי להתחיל, השתמש במדפסת סיכות מגע כדי להדפיס תערובת הדפסה של מטריצה חוץ-תאית בנקודות נאמנות לתוך לוחות שמונה בארות.השתמש בפינים בקוטר 350 מיקרומטר המסודרים בתצורת ראש הדפסה של ארבע פעמים ושבע כדי להדפיס את המטריצה החוץ-תאית עבור המיקרו-מיקרו-סרטנים של המיקרו-וירוס. בלוק הקולגן מודפס על MEMAs כרשתות. בארות PBS מלאות מספקות לחות נוספת כדי למנוע התייבשות מתוך צלחת המקור של תערובת ההדפסה של מטריצה חוץ-תאית.הדפס את המערכים ב- 8 בארות כ- 20 עמודות על 35 שורות, בסך הכל 700 נקודות. לאחר ההדפסה, יש לאחסן לוחות ב-desiccator למשך שלושה ימים לפחות לפני השימוש. ראשית, לעצב פריסת צלחת 96 היטב עם ריווח המאפשר שימוש פיפטה רב ערוצית עם ארבעה טיפים במרווחים, כך הטיפול של צלחות MEMA רבות ניתן לעשות בבת אחת.ואז לאחזר את ligands מהמקפיא, ולהפשיר בקרח ברדס זרימה למינארית. בקצרה להעיף ולסובב למטה כל צינור. השתמש במאגר המומלץ של היצרן כדי לדלל את הליגנדים למלאי עובד 200 פעמים.פיפטה 10 מיקרוליטרים של כל מניית לינד 200 פעמים לתוך באר המתאימה בתוך צלחת 96 באר. השתמש בסרט איטום כדי לאטום את הצלחות ולאחסן אותם במינוס 20 מעלות צלזיוס. הפוך לוחות טיפול ליגנד בקבוצות, וללכוד את כל המטה-נתונים לניתוח במורד הזרם.לפני culturing תאים, לחסום את MEMAs עם שני מיליליטר ל הבאר של חיץ חסימה nonfouling במשך 20 דקות. השתמש מפצל Y עם שתי פיפטים פסטר כדי לשאפת את חוצץ חסימה בארות מרובות בבת אחת, ולאחר מכן לשטוף משולשת את בארות עם PBS. כדי למנוע ייעוד, להשאיר את הנפח הסופי של PBS בארות עד מוכן ציפוי תא.לפני ניסוי MEMA מלא, לייעל את ריכוז זריעת תא MCF7 על ידי ביצוע ניסוי טיטריות התא. נקודה אידיאלית, כפי שמוצג כאן, יש מספיק מספרי תאים כדי לחלץ נתונים, אבל לא כל כך הרבה כי המקום הוא confluent יתר על מדי. ב- MEMA, שאפו את תאי ה- PBS והזרעים הנותרים MCF7 ב- 30, 000 עד 35, 000 תאים ל באר בשני מיליליטר של מדיום זריעה.מניחים את ה-MEMA באינקובטור ב-37 מעלות צלזיוס. לאחר הידבקות לילה באינקובטור, שאפו את המדיום והחלפו בשני מיליליטר של מדיום צמיחה מופחת כדי לבודד את ההשפעה המריצה של ליגנדים ספציפיים. ואז להפשיר צלחת טיפול ליגנד קפואה בעבר על קרח.צלחת מופשרת צנטריפוגה ב 200 פעמים g לדקה אחת. מעבירים 200 מיקרוליטרים של מדיום מכל באר בצלחת התרבות MEMA ל באר המתאימה בצלחת הטיפול בליגה. פיפטה למעלה ולמטה כדי לערבב את הליגנד עם המדיום, ולהעביר את התערובת בחזרה ל באר המתאימה בצלחת התרבות MEMA.התנדנדו קלות ביד והחזירו את צלחות ה-MEMA לאנקובטור כדי לתרבת את שילוב הליגנד-ECM ב-37 מעלות צלזיוס ו-5% פחמן דו-חמצני. לאחר 71 שעות, להוסיף 100 פעמים EdU ל בארות MEMA עבור ריכוז סופי של 10 micromolar. דגירה זה עוד שעה אחת ב 37 מעלות צלזיוס ו 5% פחמן דו חמצני.לאחר הדגירה הסופית, שאפו את בארות. תקן MEMAs בשני מיליליטר ל באר של 2% PFA במשך 15 דקות בטמפרטורת החדר. ואז שאף את PFA מה בארות.Permeabilize עם שני מיליליטר לבא של 0.1% חומר שטח לא יוני במשך 15 דקות. שאפו את חומר הגלישה, ולאחר מכן שטפו את בארות עם שני מיליליטר של PBS ו- PBS-T, ברצף. לאחר מכן, להוסיף 1.5 מיליליטר של ריאגנטים תגובת זיהוי EdU לכל באר.דגירה במשך שעה בטמפרטורת החדר, נדנדה מוגן מפני אור. לאחר מכן מרווה את התגובה עם חיץ מרווה מסחרי 1.5 מיליליטר ל הבאר. שאפו שוב, ושטפו עם PBS-T לפני הדגירה עם ריכוזים אופטימליים של כתמים או נוגדנים.דגירה בארות MEMA עם נוגדנים ראשוניים חיץ כתמים, נדנדה בארבע מעלות צלזיוס לילה. בעקבות דגירה נוגדנים ראשונית, לשטוף בארות עם PBS ואחריו PBS-T. הוסף נוגדנים משניים ב- 0.5 מיקרוגרם ל- DAPI מיליליטר, מדולל במאגר כתמים.דגירה, נדנדה במשך שעה בטמפרטורת החדר בחושך. לשטוף בארות פעמיים עם שני מיליליטר לכל באר של PBS, ולהשאיר אותם בשני המיליליטרים האחרונים של PBS. כדי לדמיין MEMA מוכתם, מקם אותו על שלב המיקרוסקופ של מערכת הדמיה אוטומטית עם ערוצי זיהוי פלואורסצנטיים מתאימים.פלט נתוני תמונה המתקבלים למערכת ניהול תמונה. פלח תאים וחשב רמות עוצמה באמצעות CellProfiler. בפרוטוקול זה, פרופילי מחזור תאים של ערכי עוצמת DAPI מסוכפלים לעומת ספירת תאים מצלחת אחת בת שמונה בארות מציינים תאים בשלב G1 לעומת מחזור תא G2.זה מתאים לשני תוכן nDNA בתאים בשלב הצמיחה המוקדמת, וארבעה תוכן nDNA בתאים עומד לעבור מיטוזה. ההשפעה של microenvironment של ליגנדים ו ECM על מספר התא והן על שילוב EdU מוצגת. אדום מציין מספר תא גבוה יותר וכחול הוא מספר תא נמוך יותר.רבים מההשפעות מונחות ליגנד, שכן מצב ECM לא השפיע מאוד על מספר התא או על החיוביות של EdU. Natagen 1 הוא יוצא מן הכלל ברור, כמו נוכחות של מולקולת ECM זה מעכב מחייב תאים וצמיחה של MCF7. ליגנדים כגון FGF6 ו neuregulin-1 אלפא לשפר את מספר התא ויש להם שיעור גבוה של התא שילוב EdU, בעוד ligands כגון אמפירגלין ו neuregulin-1 SMDF לעכב איגוד תאים וצמיחה של תאים.דוגמה לתאי MCF7 הגדלים במקום MEMA שטופלו באלפא neuregulin-1 מראה שיעורים גבוהים של התאגדות EdU, המצוין על ידי גרעינים ורודים. בתמונה זו, הכתם הירוק הוא מסיכת תא, וכחול הוא DAPI. מכיוון שניסוי MEMA מלא הוא יקר, חשוב מאוד לבצע שלבי אופטימיזציה, כגון גירויים בתאים ובנסיובים, לפני ביצוע הניסוי המלא.לאחר שזוהו תנאי עניין מיקרו-ויראליים באמצעות פלטפורמת MEMA, ניתן ללמוד את הליגנדים הספציפיים וחלבוני המטריצה החוץ-תאיים לעומק באמצעות מערכות מסורתיות לתרבות תאים 2D ו- 3D.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

ה<em&gt; תסיסנית</em&gt; דגם גידול דיסק דמותי: ויזואליזציה וכימות של ביטוי גנים סרטניים הפולשנות שימוש פסיפסים גנטי

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

Cell הזרקת הסרטן Intracarotid לייצר מודלי עכבר של המוח גרור

Metastasis, the spread and growth of malignant cells at secondary sites within a patient&#39;s body, accounts for &#62; 90% of cancer-related mortality. ...

Counting Proteins in Single Cells with Addressable Droplet Microarrays

ספירת חלבונים בתאים יחיד עם Droplet למיעון מיקרו-מערכים

Often cellular behavior and cellular responses are analyzed at the population level where the responses of many cells are pooled together as an average ...

Using the Dot Assay to Analyze Migration of Cell Sheets

באמצעות וזמינותו נקודה כדי לנתח את ההעברה של גיליונות תא

Although complex organisms appear static, their tissues are under a continuous turnover. As cells age, die, and are replaced by new cells, cells move ...

Using 22C3 Anti-PD-L1 Antibody Concentrate on Biopsy and Cytology Samples from Non-small Cell Lung Cancer Patients

באמצעות 22C 3 נוגדן Anti-PD-L1 להתרכז ביופסיה ודוגמאות ציטולוגיה של חולי סרטן ריאות שאינם קטנים התא

Pembrolizumab monotherapy has been approved for the first- and second-line treatment of patients with PD-L1-expressing advanced non-small cell lung cancer ...

Acellular and Cellular Lung Model to Study Tumor Metastasis

דגם לונג acellular וסלולריות ללמוד גרורות הגידול

It is difficult to isolate tumor cells at different points of tumor progression. We created an ex vivo lung model that can show the interaction of tumor ...

Elastic Staining on Paraffin-embedded Slides of pT3N0M0 Gastric Cancer Tissue

מכתים אלסטי על פרפין-שקופיות מוטבעות של רקמת סרטן pT3N0M0 קיבה

The elastic lamina, which is usually located in the sub-mesothelial layer, adjacent to the peritoneum mesothelial cells, is amphiphilic on hematoxylin and ...

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array (HMCA)-based Plates

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array HMCA-based Plates

ניתוח של סרטן תאים הפלישה ושל סמים אנטי גרורתי הקרנת באמצעות מערך הידרוג מיקרו-תא (HMCA)-המבוסס על צלחות

Cancer metastasis is known to cause 90% of cancer lethality. Metastasis is a multistage process which initiates with the penetration/invasion of tumor ...

Characterize Disease-related Mutants of RAF Family Kinases by Using a Set of Practical and Feasible Methods

אפיון מוטציות הקשורות למחלות של חיל המשפחה באמצעות קבוצה של שיטות מעשיות ושימושיות

The rapidly accelerated fibrosarcoma (RAF) family kinases play a central role in cell biology and their dysfunction leads to cancers and developmental ...

Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter

זיהוי של שעתוק מקדם ווסת באמצעות הקרנת תפוקה בינונית של ספריות מסודר וכתבת המבוססת על כפול-לוציפראז

Transcription factors can alter the expression of numerous target genes that influence a variety of downstream processes making them good targets for ...