Name: using microarrays to interrogate microenvironmental impact on cellular phenotypes in cancer
Uploaded: 2019-05-21T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer at JoVE.com

Detta arbete stöddes av NIH gemensam fond bibliotek av Network cellulära signaturer (LINCS) Grant HG008100 (J.W.G., L.M.H., och J. E. K).

Anmärkning: En översikt över hela MEMA-processen, inklusive Beräknad tid, beskrivs i flödesdiagrammet som visas i figur 1. Detta protokoll specificerar tillverkningen av MEMAs i 8-brunn plattor. Protokollet kan anpassas för andra plattor eller diabilder.
1. beredning av protein, spädningsvätska och Färgbuffertar
<ol><li>Equilibrate injektionsflaskor med ECMs, ligander och cytokiner till rumstemperatur (RT) och kort Centrifugera. Lägg t...

<ol>
	<li>Hanahan, D., Coussens, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accessories+to+the+crime:+functions+of+cells+recruited+to+the+tumor+microenvironment.">Accessories to the crime: functions of cells recruited to the tumor microenvironment.</a> Cancer Cell. 21 (3), 309-322 (2012).</li><li>Quail, D. F., Joyce, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironmental+regulation+of+tumor+progression+and+metastasis.">Microenvironmental regulation of tumor progression and metastasis.</a> Nature Medicine. 19 (11), 1423-1437 (2013).</li><li>Hughes, C. S., Postovit, L. M., Lajoie, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrigel:+a+complex+protein+mixture+required+for+optimal+growth+of+cell+culture.">Matrigel: a complex protein mixture required for optimal growth of cell culture.</a> Proteomics. 10 (9), 1886-1890 (2010).</li><li>LaBarge, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+mammary+progenitor+cell+fate+decisions+are+products+of+interactions+with+combinatorial+microenvironments.">Human mammary progenitor cell fate decisions are products of interactions with combinatorial microenvironments.</a> Integrative Biology (Cambridge). 1 (1), 70-79 (2009).</li><li>Watson, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironment-Mediated+Mechanisms+of+Resistance+to+HER2+Inhibitors+Differ+between+HER2++Breast+Cancer+Subtypes.">Microenvironment-Mediated Mechanisms of Resistance to HER2 Inhibitors Differ between HER2+ Breast Cancer Subtypes.</a> Cell Systems. 6 (3), 329-342 (2018).</li><li>Ranga, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+niche+microarrays+for+systems-level+analyses+of+cell+fate.">3D niche microarrays for systems-level analyses of cell fate.</a> Nature Communications. 5, 4324 (2014).</li><li>Malta, D. F. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+microarrays+to+study+inductive+signaling+for+endoderm+specification.">Extracellular matrix microarrays to study inductive signaling for endoderm specification.</a> Acta Biomater. 34, 30-40 (2016).</li><li>Kamentsky, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+structure,+function+and+compatibility+for+CellProfiler:+modular+high-throughput+image+analysis+software.">Improved structure, function and compatibility for CellProfiler: modular high-throughput image analysis software.</a> Bioinformatics. 27 (8), 1179-1180 (2011).</li><li>Gagnon-Bartsch, J. A., Jacob, L., Speed, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Removing+Unwanted+Variation+from+High+Dimensional+Data+with+Negative+Controls.">Removing Unwanted Variation from High Dimensional Data with Negative Controls.</a> University of California, Berkeley, Department of Statistics, University of California, Berkeley. , (2013).</li><li>Allan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OMERO:+flexible,+model-driven+data+management+for+experimental+biology.">OMERO: flexible, model-driven data management for experimental biology.</a> Nature Methods. 9 (3), 245-253 (2012).</li><li>Simian, M., Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids:+A+historical+perspective+of+thinking+in+three+dimensions.">Organoids: A historical perspective of thinking in three dimensions.</a> Journal of Cell Biology. 216 (1), 31-40 (2017).</li><li>Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+differentiated+state+of+normal+and+malignant+cells+or+how+to+define+a+"normal"+cell+in+culture.">The differentiated state of normal and malignant cells or how to define a "normal" cell in culture.</a> International Review of Cytology. 70, 27-100 (1981).</li><li>Serban, M. A., Prestwich, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modular+extracellular+matrices:+solutions+for+the+puzzle.">Modular extracellular matrices: solutions for the puzzle.</a> Methods. 45 (1), 93-98 (2008).</li><li>Kaylan, K. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+lung+tumor+cell+drug+responses+as+a+function+of+matrix+context+and+genotype+using+cell+microarrays.">Mapping lung tumor cell drug responses as a function of matrix context and genotype using cell microarrays.</a> Integrative Biology (Cambridge). 8 (12), 1221-1231 (2016).</li><li>Lin, C. H., Jokela, T., Gray, J., LaBarge, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combinatorial+Microenvironments+Impose+a+Continuum+of+Cellular+Responses+to+a+Single+Pathway-Targeted+Anti-cancer+Compound.">Combinatorial Microenvironments Impose a Continuum of Cellular Responses to a Single Pathway-Targeted Anti-cancer Compound.</a> Cell Reports. 21 (2), 533-545 (2017).</li><li>Gjorevski, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Designer+matrices+for+intestinal+stem+cell+and+organoid+culture.">Designer matrices for intestinal stem cell and organoid culture.</a> Nature. 539 (7630), 560-564 (2016).</li></ol>

Vikten av "dimensionalitet" och sammanhang har varit en motiverande faktor i utvecklingen av in vitro-kultursystem som verktyg i karakterisering av cancerceller genom deras interaktion med mikromiljö11, och förmågan hos in vitro- kultur system för att efterlikna in vivo-miljön är en drivande kraft bakom strävan att förbättra dessa kultur system. In vitro-system är dock fortfarande betydande verktyg för cancerforskning just på grund av deras förmåga att destillera den komplexa in vivo...

Odling av cancer cellinjer på plast i tvådimensionella (2D) enskiktslager är fortfarande en av de stora arbetshästar för cancerforskare. Emellertid, mikromiljön är alltmer erkänns för dess förmåga att påverka cellulära fenotyper. I cancer, tumören mikromiljö är kända för att påverka flera cellulära beteenden, inklusive tillväxt, överlevnad, invasion, och svar på terapi1,2. Traditionella enskiktslager cellkulturer saknar typiskt mikromiljö influenser, vilket har lett till utvecklingen av mer komplexa tredimensionella (3D) analyser för att odla celler, inklusive kommersiellt tillgängliga renade basalmembran extrakt. Men dessa renade matriser är vanligtvis komplicerade att använda och lider av tekniska problem såsom batchvariation3 och komplexa kompositioner3. Som ett resultat, det kan vara svårt att tilldela funktion till specifika proteiner som kan påverka cellulära fenotyper3.
För att hantera dessa begränsningar, har vi utvecklat mikromiljö microarray (Mema) teknik, vilket minskar mikromiljön ner till enkla kombinationer av extracellulära matrix (ECM) och lösliga tillväxtfaktor proteiner4,5 . MEMA-plattformen möjliggör identifiering av dominerande mikromiljöfaktorer som påverkar cellernas beteende. Genom att använda ett matrisformat kan tusentals kombinationer av mikromiljöfaktorer analyseras i ett enda experiment. Mema beskrivs här förhör ~ 2 500 olika unika mikromiljö villkor. ECM-proteiner tryckta i väl plåtar bildar tillväxt kuddar på vilka celler kan odlas. Lösliga ligander läggs till enskilda brunnar, skapa unika kombinatoriska mikromiljöer (ECM + ligand) på varje annan plats som cellerna exponeras. Celler odlas i flera dagar, sedan fast, färgas, och avbildas för att bedöma cellulära fenotyper som en följd av exponering för dessa specifika mikromiljö kombinationer. Eftersom mikromiljöerna är enkla kombinationer är det enkelt att identifiera proteiner som driver stora fenotypiska förändringar i cellerna. Memas har använts framgångsrikt för att identifiera faktorer som påverkar flera cellulära fenotyper, inklusive de som driver cell öde beslut och svar på terapi4,5,6,7. Dessa svar kan valideras i enkla 2D experiment och kan sedan bedömas under förhållanden som mer fullständigt recapitulate komplexiteten i tumören mikromiljö. MEMA-plattformen är mycket anpassningsbar till en mängd olika celltyper och endpoints, förutsatt att goda fenotypiska biomarkörer finns tillgängliga.

using microarrays to interrogate microenvironmental impact on cellular phenotypes in cancer

Förstå effekterna av mikromiljön på fenotypen av celler är ett svårt problem på grund av den komplexa blandningen av både lösliga tillväxtfaktorer och Matrix-associerade proteiner i mikromiljön in vivo. Dessutom finns lättillgängliga reagenser för modellering av mikromiljöer in vitro vanligtvis använda komplexa blandningar av proteiner som är ofullständigt definierade och lider av batch till sats variation. Mikromiljö microarray (Mema) plattform möjliggör bedömning av tusentals enkla kombinationer av mikromiljö proteiner för deras inverkan på cellulära fenotyper i en enda analys. De Memas är beredda i bra tallrikar, som gör det möjligt att tillägg av enskilda ligander att separera brunnar som innehåller klädd extracellulära matrix (ECM) proteiner. Kombinationen av den lösliga ligand med varje tryckt ECM bildar en unik kombination. En typisk MEMA-analys innehåller mer än 2 500 unika kombinatoriska mikromiljöer som celler exponeras för i en enda analys. Som ett testfall, bröstcancer cellinjer MCF7 var pläterad på MEMA plattformen. Analys av denna analys identifierade faktorer som både förbättra och hämma tillväxten och spridningen av dessa celler. MEMA-plattformen är mycket flexibel och kan utökas för användning med andra biologiska frågor utöver cancerforskning.

För att förenkla mikromiljö påverkan på celltillväxt och spridning och för att identifiera villkor som främjade eller hämmade celltillväxt och proliferation, var bröstcancer cellinjer MCF7 seedade på en uppsättning av åtta 8-väl MEMAs som beskrivs i protokollet. Detta test exponerade cellerna till 48 olika ECMs och 57 olika ligander, för totalt 2736 kombinatoriska mikromiljö förhållanden. Efter 71 h i kultur, celler pulsade med EdU, fast, permeablized, och färgade med DAPI, reaktionen för EdU upptäc...

Watch this Scientific Journal Video about Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer at JoVE.com

Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer

Syftet med den metod som presenteras här är att visa hur mikromiljö Microarrays (Mema) kan tillverkas och används för att förhöra effekten av tusentals enkla kombinatoriska mikromiljöer på fenotyp av odlade celler.

Använda Microarrays att förhöra mikromiljö påverkan på cellulära fenotyper i cancer

Understanding the impact of the microenvironment on the phenotype of cells is a difficult problem due to the complex mixture of both soluble growth ...

Att studera tumörmikromiljö är svårt på grund av dess komplexitet. Vi har utvecklat mikromiljö microarrays bestående av enkla kombinatoriska mikromiljöer som gör det möjligt att identifiera stora drivkrafter för tumörcell fenotyper. Den stora fördelen med MEMA-plattformen är att eftersom mikromiljöförhållandena alla definieras är det okomplicerat att identifiera mikromiljöfaktorer som driver fenotyper av intresse.MEMA-plattformen är allmänt tillämplig i andra icke-cancersystem, inklusive primära cellstammar och stamceller. Det finns ett antal tekniska knep och steg som vi har utvecklat för att påskynda den våta bänkarbetet och förenkla protokollet. Till att börja med använder du en tryckstiftsskrivare för att skriva ut extracellulär matristrycksblandning i fiducialfläckar i åtta-brunnsplattor.Använd 350-mikrometer diameter stift arrangerade i en fyra gånger-sju skrivhuvud konfiguration för att skriva ut extracellulära matris för mikromiljö microarrays. Kollagenblocket skrivs ut på MEMAs som ett rutnät. De PBS-fyllda brunnarna ger extra fuktighet för att förhindra uttorkning ur den extracellulära matristrycksblandningsblandningsplattan.Skriv ut matriserna i åtta-brunnsplåtarna som 20 kolumner med 35 rader, för totalt 700 fläckar. Efter tryckning förvaras plåtar i en exsiccator i minst tre dagar före användning. Först designa en 96-väl-plåtlayout med mellanrum som möjliggör användning av en flerkanalspipets med fyra fördelade spetsar, så att behandlingen av många MEMA-plattor kan göras på en gång.Hämta sedan liganderna från frysen och tina i is i en laminär flödeshuva. Kort snärta och snurra ner varje rör. Använd tillverkarens rekommenderade buffert för att späda ut liganderna till ett 200-gånger arbetslager.Pipett 10 mikroliter av varje 200-gånger ligand lager i motsvarande väl inom 96-brunnsplattan. Använd tätningsfilm för att täta plattorna och förvara dem på minus-20 grader Celsius. Gör ligand behandlingsplattor i omgångar, och fånga alla metadata för nedströms analys.Innan odlingscellerna, blockera MEMAs med två milliliter per brunn av nonfouling blockerande buffert i 20 minuter. Använd en Y-splitter med två Pasteur-pipetter till aspireringsblockeringsbuffert i flera brunnar samtidigt, och trippeltvätta sedan brunnarna med PBS. För att förhindra uttorkning, lämna den slutliga volymen av PBS i brunnarna tills redo för cellplätering.Före ett fullständigt MEMA-experiment, optimera MCF7 cell seeding koncentration genom att utföra en cell titrering experiment. En idealisk plats, som visas här, har tillräckligt med cellnummer för att extrahera data, men inte så många att platsen är alltför konfluent. I MEMA, aspirera de återstående PBS och utsäde MCF7 celler på 30, 000 till 35, 000 celler per brunn i två milliliter av sådd medium.Placera MEMA i en inkubator på 37 grader Celsius. Efter vidhäftning över natten i inkubatorn, aspirera mediet och ersätt med två milliliter av reducerat tillväxtmedium för att isolera stimulatoriska inverkan av specifika ligander. Tina sedan en tidigare frusen ligandbehandlingsplatta på is.Centrifugera tinad platta vid 200 gånger g i en minut. Överför 200 mikroliter av medium från varje brunn i MEMA-odlingsplattan till lämplig brunn i ligandbehandlingsplattan. Pipett upp och ner för att blanda liganden med mediet, och överföra denna blandning tillbaka till lämplig brunn i MEMA-odlingsplattan.Lätt rock för hand och returnera MEMA plattorna till inkubatorn för att odla ligand-ECM kombinationen vid 37 grader Celsius och 5%koldioxid. Efter 71 timmar, tillsätt 100 gånger EdU till MEMA brunnarna för en slutlig koncentration av 10 mikromolar. Inkubera den i ytterligare en timme vid 37 grader Celsius och 5% koldioxid.Efter den slutliga inkubationen aspirera du brunnarna. Fixera MEMAs i två milliliter per brunn på 2%PFA i 15 minuter vid rumstemperatur. Därefter aspirera PFA från brunnarna.Permeabilisera med två milliliter per brunn på 0,1%nonioniskt ytaktiva föremål i 15 minuter. Aspirera ytaktiva, och sedan tvätta brunnarna med två milliliter PBS och PBS-T, sekventiellt. Därefter lägger du till 1,5 milliliter EdU-reagenser för upptäcktsreaktion till varje brunn.Inkubera i en timme i rumstemperatur, gunga och skyddas mot ljus. Släck sedan reaktionen med 1,5 milliliter kommersiell släckbuffert per brunn. Aspirera igen, och tvätta med PBS-T före inkubering med optimerade koncentrationer av fläckar eller antikroppar.Inkubera MEMA brunnar med primära antikroppar i färgning buffert, gunga på fyra grader Celsius över natten. Efter inkubation av primär antikropp, tvätta brunnar med PBS följt av PBS-T. Tillsätt sekundära antikroppar i 0,5 mikrogram per milliliter DAPI, utspädd i färgningsbuffert.Inkubera, gunga i en timme i rumstemperatur i mörkret. Tvätta brunnar två gånger med två milliliter per brunn av PBS, och lämna dem i de sista två milliliter av PBS. Till bild fläckas MEMA, placera den på mikroskopet skede av en automatiserad bildsystem med lämpliga fluorescerande detekteringskanaler.Utdata resulterande bilddata till ett bildhanteringssystem. Segmentera celler och beräkna intensitetsnivåer med cellprofiler. I det här protokollet cellcykelprofiler av binned DAPI intensitetsvärden kontra cell räknas från en åtta-brunns plåt indikerar celler i G1 kontra G2 cellcykelfas.Detta motsvarar två nDNA innehåll i celler i tidig tillväxt fas, och fyra nDNA innehåll i celler på väg att genomgå mitos. Effekten av mikromiljö av ligander och ECM på både cellnummer och EdU-inkorporering visas. Rött anger högre celltal och blått är lägre celltal.Många av effekterna är ligand-driven, som ECM villkoret inte starkt inverkan cellnummer eller EdU positivitet. Natagen 1 är ett tydligt undantag, eftersom förekomsten av denna ECM-molekyl hämmar cellbindning och tillväxt av MCF7. Ligander som FGF6 och neuregulin-1 alfa förbättra cellnummer och har höga priser av EdU införlivande, medan ligander såsom amfiende och neuregulin-1 SMDF hämmar cellbindning och tillväxt av celler.Ett exempel på MCF7 celler växer på en MEMA plats behandlas med neuregulin-1 alfa visar hög priser av EdU införlivande, indikeras av rosa kärnor. I den här bilden är grön fläck cellmask, och blått är DAPI. Eftersom ett fullt MEMA-experiment är dyrt är det mycket viktigt att utföra optimeringssteg, såsom cell- och serumtitreringar, innan det fullständiga experimentet framförs.När mikromiljövillkor av intresse har identifierats med hjälp av MEMA-plattformen kan de specifika liganderna och de extracellulära matrisproteinerna studeras mer ingående med traditionella 2D- och 3D-cellodlingssystem.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

De<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginal skiva Tumör Modell: Visualisering och kvantifiering av genuttryck och tumör invasiv använda genetiska mosaiker

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

Intracarotid Cancer Cell Injection att producera musmodeller av metastaser i hjärnan

Metastasis, the spread and growth of malignant cells at secondary sites within a patient&#39;s body, accounts for &#62; 90% of cancer-related mortality. ...

Counting Proteins in Single Cells with Addressable Droplet Microarrays

Räknar protein i enstaka celler med adresserbara Droplet Microarrays

Often cellular behavior and cellular responses are analyzed at the population level where the responses of many cells are pooled together as an average ...

Using the Dot Assay to Analyze Migration of Cell Sheets

Med Dot-analys att analysera Migration av Cell ark

Although complex organisms appear static, their tissues are under a continuous turnover. As cells age, die, and are replaced by new cells, cells move ...

Using 22C3 Anti-PD-L1 Antibody Concentrate on Biopsy and Cytology Samples from Non-small Cell Lung Cancer Patients

Använda 22C 3 Anti-PD-L1 antikropp koncentreras biopsi och cytologi prover från icke-small Cell Lung cancerpatienter

Pembrolizumab monotherapy has been approved for the first- and second-line treatment of patients with PD-L1-expressing advanced non-small cell lung cancer ...

Acellular and Cellular Lung Model to Study Tumor Metastasis

Acellulärt och cellulära Lung modell att studera tumör metastasering

It is difficult to isolate tumor cells at different points of tumor progression. We created an ex vivo lung model that can show the interaction of tumor ...

Elastic Staining on Paraffin-embedded Slides of pT3N0M0 Gastric Cancer Tissue

Elastisk färgning på paraffin-inbäddade diabilder av pT3N0M0 mag cancer vävnad

The elastic lamina, which is usually located in the sub-mesothelial layer, adjacent to the peritoneum mesothelial cells, is amphiphilic on hematoxylin and ...

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array (HMCA)-based Plates

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array HMCA-based Plates

Analys av Cancer Cell Invasion och anti metastaserande Drug Screening med hjälp av Hydrogel Micro-kammare Array (HMCA)-baserade plattor

Cancer metastasis is known to cause 90% of cancer lethality. Metastasis is a multistage process which initiates with the penetration/invasion of tumor ...

Characterize Disease-related Mutants of RAF Family Kinases by Using a Set of Practical and Feasible Methods

Karakterisera sjukdomsrelaterade mutanter av RAF-Familjekinaser genom att använda en uppsättning praktiska och genomförbara metoder

The rapidly accelerated fibrosarcoma (RAF) family kinases play a central role in cell biology and their dysfunction leads to cancers and developmental ...

Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter

Identifiering av transkriptionsfaktor regulatorer med hjälp av Medium-Genomströmning Screening av arrayed bibliotek och en Dual-Luciferase-Based Reporter

Transcription factors can alter the expression of numerous target genes that influence a variety of downstream processes making them good targets for ...