Name: using microarrays to interrogate microenvironmental impact on cellular phenotypes in cancer
Uploaded: 2019-05-21T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer at JoVE.com

Bu çalışma, ağ hücresel Imzaları (LıNCS) Grant HG008100 (J.W.G., L.M.H. ve J. E. K) NıH ortak fon Kütüphanesi tarafından destekleniyordu.

Not: Tahmini saat de dahil olmak üzere tüm MEMA işleminin genel bakışı Şekil 1' de gösterilen akış diyagramında özetlenmiştir. Bu protokol 8-kuyu plakaları içinde MEMAs imalatı ayrıntıları. Protokol diğer plakalar veya slaytlar için uyarlanabilir.
1. protein, Seyreltilme ve boyama tamponları hazırlanması
<ol><li>ECMs, ligler ve sitokinlerin oda sıcaklığına (RT) ve kısaca santrifüjlerin dengelenme şişeleri. Uygun R...

<ol>
	<li>Hanahan, D., Coussens, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accessories+to+the+crime:+functions+of+cells+recruited+to+the+tumor+microenvironment.">Accessories to the crime: functions of cells recruited to the tumor microenvironment.</a> Cancer Cell. 21 (3), 309-322 (2012).</li><li>Quail, D. F., Joyce, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironmental+regulation+of+tumor+progression+and+metastasis.">Microenvironmental regulation of tumor progression and metastasis.</a> Nature Medicine. 19 (11), 1423-1437 (2013).</li><li>Hughes, C. S., Postovit, L. M., Lajoie, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrigel:+a+complex+protein+mixture+required+for+optimal+growth+of+cell+culture.">Matrigel: a complex protein mixture required for optimal growth of cell culture.</a> Proteomics. 10 (9), 1886-1890 (2010).</li><li>LaBarge, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+mammary+progenitor+cell+fate+decisions+are+products+of+interactions+with+combinatorial+microenvironments.">Human mammary progenitor cell fate decisions are products of interactions with combinatorial microenvironments.</a> Integrative Biology (Cambridge). 1 (1), 70-79 (2009).</li><li>Watson, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironment-Mediated+Mechanisms+of+Resistance+to+HER2+Inhibitors+Differ+between+HER2++Breast+Cancer+Subtypes.">Microenvironment-Mediated Mechanisms of Resistance to HER2 Inhibitors Differ between HER2+ Breast Cancer Subtypes.</a> Cell Systems. 6 (3), 329-342 (2018).</li><li>Ranga, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+niche+microarrays+for+systems-level+analyses+of+cell+fate.">3D niche microarrays for systems-level analyses of cell fate.</a> Nature Communications. 5, 4324 (2014).</li><li>Malta, D. F. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+microarrays+to+study+inductive+signaling+for+endoderm+specification.">Extracellular matrix microarrays to study inductive signaling for endoderm specification.</a> Acta Biomater. 34, 30-40 (2016).</li><li>Kamentsky, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+structure,+function+and+compatibility+for+CellProfiler:+modular+high-throughput+image+analysis+software.">Improved structure, function and compatibility for CellProfiler: modular high-throughput image analysis software.</a> Bioinformatics. 27 (8), 1179-1180 (2011).</li><li>Gagnon-Bartsch, J. A., Jacob, L., Speed, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Removing+Unwanted+Variation+from+High+Dimensional+Data+with+Negative+Controls.">Removing Unwanted Variation from High Dimensional Data with Negative Controls.</a> University of California, Berkeley, Department of Statistics, University of California, Berkeley. , (2013).</li><li>Allan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=OMERO:+flexible,+model-driven+data+management+for+experimental+biology.">OMERO: flexible, model-driven data management for experimental biology.</a> Nature Methods. 9 (3), 245-253 (2012).</li><li>Simian, M., Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids:+A+historical+perspective+of+thinking+in+three+dimensions.">Organoids: A historical perspective of thinking in three dimensions.</a> Journal of Cell Biology. 216 (1), 31-40 (2017).</li><li>Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+differentiated+state+of+normal+and+malignant+cells+or+how+to+define+a+"normal"+cell+in+culture.">The differentiated state of normal and malignant cells or how to define a "normal" cell in culture.</a> International Review of Cytology. 70, 27-100 (1981).</li><li>Serban, M. A., Prestwich, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modular+extracellular+matrices:+solutions+for+the+puzzle.">Modular extracellular matrices: solutions for the puzzle.</a> Methods. 45 (1), 93-98 (2008).</li><li>Kaylan, K. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+lung+tumor+cell+drug+responses+as+a+function+of+matrix+context+and+genotype+using+cell+microarrays.">Mapping lung tumor cell drug responses as a function of matrix context and genotype using cell microarrays.</a> Integrative Biology (Cambridge). 8 (12), 1221-1231 (2016).</li><li>Lin, C. H., Jokela, T., Gray, J., LaBarge, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combinatorial+Microenvironments+Impose+a+Continuum+of+Cellular+Responses+to+a+Single+Pathway-Targeted+Anti-cancer+Compound.">Combinatorial Microenvironments Impose a Continuum of Cellular Responses to a Single Pathway-Targeted Anti-cancer Compound.</a> Cell Reports. 21 (2), 533-545 (2017).</li><li>Gjorevski, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Designer+matrices+for+intestinal+stem+cell+and+organoid+culture.">Designer matrices for intestinal stem cell and organoid culture.</a> Nature. 539 (7630), 560-564 (2016).</li></ol>

"Dimensionality" ve içeriğin önemi, mikroçevre11ile etkileşimi ile kanser hücrelerinin karakterizasyonu araçları olarak in vitro kültür sistemlerinin geliştirilmesi konusunda motive edici bir faktör olmuştur ve in vitro yeteneği Kültür sistemleri in vivo çevre taklit etmek için bu kültür sistemleri geliştirmek için arayışı arkasında bir itici kuvvettir. In vitro sistemlerde, ancak, oldukça basitleştirilmiş bir model12aşağı kompleks in vivo du...

İki boyutlu (2D) monolayers plastik üzerinde kanser hücre hatları kültür kanser araştırmacıları için büyük workhorses vardır biri kalır. Ancak, mikroortam giderek hücresel fenotürleri etkisi yeteneği için tanınıyor. Kanserde, tümör mikroçevre, büyüme, hayatta kalma, invazyon ve tedaviye yanıt dahil olmak üzere birden fazla hücresel davranışları etkileyen bilinmektedir1,2. Geleneksel Tek tabakalı hücre kültürler genellikle mikroçevre etkileri eksikliği, hangi daha karmaşık üç boyutlu gelişimine yol açmıştır (3D) hücreleri büyümek için tespit, ticari olarak kullanılabilir arıtılmış Bodrum membran özler de dahil olmak üzere. Ancak, bu saflaştırılmış matrisler genellikle kullanmak ve toplu değişkenlik3 ve karmaşık kompozisyonlar3gibi teknik sorunlardan muzdarip karmaşıklaşır. Sonuç olarak, hücresel fenotürleri etkileyen olabilir belirli proteinler için fonksiyon atamak zor olabilir3.
Bu sınırlamaları gidermek için, mikroortam Mikroarray (Mema) teknolojisini geliştirdik, bu da mikro 'ı basit bileşimsiz matris (ECM) ve çözünebilir büyüme faktörü proteinlerinin kolay kombinasyonuna düşüren4,5 . MEMA platformu, hücrelerin davranışını etkileyen baskın mikroçevresel faktörlerin tanımlanması sağlar. Bir dizi biçimi kullanarak, mikro ortam faktörlerinin kombinasyonları binlerce tek bir denemede farklı teknik kullanılarak olabilir. MEMA burada açıklanan interrogates ~ 2.500 farklı benzersiz mikroçevre koşulları. İyi plakalara yazdırılan ECM proteinleri, hücrelerin kültürlü olması üzerine büyüme pedleri oluşturur. Çözünür ligler bireysel kuyulara eklenir, hücrelerin maruz kaldığı her farklı noktada benzersiz Kombinatoryal mikroortamlar (ECM + ligand) oluşturma. Hücreler birkaç gün boyunca kültürlü, sonra sabit, lekeli, ve bu özel mikroçevre kombinasyonları maruz kalma sonucu hücresel fenotipleri değerlendirmek için görüntülenmiştir. Mikroortamlar basit kombinasyonları olduğundan, hücrelerde büyük fenotipi değişiklikler yapan proteinlerin tanımlanması basittir. Memalar, hücre kaderi kararları ve terapi4,5,6,7tepki sürücü olanlar da dahil olmak üzere, birden fazla hücresel fenotürleri etkileyen faktörleri belirlemek için başarıyla kullanılmıştır. Bu tepkiler basit 2D deneylerde doğrulanabilir ve daha sonra tümör mikroortamının karmaşıklığını daha tam olarak tekrar eden koşullar altında değerlendirilebilir. MEMA platformu, iyi fenotip biyomarkerlerin mevcut olması koşuluyla, çeşitli hücre türleri ve uç noktalarıyla oldukça uyarlanabilir.

using microarrays to interrogate microenvironmental impact on cellular phenotypes in cancer

Mikroortamın hücrelerin phenoype üzerindeki etkisini anlamak, hem çözünür büyüme faktörleri hem de mikro ortamda matris ilişkili proteinlerin kompleks karışımı nedeniyle zor bir sorundur. Ayrıca, mikroortamlar içinde vitro modelleme için kolayca kullanılabilir reaktifler genellikle tamamen tanımlanmış ve toplu değişkenlik için toplu muzdarip proteinlerin karmaşık karışımları kullanın. Mikro Mikroarray (Mema) platformu tek bir tahlil içinde hücresel fenotipleri üzerindeki etkileri için mikro çevre proteinleri binlerce basit kombinasyonları değerlendirilmesi için izin verir. Memalar, bireysel liglerin dizilmiş ekstrenüler matris (ECM) proteinlerini içeren ayrı kuyulara eklenmesini sağlayan iyi plakalar halinde hazırlanmaktadır. Her basılı ECM ile çözünür ligand kombinasyonu benzersiz bir kombinasyon oluşturur. Tipik bir Mema tahlil hücre tek bir tahlil maruz kalan 2.500 benzersiz Kombinatoryal mikroortamlar büyük içerir. Bir test durumu olarak, meme kanseri hücre hattı MCF7 MEMA platformunda kaplama oldu. Bu tahlil Analizi hem geliştirmek ve bu hücrelerin büyümesi ve proliferasyonu inhibe faktörler tespit. MEMA platformu son derece esnektir ve kanser araştırmalarının ötesinde diğer biyolojik sorularla kullanılmak üzere uzatılabilir.

Hücre büyümesi ve proliferasyonu üzerinde mikroçevresel etkileri kolaylaştırmak ve hücre büyümesini ve proliferasyonu teşvik eden veya engellenmiş olan koşulları belirlemek için, meme kanseri hücre hattı MCF7 protokolde açıklandığı gibi sekiz 8-iyi Memas bir dizi üzerinde seribaşı oldu. Bu tahlil 48 farklı ECMs ve 57 farklı ligler, toplam 2736 Kombinatoryal mikroçevre koşulları için hücreleri maruz. Kültüre 71 h sonra, hücreler EdU ile darbeli, sabit, geçirgen, ve DAPı ile lekelenmiş...

Watch this Scientific Journal Video about Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer at JoVE.com

Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer

Burada sunulan yöntemin amacı, mikroortam mikrodiziler (Mema) nasıl imal edilebilir ve kültürlü hücrelerin fenotürü üzerinde basit Kombinatoryal mikroortamlar binlerce etkisini sorgulamak için kullanılan göstermek için.

Kanser hücresel Phenotypes üzerinde Mikroçevresel etki Interrogate için Microdiziler kullanma

Understanding the impact of the microenvironment on the phenotype of cells is a difficult problem due to the complex mixture of both soluble growth ...

Tümör mikroçevresini incelemek karmaşıklığı nedeniyle zordur. Tümör hücre fenotiplerinin ana sürücülerinin belirlenmesine olanak tanıyan basit kombinatorial mikroortamlardan oluşan mikroçevre mikrodizileri geliştirdik. MEMA platformunun en büyük avantajı, mikroçevre koşullarının tümü tanımlanmış olduğundan, ilgi nin fenotiplerini yönlendiren mikroçevre faktörlerini tanımlamanın kolay olmasıdır.MEMA platformu, primer hücre suşları ve kök hücreler de dahil olmak üzere diğer kanser dışı sistemlerde yaygın olarak uygulanabilir. Islık tezgah çağrılarını hızlandırmak ve protokolü basitleştirmek için geliştirdiğimiz bir dizi mühendislik hilesi ve adımı var. Başlamak için, hücre dışı matris baskı karışımını sekiz kuyuplakaya sabit noktalara yazdırmak için dokunmatik pimli yazıcı kullanın.Mikroçevre mikrodizileri için hücre dışı matrisi yazdırmak için dört kez-yedi baskı kafası yapılandırmasında düzenlenmiş 350 mikrometre çapındaki pimleri kullanın. Kollajen blok bir ızgara olarak MEMA üzerine basılır. PBS dolu kuyular, hücre dışı matris baskı karışımı kaynak plakasının kurumasını önlemek için ekstra nem sağlar.Dizileri sekiz kuyulu plakalara, toplam 700 nokta için 35 satıra 20 sütun halinde yazdırın. Baskıdan sonra, plakaları kullanmadan önce en az üç gün boyunca kurutucuda saklayın. İlk olarak, birçok MEMA plakasının tedavisinin aynı anda yapılabilmeleri için, dört aralıklı uçlu çok kanallı pipet kullanımına olanak tanıyan aralıklı 96 kuyuluk bir plaka düzeni tasarlayın.Sonra dondurucudan ligands almak ve bir laminar akış kaputunda buz içinde çözülür. Kısaca flick ve her tüp aşağı spin. Ligandları 200 kat çalışan bir stokla seyreltmek için üreticinin tavsiye edilen tamponu kullanın.Pipet 10 mikrolitre her 200-kez ligand stok 96-iyi plaka içinde ilgili kuyuiçine. Plakaları mühürlemek ve eksi-20 santigrat derecede saklamak için sızdırmazlık filmini kullanın. Ligand tedavi plakalarını gruplar halinde yapın ve akış aşağı analizi için tüm meta verileri yakalayın.Hücreleri çiftlemeden önce, 20 dakika boyunca kirlenmez engelleme tampon kuyubaşına iki mililitre ile MEMA'ları engelleyin. Aynı anda birden fazla kuyuda engelleme tamponu aspire etmek için iki Pasteur pipetleri ile bir Y-splitter kullanın ve sonra pbs ile kuyuları üç kez yıkayın. Kurutmayı önlemek için, hücre kaplaması için hazır olana kadar pbs'nin son hacmini kuyularda bırakın.Tam bir MEMA denemesiöncesinde, hücre titrasyonu deneyi yaparak MCF7 hücre tohumlama konsantrasyonu optimize edin. İdeal bir nokta, burada gösterildiği gibi, veri ayıklamak için yeterli hücre numaraları vardır, ama nokta aşırı confluent olduğunu çok değil. MEMA'da, kalan PBS ve tohum MCF7 hücrelerini 30, 000 ila 35, 000 hücreyi iki mililitrelik tohumlama ortamında alıto.MEMA'yı 37 derecede bir kuvöze yerleştirin. Kuvözde bir gecede yapvere den sonra, orta aspire ve belirli ligandların uyarıcı etkisini izole etmek için azaltılmış büyüme ortamı iki mililitre ile değiştirin. Sonra buz üzerinde daha önce dondurulmuş ligand tedavi plakası eritin.Santrifüj bir dakika için 200 kez g'de erimiş plaka. MEMA kültür plakasındaki her kuyudan 200 mikrolitre orta yı ligand arıtma plakasına uygun kuyuya aktarın. Pipet yukarı ve aşağı orta ile ligand karıştırmak ve mema kültür plaka uygun kuyuya bu karışımı geri aktarın.Elle hafifçe kayan ve 37 santigrat derece ve% 5 karbondioksit ligand-ECM kombinasyonu kültür için kuvöz MEMA plakaları dönmek. 71 saat sonra, 10 mikromolar son konsantrasyon için MEMA kuyuları için 100 kez EdU ekleyin. 37 santigrat derece ve %5 karbondioksitle bir saat daha kuluçkaya yatırın.Son kuluçkadan sonra, kuyuları aspire edin. MM'leri oda sıcaklığında 15 dakika boyunca %2 PFA'nın kuyusu başına iki mililitre de düzeltin. Sonra kuyulardan PfA aspire.15 dakika boyunca % 0.1 noniyonik yüzey aktif kuyu başına iki mililitre ile permeabilize. Sürfaktanas, ve sonra sırayla, PBS ve PBS-T iki mililitre ile kuyuları yıkayın. Bundan sonra, her kuyuya 1,5 mililitre EdU algılama reaksiyonu reaktifi ekleyin.Oda sıcaklığında bir saat kuluçka, sallanan ve ışıktan korunmaktadır. Sonra iyi başına 1.5 mililitre ticari söndürme tampon ile reaksiyon söndürmek. Tekrar aspire edin ve en iyi şekilde boya veya antikor konsantrasyonları ile kuluçkaya yatırmadan önce PBS-T ile yıkayın.Mema,tamponun boyanmasında birincil antikorlara sahip, bir gecede dört derece santigrat derecede sallayarak MEMA kuyularını inkübün. Primer antikor inkübasyonundan sonra kuyuları PBS ve ardından PBS-T ile yıkayın. Mililitre DAPI başına 0,5 mikrogram ikincil antikorlar ekleyin, boyama tampon seyreltilmiş.Kuluçka, karanlıkta oda sıcaklığında bir saat sallanan. Kuyuları pbs kuyusu başına iki mililitre ile iki kez yıkayın ve pbs'nin son iki mililitresinde bırakın. Lekeli MEMA'yı görüntülemek için, uygun floresan algılama kanallarına sahip otomatik görüntüleme sisteminin mikroskop aşamasına yerleştirin.Görüntü yönetim sistemine çıkan görüntü verilerinin çıktısı. Hücreleri segmente edin ve CellProfiler kullanarak yoğunluk düzeylerini hesaplayın. Bu protokolde, binned DAPI yoğunluk değerlerinin hücre döngüsü profilleri ile sekiz kuyulu bir plakadan alınan hücre sayıları G1 ve G2 hücre döngüsü fazındaki hücreleri gösterir.Bu, erken büyüme evresinde hücrelerdeki iki nDNA içeriğine ve mitoz bölünmek üzere olan hücrelerdeki dört nDNA içeriğine karşılık gelir. Ligandların ve ECM'lerin mikro ortamının hem hücre numarası hem de EdU dahili olması üzerindeki etkisi gösterilmiştir. Kırmızı daha yüksek hücre numarasını gösterir ve mavi daha düşük hücre numarasıdır.Etkileri çoğu ligand odaklı, ECM durumu güçlü hücre numarası veya EdU pozitifliği etkilemedi gibi. Natagen 1 açık bir istisna, Bu ECM molekülün varlığı hücre bağlanması ve MCF7 büyümesini inhibe olarak. FGF6 ve neuregulin-1 alfa gibi ligandlar hücre sayısını artırır ve yüksek EdU birleşme oranlarına sahiptir, amphiregülin ve neuregulin-1 SMDF gibi ligandlar hücre bağlanmasını ve hücrelerin büyümesini engeller.Neuregulin-1 alfa ile tedavi edilen bir MEMA yerinde büyüyen MCF7 hücrelerinin bir örneği, pembe çekirdekleri ile gösterilen yüksek EdU birleşme oranlarını göstermektedir. Bu resimde, yeşil leke hücre maskesi ve mavi DAPI olduğunu. Tam bir MEMA deneyi pahalı olduğundan, tam denemeyi gerçekleştirmeden önce hücre ve serum titrasyonları gibi optimizasyon adımlarını gerçekleştirmek çok önemlidir.Mema platformu kullanılarak mikroçevresel koşullar tanımlandıktan sonra, spesifik ligandlar ve hücre dışı matriks proteinleri geleneksel 2D ve 3D hücre kültür sistemleri kullanılarak daha derinlemesine incelenebilir.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

<em&gt; Drosophila</em&gt; Hayali Disk Tümör Modeli: Genetik Mozaikler kullanma Gen İfade ve Tümör invazivliğinin Görselleştirme ve

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

Intracarotid Kanser Hücre Enjeksiyon Beyin metastaz Fare modelleri üretmek için

Metastasis, the spread and growth of malignant cells at secondary sites within a patient&#39;s body, accounts for &#62; 90% of cancer-related mortality. ...

Counting Proteins in Single Cells with Addressable Droplet Microarrays

Proteinler adresli damlacık Microarrays ile tek kişilik hücrelerde sayma

Often cellular behavior and cellular responses are analyzed at the population level where the responses of many cells are pooled together as an average ...

Using the Dot Assay to Analyze Migration of Cell Sheets

Geçiş hücre yaprak analiz etmek için nokta tahlil kullanarak

Although complex organisms appear static, their tissues are under a continuous turnover. As cells age, die, and are replaced by new cells, cells move ...

Using 22C3 Anti-PD-L1 Antibody Concentrate on Biopsy and Cytology Samples from Non-small Cell Lung Cancer Patients

22C 3 kullanarak Anti-PD-L1 antikor konsantre biyopsi ve küçük hücreli dışı akciğer kanserli hastalarda sitoloji örnekleri

Pembrolizumab monotherapy has been approved for the first- and second-line treatment of patients with PD-L1-expressing advanced non-small cell lung cancer ...

Acellular and Cellular Lung Model to Study Tumor Metastasis

Tümör metastazı çalışmaya acellular ve hücresel akciğer modeli

It is difficult to isolate tumor cells at different points of tumor progression. We created an ex vivo lung model that can show the interaction of tumor ...

Elastic Staining on Paraffin-embedded Slides of pT3N0M0 Gastric Cancer Tissue

Parafin üzerinde elastik boyama-pT3N0M0 gastrik kanser dokusu gömülü slaytlar

The elastic lamina, which is usually located in the sub-mesothelial layer, adjacent to the peritoneum mesothelial cells, is amphiphilic on hematoxylin and ...

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array (HMCA)-based Plates

Analysis of Cancer Cell Invasion and Anti-metastatic Drug Screening Using Hydrogel Micro-chamber Array HMCA-based Plates

Kanser hücre işgali ve Anti-metastatik uyuşturucu kullanarak hidrojel mikro-odası dizi (HMCA) eleme Analizi-tabak dayalı

Cancer metastasis is known to cause 90% of cancer lethality. Metastasis is a multistage process which initiates with the penetration/invasion of tumor ...

Characterize Disease-related Mutants of RAF Family Kinases by Using a Set of Practical and Feasible Methods

Bir dizi pratik ve uygulanabilir yöntem kullanarak RAF aile Kinazlarının hastalıkla ilgili mutantları karakterize etme

The rapidly accelerated fibrosarcoma (RAF) family kinases play a central role in cell biology and their dysfunction leads to cancers and developmental ...

Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter

Dizili Kütüphanelerin Orta İşleç Lik Taraması ve Çift Luciferase Tabanlı Muhabir kullanılarak Transkripsiyon Faktörü Düzenleyicilerin Tanımlanması

Transcription factors can alter the expression of numerous target genes that influence a variety of downstream processes making them good targets for ...