Name: primary culture of rat adrenocortical cells and assays of steroidogenic functions
Uploaded: 2019-03-12T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Primary Culture of Rat Adrenocortical Cells and Assays of Steroidogenic Functions at JoVE.com

Dit werk werd gesteund door een subsidie van de National Science Raad Taiwan (NSC102-2320-B-037-008-MY3) en een nationale Cheng-Kung Universiteit ziekenhuis onderzoeksbeurs (NCKUH-10102045).

Alle procedures met inbegrip van dierlijke onderwerpen zijn goedgekeurd door institutionele Animal Care en gebruik Comité van Kaohsiung medische universiteit.
1. experimentele Procedure
<ol><li>De volwassene (8 tot 12 weken oude) mannelijke en vrouwelijke SD rats offeren door CO2 euthanasie.</li>
	<li>Toepassen van 70% ethanol en laat het worden geabsorbeerd in de huid, en vervolgens veeg de huid met een papieren zakdoekje.</li>
	<li>Zet de rat op een schone kunststof plaat in de...

<ol>
	<li>Frith, C. H., Jones, T. C., Mohr, U., Hunt, R. D., Capen, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histology,+Adrenal+Gland,+Mouse.">Histology, Adrenal Gland, Mouse.</a> Endocrine System. Monographs on Pathology of Laboratory Animals. , 8-12 (1983).</li><li>Keegan, C. E., Hammer, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+insights+into+organogenesis+of+the+adrenal+cortex.">Recent insights into organogenesis of the adrenal cortex.</a> Trends in Endocrinology Metabolism. 13 (5), 200-208 (2002).</li><li>Marieb, E., Wilhelm, P. B., Mallatt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chapter 17: The Endocrine System. , 558-581 (2017).</li><li>Chrousos, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypothalamic-pituitary-adrenal+axis+and+immune-mediated+inflammation.">The hypothalamic-pituitary-adrenal axis and immune-mediated inflammation.</a> New England Journal Medicine. 332 (20), 1351-1362 (1995).</li><li>Bornstein, S. R., Rutkowski, H., Vrezas, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytokines+and+steroidogenesis.">Cytokines and steroidogenesis.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. (1-2), 135-141 (2004).</li><li>Bielohuby, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+analysis+of+the+mouse+adrenal+gland+from+weaning+to+adulthood:+time-+and+gender-dependent+alterations+of+cell+size+and+number+in+the+cortical+compartment.">Growth analysis of the mouse adrenal gland from weaning to adulthood: time- and gender-dependent alterations of cell size and number in the cortical compartment.</a> American Journal of Physiology-Endocrinology Metabolism. 293 (1), E139-E146 (2007).</li><li>van Weerden, W. M., Bierings, H. G., van Steenbrugge, G. J., de Jong, F. H., Schroder, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenal+glands+of+mouse+and+rat+do+not+synthesize+androgens.">Adrenal glands of mouse and rat do not synthesize androgens.</a> Life Sciences. 50 (12), 857-861 (1992).</li><li>Wang, T., Rainey, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+adrenocortical+carcinoma+cell+lines.">Human adrenocortical carcinoma cell lines.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 351 (1), 58-65 (2012).</li><li>Payne, A. H., Hales, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overview+of+steroidogenic+enzymes+in+the+pathway+from+cholesterol+to+active+steroid+hormones.">Overview of steroidogenic enzymes in the pathway from cholesterol to active steroid hormones.</a> Endocrine Review. 25 (6), 947-970 (2004).</li><li>Ruggiero, C., Lalli, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+ACTH+Signaling+on+Transcriptional+Regulation+of+Steroidogenic+Genes.">Impact of ACTH Signaling on Transcriptional Regulation of Steroidogenic Genes.</a> Frontiers in Endocrinology. 7, 24 (2016).</li><li>Chen, Y. C., Liang, Y. L., Huang, Y. L., Huang, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+Toona+sinensis-stimulated+adrenal+steroidogenesis+in+primary+rat+adrenal+cells.">Mechanism of Toona sinensis-stimulated adrenal steroidogenesis in primary rat adrenal cells.</a> Journal of Functional Foods. 14 (2015), 318-323 (2015).</li><li>Rybak, S. M., Ramachandran, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+culture+of+normal+rat+adrenocortical+cells.+I.+Culture+conditions+for+optimal+growth+and+function.">Primary culture of normal rat adrenocortical cells. I. Culture conditions for optimal growth and function.</a> In Vitro. 17 (7), 599-604 (1981).</li><li>Rybak, S. M., Ramachandran, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+culture+of+normal+rat+adrenocortical+cells.+II.+Quantitation+of+steroid+dehydrogenase+stain.">Primary culture of normal rat adrenocortical cells. II. Quantitation of steroid dehydrogenase stain.</a> In Vitro. 17 (7), 605-611 (1981).</li><li>O'Hare, M. J., Neville, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Steroid+metabolism+by+adult+rat+adrenocortical+cells+in+monolayer+culture.">Steroid metabolism by adult rat adrenocortical cells in monolayer culture.</a> Journal of Endocrinology. 58 (3), 447-462 (1973).</li><li>Di Blasio, A. M., Fujii, D. K., Yamamoto, M., Martin, M. C., Jaffe, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+of+cell+proliferation+and+steroidogenesis+in+cultured+human+fetal+adrenal+cells+chronically+exposed+to+adrenocorticotropic+hormone:+rationalization+of+in+vitro+and+in+vivo+findings.">Maintenance of cell proliferation and steroidogenesis in cultured human fetal adrenal cells chronically exposed to adrenocorticotropic hormone: rationalization of in vitro and in vivo findings.</a> Biology of Reproduction. 42 (4), 683-691 (1990).</li><li>Brasaemle, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thematic+review+series:+adipocyte+biology.+The+perilipin+family+of+structural+lipid+droplet+proteins:+stabilization+of+lipid+droplets+and+control+of+lipolysis.">Thematic review series: adipocyte biology. The perilipin family of structural lipid droplet proteins: stabilization of lipid droplets and control of lipolysis.</a> Journal of Lipid Research. 48 (12), 2547-2559 (2007).</li><li>Hoeflich, A., Bielohuby, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+adrenal+gland+growth:+signal+integration+by+extracellular+signal+regulated+kinases1/2.">Mechanisms of adrenal gland growth: signal integration by extracellular signal regulated kinases1/2.</a> Journal of Molecular Endocrinology. 42 (3), 191-203 (2009).</li><li>O'Hare, M. J., Neville, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+responses+to+corticotrophin+and+cyclic+AMP+by+adult+rat+adrenocortical+cells+in+monolayer+culture.">Morphological responses to corticotrophin and cyclic AMP by adult rat adrenocortical cells in monolayer culture.</a> Journal of Endocrinology. 56 (3), 529-536 (1973).</li></ol>

Bijnieren spelen een sleutelrol in milieu aanpassing3. Het hormoon dat door die de bijnierschors scheidt kunt reguleren en fysiologische functies en homeostase3aanpassen. De in vivo model weerspiegelt de echte fysiologische effecten in het lichaam. Het is echter nog steeds beïnvloed door vele complexe factoren, unstable effecten veroorzaken in experimenten. Daarentegen heeft de in vitro cell model voordelen waardoor het onvergelijkbaar met de diermodel. Ten eerste is de mi...

Het endocriene systeem is verantwoordelijk voor de regulering van de fysiologische activiteiten en homeostase1. Bijnieren, gelegen aan de craniale pool van de nieren zijn een van de belangrijkste endocriene organen die mineralocorticoids, glucocorticoïden en androgeen2,3 afscheiden. Er zijn twee verschillende delen van de bijnier: de cortex en de medulla. De bijnierschors bestaat uit drie lagen: de buitenste glomerulosa, de tussenliggende fasciculata en de innerlijke reticularis3. De zona glomerulosa is de oorspronkelijke dat site van aldosteron, een Mineralocorticoïden, die helpt bij het ion van natrium en water in de nieren3geabsorbeerd. De fasciculata van de zona produceert voornamelijk een basale niveau van glucocorticoïden in normale fysiologische omstandigheden3. Corticosteroïden bij knaagdieren en cortisol in mensen handelen binnen het lichaam helpen in het omgaan met stress door het reguleren van bloed glucose3. Tot op zekere hoogte kunnen remmen inflammatoire reacties en reguleren het immuunsysteem4,5. In tegenstelling tot andere zoogdieren, muizen en ratten geen hebben een functionele zona reticularis vanwege het ontbreken van een 17α-hydroxylase expressie in de bijnier6,7. Bijnieren van muizen en ratten zijn dus verstoken van de secretie van bijnier C-19 steroïden (cortisol en bijnier-androgenen).
Primaire gekweekte adrenocortical cellen is aangetoond dat het nuttig is voor het onderzoeken van de mechanismen waarmee de bijnier fysiologie8worden bestuurd. Net als andere steroidogenic weefsels synthetiseert elke bijnier zone zijn steroïden van gratis cholesterol9. Op adrenocorticotropic hormoon (ACTH) stimulatie, de gratis cholesterol wordt vrijgelaten uit de uitsplitsing lipide druppels en, dus, verbetert steroïde productie in de fasciculata en reticularis10.
Vele groepen hebben geprobeerd om stabiele cellijnen van adrenocortical carcinomen. Verschillende zorgen hebben echter slechts beperkt het gebruik van adrenocortical cellijnen in vitro modellen8. De steroïde reacties van cellijnen kunnen verschillen tussen passages, het lotnummer van het serum en de kwaliteit van de serum, enz. Bovendien doen de commerciële bijnier cellijnen (Y1 en SW13) niet corticosterone, waardoor het moeilijker om te studeren bijnier steroidogenesis8afscheiden. Met behulp van runderen en paarden bijnieren zoals ex vivo modellen een goede keuze wellicht, hoewel weefsels van deze markten sommige onbekende risico's verdoezelen kunnen. Vergeleken met hen, beheer van rat bijnieren is makkelijker en de bron is relatief meer stabiel en pathogenen vrije. Tezamen, kan de huidige hier beschreven methode worden gebruikt om te onderzoeken het verwante mechanisme van corticosterone synthese in rat bijnier fasciculata cellen.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>female/ male, SD/Wistar rats (8-12 wk)</td>
			<td>BioLASCO</td>
			<td></td>
			<td>male or femal rats are suitable for experiments. Female&#39;s adrenal glands are larger than male rats, however, female rats own the oestrous cycles that may influence the experiments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>collagenase, type II</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C-6885</td>
			<td>isolation of adrenal cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>12800-017</td>
			<td>powder media for adrenal cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ham&#39;s F12</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>21700-075</td>
			<td>powder media for adrenal cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>JT.baker</td>
			<td>4018</td>
			<td>buffer (powder)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>JT.baker</td>
			<td>3506-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse serum</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>16050014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>SAFC</td>
			<td>12103C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin (10,000 U)-streptomycin (10,000 ug/ml)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>30-002-Cl</td>
			<td>antibiotics</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>curved forceps</td>
			<td>BRAUN</td>
			<td>BD343R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>forceps</td>
			<td>BRAUN</td>
			<td>BD331R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scissor</td>
			<td>BRAUN</td>
			<td>BC224R</td>
			<td>cut rat skin and muscle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>delicate scissor</td>
			<td>BRAUN</td>
			<td>BC101R</td>
			<td>cut adrenal glands</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>adipose-differentiation related protein</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab108323</td>
			<td>antibody for lipid droplet associated protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>corticosterone ELISA kit</td>
			<td>cayman</td>
			<td>500655</td>
			<td>assay for corticosterone synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>inverted light microscopy</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fluorescence microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>JT.baker</td>
			<td>X198-07</td>
			<td>for immunofluorescence staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat anti-rabbit IgG Alexa 488 Fluor secondary antibody</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>A-11034</td>
			<td>for immunofluorescence staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-ADFP</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>108323</td>
			<td>for immunofluorescence staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong Gold antifade mountant</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>P36935</td>
			<td>for immunofluorescence staining</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

primary culture of rat adrenocortical cells and assays of steroidogenic functions

Het hormoon die de bijnierschors scheidt is van vitaal belang voor dieren tegen stress en ziekten. De hier beschreven methode is de procedure van primaire gekweekte rat bijnier cellen en verwante Functionele assays (immunofluorescentie kleuring van lipide druppel oppervlakte-proteïne, evenals corticosterone analyse). In tegenstelling tot een in vivo model, de variatie van de interexperiments in de bijnier enkelgelaagde culturen is minder en de experimentele conditie is makkelijk te controleren. Bovendien, is de bron van ratten ook stabieler dan andere dieren zoals runderen ones. Er zijn ook verschillende menselijke bijnier cellijnen (NCI-H295 NCI-H295R, SW13, etc.) die kunnen worden gebruikt in de bijnier studies. De steroïde productie van deze regels zal echter nog steeds worden beïnvloed door talrijke factoren, waaronder serum lotnummer, passage nummer, mutant/verlies van verschillende genen, enz. Met uitzondering van 17α-hydroxylase ontbreekt, is de primaire cultuur van rat adrenocortical cellen een beter en handiger techniek voor het bestuderen van de bijnier fysiologie. Kortom zou de primaire rat bijnier culturen een goede in-vitro platform voor onderzoekers te onderzoeken van de mechanismen van het reagens van belang in de bijnier-systeem.

Gebruik de procedure hier, zich primaire gekweekte bijnier cellen kunnen onderscheiden onder een microscoop met fase contrast (figuur 1A). Om te bevestigen dat de blaasjes in het cytoplasma lipide druppels zijn, kan de immunofluorescentie kleuring van obesitas differentiatie-gerelateerde eiwitten (ADRP) plaatsvinden op de dag-3 culturen (figuur 1B). Cellen werden geteeld op de glazen coverslips. De cellen waren drie keer gewassen...

Watch this Scientific Journal Video about Primary Culture of Rat Adrenocortical Cells and Assays of Steroidogenic Functions at JoVE.com

Primary Culture of Rat Adrenocortical Cells and Assays of Steroidogenic Functions

Primaire cultuur van Rat Adrenocortical cellen en testen van Steroidogenic functies

Het hormoon afgescheiden door de bijnierschors is van vitaal belang voor dieren tegen stress en ziekten. Hier presenteren we een protocol bij de cultuur de primaire rat bijnier cellen. Het zou een goede in-vitro platform voor onderzoek naar de mechanismen van het reagens van belang in de bijnier steroidogenesis en lipide biosynthese.

The hormone which the adrenal cortex secretes is vital for animals against stress and diseases. The method described here is the procedure of primary ...

Het gepresenteerde protocol is zeer eenvoudig en het zal onderzoekers helpen bij te bereiden primaire bijnierculturen. Het biedt een gemakkelijke procedure voor het starten van bijniersteroïde. Deze techniek kan worden toegepast bij het screenen van de stress-gerelateerde ziekten, alle mogelijkheden van de agent-geremde ontstekingsreacties.Het aantonen van de procedure zal Wei-Chang Lee zijn, een Masters student uit mijn laboratorium. Begin met het steriliseren van euthanasized SD rat met behulp van 70% ethanol en laat het worden geabsorbeerd in de huid. Na het afvegen van de huid met het tissuepapier, plaats de rat op een schone plastic plaat in de supine positie.Gebruik vervolgens externe gebogen tangen om de huid op te tillen aan de middellijn. Gebruik een schaar om een stompe dissectie van de huid uit te voeren door het creëren van een Y-vorm van het niveau van de dij naar de subcostal hoek. Na het spoelen van de schaar met 70%-ethanol, snijd de spier, ook het creëren van een Y-vorm.Zoek de linker bijnier achter de maag in het recht achter de lever. Met een paar standaard tangen en een paar gebogen tangen, til de maag en lever en vervolgens isoleren de bijnieren met een andere gebogen tang en plaats ze in een steriele schotel. Gebruik fijne tangen om de bijniercapsule voorzichtig van elke klier te verplaatsen.Gebruik nu een delicaat schaartje om de bijnieren in kleine stukjes te snijden in voldoende serumvrije DMEM F-12 medium om het weefsel te bedekken. Bereid drie verschillende pour size pasteur pipetten door ze te verwarmen over een brander. Gebruik de eerste pipet met de grootste opening om alle bijnierstukken over te brengen in een 50mL conische buis met medium met Collagenase II.Voorzichtig Pipette het weefsel stukken op en neer ongeveer 10 keer.Dan incubeer de buis in een waterbad op 37 graden Celsius gedurende twintig minuten, en schud het elke vijf minuten, vier keer in totaal. Het is zeer kritisch om weefselverspreiding goed uit te voeren tijdens enzymvertering. Gebruik de tweede en vervolgens de kleinste giet-size pipet te herhalen pipet en incubatie totdat alle weefsel stukken kleiner geworden.Voeg vervolgens zesvoudig volume van bresh in vier graden Celsius koud medium om de enzymatische reactie te stoppen. Dan centrafuge op 800 keer G gedurende 10 minuten, en gooi de supernatant beide keren. Voeg een geschikt volume van het medium toe en schort de cellen opnieuw op.Plant de cellen in gewenste platen of gerechten met geteeld medium 's nachts op 37 graden Celsius in 95% vochtigheid en 5% kooldioxide. Op de volgende dag, zorgvuldig wassen van de cellen tweemaal met serum-vrij, warm DMEM F-12 medium. Voeg vers groeimedium toe en houd de cellen op 37 graden Celsius en 95% luchtvochtigheid en 5% kooldioxide tot dag 3.Met behulp van dit protocol werden primaire gekweekte rattenbijniercellen verkregen. Dag 3 bijniercellen werden bevestigd onder een fase contrastmicroscoop. Immunofluorescente kleuring van vetdifferentiatie gerelateerde eiwitten uitgevoerd op dag 3 culturen bevestigd dat vesicles binnen het cytoplasma zijn lipide druppels.Na adrenocorticotropic hormoonstimulatie van rattenadrencellen werd het hormoonproducerende vermogen van de cellen bepaald door corticosterontest, met verhoogde corticosteronafgifte met een hogere ACTH-concentratie. Deze methode kan worden toegepast op andere primaire cultuursystemen, zoals primaire hartculturen, bijniermedullaculturen, et cetera. Deze techniek kan ook helpen om de interactie tussen adrenocorticale cellen en chromaffinecellen te onderzoeken.

Research

JoVE Journal

Biology

Primary Culture of Adult Rat Heart Myocytes

Primaire Cultuur van volwassen ratten Heart myocyten

Cultured primary adult rodent heart cells are an important model system for cardiovascular research.  Nevertheless, establishment of robust, viable ...

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

Ex Vivo Cultuur van primaire menselijke eileider epitheelcellen

Epithelial ovarian cancer is a leading cause of female cancer mortality in the United States. In contrast to other women-specific cancers, like breast and ...

Isolation and Primary Culture of Rat Hepatic Cells

Isolatie en Primaire Cultuur van Rat levercellen

Primary hepatocyte culture is a valuable tool that has been extensively used in basic research of liver function, disease, pathophysiology, pharmacology ...

Culturing Primary Rat Inner Medullary Collecting Duct Cells

Kweken Primaire Rat Inner Medullary Verzamelen Duct Cells

Arginine-vasopressin (AVP) facilitates water reabsorption by renal collecting duct principal cells and thereby fine-tunes body water homeostasis. AVP ...

Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

Isolatie en Cultuur van de Muis Primaire Pancreatic Acinaire Cells

This protocol permits rapid isolation (in less than 1 hr) of murine pancreatic acini, making it possible to maintain them in culture for more than one ...

Viability Assays for Cells in Culture

Levensvatbaarheid Testen voor Cellen in Cultuur

Manual cell counts on a microscope are a sensitive means of assessing cellular viability but are time-consuming and therefore expensive. Computerized ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

Isolatie en Primaire Cultuur van de muis endotheelcellen

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

A Tissue Culture Model of Estrogen-producing Primary Bovine Granulosa Cells

Een weefselkweek Model van primaire boviene Granulosa oestrogeen-producerende cellen

Ovarian granulosa cells (GC) are the major source of estradiol synthesis. Induced by the preovulatory luteinizing hormone (LH) surge, cells of the theca ...

Isolation and Culture of Primary Aortic Endothelial Cells from Miniature Pigs

Isolatie en cultuur van primaire aorta-endotheel cellen van miniatuur varkens

Xenotransplantation is a promising way to resolve the shortage of human organs for patients with end-stage organ failure, and the pig is considered as a ...

Apoptosis Induction and Detection in a Primary Culture of Sea Cucumber Intestinal Cells

Apoptosis inductie en detectie in een primaire cultuur van zee komkommer darmcellen

Primary cultured cells are used in a variety of scientific disciplines as exceptionally important tools for the functional evaluation of biological ...