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JoVE Journal

Genetics

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CRISPR-Cas का उपयोग करके Mammalian कक्ष लाइनों में जीनोम संपादन

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07:56 min

April 11th, 2019

April 11th, 2019

20,683 Views

0:04

Title

0:18

Cell Passaging

1:08

Cell Transfection

1:47

Transfected Cell Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)

2:32

Individual Clone Expansion and Editing Efficiency Evaluation

6:09

Results: Representative Gene Editing Efficiency Analyses

7:24

Conclusion

Transcript

यह प्रोटोकॉल नॉक-आउट या नॉक-इन लाइनों को बनाने के लिए CRISPR-Cas9 का उपयोग करता है। इस तकनीक का मुख्य लाभ यह है कि विशेष रूप से नौसिखिए शोधकर्ताओं के लिए इसका पालन करना सरल और कुशल है। सेल पासिंग के लिए, दो मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर प्रति

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CRISPR-Cas पौधों और जानवरों के जटिल जीनोम को इंजीनियर करने के लिए एक शक्तिशाली तकनीक है । यहां, हम विस्तार से एक प्रोटोकॉल के लिए कुशलतापूर्वक अलग कैस endonucleases का उपयोग कर मानव जीनोम संपादित करें । हम संपादन दक्षता का अनुकूलन करने के लिए महत्वपूर्ण विचार और डिजाइन मापदंडों पर प्रकाश डाला ।

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