Name: a murine model of dengue virus-induced acute viral encephalitis-like disease
Uploaded: 2019-04-28T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Dengue Virus-induced Acute Viral Encephalitis-like Disease at JoVE.com

وقد تم دعم هذه الدراسة بمنح من وزارة العلوم والتكنولوجيا (MOST107-2321-B-038-001) والتمويل الداخلي 106TMU-CIT-01-2، تايبيه، تايوان.

تمت الموافقة على البروتوكولات التجريبية لدراسة الحيوانات من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات والمستخدم في المركز الطبي للدفاع الوطني (IACUC رقم: 16-261)، وفقا للمبادئ التوجيهية التي وضعتها وزارة العلوم والتكنولوجيا، تايوان.
1. إجراء العدوى
<ol><li>إعداد DENV2 غير مكيفة (سلالة PL04...

<ol>
	<li>Guzman, M. G., Gubler, D. J., Izquierdo, A., Martinez, E., Halstead, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue+infection.">Dengue infection.</a> Nature Reviews Disease Primers. 2, 16055 (2016).</li><li>Katzelnick, L. C., Coloma, J., Harris, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue:+knowledge+gaps,+unmet+needs,+and+research+priorities.">Dengue: knowledge gaps, unmet needs, and research priorities.</a> Lancet Infectious Diseases. 17 (3), e88-e100 (2017).</li><li>Carod-Artal, F. J., Wichmann, O., Farrar, J., Gascon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurological+complications+of+dengue+virus+infection.">Neurological complications of dengue virus infection.</a> Lancet Neurology. 12 (9), 906-919 (2013).</li><li>Geneva: World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Dengue: Guidelines for Diagnosis, Treatment, Prevention and Control: New Edition. , (2009).</li><li>Amaral, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracerebral+infection+with+dengue-3+virus+induces+meningoencephalitis+and+behavioral+changes+that+precede+lethality+in+mice.">Intracerebral infection with dengue-3 virus induces meningoencephalitis and behavioral changes that precede lethality in mice.</a> Journal of Neuroinflammation. 8, 23 (2011).</li><li>de Miranda, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue-3+encephalitis+promotes+anxiety-like+behavior+in+mice.">Dengue-3 encephalitis promotes anxiety-like behavior in mice.</a> Behavioural Brain Research. 230 (1), 237-242 (2012).</li><li>Velandia-Romero, M. L., Acosta-Losada, O., Castellanos, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+infection+by+a+neuroinvasive+neurovirulent+dengue+virus.">In vivo infection by a neuroinvasive neurovirulent dengue virus.</a> Journal of Neurovirology. 18 (5), 374-387 (2012).</li><li>Despres, P., Frenkiel, M. P., Ceccaldi, P. E., Duarte Dos Santos, C., Deubel, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+in+the+mouse+central+nervous+system+in+response+to+infection+with+mouse-neurovirulent+dengue+viruses.">Apoptosis in the mouse central nervous system in response to infection with mouse-neurovirulent dengue viruses.</a> Journal of Virology. 72 (1), 823-829 (1998).</li><li>Tsai, T. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+retard+dengue+virus-induced+acute+viral+encephalitis.">Microglia retard dengue virus-induced acute viral encephalitis.</a> Scientific Reports. 6, 27670 (2016).</li><li>Cheng, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+Nrf2+by+the+dengue+virus+causes+an+increase+in+CLEC5A,+which+enhances+TNF-alpha+production+by+mononuclear+phagocytes.">Activation of Nrf2 by the dengue virus causes an increase in CLEC5A, which enhances TNF-alpha production by mononuclear phagocytes.</a> Scientific Reports. 6, 32000 (2016).</li><li>Ho, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockade+of+dengue+virus+infection+and+viral+cytotoxicity+in+neuronal+cells+in+vitro+and+in+vivo+by+targeting+endocytic+pathways.">Blockade of dengue virus infection and viral cytotoxicity in neuronal cells in vitro and in vivo by targeting endocytic pathways.</a> Scientific Reports. 7 (1), 6910 (2017).</li><li>Jhan, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-TNF-alpha+restricts+dengue+virus-induced+neuropathy.">Anti-TNF-alpha restricts dengue virus-induced neuropathy.</a> Journal of Leukocyte Biology. 104 (5), 961-968 (2018).</li><li>Kao, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+antiparasitic+drug+niclosamide+inhibits+dengue+virus+infection+by+interfering+with+endosomal+acidification+independent+of+mTOR.">The antiparasitic drug niclosamide inhibits dengue virus infection by interfering with endosomal acidification independent of mTOR.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 12 (8), e0006715 (2018).</li><li>Tsai, T. T., Chen, C. L., Tsai, C. C., Lin, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+heat+shock+factor+1+as+an+antiviral+strategy+against+dengue+virus+replication+in+vitro+and+in+vivo.">Targeting heat shock factor 1 as an antiviral strategy against dengue virus replication in vitro and in vivo.</a> Antiviral Research. 145, 44-53 (2017).</li><li>Jhan, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue+virus+infection+increases+microglial+cell+migration.">Dengue virus infection increases microglial cell migration.</a> Scientific Reports. 7 (1), 91 (2017).</li><li>Benskey, M. J., Manfredsson, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraparenchymal+Stereotaxic+Delivery+of+rAAV+and+Special+Considerations+in+Vector+Handling.">Intraparenchymal Stereotaxic Delivery of rAAV and Special Considerations in Vector Handling.</a> Methods in Molecular Biology. , 199-215 (2016).</li><li>Fong, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mild+encephalitis/encephalopathy+with+reversible+splenial+lesion+(MERS)+due+to+dengue+virus.">Mild encephalitis/encephalopathy with reversible splenial lesion (MERS) due to dengue virus.</a> Journal of Clinical Neuroscience. 36, 73-75 (2017).</li><li>Sarathy, V. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+lethal+murine+infection+model+for+dengue+virus+3+in+AG129+mice+deficient+in+type+I+and+II+interferon+receptors+leads+to+systemic+disease.">A lethal murine infection model for dengue virus 3 in AG129 mice deficient in type I and II interferon receptors leads to systemic disease.</a> Journal of Virology. 89 (2), 1254-1266 (2015).</li><li>Schul, W., Liu, W., Xu, H. Y., Flamand, M., Vasudevan, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dengue+fever+viremia+model+in+mice+shows+reduction+in+viral+replication+and+suppression+of+the+inflammatory+response+after+treatment+with+antiviral+drugs.">A dengue fever viremia model in mice shows reduction in viral replication and suppression of the inflammatory response after treatment with antiviral drugs.</a> The Journal of Infectious Diseases. 195 (5), 665-674 (2007).</li><li>Tyler, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+Viral+Encephalitis.">Acute Viral Encephalitis.</a> New England Journal of Medicine. 379 (6), 557-566 (2018).</li><li>Yauch, L. E., Shresta, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+dengue+virus+infection+and+disease.">Mouse models of dengue virus infection and disease.</a> Antiviral Research. 80 (2), 87-93 (2008).</li><li>Assir, M. Z., Jawa, A., Ahmed, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanded+dengue+syndrome:+subacute+thyroiditis+and+intracerebral+hemorrhage.">Expanded dengue syndrome: subacute thyroiditis and intracerebral hemorrhage.</a> BMC Infectious Diseases. 12, 240 (2012).</li><li>Kumar, R., Prakash, O., Sharma, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracranial+hemorrhage+in+dengue+fever:+management+and+outcome:+a+series+of+5+cases+and+review+of+literature.">Intracranial hemorrhage in dengue fever: management and outcome: a series of 5 cases and review of literature.</a> Surgical Neurology. 72 (4), 429-433 (2009).</li><li>Simanjuntak, Y., Liang, J. J., Lee, Y. L., Lin, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repurposing+of+prochlorperazine+for+use+against+dengue+virus+infection.">Repurposing of prochlorperazine for use against dengue virus infection.</a> Journal of Infectious Diseases. 211 (3), 394-404 (2015).</li><li>Rocha, B. A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue-specific+serotype+related+to+clinical+severity+during+the+2012/2013+epidemic+in+centre+of+Brazil.">Dengue-specific serotype related to clinical severity during the 2012/2013 epidemic in centre of Brazil.</a> Infectious Disease Poverty. 6 (1), 116 (2017).</li></ol>

تم الكشف عن عدوى DENV في الجهاز العصبي الوطني لمرضى حمى الضنك الشديدة3،17، مما يشير إلى إمكانية ظهور التهاب الدماغ الفيروسي الحاد وقعت خلال مرض حمى الضنك. هنا، نبلغ عن نموذج في الجسم الحي من عدوى DENV لدراسة مشاركة خلل الجهاز العصبي المركزي في حمى الضنك الشديدة، ...

DENV، وهو فيروس يحمله المفصليمن عائلة Flaviviridae، يحتوي على جينوم RNA بالمعنى الإيجابي الذي يشفر ثلاثة بروتينات هيكلية فيروسية (كابسيد، قبل الغشاء، والمغلف) وسبعة بروتينات فيروسية غير هيكلية (NS1، NS2A، NS2B، NS3، NS4A، NS4B ، وNS5). الأنواع المصلية الأربعة من DENV (DENV1-4)، التي تصيب ما يقرب من 390 مليون شخص سنويا، تسبب عبئا عالميا على الرغم من أن الحكومات قد وجهت جهودا كبيرة نحو ناقلات البعوض ومكافحة الأمراض1. وفي الوقت الراهن، يجري تطوير لقاحات واقية وأدوية علاجية مضادة للفيروسات وتتطلب مزيدا من التحقق على المدى الطويل2. في الممارسة السريرية، على الرغم من أن مريض حمى الضنك مع عدوى الجهاز العصبي الوطني نادرة، فإنه يحتاج إلى مزيد من الاستكشاف لفهم تنوع تطور مرض حمى الضنك3. وثمة حاجة إلى مزيد من التحقيق والتحقق؛ وعلى وجه الخصوص، أدرجت منظمة الصحة العالمية مشاركة ضعف الجهاز العصبي الوطني، مثل ضعف الإدراك، والتشنجات، واعتلال الدماغ، والتهاب الدماغ، في تصنيف حمى الضنك الشديدة3و4. بناء نماذج حيوانية من عدوى DENV أمر لا غنى عنه لاستكشاف الأمراض العصبية من عدوى DENV.
لتوليد عدوى الجهاز العصبي المركزي من قبل DENV، وقد نفذت العديد من الدراسات طرق مختلفة من عدوى DENV، بما في ذلك (1) التلقيح داخل الدماغ من الفئران C57BL/6 الذين تلقوا 4 × 103 وحدات تشكيل البلاك (PFU) من DENV3 غير مكيفة5، 6، (2) التلقيح داخل التعامق من الفئران BALB / ج الذين تلقوا 7 × 104 PFU من في المختبر NEUROadaptED DENV47، (3) التلقيح داخل المخ من الفئران السويسرية الذين تلقوا 1 × 105 PFU من في الجسم الحي NEUROadapted DENV18، و (4) التلقيح المشترك داخل الدماغ وداخل اقفارية من الفئران الإمتصاص ICR الذين تلقوا 1 × 106 PFU من DENV2 غير مكيفة9. وفقا لنتائج هذه الدراسات5,6,7,8,9, عدوى DENV في الفئران تؤدي إلى النسخ الفيروسي في الدماغ , مما يؤدي إلى الفيروسية الحادة متلازمات التهاب الدماغ مثل، والتغيرات السلوكية مصحوبة بشلل الأطراف وعدم الاستقرار الوضعي، والسمية العصبية للسي إن سي والتهاب، وتسرب البلازما العامة والمحلية من خلال حاجز الدم في الدماغ (BBB)، والفتك. وقد أظهرت جميع النتائج من هذه الدراسات5،6،7،8،9 قدرة DENV لإصابة الجهاز العصبي المركزى وتحريض التهاب الدماغ الفيروسي الحاد مثل المرض بعد العدوى.
بناء على النتائج الحاليةلدينا9،10،11،12،13،14،15،أنشأنا نموذج مورين من عدوى DENV باعتبارها في الجسم الحي منصة لدراسة الفعالية العلاجية للعوامل المستهدفة / العوامل ضد النسخ المتماثل الفيروسي، فضلا عن السمية العصبية. هنا، نبلغ عن البروتوكول المستخدم لإنشاء فأرICR خارجي مناعية للمناعة لدراسة عدوى الجهاز العصبي الوطني ولرصد تطور الاعتلال العصبي مع شدة مختلفة الناجمة عن DENV. وتظهر النتائج التقدم الكبير للأمراض الشبيهة بالتهاب الدماغ في الفئران المصابة بDENV بطريقة تعتمد على الوقت.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:745px;" width="746">
	<tbody>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:216px;">Roswell Park Memorial Institute 1640 medium (RPMI)</td>
			<td style="width:211px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">11875-085</td>
			<td style="width:200px;">Diluting virus</td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:216px;">0.3-mL Insulin Syringe&#160;</td>
			<td style="width:211px;">BD Ultra-Fine&#173;II</td>
			<td style="width:119px;">328838</td>
			<td style="width:200px;">Intracerebral and intraperitoneal injection</td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:216px;">Microbalance</td>
			<td style="width:211px;">METTLER TOLEDO&#39;s LabX</td>
			<td style="width:119px;">AL104</td>
			<td style="width:200px;">Weight mouse</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Non-adapted DENV2 (strain PL046)</td>
			<td style="width:211px;">The Centers for Disease Control of Taiwan</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:200px;">Infect mouse</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Institute of Cancer Research (ICR) suckling mouse</td>
			<td style="width:211px;">BioLASCO Taiwan Co., Ltd</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:200px;">Our murine model</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a murine model of dengue virus-induced acute viral encephalitis-like disease

فيروس حمى الضنك (DENV)، وهو فيروس ينتقل عن طريق المفصل ينتقل عن طريق البعوض، قد يسبب المرض الحاد المعروف باسم حمى الضنك النزفية، والذي يتميز بمضاعفات مميتة بسبب تسرب البلازما، الاستسقاء، الانصباب الجنبي، الضائقة التنفسية، نزيف حاد، وضعف الأعضاء. وهناك عدد قليل من حالات العدوى DENV تقديم مظاهر عصبية. ومع ذلك، لم تستكشف الدراسات الأمراض العصبية الناجمة عن DENV أكثر من ذلك. في هذه الدراسة، نقدم بروتوكوللاستخدام فأر ICR (معهد أبحاث السرطان) مناعية مناعية للتحقق من تحريض عدوى الجهاز العصبي المركزي (CNS) مع DENV، يليه تطور التهاب الدماغ الفيروسي الحاد مثل التهاب الدماغ الفيروسي المرض.

تم الإبلاغ عن مضاعفات عصبية شديدة مرتبطة بحمى الضنك في المرضى الذين يعانون من مرض حمى الضنك4. على الرغم من أن هذه الحالات نادرة في العيادة، يمكن استخدام إنشاء نموذج المورين المناعي من عدوى DENV ليس فقط لدراسة مسببات الأمراض المناعية ولكن أيضا لاستكشاف عدوى الج...

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Dengue Virus-induced Acute Viral Encephalitis-like Disease at JoVE.com

A Murine Model of Dengue Virus-induced Acute Viral Encephalitis-like Disease

هنا، نقدم بروتوكول لإنشاء ICR المناعة (معهد أبحاث السرطان) نموذج مورين من عدوى الجهاز العصبي المركزي لعرض تطور الاعتلال العصبي. ويمكن رصد اضطرابات الدماغ الفيروسية الحادة من خلال درجات المرض المتطابقة لإظهار الاعتلال العصبي الناجم عن فيروس حمى الضنك في الجسم الحي.

نموذج مورين من مرض التهاب الدماغ الفيروسي الحاد الناجم عن فيروس حمى الضنك

Dengue virus (DENV), an arthropod-borne virus transmitted by mosquitoes, may cause the severe disease known as dengue hemorrhagic fever, which is ...

هذا البروتوكول لنموذج المرض ترى عدوى فيروس حمى الضنك في الدماغ تصبح منصة في الجسم الحي لفحص النواقل الفيروسية والمضيفة المرتبطة بنشوء الأمراض العصبية. على عكس النماذج السابقة، تستخدم نماذجنا أدوات العدوى مع تتر فيروسي منخفض، لإصابة معهد القوى المناعية لأبحاث السرطان الفئران التي تمتص الفئران لاستقراء الإنجاب الشبيه بالتهاب الدماغ. إثبات الإجراء سيكون (تينغ جينغ شين) مرشحة لنيل الدكتوراه من مختبريقبل البدء في إجراء العدوى، تمييع فيروس حمى الضنك غير المكيفة اثنين من الأسهم، إلى واحد مرات 10 لتشكيل البلاك الخامس وحدات كل 40 ميكرولترات من تركيز 1640 1640 1640 متوسطة. بعد ذلك، قم بتحميل حقنة واحدة 0.3 ملليلتر مجهزة بإبرة قياس 30 مع 10 ميكرولترات من الفيروس المخفف. ومحاقن واحدة 0.3 ملليلتر مجهزة بإبرة قياس 30، مع 30 ميكرولترات من الفيروس لكل.للتسليم بين فصلي للفيروس، اضغط على أوراكل بين الإبهام وإصبع السبابة لكبح بلطف معهد الرضاعة من العمر سبعة أيام من الماوس معهد أبحاث السرطان في موقف عرضة وحقن حجم 10 ميكرولتر من الفيروس المخفف في منطقة لامدا، عند تقاطع خياطة القوس وحامد. بعد الحقن بين النخاع، واستخدام الإبهام وإصبع السبابة لعقد الماوس في موقف سوبين، وبلطف intraperitoneally، وحقن 30 ميكرولتر حجم الفيروس المخفف، في البطن مورين. لتسجيل تطور المرض ، قم بتعيين درجة من صفر إلى خمسة لكل فأر مطعوم يوميًا ، وفقًا لدرجات الأمراض الشبيهة بالتهاب الدماغ الفيروسي الحاد ، وارسم الدرجات لكل يوم كشخصية تعتمد على المنحنى ، باستخدام متوسط زائد وناقص الانحراف المعياري لعشرات الاختبار اليومية في كل مجموعة.بالمقارنة مع التغيرات وزن الجسم تقاس في وهمية، المتوسطة فقط الفئران المحقح، والحيوانات التي تلقيح فيروس حمى الضنك تظهر انخفاضا في وزن الجسم في كل نقطة زمنية خلال التجربة. بالإضافة إلى ذلك، تظهر الحيوانات المصابة بفيروس حمى الضنك زيادة كبيرة في مواقف الظهر الحدس، والنوبات الحوفية، والضعف الحوفي، والشلل، والوفاة مقارنة بالأعراض التي تظهرها الحيوانات الملقح وهمية. في الواقع ، تظهر الفئران المصابة بحمى الضنك انخفاضًا في معدلات البقاء على قيد الحياة لا يتم ملاحظته في الحيوانات الملقدة ، مما يؤكد إنشاء نموذج معدي لفيروس حمى الضنك داخل الجهاز العصبي المركزي يوضح تطور الأمراض الحادة الشبيهة بالتهاب الدماغ الفيروسي في الفئران.ثقب الموقع الخطأ قد يؤدي إلى انسداد إبرة من قبل النتيجة وتجاوز حل الفيروس خارج الرأس، مما أدى إلى فشل الحقن وفشل العدوى. بعد الإجراء ، يمكن حصاد عينات الدماغ للضرر المرضي ، وتسلل الخلايا المناعية ، وتحليل النسخ الفيروسي من قبل الهماووكسيلين وosin التي تلطيخ قياس تدفق الخلايا ، وقياس تشكيل البلاك ، على التوالي. ويوفر نموذجنا لليورين المناعي منصة لاستكشاف الآليات المسببة للأمراض للعدوى بفيروس حمى الضنك، لتطوير لقاحات فيروس حمى الضنك، أو الأدوية المضادة لفيروس حمى الضنك.فيروس حمى الضنك هو عامل أمراض من مستوى السلامة البيولوجية 2، وعلى هذا النحو، ينبغي أن تكتمل جميع التجارب مع هذا الفيروس في مختبر مؤهل للسلامة البيولوجية الحيوانية المستوى الثاني.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

تحريض الطعم ضد المضيف المرض و<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; مراقبة الخلايا T باستخدام نموذج MHC المطابقة الفئران

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

إرساء ثقافة السائل المغطاة من مجرى الهواء الإنسان المستقطب طلائي Calu-3 خلايا لدراسة استجابة الخلية المضيفة لمسببات الأمراض التنفسية<em&gt; في المختبر</em

The  apical and basolateral surfaces of airway epithelial cells demonstrate  directional responses to pathogen exposure in  vivo. Thus, ideal in vitro ...

A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization

A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization

نموذج الفئران من المجموعة الثانية<em&gt; العقدية</em&gt; المهبلية الاستعمار

Streptococcus agalactiae (group B Streptococcus, GBS), is a Gram-positive, asymptomatic colonizer of the human gastrointestinal tract and vaginal tract of ...

Swab Sampling Method for the Detection of Human Norovirus on Surfaces

مسحة طريقة أخذ العينات للكشف عن نوروفيروس الإنسان على السطوح

Human noroviruses are a leading cause of epidemic and sporadic gastroenteritis worldwide. Because most infections are either spread directly via the ...

Purification of Viral DNA for the Identification of Associated Viral and Cellular Proteins

تنقية الحمض النووي الفيروسي للتعرف على البروتينات الفيروسية والخلوية المرتبطة بها

The goal of this protocol is to isolate herpes simplex virus type 1 (HSV-1) DNA from infected cells for the identification of associated viral and ...

Evaluation of Zika Virus-specific T-cell Responses in Immunoprivileged Organs of Infected Ifnar1-/- Mice

Evaluation of Zika Virus-specific T-cell Responses in Immunoprivileged Organs of Infected Ifnar1-/- Mice

تقييم الاستجابات الخاصة بفيروس زيكا تي خلية في أجهزة إيمونوبريفيليجيد من الفئران المصابة Ifnar1-/-

The Zika virus (ZIKV) can induce inflammation in immunoprivileged organs (e.g., the brain and testis), leading to the Guillain-Barr&#233; syndrome and ...

In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model

In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model

في فيفو تصوير للأنواع الأكسجين التفاعلية في الفاري الجرح النموذجي

The generation of reactive oxygen species (ROS) is a hallmark of inflammatory processes, but in excess, oxidative stress is widely implicated in various ...

Induction and Scoring of Graft-Versus-Host Disease in a Xenogeneic Murine Model and Quantification of Human T Cells in Mouse Tissues using Digital PCR

الحث والتهديف من مرض الكسب غير المشروع مقابل المضيف في نموذج المورين Xenogeneic والقياس الكمي للخلايا تي البشرية في أنسجة الماوس باستخدام PCR الرقمية

Acute graft-versus-host disease (GVHD) is a significant limitation for patients receiving hematopoietic stem cell transplant as therapy for hematological ...

A Model of Self-limited Acute Lung Injury by Unilateral Intra-bronchial Acid Instillation

نموذج لإصابة الرئة الحادة المحدودة ذاتياً عن طريق الغرس من جانب واحد داخل الشعب الهوائية

Selective intra-bronchial instillation of hydrochloric acid (HCl) to the murine left mainstem bronchus causes acute tissue injury with histopathologic ...

Mouse Model of Oleic Acid-Induced Acute Respiratory Distress Syndrome

نموذج الفأر لمتلازمة الضائقة التنفسية الحادة الناجمة عن حمض الأوليك

Acute respiratory distress syndrome (ARDS) is a significant threat to critically ill patients with a high fatality rate. Pollutant exposure, cigarette ...