Name: direct injection of a lentiviral vector highlights multiple motor pathways in the rat spinal cord
Uploaded: 2019-03-15T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord at JoVE.com

Dette arbejde blev finansieret af et tilskud fra det nationale Institut for neurologiske forstyrrelser og slagtilfælde R01 R01NS103481 og Shriners Hospital for pædiatrisk forskning tilskud SHC 84051 og SHC 86000 og Department of Defense (SC140089).

Alle de følgende kirurgiske og dyrs pleje procedurer er blevet godkendt af dyrs pleje og brug Udvalget af Temple University.
1. præ-kirurgisk præparater
<ol><li>Forberede trak glas nåle til viral injektion et par dage før operation ved hjælp af 3,5 nanoliter glas kapillær pipetter designet til nanoliter injektorer. Trække hver pipette på en to-trins nål puller ifølge producentens anvisninger til at oprette to nål skabeloner.</li>
	<li>Forfine spidsen af nålen skabeloner ved at a...

Genmanipulation af neuroner i hjernen og rygmarven har tjent til at fremhæve sensoriske, motoriske og autonome veje via fluorescerende sporing og at udforske genvækst potentiale af neuronal skrifter efter skade27,28, 29 , 30 , 31 , 32 , 33. direkte injektion af en retrogradely transportabl...

Virale vektorer er vigtige biologiske funktioner, som kan indføre genetisk materiale i cellerne for at kompensere for defekte gener, upregulate vigtigt vækst proteiner eller fremstille markør proteiner, der fremhæver strukturen og synaptiske forbindelser af deres mål. Denne artikel fokuserer på direkte injektion af en yderst effektiv retrogradely transportable lentiviral vektor i rygmarven rotte for at fremhæve større motor veje med fluorescerende sporing.  Denne metode er også meget velegnet til cytoskeletale regenerering og genvækst undersøgelser at indføre proteiner af interesse i forskellige populationer af neuroner og er blevet brugt til tavshed neuroner for funktionel kortlægning undersøgelser1,2.
Mange af de anatomiske detaljer af spinal motor veje blev belyst gennem direkte indsprøjtning undersøgelser med klassisk sporstoffer såsom BDA og fluoro-guld3,4,5,6,7 , 8. disse røbestoffer betragtes som guldstandarden men kan have visse ulemper såsom optagelse af beskadigede axoner eller axoner i passage i den hvide substans omkring en indsprøjtning websted9,10,11 . Dette kunne føre til forkerte fortolkninger af sti connectivity og kan være en ulempe i regenerering undersøgelser hvor farvestof absorption af beskadigede eller afhuggede axoner kan forveksles med regenererende fibre under senere analyse12.
Lentiviral vektorerne er populære i gen terapi undersøgelser, da de giver et stabilt, langsigtet udtryk i neuronal populationer13,14,15,16,17,18 ,19. Men traditionelt pakket lentiviral vektorer kan have begrænset retrograd transport og kan udløse immunsystemet svar når det bruges i vivo4,20,21. En yderst effektiv retrograd transport vektor betegnes HiRet er blevet produceret af Kato et al. ved at ændre den virale kuvert med en rabies virus glycoprotein til at oprette en hybrid vektor, der forbedrer retrograd transport22,23.
Retrograd sporing introducerer en vektor ind i synaptic rummet af en target neuron, gør det muligt at blive taget ved at celle axon og transporteres til cellen kroppen. Vellykket transport af HiRet har påvist fra neuronal synapser i hjernen hos mus og primater23,24 og muskel i motoriske neuroner22. Denne protokol viser injektion i lumbal rygmarven, specifikt er rettet mod de synaptiske terminalerne i propriospinal interneurons og hjernestammen neuroner. PNs modtage forbindelser fra mange forskellige spinal stier og kan således bruges til at målrette en forskelligartet befolkning af neuroner i rygmarven og hjernestammen. Mærket neuroner i denne undersøgelse udgør kredsløb innerverer motorneuron puljer vedrørende hindlimb motorik. Robust mærkning er set i rygmarven og hjernestammen, herunder high fidelity detaljer af dendritiske Dorne og axon terminaler. Vi har også brugt denne metode i tidligere undersøgelser inden for den cervikale rygmarv til at mærke propriospinal og hjernestammen reticulospinal veje25.
Denne protokol viser injektion af en viral vektor i lumbal rygmarv fra en rotte. Som det ses i filmen 1, målrettet snit ved at identificere L1 hvirvel beliggende på den sidste ribben. Dette bruges som en caudale vartegn for en 3-4 cm incision, der udsætter muskulatur over rygmarven L1-L4. Laminectomies af de dorsale aspekter af T11-T13 ryghvirvler er udført og en skrå glas nål er instrueret 0,8 mm lateral fra midterlinjen og sænket 1,5 mm dybt ind i det grå materie til at injicere virus.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>#10 Scalpel Blades</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9801-10</td>
			<td>For use with the scalpel.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringes</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>309659</td>
			<td>For anesthetic IP injection, potential anesthetic booster shots, and antibiotic injections.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10mL Syringes</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>309604</td>
			<td>For injecting saline into the animal, post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4.0 Chromic Catgut Suture</td>
			<td>DemeTECH</td>
			<td>NN374-16</td>
			<td>To re-bind muscle during closing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>48000 Micropipette Beveler</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>32416</td>
			<td>Used to bevel the tips of the pulled glass capillary tubes to form functional glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Iodine Solution</td>
			<td>Purdue Products L.P.</td>
			<td>L01020-08</td>
			<td>For use in sterilzation of the surgical site.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% Ethanol</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For sterilization of newly prepared glass needles, animal models during surgical preparation, and surgeon&#39;s hands during surgery, as well as all other minor maintainances of sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic (Ketamine/Xylazine Solution)</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>240048</td>
			<td>For keeping the animal in the correct plane of consciousness during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic (Cefazolin)</td>
			<td>West-Ward Pharmaceuticals</td>
			<td>NPC 0143-9924-90</td>
			<td>To be injected subcutaneously to prevent infection post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bead Sterilizer</td>
			<td>CellPoint</td>
			<td>5-1450</td>
			<td>To heat sterilize surgical instruments.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonewax</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>19009-00</td>
			<td>To seal up bone in the case of bone bleeding.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cauterizer</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td>To seal any arteries or veins severed during surgery to prevent excessive blood loss.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Scale</td>
			<td>Okaus</td>
			<td>REV.005</td>
			<td>For weighing the animal during surgical preparation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexible Needle Attachment</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>MF34G-5</td>
			<td>For cleaning glass needles and loading red oil into glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelfoam</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>H68079</td>
			<td>To seal up bone in the case of bone bleeding.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Capillary Tubes</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>4878</td>
			<td>For pulled glass needles - should be designed for nanoliter injectors.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair Clippers</td>
			<td>Oster</td>
			<td>111038-060-000</td>
			<td>For clearing the surgical site of hair.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostats</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-7231</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>Kimtech</td>
			<td>34155</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Point Curved Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5136</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator with a Vernier Scale</td>
			<td>Kanetec</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For precise targeting during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5621</td>
			<td>For cutting glass whisps off of freshly pulled glass capillary tubes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope with Light and Vernier Scale Ocular</td>
			<td>Leitz Wetzlar</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Used to visualize and measure beveling of pulled glass capillary tubes into functional glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroSyringe Pump Controller</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>62403</td>
			<td>To control the rate of injection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoliter 2000 Pump Head Injector</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500150</td>
			<td>To load and inject virus in a controlled fashion.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Puller</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>PC-100</td>
			<td>To heat and pull apart glass capillary tubes to form glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalamic Ointment</td>
			<td>Dechra Veterinary Products</td>
			<td>RAC 0119</td>
			<td>To protect the animal&#39;s eyes during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bemis</td>
			<td>PM-996</td>
			<td>To assist with loading virus into the nanoinjector.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PrecisionGlide Needles (25G x 5/8)</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>305122</td>
			<td>For use with the 1mL and 10 mL syringes to allow injection of the animal model.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Tooth Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5152</td>
			<td>For griping spinous processes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red Oil</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To provide a front for visualization of virus entering tissue during injection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-6510</td>
			<td>To hold open the surgical wound.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rimadyl Tablets</td>
			<td>Bio Serv</td>
			<td>MP275-050</td>
			<td>For pain management post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rongeurs</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-8300</td>
			<td>To remove muscle from the spinal column during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade Handle</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9843</td>
			<td>To slice open skin and fat pad of animal model during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5980</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steal Wound Clips</td>
			<td>CellPoint</td>
			<td>201-1000</td>
			<td>To bind the skin of the surgical wound during closing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staple Removing Forceps</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>INS750347</td>
			<td>To remove the staples, should they be applied incorrectly.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Cloth</td>
			<td>Phenix Research Products</td>
			<td>BP-989</td>
			<td>To provide a sterile surface for the operation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td>Puritan</td>
			<td>806-WC</td>
			<td>To soak up blood in the surgical wound while maintaining sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Gauze</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>2146</td>
			<td>To clean the surgical area and surgical tools while maintaining sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Saline</td>
			<td>Baxter Healthcare Corporation</td>
			<td>281324</td>
			<td>For use in blood clearing, and for replacing fluids post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Gloves</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For use by the surgeon to maintain sterile field during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Heating Pad</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For maintaining the body temperature of the animal model during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Microscope</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For enhanced visualization of the surgical wound.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Stapler</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>INS750546</td>
			<td>To apply the staples.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T/Pump Heat Therapy Water Pump</td>
			<td>Gaymar</td>
			<td>TP500C</td>
			<td>To pump warm water into the water convection warming pad.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water Convection Warming Pad</td>
			<td>Baxter Healthcare Corporation</td>
			<td>L1K018</td>
			<td>For use in the post-operational recovery area to maintain the body temperature of the unconscious animal.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighted Hooks</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To hold open the surgical wound.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

direct injection of a lentiviral vector highlights multiple motor pathways in the rat spinal cord

At indføre proteiner af interesse i celler i nervesystemet er udfordrende på grund af medfødte biologiske barrierer, der begrænser adgang til de fleste molekyler. Kan injiceres direkte i rygmarven væv omgår disse barrierer, giver adgang til celle organer eller synapser, hvor molekyler kan indarbejdes. Kombinerer viral vektor teknologi med denne metode giver mulighed for indførelsen af mål gener nervevæv genterapi eller tarmkanalen sporing. Her er en virus, der er udviklet til højeffektive retrograd transport (HiRet) indført på synapser af propriospinal interneurons (PNs) at fremme specifikke transport til neuroner i rygmarven og hjernestammen kerner. Målretning PNs drager fordel af de mange forbindelser, de modtager fra motor veje som rubrospinal og reticulospinal skrifter, samt deres sammenkobling med hinanden gennem rygmarven segmenter. Repræsentative sporing ved hjælp af HiRet vektor med constitutively aktive grøn fluorescerende proteiner (NGL) viser high fidelity detaljer af celle organer, axoner og dendritiske Dorne i thorax PNs og reticulospinal neuroner i Pontinske retikulære formation. HiRet indarbejdet godt hjernestammen veje og PNs men viser alder afhængige integration i corticospinal tarmkanalen neuroner. I Resumé er rygmarven injektion ved hjælp af virale vektorer en velegnet metode til indførelse af proteiner af interesse i neuroner i målrettede skrifter.

Vellykket injektion og transport af den virale vektor bør resultere i transduktion af en robust population af ensidige neuroner i rygmarven og i visse hjernestammen kerner. Figur 1 viser stereotype mærkning af neuroner og axoner i thorax rygmarven og de Pontinske retikulære formation af hjernestammen på fire uger efter injektion. Betydelig normal god landbrugspraksis udtryk ses i neuroner i den grå substans i thorax rygmarven side ipsilaterale til injektion (...

Watch this Scientific Journal Video about Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord at JoVE.com

Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord

Denne protokol viser injektion af en retrogradely transportable viral vektor i rotte rygmarv væv. Vektor er taget på synapser og transporteres til cellen kroppen af target neuroner. Denne model er velegnet til retrograd sporing af vigtige spinal stier eller målretning celler for gen terapi programmer.

Direkte indsprøjtning af en Lentiviral vektor fremhæver flere Motor veje i rygmarven rotte

Introducing proteins of interest into cells in the nervous system is challenging due to innate biological barriers that limit access to most molecules. ...

Virale vektorer kan indføre genetisk materiale i celler for at kompensere for defekte gener, at opregulere vigtige vækstproteiner, eller at fremstille markører, der kan spore neurale kredsløb. Indførelse af virale vektorer i nervesystemet er udfordrende på grund af medfødte biologiske barrierer. Direkte injektion i rygmarvsvæv omgår disse barrierer, giver adgang til celle organer eller synapser.Korrekt målretning af L1 til L4 spinal niveauer kan være svært. Det er vigtigt at bruge landemærker til at kontrollere målet og huske, at disse segmenter linje til T11 til T13 ryghvirvler. På procedurens dag sættes injektoren i mikropumpen i mikropumpen, og mikropumpen sættes i en mikromanipulator med en vernierskala.Brug en sprøjte med en fleksibel nål til forsigtigt at lægge et farvet farvestof i en af glasnålene og sætte glasnålen i injektoren. Bekræft derefter, at nålen er sået korrekt ind i skiverne, og at injektorhætten skrues stramt fast, og at stålinjektornålen forlænges ca. tre fjerdedele af glasnålens længde. Før proceduren påbegyndes, optøes mindst én mikroliter plus en lille mængde ekstra virus pr. injektion fra fryseopbevaring, og bekræft manglende reaktion på tåspidsiske i en bedøvet rotte.Barber langs dorsale midterlinjen fra hofterne til den ringere vinkel af skulderbladet af dyret, trække huden stram for en lettere og mere præcis barbering, og desinficere den eksponerede hud med sekventiel 5% jod og 70% ethanol scrubs. Påfør oftalmologiske salve til begge øjne. Derefter placere dyret på en steril klud og sted gaze under blæren til at indsamle urin.For at identificere det sted, hvor huden snit, skal du trykke fingrene forsigtigt på det sidste ribben for at finde L1 ryghvirvel. Brug denne ryghvirvel som et vartegn og holde huden stram ved blid spredning, mens du trykker fast med skalpel, bruge en række 10 kirurgisk klinge til at gøre en tre til fire-centimeter flået snit slutter lige ringere end L1 at udsætte musklen. Brug vices og saks til at føle for de spinøse processer.Lav små rostrale snit for at give plads til at gribe sikkert på en øvre proces med rotte tandspind. Og lav to lange, dybe snit så tæt på processerne som muligt. Efter sikring af de laterale muskler på plads, klare musklen omkring processerne til at bestemme formen af deres hoveder.Derefter visualisere figurerne af lederne af de spinøse processer for at identificere laminectomy site. T11- og sammenføjnings-T12- og T13-processerne vil være stedet for laminectomy. Når målområdet er korrekt identificeret, forsigtigt sprede ryghvirvler til at afsløre intervertebrale ledbånd, og bruge rongeurs til at tage små bid af spinøse processer og ryghvirvler.Ryd knoglen væk fra midterlinjen, så midterlinjen blodkar kan observeres, forlader et vindue, der klart afslører rygmarvsvæv og er fri for snavs. Derefter fastgøres stabiliserende arpinp til de spinøse processer rostral og caudal til laminectomy vinduet for at sikre dyret i en spinal indehaveren. Og hæve maven af dyret til at ophæve effekten af vejrtrækning bevægelser.For at indlæse virus i injektoren, pipette ca fem mikroliter af optøet bestand på et stykke Parafilm, og placere glasnåle, så spidsen er inde i dråben. Brug mikropumpen til at trække op til fire mikroliter virus med en hastighed på 20 til 100 nanoliter pr. sekund, og indstil controlleren til at injicere, før du slipper en lille mængde virus ud af nålespidsen for at sikre, at den ikke blokeres. Tør overskydende virus af med en laboratoriesletning, og placer mikromanipulatorerne, så vernierskalaen er synlig.Placer nålen på midterlinjen af rygmarven, og brug vernier skalaen på mikromanipulatoren til at lede nålen sideom sidet 0,8 millimeter. Sænk derefter nålen til spinal akkord, indtil det er indrykning, men ikke punktering, dura, og bruge en hurtig vride bevægelse til at punktere dura med nålen, indtil nålen spidsen er sunket til en dybde på 1,5 millimeter. Når nålen er på plads, programmer injektoren til at levere virus med en hastighed på 400 nanoliters per minut, og bekræfte, at virus er på vej ind i spinal akkord ved at observere udviklingen af farvestoffet front.Når injektionen er færdig, skal nålen hvile i rygmarven i to til fem minutter for at lette spredningen af virus, før nålen langsomt trækkes tilbage til placering på det næste injektionssted. Efter den sidste injektion, fjerne dyret fra spinal indehaveren at tillade fjernelse af alle enheder, der anvendes til at sprede lateral muskel. Luk derefter musklen med en 4,0 kromisk catgut sutur og hæfte huden med ni-millimeter sårclips.Fire uger efter en vellykket injektion, betydelig GFP udtryk er observeret i neuroner i den grå stof af brystkassen rygmarven på siden, ipsilateral til injektion. I det hvide stof observeres GFP-udtrykket i axonerne i den ipsilaterale ledning, især i områder, der er typiske for propriospinal axoner. En højere forstørrelse af de grå stof neuroner afslører et eksempel på en typisk signal udtryk i neuronal celle organer og dendritter.GFP udtryk i neuroner kan også observeres i hjernestammen kerner, såsom inden for pontin retikulære dannelse. De vigtigste faktorer for en vellykket rygmarvsinjektion procedure er korrekte vertebrale målretning og sikre, at virus er på vej ind i vævet Hvis en rostral rygmarvsskade udføres forud for denne procedure, direkte injektion kan bruges til at spore neuroner, der genetablere forbindelser omkring skaden.

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Anatomy and Physiology

Neuroscience

Unit 1

Functions of the Central and Peripheral Nervous System

SCIENTISTS IN ACTION

A Functional Motor Unit in the Culture Dish: Co-culture of Spinal Cord Explants and Muscle Cells

En funktionel Motor enhed i Kultur Dish: Co-kultur for Rygmarvsskader eksplantater og muskelceller

Human primary muscle cells cultured  aneurally in monolayer rarely contract spontaneously because, in the absence of  a nerve component, cell ...

Stereotaxic Injection of a Viral Vector for Conditional Gene Manipulation in the Mouse Spinal Cord

Stereotaktisk injektion af en virusvektor til Betinget Gene Manipulation i Mouse Spinal Cord

Intraparenchymal injection of a viral vector enables conditional gene manipulation in distinct populations of neurons or particular regions of the central ...

Production of RNA for Transcriptomic Analysis from Mouse Spinal Cord Motor Neuron Cell Bodies by Laser Capture Microdissection

Produktion af RNA til transskriptionsanalyse fra Mus Rygmarv Motor Neuron Cell Organer ved Laser Capture Microdissection

Preparation of high-quality RNA from cells of interest is critical to precise and meaningful analysis of transcriptional differences among cell types or ...

Spinal Cord Transection in the Larval Zebrafish

Spinal Cord transection i larvestadiet zebrafisk

Mammals fail in sensory and motor recovery following spinal cord injury due to lack of axonal regrowth below the level of injury as well as an inability ...

Diffusion Imaging in the Rat Cervical Spinal Cord

Diffusion Imaging i Rat Cervical Spinal Cord

Magnetic resonance imaging (MRI) is the state of the art approach for assessing the status of the spinal cord noninvasively, and can be used as a ...

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

Zebrafisk<em&gt; In Situ</em&gt; Spinal Cord Forberedelse til Elektrofysiologiske Optagelser fra Spinal sensoriske og motoriske neuroner

Zebrafish, first introduced as a developmental model, have gained popularity in many other fields. The ease of rearing large numbers of rapidly developing ...

Laminectomy and Spinal Cord Window Implantation in the Mouse

Laminektomi og rygmarv vindue implantation i musen

This protocol describes a method for spinal cord laminectomy and glass window implantation for in vivo imaging of the mouse spinal cord. An integrated ...

Thoracic Spinal Cord Hemisection Surgery and Open-Field Locomotor Assessment in the Rat

Thorax rygmarv Hemisection kirurgi og åben-felt Locomotor vurdering hos rotter

Spinal cord injury (SCI) causes disturbances in motor, sensory, and autonomic function below the level of the lesion. Experimental animal models are ...

Intra-Arterial Delivery of Neural Stem Cells to the Rat and Mouse Brain: Application to Cerebral Ischemia

Intra-arteriel levering af neurale stamceller til rotte og mus hjernen: Ansøgning om cerebral iskæmi

Neural stem cell (NSC) therapy is an emerging innovative treatment for stroke, traumatic brain injury and neurodegenerative disorders. As compared to ...

In Vivo Intracellular Recording of Type-Identified Rat Spinal Motoneurons During Trans-Spinal Direct Current Stimulation

I Vivo Intracellulær optagelse af type-identificeret Rotte Spinal Motoneurons under Trans-Spinal direkte strøm stimulation

Intracellular recording of spinal motoneurons in vivo provides a &#8220;gold standard&#8221; for determining the cells&#8217; electrophysiological ...