Name: direct injection of a lentiviral vector highlights multiple motor pathways in the rat spinal cord
Uploaded: 2019-03-15T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord at JoVE.com

Dit werk werd gefinancierd door een subsidie van de National Institute of Neurological Disorders en beroerte R01 R01NS103481 en het Shriners ziekenhuis voor pediatrisch onderzoek verleent SHC 84051 en SHC 86000 en het ministerie van defensie (SC140089).

Alle volgende chirurgische en dierlijke verzorging procedures zijn goedgekeurd door de zorg van het dier en gebruik Comité van Temple University.
1. vooraf chirurgische preparaten
<ol><li>Bereiden getrokken glas naalden voor virale injectie een paar dagen voor de ingreep met behulp van 3,5 nanoliter glazen capillaire pipetten ontworpen voor nanoliter injectoren. Trek elke pipet op een trekker naald in twee stappen volgens de instructies van de fabrikant om twee naald-sjablonen te maken.</li...

Genetische manipulatie van neuronen in de hersenen en het ruggenmerg heeft gediend om te markeren zintuiglijke, motorische en autonome trajecten via fluorescerende tracering en hergroei mogelijkheden verkennen van neuronale traktaten na letsel27,28, 29 , 30 , 31 , 32 , 33. directe injectie v...

Virale vectoren zijn belangrijke biologische hulpmiddelen die genetisch materiaal kunnen introduceren in cellen om te compenseren voor defecte genen, upregulate belangrijke groei eiwitten of marker eiwitten die wijzen op de structuur en de synaptische Connecties van vervaardiging hun doelstellingen. Dit artikel richt zich op directe injectie van een zeer efficiënte retrogradely vervoerbare lentivirale vector in het ruggenmerg rat om te benadrukken grote motor trajecten met fluorescerende tracering.  Deze methode is ook zeer geschikt voor axonale regeneratie en hergroei studies te introduceren van proteïnen van belang in diverse populaties van neuronen en heeft geweest tweedehands voor zwijgen neuronen voor functionele toewijzing studies1,2.
Veel van de anatomische details voor spinale motor trajecten werden toegelicht door middel van directe inspuiting studies met klassieke traceurs zoals BDA en fluoro-goud3,4,,5,,6,7 , 8. deze verklikstoffen worden beschouwd als gouden standaard maar wellicht bepaalde nadelen zoals opname door beschadigde axonen of axonen in de passage in de witte stof rondom een injectie site9,10,11 . Dit kan kan leiden tot onjuiste interpretaties van traject connectiviteit en een nadeel in regeneratie studies waar de kleurstof absorptie door beschadigd of afgehakte axonen voor het regenereren van de vezels tijdens latere analyse12kon vergissen.
Lentivirale vectoren zijn populair in gen therapie onderzoeken, zoals zij stabiele expressie in neuronale populaties13,14,15,16,17,18 leveren ,19. Echter, traditioneel verpakte lentivirale vectoren kunnen hebben beperkte retrograde vervoer en kan leiden tot immuunsysteem reactie wanneer gebruikt in vivo4,20,21. Een uiterst efficiënte retrograde vervoer vector genoemd HiRet opgesteld door Kato et al. door aanpassing van de virale envelop met een rabiës virus glycoproteïne maken een hybride-vector die retrograde vervoer22,23 verbetert.
Retrograde tracering introduceert een vector in de synaptische ruimte van een target neuron, waardoor het te worden in beslag genomen door de axon van die cel naar de cel lichaam vervoerd. Succesvolle vervoer van HiRet is gebleken uit de neuronale synapsen in de hersenen van muizen en primaten23,24 en de spier in motorische neuronen22. Dit protocol toont injectie in de lumbale ruggemerg, specifiek gericht zijn op de synaptische terminals van propriospinal interneuronen en hersenstam neuronen. PNs ontvangen van verbindingen van vele verschillende spinale routes en kunnen dus worden gebruikt om een diverse bevolking van neuronen in het ruggenmerg en hersenstam richten. Gelabelde neuronen in deze studie vertegenwoordigen schakelingen innervating motor neuron zwembaden met betrekking tot stuk motor functie. Robuuste labeling is te zien in het ruggenmerg en hersenstam, met inbegrip van high-fidelity details van dendritische arbors en axon terminals. Wij hebben deze methode ook gebruikt in eerdere studies binnen het cervicale ruggenmerg aan het label propriospinal en hersenstam reticulospinal trajecten25.
Dit protocol toont injectie van een virale vector in de lumbale ruggemerg van een rat. Zoals te zien in de film 1, wordt de incisie wordt gericht door het identificeren van de L1 wervel attractiepark van de laatste rib. Dit wordt gebruikt als een caudal mijlpaal voor een incisie voor 3-4 cm die de daaraan gehechte spiermassa over het ruggenmerg L1-L4 bloot. Laminectomies van de dorsale aspecten van de wervels T11-T13 worden uitgevoerd en een schuine glazen naald is gericht 0.8 mm lateraal van de middellijn en verlaagde 1,5 mm diep in de grijze stof te injecteren van virus.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>#10 Scalpel Blades</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9801-10</td>
			<td>For use with the scalpel.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringes</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>309659</td>
			<td>For anesthetic IP injection, potential anesthetic booster shots, and antibiotic injections.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10mL Syringes</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>309604</td>
			<td>For injecting saline into the animal, post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4.0 Chromic Catgut Suture</td>
			<td>DemeTECH</td>
			<td>NN374-16</td>
			<td>To re-bind muscle during closing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>48000 Micropipette Beveler</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>32416</td>
			<td>Used to bevel the tips of the pulled glass capillary tubes to form functional glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Iodine Solution</td>
			<td>Purdue Products L.P.</td>
			<td>L01020-08</td>
			<td>For use in sterilzation of the surgical site.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% Ethanol</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For sterilization of newly prepared glass needles, animal models during surgical preparation, and surgeon&#39;s hands during surgery, as well as all other minor maintainances of sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic (Ketamine/Xylazine Solution)</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>240048</td>
			<td>For keeping the animal in the correct plane of consciousness during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic (Cefazolin)</td>
			<td>West-Ward Pharmaceuticals</td>
			<td>NPC 0143-9924-90</td>
			<td>To be injected subcutaneously to prevent infection post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bead Sterilizer</td>
			<td>CellPoint</td>
			<td>5-1450</td>
			<td>To heat sterilize surgical instruments.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonewax</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>19009-00</td>
			<td>To seal up bone in the case of bone bleeding.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cauterizer</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td>To seal any arteries or veins severed during surgery to prevent excessive blood loss.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Scale</td>
			<td>Okaus</td>
			<td>REV.005</td>
			<td>For weighing the animal during surgical preparation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexible Needle Attachment</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>MF34G-5</td>
			<td>For cleaning glass needles and loading red oil into glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelfoam</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>H68079</td>
			<td>To seal up bone in the case of bone bleeding.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Capillary Tubes</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>4878</td>
			<td>For pulled glass needles - should be designed for nanoliter injectors.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair Clippers</td>
			<td>Oster</td>
			<td>111038-060-000</td>
			<td>For clearing the surgical site of hair.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostats</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-7231</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>Kimtech</td>
			<td>34155</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Point Curved Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5136</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator with a Vernier Scale</td>
			<td>Kanetec</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For precise targeting during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5621</td>
			<td>For cutting glass whisps off of freshly pulled glass capillary tubes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope with Light and Vernier Scale Ocular</td>
			<td>Leitz Wetzlar</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Used to visualize and measure beveling of pulled glass capillary tubes into functional glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroSyringe Pump Controller</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>62403</td>
			<td>To control the rate of injection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoliter 2000 Pump Head Injector</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500150</td>
			<td>To load and inject virus in a controlled fashion.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Puller</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>PC-100</td>
			<td>To heat and pull apart glass capillary tubes to form glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalamic Ointment</td>
			<td>Dechra Veterinary Products</td>
			<td>RAC 0119</td>
			<td>To protect the animal&#39;s eyes during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bemis</td>
			<td>PM-996</td>
			<td>To assist with loading virus into the nanoinjector.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PrecisionGlide Needles (25G x 5/8)</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>305122</td>
			<td>For use with the 1mL and 10 mL syringes to allow injection of the animal model.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Tooth Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5152</td>
			<td>For griping spinous processes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red Oil</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To provide a front for visualization of virus entering tissue during injection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-6510</td>
			<td>To hold open the surgical wound.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rimadyl Tablets</td>
			<td>Bio Serv</td>
			<td>MP275-050</td>
			<td>For pain management post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rongeurs</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-8300</td>
			<td>To remove muscle from the spinal column during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade Handle</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9843</td>
			<td>To slice open skin and fat pad of animal model during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5980</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steal Wound Clips</td>
			<td>CellPoint</td>
			<td>201-1000</td>
			<td>To bind the skin of the surgical wound during closing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staple Removing Forceps</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>INS750347</td>
			<td>To remove the staples, should they be applied incorrectly.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Cloth</td>
			<td>Phenix Research Products</td>
			<td>BP-989</td>
			<td>To provide a sterile surface for the operation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td>Puritan</td>
			<td>806-WC</td>
			<td>To soak up blood in the surgical wound while maintaining sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Gauze</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>2146</td>
			<td>To clean the surgical area and surgical tools while maintaining sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Saline</td>
			<td>Baxter Healthcare Corporation</td>
			<td>281324</td>
			<td>For use in blood clearing, and for replacing fluids post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Gloves</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For use by the surgeon to maintain sterile field during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Heating Pad</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For maintaining the body temperature of the animal model during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Microscope</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For enhanced visualization of the surgical wound.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Stapler</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>INS750546</td>
			<td>To apply the staples.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T/Pump Heat Therapy Water Pump</td>
			<td>Gaymar</td>
			<td>TP500C</td>
			<td>To pump warm water into the water convection warming pad.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water Convection Warming Pad</td>
			<td>Baxter Healthcare Corporation</td>
			<td>L1K018</td>
			<td>For use in the post-operational recovery area to maintain the body temperature of the unconscious animal.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighted Hooks</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To hold open the surgical wound.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

direct injection of a lentiviral vector highlights multiple motor pathways in the rat spinal cord

Invoering van proteïnen van belang in cellen in het zenuwstelsel is uitdagend als gevolg van aangeboren biologische barrières die de toegang tot de meeste moleculen beperken. Injectie rechtstreeks in het ruggenmerg weefsel omzeilt deze belemmeringen, toegang tot cel organen of synapses waar moleculen kunnen worden opgenomen. Virale vector technologie combineren met deze methode zorgt voor het binnenbrengen van doelgenen zenuwweefsel ten behoeve van gentherapie of tractus tracering. Hier is een virus dat is ontworpen voor zeer efficiënte retrograde vervoer (HiRet) geïntroduceerd op de synapsen van propriospinal interneuronen (PNs) ter bevordering van specifieke vervoer naar neuronen in het ruggenmerg en de kernen van de hersenstam. Gericht op de PNs profiteert van de talrijke verbindingen die zij van motor trajecten zoals de rubrospinal en reticulospinal traktaten, evenals hun interconnectie met elkaar hele segmenten van het ruggenmerg ontvangen. Representatieve tracering met behulp van de vector HiRet met de constitutively actieve groen fluorescente proteïne (GFP) toont HiFi details voor cel organen, axonen en dendritische arbors in thoracale PNs en in de reticulospinal neuronen in de pontine Formatio vorming. HiRet integreert goed in de hersenstam trajecten en PNs maar toont van de leeftijd afhankelijke integratie in corticospinal tract neuronen. Kortom is ruggenmerg injectie met behulp van virale vectoren een geschikte methode voor het binnenbrengen van neuronen van gerichte traktaten van proteïnen van belang.

Succesvolle injectie en vervoer van de virale vector moeten resulteren in signaaltransductie van een robuuste bevolking van unilaterale neuronen in het ruggenmerg, en in bepaalde kernen van de hersenstam. Figuur 1 toont de stereotiepe etikettering van neuronen en axonen in het thoracale ruggenmerg en in de pontine Formatio vorming van de hersenstam op vier weken na injectie. Belangrijke GFP expressie wordt gezien in de neuronen in de grijze stof van het thoracale ruggenme...

Watch this Scientific Journal Video about Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord at JoVE.com

Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord

Dit protocol toont injectie van een retrogradely vervoerbare virale vector in rat ruggenmerg weefsel. De vector is overgenomen in de synaps en vervoerd naar de cel lichaam van doel neuronen. Dit model is geschikt voor retrograde tracering van belangrijke spinale trajecten of targeting cellen voor gen-therapie-toepassingen.

Directe inspuiting van een lentivirale Vector hoogtepunten meerdere Motor trajecten in het ruggenmerg Rat

Introducing proteins of interest into cells in the nervous system is challenging due to innate biological barriers that limit access to most molecules. ...

Virale vectoren kunnen genetisch materiaal in cellen introduceren om defecte genen te compenseren, belangrijke groeieiwitten te up-reguleren of markers te produceren die neurale circuits kunnen traceren. De invoering van virale vectoren in het zenuwstelsel is een uitdaging als gevolg van aangeboren biologische barrières. Directe injectie in ruggenmergweefsel omzeilt deze barrières, waardoor toegang tot cellichamen of synapsen.Correct gericht op de L1 naar L4 spinale niveaus kan moeilijk zijn. Het is belangrijk om oriëntatiepunten te gebruiken om het doel te verifiëren en te onthouden dat deze segmenten lijn naar de T11 tot T13 wervels. Sluit de injector op de dag van de procedure aan op de micropomp en plaats de micropomp in een micromanipulator met een vernierschaal.Gebruik een spuit met een flexibele naald om een gekleurde kleurstof zorgvuldig in een van de glazen naalden te laden en de glasnaald in de injector te steken. Bevestig vervolgens dat de naald correct in de ringen is gezaaid en dat de injectordop op de geschroefde is en dat de stalen injectornaald ongeveer driekwart van de lengte van de glazen naald wordt verlengd. Ontdooi vóór het begin van de procedure ten minste één microliter, plus een klein volume extra virus per injectie uit vriesopslag, en bevestig een gebrek aan respons van teensnuifje in een verdoofde rat.Scheer langs de dorsale middellijn van de heupen naar de inferieure hoek van het schouderblad van het dier, trek de huid strak voor een gemakkelijker en nauwkeuriger scheren, en desinfecteren de blootgestelde huid met sequentiële 5% jodium en 70% ethanol scrubs. Breng oogheelkundige zalf aan op beide ogen. Plaats het dier vervolgens op een steriele doek en plaats gaas onder de blaas om urine te verzamelen.Om de plaats van de huidincisie te identificeren, drukt u de vingers voorzichtig op de laatste rib om de L1-wervel te lokaliseren. Met behulp van deze wervel als een mijlpaal en het houden van de huid strak door zachte verspreiding tijdens het indrukken stevig met de scalpel, gebruik maken van een nummer 10 chirurgische blad om een drie tot vier centimeter gevilde incisie eindigt net inferieur aan L1 om de spier bloot te stellen. Gebruik tangen en scharen om te voelen voor de spineuze processen.Maak kleine rostral bezuinigingen om ruimte om veilig te grijpen op een bovenste proces met rat tand tang. En maak twee lange, diepe sneden zo dicht mogelijk bij de processen mogelijk. Na het veiligstellen van de laterale spieren op zijn plaats, duidelijk de spier rond de processen om de vorm van hun hoofd te bepalen.Visualiseer vervolgens de vormen van de hoofden van de spineuze processen om de plaats van de laminectomie te identificeren. De T11 en de verbindende T12 en T13 processen zullen de plaats van de laminectomie zijn. Zodra het doelgebied correct is geïdentificeerd, spreidt u de wervels voorzichtig uit om de tussenwervelbanden te onthullen en gebruikt rongeurs kleine beten van de spineuze processen en het dorsale aspect van de wervels.Duidelijk het bot uit de buurt van de middellijn, zodat de middellijn bloedvat kan worden waargenomen, waardoor een venster dat duidelijk onthult het ruggenmergweefsel en is vrij van puin. Bevestig vervolgens stabiliserende tangen aan de spineuze processen rostral en caudal aan het laminectomievenster om het dier in een ruggenmerghouder te beveiligen. En hef de buik van het dier op om het effect van ademhalingsbewegingen te ontkennen.Om het virus in de injector te laden, pipette ongeveer vijf microliter van de ontdooide voorraad op een stuk Parafilm, en plaats de glasnaalden zodat de punt zich in de daling bevindt. Gebruik de micropomp om maximaal vier microliter van het virus terug te trekken met een snelheid van 20 tot 100 nanoliter per seconde, en stel de controller te injecteren voordat het vrijgeven van een kleine hoeveelheid virus uit de naald tip om ervoor te zorgen dat het niet wordt geblokkeerd. Veeg een overtollig virus af met een laboratoriumdoek en plaats de micromanipulatoren zodat de vernierschaal zichtbaar is.Plaats de naald op de middellijn van het ruggenmerg en gebruik de vernierschaal op de micromanipulator om de naald lateraal 0,8 millimeter te leiden. Laat vervolgens de naald naar het ruggenmerg totdat het inspringt, maar niet doorboren, de dura, en gebruik een snelle draaiende beweging om de dura met de naald te doorboren totdat de naaldpunt is gezonken tot een diepte van 1,5 millimeter. Zodra de naald is op zijn plaats, het programma van de injector om het virus te leveren met een snelheid van 400 nanoliter per minuut, en bevestigen dat het virus is het invoeren van het ruggenmerg door het observeren van de voortgang van de kleurstof front.Zodra de injectie is voltooid, laat de naald twee tot vijf minuten rusten in het ruggenmerg om de verspreiding van het virus te vergemakkelijken, voordat u de naald langzaam terugtrekt voor positionering op de volgende injectieplaats. Na de laatste injectie, verwijder het dier uit de ruggenmerghouder om het verwijderen van alle apparaten die worden gebruikt om de laterale spier te verspreiden mogelijk te maken. Sluit vervolgens de spier met een 4.0 chromische catgut hechting en nietje van de huid met negen millimeter wondclips.Vier weken na een succesvolle injectie wordt significante GFP-expressie waargenomen in de neuronen in de grijze stof van het thoracale ruggenmerg aan de zijkant, ipsilateraal aan de injectie. In de witte stof wordt GFP-expressie waargenomen in de axonen in het ipsilaterale koord, vooral in gebieden die typisch zijn voor de propriospinale axonen. Een hogere vergroting van de grijze stof neuronen onthult een voorbeeld van een typische signaalexpressie in neuronale cellichamen en dendrieten.GFP expressie in neuronen kan ook worden waargenomen in hersenstam kernen, zoals binnen de pontine reticulaire vorming. De belangrijkste factoren voor een succesvolle spinale injectie procedure zijn correcte wervel targeting en ervoor te zorgen dat het virus is het invoeren van het weefsel Als een rostrale dwarslaesie wordt uitgevoerd voorafgaand aan deze procedure, directe injectie kan worden gebruikt om neuronen die verbindingen rond de schade te herstellen traceren.

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Anatomy and Physiology

Neuroscience

Unit 1

Functions of the Central and Peripheral Nervous System

SCIENTISTS IN ACTION

A Functional Motor Unit in the Culture Dish: Co-culture of Spinal Cord Explants and Muscle Cells

Een Functionele Motor-eenheid in de cultuur Dish: Co-cultuur van het ruggenmerg Explantaten-en spiercellen

Human primary muscle cells cultured  aneurally in monolayer rarely contract spontaneously because, in the absence of  a nerve component, cell ...

Stereotaxic Injection of a Viral Vector for Conditional Gene Manipulation in the Mouse Spinal Cord

Stereotactische injectie van een virale vector voor voorwaardelijke Gene Manipulation in de muis Spinal Cord

Intraparenchymal injection of a viral vector enables conditional gene manipulation in distinct populations of neurons or particular regions of the central ...

Production of RNA for Transcriptomic Analysis from Mouse Spinal Cord Motor Neuron Cell Bodies by Laser Capture Microdissection

Productie van RNA voor transcriptomische analyse van muis ruggenmerg motor neuron cellichamen door laser capture microdissection

Preparation of high-quality RNA from cells of interest is critical to precise and meaningful analysis of transcriptional differences among cell types or ...

Spinal Cord Transection in the Larval Zebrafish

Spinal Cord doorsnijding in het larvale zebravis

Mammals fail in sensory and motor recovery following spinal cord injury due to lack of axonal regrowth below the level of injury as well as an inability ...

Diffusion Imaging in the Rat Cervical Spinal Cord

Diffusion Imaging in het Rat ruggenmerg

Magnetic resonance imaging (MRI) is the state of the art approach for assessing the status of the spinal cord noninvasively, and can be used as a ...

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

zebravis<em&gt; In Situ</em&gt; Spinal Cord Voorbereiding voor elektrofysiologische registraties van Spinal sensorische en motorische neuronen

Zebrafish, first introduced as a developmental model, have gained popularity in many other fields. The ease of rearing large numbers of rapidly developing ...

Laminectomy and Spinal Cord Window Implantation in the Mouse

Implantatie van de laminectomie en het ruggenmerg in de muis

This protocol describes a method for spinal cord laminectomy and glass window implantation for in vivo imaging of the mouse spinal cord. An integrated ...

Thoracic Spinal Cord Hemisection Surgery and Open-Field Locomotor Assessment in the Rat

Thoracale ruggenmerg hemisection chirurgie en open veld motorische beoordeling bij de rat

Spinal cord injury (SCI) causes disturbances in motor, sensory, and autonomic function below the level of the lesion. Experimental animal models are ...

Intra-Arterial Delivery of Neural Stem Cells to the Rat and Mouse Brain: Application to Cerebral Ischemia

Intra-arteriële levering van neurale stamcellen aan de Rat en Mouse Brain: Toepassing op cerebrale ischemie

Neural stem cell (NSC) therapy is an emerging innovative treatment for stroke, traumatic brain injury and neurodegenerative disorders. As compared to ...

In Vivo Intracellular Recording of Type-Identified Rat Spinal Motoneurons During Trans-Spinal Direct Current Stimulation

In Vivo intracellulaire opname van type-geïdentificeerde Rat Spinal Motoneurons tijdens trans-spinale directe stroomstimulatie

Intracellular recording of spinal motoneurons in vivo provides a &#8220;gold standard&#8221; for determining the cells&#8217; electrophysiological ...