Name: direct injection of a lentiviral vector highlights multiple motor pathways in the rat spinal cord
Uploaded: 2019-03-15T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord at JoVE.com

Detta arbete finansierades genom ett bidrag från de nationella institutet för neurologiska sjukdomar och Stroke R01 R01NS103481 och Shriners sjukhuset för pediatrisk forskning bidrag SHC 84051 och SHC 86000 och försvarsdepartementet (SC140089).

Alla följande kirurgiska och djurs vård förfaranden har godkänts av djur vård och användning kommittén vid Temple University.
1. före kirurgiska preparat
<ol><li>Förbereda drog glas nålar viral injektionsvätska några dagar före operationen med 3,5 nliter glas kapillär pipetter avsedda för nliter spridare. Dra varje pipett en två-stegs nål avdragare enligt tillverkarens instruktioner för att skapa två nål mallar.</li>
	<li>Förfina spetsen på nålen mallarna genom att sk?...

Genmanipulation av nervceller i hjärnan och ryggmärgen har tjänat till att markera sensorisk, motorisk och autonoma vägar via fluorescerande spårning och att utforska återväxt potential av neuronala skrifter efter skada27,28, 29 , 30 , 31 , 32 , 33. direkt injektion av ett retrogradel...

Virala vektorer är viktiga biologiska verktyg som kan införa genetiska materialet i celler för att kompensera för defekta gener, upregulate viktig tillväxt proteiner eller tillverka markör proteiner som framhäver strukturen och synapsförbindelser av sina mål. Denna artikel fokuserar på direkt injektion av en högeffektiv retrogradely transportabla lentiviral vektor i råtta ryggmärgen för att belysa större motoriska vägar med fluorescerande spårning.  Denna metod är också mycket lämplig för axonal föryngring och återväxt studier att införa proteiner av intresse i olika populationer av nervceller och har använts för att tysta nervceller för funktionell kartläggning studier1,2.
Många av de anatomiska detaljerna för spinal motoriska vägar var klarlagd genom direkt injektion studier med klassiskt spårämnen såsom BDA och fluoro-guld3,4,5,6,7 , 8. dessa spårämnen anses guldmyntfoten men kan ha vissa nackdelar såsom upptag av skadade axoner, eller axoner i passage i den vita substansen kring en injektion webbplats9,10,11 . Detta kan leda till felaktiga tolkningar av väg anslutning och kan vara en nackdel i regenerering studier där färgämne absorption av skadade eller avhuggna axoner kan misstas för regenererande fibrer under senare analys12.
Lentiviral vektorer är populära i gen terapi studier, eftersom de ger stabil, långsiktig uttryck i neuronala populationer13,14,15,16,17,18 ,19. Men traditionellt paketerade lentiviral vektorer kan ha begränsad retrograd transport och kan utlösa immunsystemet när den används i vivo4,20,21. En mycket effektiv retrograd transport vektor kallas HiRet har producerats av Kato et al. genom att ändra virala kuvertet med en rabies virus glykoprotein att skapa en hybrid-vektor som förbättrar retrograd transport22,23.
Retrograd spårning introducerar en vektor i synaptiska utrymmet av en target neuron, så att den kan tas av cellens axon och transporteras till cellkroppen. Framgångsrika transport av HiRet har påvisats från nervcellernas synapser i hjärnan hos möss och primater23,24 och från muskeln till motoriska nervceller22. Detta protokoll visar injektion i ländryggen ryggmärgen, särskilt inriktad på propriospinal interneuronen och hjärnstammen nervceller synaptiska terminaler. PNs ta emot anslutningar från många olika spinal vägar och kan således användas för att rikta en mångskiftande befolkningen av nervceller i ryggmärgen och hjärnstammen. Märkt nervceller i denna studie utgör kretsar innervating motorneuronen pooler avser bakbenet motorik. Robust märkning ses i ryggmärgen och hjärnstammen, inklusive HiFi Detaljer för dendritiska arbors och axon terminaler. Vi har också använt denna metod i tidigare studier inom den cervikala ryggmärgen för att märka propriospinal och hjärnstammen reticulospinal vägar25.
Detta protokoll visar injektion av en viral vektor i ländryggen ryggmärgen på en råtta. Som kan ses i filmen 1, riktar snittet genom att identifiera den L1-kotan som ligger på revbenet. Detta används som ett kaudala landmärke för en 3-4 cm snitt som exponerar muskulatur över L1-L4 ryggmärgen. Laminectomies av de dorsala aspekterna av T11-T13 kotorna utförs och avfasade glas nål är riktad 0,8 mm i sidled från mittlinjen och sänkt 1,5 mm djupt in i den grå substans att injicera viruset.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>#10 Scalpel Blades</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9801-10</td>
			<td>For use with the scalpel.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringes</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>309659</td>
			<td>For anesthetic IP injection, potential anesthetic booster shots, and antibiotic injections.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10mL Syringes</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>309604</td>
			<td>For injecting saline into the animal, post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4.0 Chromic Catgut Suture</td>
			<td>DemeTECH</td>
			<td>NN374-16</td>
			<td>To re-bind muscle during closing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>48000 Micropipette Beveler</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>32416</td>
			<td>Used to bevel the tips of the pulled glass capillary tubes to form functional glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Iodine Solution</td>
			<td>Purdue Products L.P.</td>
			<td>L01020-08</td>
			<td>For use in sterilzation of the surgical site.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% Ethanol</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For sterilization of newly prepared glass needles, animal models during surgical preparation, and surgeon&#39;s hands during surgery, as well as all other minor maintainances of sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic (Ketamine/Xylazine Solution)</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>240048</td>
			<td>For keeping the animal in the correct plane of consciousness during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic (Cefazolin)</td>
			<td>West-Ward Pharmaceuticals</td>
			<td>NPC 0143-9924-90</td>
			<td>To be injected subcutaneously to prevent infection post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bead Sterilizer</td>
			<td>CellPoint</td>
			<td>5-1450</td>
			<td>To heat sterilize surgical instruments.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonewax</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>19009-00</td>
			<td>To seal up bone in the case of bone bleeding.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cauterizer</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td>To seal any arteries or veins severed during surgery to prevent excessive blood loss.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Scale</td>
			<td>Okaus</td>
			<td>REV.005</td>
			<td>For weighing the animal during surgical preparation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexible Needle Attachment</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>MF34G-5</td>
			<td>For cleaning glass needles and loading red oil into glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelfoam</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>H68079</td>
			<td>To seal up bone in the case of bone bleeding.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Capillary Tubes</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>4878</td>
			<td>For pulled glass needles - should be designed for nanoliter injectors.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair Clippers</td>
			<td>Oster</td>
			<td>111038-060-000</td>
			<td>For clearing the surgical site of hair.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostats</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-7231</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>Kimtech</td>
			<td>34155</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Point Curved Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5136</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator with a Vernier Scale</td>
			<td>Kanetec</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For precise targeting during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5621</td>
			<td>For cutting glass whisps off of freshly pulled glass capillary tubes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope with Light and Vernier Scale Ocular</td>
			<td>Leitz Wetzlar</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Used to visualize and measure beveling of pulled glass capillary tubes into functional glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroSyringe Pump Controller</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>62403</td>
			<td>To control the rate of injection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoliter 2000 Pump Head Injector</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500150</td>
			<td>To load and inject virus in a controlled fashion.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Puller</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>PC-100</td>
			<td>To heat and pull apart glass capillary tubes to form glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalamic Ointment</td>
			<td>Dechra Veterinary Products</td>
			<td>RAC 0119</td>
			<td>To protect the animal&#39;s eyes during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bemis</td>
			<td>PM-996</td>
			<td>To assist with loading virus into the nanoinjector.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PrecisionGlide Needles (25G x 5/8)</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>305122</td>
			<td>For use with the 1mL and 10 mL syringes to allow injection of the animal model.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Tooth Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5152</td>
			<td>For griping spinous processes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red Oil</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To provide a front for visualization of virus entering tissue during injection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-6510</td>
			<td>To hold open the surgical wound.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rimadyl Tablets</td>
			<td>Bio Serv</td>
			<td>MP275-050</td>
			<td>For pain management post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rongeurs</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-8300</td>
			<td>To remove muscle from the spinal column during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade Handle</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9843</td>
			<td>To slice open skin and fat pad of animal model during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5980</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steal Wound Clips</td>
			<td>CellPoint</td>
			<td>201-1000</td>
			<td>To bind the skin of the surgical wound during closing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staple Removing Forceps</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>INS750347</td>
			<td>To remove the staples, should they be applied incorrectly.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Cloth</td>
			<td>Phenix Research Products</td>
			<td>BP-989</td>
			<td>To provide a sterile surface for the operation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td>Puritan</td>
			<td>806-WC</td>
			<td>To soak up blood in the surgical wound while maintaining sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Gauze</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>2146</td>
			<td>To clean the surgical area and surgical tools while maintaining sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Saline</td>
			<td>Baxter Healthcare Corporation</td>
			<td>281324</td>
			<td>For use in blood clearing, and for replacing fluids post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Gloves</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For use by the surgeon to maintain sterile field during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Heating Pad</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For maintaining the body temperature of the animal model during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Microscope</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For enhanced visualization of the surgical wound.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Stapler</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>INS750546</td>
			<td>To apply the staples.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T/Pump Heat Therapy Water Pump</td>
			<td>Gaymar</td>
			<td>TP500C</td>
			<td>To pump warm water into the water convection warming pad.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water Convection Warming Pad</td>
			<td>Baxter Healthcare Corporation</td>
			<td>L1K018</td>
			<td>For use in the post-operational recovery area to maintain the body temperature of the unconscious animal.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighted Hooks</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To hold open the surgical wound.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

direct injection of a lentiviral vector highlights multiple motor pathways in the rat spinal cord

Att införa proteiner av intresse i celler i nervsystemet är utmanande på grund av medfödda biologiska hinder som begränsar tillgång till de flesta molekyler. Injektion direkt i ryggmärgsvävnad förbi dessa hinder, som ger tillgång till cellen organ eller synapser där molekyler kan införlivas. Att kombinera virala vektorn teknik med denna metod möjliggör införsel av målgener nervvävnad i syfte att genterapi eller tarmkanalen spårning. Här introduceras ett virus konstruerade för högeffektiva retrograd transport (HiRet) på synapserna av propriospinal interneuroner (PNs) att främja särskilda transporter till nervceller i ryggmärgen och hjärnstammen atomkärnor. Inriktning PNs utnyttjar de talrika anslutningar som de får från motoriska vägar såsom de rubrospinal och reticulospinal skrifter, liksom deras sammankoppling med varandra under hela ryggmärgen segmenten. Representativa spårning med HiRet vector med konstitutivt aktiv grönt fluorescerande protein (GFP) visar HiFi Detaljer för cell organ, axoner och dendritiska arbors i bröstkorg PNs och reticulospinal nervceller i pontine reticular formation. HiRet innehåller väl in i hjärnstammen vägar och PNs men visar ålder beroende integreras corticospinal tarmkanalen nervceller. Sammanfattningsvis är spenat snore injektion med virala vektorer en lämplig metod för införandet av proteiner av intresse i nervceller av riktade skrifter.

Framgångsrika injektion och transport av virala vektorn bör resultera i transduktion av en robust befolkningen av ensidiga nervceller i ryggmärgen och i vissa kärnor i hjärnstammen. Figur 1 visar stereotypa märkning av neuron och axoner i bröstkorg ryggmärgen och i pontine reticular bildandet av hjärnstammen på fyra veckor efter injektionen. Betydande GFP uttryck ses i nervceller i den grå substans av bröstkorg ryggmärgen på sida ipsilaterala till injektion ...

Watch this Scientific Journal Video about Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord at JoVE.com

Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord

Detta protokoll visar injektion av ett retrogradely transportabla virala vektorn i råtta ryggmärgsvävnad. Vektorn tas upp vid synapsen och transporteras till cellkroppen av målet nervceller. Denna modell är lämplig för retrograd spårning av viktiga spinal vägar eller inriktning celler för gen terapi program.

Direktinsprutning av en Lentiviral vektor belyser flera motoriska vägar i råtta ryggmärgen

Introducing proteins of interest into cells in the nervous system is challenging due to innate biological barriers that limit access to most molecules. ...

Viral vektorer kan införa genetiskt material i celler för att kompensera för defekta gener, att upp-reglera viktiga tillväxtproteiner, eller att tillverka markörer som kan spåra neurala kretsar. Att införa virala vektorer i nervsystemet är utmanande på grund av medfödda biologiska hinder. Direktinsprutning i ryggmärgsvävnad kringgår dessa hinder, vilket möjliggör tillgång till cellkroppar eller synapser.Korrekt inriktning på L1 till L4 spinal nivåer kan vara svårt. Det är viktigt att använda landmärken för att verifiera målet och komma ihåg att dessa segment linje till T11 till T13 kotor. På dagen för förfarandet, anslut injektorn i mikro-pumpen och placera mikro-pumpen i en micromanipulator med en vernier skala.Använd en spruta med en flexibel nål för att försiktigt ladda ett färgämne i en av glasnålarna och för in glasnålen i injektorn. Bekräfta sedan att nålen är sådd korrekt i brickorna, och att injektorlocket skruvas fast, och att stålinjektornålen förlängs ungefär tre fjärdedelar av glasnålens längd. Innan du börjar förfarandet, tina minst en mikroliter, plus en liten volym extra virus per injektion från frys lagring, och bekräfta en brist på svar på tå nypa i en sövd råtta.Raka längs ryggslipad mittlinjen från höfterna till sämre vinkel på djurets skulderblad, dra huden spänd för en enklare och mer exakt rakning, och desinficera den exponerade huden med sekventiell 5%jod och 70%etanolskrubber. Applicera oftalmisk salva på båda ögonen. Placera sedan djuret på en steril trasa och placera gasbinda under blåsan för att samla in urin.För att identifiera hudansionsstället, tryck fingrarna försiktigt vid det sista revbenet för att lokalisera L1-kotan. Använda denna kota som ett landmärke och hålla huden spänd genom mild spridning samtidigt trycka stadigt med skalpell, använd ett nummer 10 kirurgiskt blad för att göra en tre till fyra-centimeter flådda snitt slutar bara sämre än L1 att exponera muskeln. Använd teds och sax för att känna för de spinösa processerna.Gör små rostral nedskärningar för att ge utrymme att ta säkert på en övre process med råtta tandtång. Och gör två långa, djupa skär så nära processerna som möjligt. Efter att ha säkrat de laterala musklerna på plats, rensa muskeln runt processerna för att bestämma formen på deras huvuden.Sedan visualisera formerna av huvudena på de spinous processerna för att identifiera laminektomiplatsen. T11 och de sammanfogande T12- och T13-processerna kommer att vara platsen för laminektomi. När målområdet har identifierats korrekt, försiktigt sprida kotorna att avslöja intervertebral ligament, och använda rongeurs att ta små bett av spinous processer och ryggasal aspekt av kotorna.Rensa benet bort från mittlinjen så att mittlinjen blodkärlet kan observeras, lämnar ett fönster som tydligt avslöjar ryggmärgen vävnad och är fri från skräp. Fäst sedan stabiliserande tång till de spinösa processerna rostral och caudal till laminektomifönstret för att säkra djuret i en ryggradshållare. Och höja djurets buk för att förneka effekten av andningsrörelser.För att belasta in viruset i injektorn, pipetteras cirka fem mikroliter av det tinade beståndet på en bit Parafilm, och placera glasnålarna så att spetsen är inne i droppen. Använd mikropumpen för att dra tillbaka upp till fyra mikroliter av virus med en hastighet av 20 till 100 nanoliter per sekund, och ställ in styrenheten att injicera innan du släpper en liten mängd virus från nålspetsen för att säkerställa att den inte är blockerad. Torka bort eventuellt överskottsvirus med en laboratorietorka och placera mikromanipulatorerna så att den vernier skalan syns.Placera nålen vid mittlinjen i ryggmärgen, och använd den vernier skalan på mikromanipulator för att rikta nålen i laterled 0,8 millimeter. Sänk sedan nålen till ryggmärgen tills den är indrag, men inte punktering, dura, och använd en snabb vridning rörelse för att punktera dura med nålen tills nålen spetsen har sjunkit till ett djup av 1,5 millimeter. När nålen är på plats, programmera injektorn att leverera viruset med en hastighet av 400 nanoliter per minut, och bekräfta att viruset kommer in i ryggmärgen genom att observera utvecklingen av färgämnet fronten.När injektionen är klar, låt nålen vila i ryggmärgen i två till fem minuter för att underlätta virusets diffusion, innan du långsamt drar tillbaka nålen för positionering vid nästa injektionsställe. Efter den sista injektionen, ta bort djuret från ryggradshållaren så att avlägsnandet av alla enheter som används för att sprida laterala muskeln. Stäng sedan muskeln med en 4,0 kromisk katagutsutur och häfta huden med nio millimeters sårklämmor.Fyra veckor efter en lyckad injektion observeras betydande GFP uttryck i nervcellerna inom den grå substansen i bröst ryggmärgen på sidan, ipsilateral till injektionen. I den vita frågan observeras GFP-uttryck i axoner i ipsilateral sladden, särskilt i områden som är typiska för propriospinal-axoner. En högre förstoring av grå substansen nervceller avslöjar ett exempel på en typisk signaluttryck i neuronala cell organ och dendrites.GFP uttryck i nervceller kan också observeras i hjärnstammen kärnor, såsom inom pontinska retikulära formationen. De viktigaste faktorerna för en lyckad ryggmärgsinjektion förfarande är korrekt vertebral inriktning och se till att virus kommer in i vävnaden Om en rostral ryggmärgsskada utförs före detta förfarande, direkt injektion kan användas för att spåra nervceller som återupprätta anslutningar runt skadan.

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Anatomy and Physiology

Neuroscience

Unit 1

Functions of the Central and Peripheral Nervous System

SCIENTISTS IN ACTION

A Functional Motor Unit in the Culture Dish: Co-culture of Spinal Cord Explants and Muscle Cells

En funktionell Motor enhet i Kultur Dish: Co-kultur av ryggmärg Explantat och muskelceller

Human primary muscle cells cultured  aneurally in monolayer rarely contract spontaneously because, in the absence of  a nerve component, cell ...

Stereotaxic Injection of a Viral Vector for Conditional Gene Manipulation in the Mouse Spinal Cord

Stereotaktisk injektion av en viral vektor för villkorad Gene Manipulation i ryggmärgen hos möss

Intraparenchymal injection of a viral vector enables conditional gene manipulation in distinct populations of neurons or particular regions of the central ...

Production of RNA for Transcriptomic Analysis from Mouse Spinal Cord Motor Neuron Cell Bodies by Laser Capture Microdissection

Produktion av RNA för transkriptomisk analys från mus ryggmärg motor neuron cellkroppar av laser capture mikrodissektion

Preparation of high-quality RNA from cells of interest is critical to precise and meaningful analysis of transcriptional differences among cell types or ...

Spinal Cord Transection in the Larval Zebrafish

Spinal Cord transection i Larvernas Zebrafish

Mammals fail in sensory and motor recovery following spinal cord injury due to lack of axonal regrowth below the level of injury as well as an inability ...

Diffusion Imaging in the Rat Cervical Spinal Cord

Diffusion Imaging i Rat Cervical Spinal Cord

Magnetic resonance imaging (MRI) is the state of the art approach for assessing the status of the spinal cord noninvasively, and can be used as a ...

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

zebrafisk<em&gt; In Situ</em&gt; Spinal Cord Förberedelse för elektrofysiologiska inspelningar från Spinal sensoriska och motoriska nervceller

Zebrafish, first introduced as a developmental model, have gained popularity in many other fields. The ease of rearing large numbers of rapidly developing ...

Laminectomy and Spinal Cord Window Implantation in the Mouse

Implantation av laminektomi och Ryggmärgs fönster i musen

This protocol describes a method for spinal cord laminectomy and glass window implantation for in vivo imaging of the mouse spinal cord. An integrated ...

Thoracic Spinal Cord Hemisection Surgery and Open-Field Locomotor Assessment in the Rat

Thorakala ryggmärgen Hemisection kirurgi och öppen-fält rörelseapparaten bedömning hos råtta

Spinal cord injury (SCI) causes disturbances in motor, sensory, and autonomic function below the level of the lesion. Experimental animal models are ...

Intra-Arterial Delivery of Neural Stem Cells to the Rat and Mouse Brain: Application to Cerebral Ischemia

Intra-arteriell leverans av neurala stamceller till råtta och mus hjärnan: Ansökan till cerebral ischemi

Neural stem cell (NSC) therapy is an emerging innovative treatment for stroke, traumatic brain injury and neurodegenerative disorders. As compared to ...

In Vivo Intracellular Recording of Type-Identified Rat Spinal Motoneurons During Trans-Spinal Direct Current Stimulation

In Vivo Intracellulär inspelning av typidentifierade Rat Spinal Motoneurons Under Trans-Spinal Direct Current Stimulation

Intracellular recording of spinal motoneurons in vivo provides a &#8220;gold standard&#8221; for determining the cells&#8217; electrophysiological ...