Name: direct injection of a lentiviral vector highlights multiple motor pathways in the rat spinal cord
Uploaded: 2019-03-15T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord at JoVE.com

Bu eser sinir hastalıkları Ulusal Enstitüsü ve kontur R01 R01NS103481 hibe tarafından finanse edildi ve Shriners Hastanesi Pediatrik araştırma hibe SHC 84051 ve SHC 86000 ve Savunma Bakanlığı (SC140089).

Aşağıdaki cerrahi ve hayvan bakımı yordamların tümünü hayvan bakım ve kullanım Komitesi Temple Üniversitesi tarafından onaylanmıştır.
1. cerrahi öncesi hazırlıklar
<ol><li>Çekti cam iğneler viral enjeksiyon 3,5 nanoliter cam kapiller Pipetler nanoliter enjektörler için tasarlanmış kullanarak ameliyattan önce bir kaç gün için hazır olun. Bir iki adım iğne çektirmenin iki iğne şablonları oluşturmak için üreticinin yönergelerine uygun olarak her pipet çe...

Beyin ve omurilik nöronlarda genetik manipülasyon vurgulamak duyusal, motor ve otonomik yolları floresan izleme aracılığıyla ve büyütme potansiyeli nöronal yollarini yaralanma27,28sonra, keşfetmek için hizmet vermiştir 29 , 30 , 31 , 32 , 33. retrogradely taşınabilir bir viral...

Viral vektörler genetik materyal arızalı genler, upregulate önemli büyüme proteinler telafi etmek veya yapısı ve sinaptik bağlantıları vurgulamak marker protein üretimi için hücrelere tanıtabilirsiniz önemli biyolojik araçlardır hedefleri. Bu makale floresan izleme büyük motorlu yolları vurgulamak için yüksek verimli retrogradely taşınabilir lentiviral vektör sıçan spinal kord içine direkt enjeksiyon üzerinde duruluyor.  Bu yöntem da nöronların farklı nüfus proteinler ilgi tanıtmak aksonal rejenerasyon ve büyütme çalışmaları için son derece uygun ve nöronlar fonksiyonel Haritalama çalışmaları1,2için susturmak için kullandı.
Birçok omurilik motor yolları anatomik ayrıntılarını direkt enjeksiyon çalışmalar ile BDA ve fluoro-altın3,4,5,6,7 gibi klasik tarayıcıları aracılığıyla aydınlatılmamıştır , 8. bu tarayıcıları altın standart olarak kabul edilir ancak bazı dezavantajları alımı gibi tarafından hasarlı aksonlar olabilir veya bir enjeksiyon çevreleyen beyaz madde pasajda akson sitesindeki9,10,11 . Bu yolu bağlantısı yanlış yorumlara neden olabilir ve bir dezavantajı ise yenilenme çalışmaları nerede boya absorpsiyonu ile bozuk veya kesik aksonlar lifleri daha sonra analiz12sırasında yeniden oluşturulması için yanlış olabilir olabilir.
Lentiviral vektörel çizimler nöron popülasyonları13,14,15,16,17,18 istikrarlı, uzun vadeli ifadede sağladıkları gen terapisi çalışmalarda, popüler şunlardır ,19. Ancak, geleneksel olarak paketlenmiş lentiviral vektörler retrograd taşıma sınırlı olan ve kullanıldığında bağışıklık sistemi yanıt tetikleyebilir vivo içinde4,20,21. HiRet olarak adlandırdığı bir yüksek verimli retrograd ulaşım vektör retrograd taşıma22,23geliştirir bir melez vektör oluşturmak için bir kuduz virüsü glikoprotein olan viral zarf değiştirerek Kato vd tarafından hazırlanmıştır.
Retrograd izleme o hücrenin axon tarafından alınan ve hücre vücut nakli izin bir hedef nöron sinaptik uzaya bir vektör tanıtır. Başarılı taşıma HiRet nöronal sinapslarda fareler ve maymunlar23,24 beyinlerinin içine ve motor nöronlar22kasına göstermiştir. Bu iletişim kuralı lomber spinal kord, özellikle propriospinal interneurons ve beyin sapı neurons sinaptik terminallerinin hedef içine enjeksiyon gösterir. PNs bağlantıları birçok farklı spinal yolları almak ve böylece omurilik ve beyin sapı nöronlarda farklı bir nüfusa hedeflemek için yararlı olabilir. Bu çalışmada etiketli nöronlar hindlimb motor işlevleri ile ilgili motor nöron havuzları innerve devreleri temsil eder. Sağlam etiketleme omurilik ve beyin sapı, dendritik arbors ve akson terminalleri yüksek sadakat ayrıntılarını dahil görülür. Biz de bu yöntem servikal spinal kord içinde önceki çalışmalarda propriospinal ve beyin sapı reticulospinal yolları25etiketlemek için kullandık.
Bu iletişim kuralı bir viral vektör enjeksiyon lomber spinal kord sıçan içine gösterir. Film 1 ' de görüldüğü gibi son kaburga bulunan L1 vertebra tanımlayarak belgili tanımlık kesme hedeflenmektedir. Bu kas L1-L4 omurilik üzerinde ortaya çıkaran bir 3-4 cm kesi Kaudal bir dönüm noktası kullanılır. Laminectomies T11-T13 vertebra dorsal yönlerini gerçekleştirilir ve eğimli cam iğne 0.8 mm lateral orta hat ve alçaltılmış 1.5 mm yönlendirilir virüs enjekte etmek için gri madde içine.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>#10 Scalpel Blades</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9801-10</td>
			<td>For use with the scalpel.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringes</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>309659</td>
			<td>For anesthetic IP injection, potential anesthetic booster shots, and antibiotic injections.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10mL Syringes</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>309604</td>
			<td>For injecting saline into the animal, post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4.0 Chromic Catgut Suture</td>
			<td>DemeTECH</td>
			<td>NN374-16</td>
			<td>To re-bind muscle during closing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>48000 Micropipette Beveler</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>32416</td>
			<td>Used to bevel the tips of the pulled glass capillary tubes to form functional glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Iodine Solution</td>
			<td>Purdue Products L.P.</td>
			<td>L01020-08</td>
			<td>For use in sterilzation of the surgical site.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% Ethanol</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For sterilization of newly prepared glass needles, animal models during surgical preparation, and surgeon&#39;s hands during surgery, as well as all other minor maintainances of sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic (Ketamine/Xylazine Solution)</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>240048</td>
			<td>For keeping the animal in the correct plane of consciousness during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic (Cefazolin)</td>
			<td>West-Ward Pharmaceuticals</td>
			<td>NPC 0143-9924-90</td>
			<td>To be injected subcutaneously to prevent infection post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bead Sterilizer</td>
			<td>CellPoint</td>
			<td>5-1450</td>
			<td>To heat sterilize surgical instruments.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonewax</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>19009-00</td>
			<td>To seal up bone in the case of bone bleeding.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cauterizer</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td>To seal any arteries or veins severed during surgery to prevent excessive blood loss.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Scale</td>
			<td>Okaus</td>
			<td>REV.005</td>
			<td>For weighing the animal during surgical preparation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexible Needle Attachment</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>MF34G-5</td>
			<td>For cleaning glass needles and loading red oil into glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelfoam</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>H68079</td>
			<td>To seal up bone in the case of bone bleeding.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Capillary Tubes</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>4878</td>
			<td>For pulled glass needles - should be designed for nanoliter injectors.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair Clippers</td>
			<td>Oster</td>
			<td>111038-060-000</td>
			<td>For clearing the surgical site of hair.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostats</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-7231</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>Kimtech</td>
			<td>34155</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Point Curved Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5136</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator with a Vernier Scale</td>
			<td>Kanetec</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For precise targeting during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5621</td>
			<td>For cutting glass whisps off of freshly pulled glass capillary tubes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope with Light and Vernier Scale Ocular</td>
			<td>Leitz Wetzlar</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Used to visualize and measure beveling of pulled glass capillary tubes into functional glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroSyringe Pump Controller</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>62403</td>
			<td>To control the rate of injection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoliter 2000 Pump Head Injector</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500150</td>
			<td>To load and inject virus in a controlled fashion.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Puller</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>PC-100</td>
			<td>To heat and pull apart glass capillary tubes to form glass needles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalamic Ointment</td>
			<td>Dechra Veterinary Products</td>
			<td>RAC 0119</td>
			<td>To protect the animal&#39;s eyes during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bemis</td>
			<td>PM-996</td>
			<td>To assist with loading virus into the nanoinjector.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PrecisionGlide Needles (25G x 5/8)</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>305122</td>
			<td>For use with the 1mL and 10 mL syringes to allow injection of the animal model.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Tooth Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5152</td>
			<td>For griping spinous processes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red Oil</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To provide a front for visualization of virus entering tissue during injection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-6510</td>
			<td>To hold open the surgical wound.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rimadyl Tablets</td>
			<td>Bio Serv</td>
			<td>MP275-050</td>
			<td>For pain management post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rongeurs</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-8300</td>
			<td>To remove muscle from the spinal column during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade Handle</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9843</td>
			<td>To slice open skin and fat pad of animal model during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5980</td>
			<td>For general use in surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steal Wound Clips</td>
			<td>CellPoint</td>
			<td>201-1000</td>
			<td>To bind the skin of the surgical wound during closing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staple Removing Forceps</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>INS750347</td>
			<td>To remove the staples, should they be applied incorrectly.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Cloth</td>
			<td>Phenix Research Products</td>
			<td>BP-989</td>
			<td>To provide a sterile surface for the operation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td>Puritan</td>
			<td>806-WC</td>
			<td>To soak up blood in the surgical wound while maintaining sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Gauze</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>2146</td>
			<td>To clean the surgical area and surgical tools while maintaining sterility.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Saline</td>
			<td>Baxter Healthcare Corporation</td>
			<td>281324</td>
			<td>For use in blood clearing, and for replacing fluids post-surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Gloves</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For use by the surgeon to maintain sterile field during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Heating Pad</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For maintaining the body temperature of the animal model during surgery.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Microscope</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For enhanced visualization of the surgical wound.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Stapler</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>INS750546</td>
			<td>To apply the staples.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T/Pump Heat Therapy Water Pump</td>
			<td>Gaymar</td>
			<td>TP500C</td>
			<td>To pump warm water into the water convection warming pad.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water Convection Warming Pad</td>
			<td>Baxter Healthcare Corporation</td>
			<td>L1K018</td>
			<td>For use in the post-operational recovery area to maintain the body temperature of the unconscious animal.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighted Hooks</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To hold open the surgical wound.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

direct injection of a lentiviral vector highlights multiple motor pathways in the rat spinal cord

Sinir sisteminde hücreye proteinler ilgi tanıtan en molekülleri erişimi sınırlamak doğuştan gelen biyolojik engelleri nedeniyle zordur. Spinal kord doku içine doğrudan enjeksiyon hücre organları erişim sağlayan bu engelleri atlar veya nerede molekülleri dahil olmak synapses. Bu yöntemle viral vektör teknoloji birleştiren gen terapisi veya yolu izleme amacıyla sinir dokusu içine hedef genlerin giriş için izin verir. Burada son derece etkili retrograd taşıma (HiRet) için tasarlanmış bir virüs, propriospinal interneurons (PNs omurilik ve beyin sapı çekirdeği nöronlarda için özel taşıma teşvik etmek) sinapslarda geliştirdiler. PNs hedefleme, rubrospinal ve reticulospinal yolları yanı sıra birbirleri ile onların arabağlantı omurilik segmentler boyunca gibi motor yolları üzerinden aldıkları çok sayıda bağlantıları yararlanır. Temsilcisi izleme hücre gövdeleri, akson ve dendritik arbors Torasik PNs ve reticulospinal nöronlarda pontine ağsı yapısal etkin yeşil flüoresan protein (GFP) gösterir yüksek sadakat ayrıntılarını HiRet vektör kullanarak. HiRet birleştirmek de beyin sapı yolları ve PNs ama yaş bağımlı entegrasyon corticospinal yolu nöronların içine gösterir. Özetle, spinal kord enjeksiyon viral vektörler kullanarak ilgi proteinlerin giriş neurons in hedeflenen arazi içine için uygun bir yöntemdir.

Başarılı enjeksiyon ve viral vektör taşımacılığının iletim tek taraflı nöronların spinal kord ve bazı beyin sapı çekirdek güçlü bir nüfusun sonuçlanmalıdır. Basmakalıp neurons ve akson torasik spinal kord ve beyin sapı, dört hafta sonrası enjeksiyon pontine ağsı etiketlerine göre şekil 1 gösterir. Önemli GFP ifade torasik spinal kord enjeksiyon (şekil 1A, kutulu alan) Ipsilateral tarafında gri madde nöronlarda görülm...

Watch this Scientific Journal Video about Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord at JoVE.com

Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord

Bu iletişim kuralı retrogradely taşınabilir bir viral vektör enjeksiyon sıçan spinal kord doku içine gösterir. Vektör sinaps kapladığı ve hedef nöron hücre gövdesi nakletti. Bu model önemli spinal yolları veya gen terapisi uygulamaları için hedefleme hücrelerin retrograd izleme için uygundur.

Birden fazla Motor yolları sıçan Spinal Kord Lentiviral bir vektör direkt enjeksiyon vurgulamaktadır

Introducing proteins of interest into cells in the nervous system is challenging due to innate biological barriers that limit access to most molecules. ...

Viral vektörler, kusurlu genleri telafi etmek, önemli büyüme proteinlerini düzenlemek veya nöral devreleri izleyen işaretler üretmek için hücrelere genetik materyal imal edebilir. Sinir sistemine viral vektörler getirilmesi doğuştan gelen biyolojik engeller nedeniyle zordur. Omurilik dokusuna doğrudan enjeksiyon bu engelleri atlar, hücre organları veya sinapserişim için izin.L1 ile L4 spinal düzeylerini doğru bir şekilde hedeflemek zor olabilir. Hedefi doğrulamak ve bu segmentlerin T11'den T13 omurlarına doğru iletiyi hatırlamak için yer işaretlerini kullanmak önemlidir. İşlem günü, enjektörü mikro pompaya takın ve mikro pompayı vernier ölçeğine sahip bir mikromanipülatöre yerleştirin.Renkli bir boyayı cam iğnelerden birine dikkatlice yüklemek ve cam iğneyi enjektöre yerleştirmek için esnek bir iğneyle şırınga kullanın. Daha sonra iğnenin yıkıtakanların içine doğru şekilde tohumlandığını ve enjektör kapağının sıkıca vidalandığını ve çelik enjektör iğnesinin cam iğnenin uzunluğunun yaklaşık dörtte üçü kadar uzatıldığını doğrulayın. İşleme başlamadan önce, en az bir mikrolitre, artı dondurucu depolama enjeksiyon başına ekstra virüs küçük bir hacim çözülme, ve anestezili sıçanda parmak çimdik yanıt eksikliği onaylamak.Kalçalardan hayvanın skapulae inferior açısına dorsal orta hat boyunca tıraş, daha kolay ve daha hassas bir tıraş için cilt gergin çekerek, ve sıralı 5% iyot ve% 70 etanol scrubs ile maruz kalan cilt dezenfekte. Her iki göze de oftalmik merhem uygulayın. Sonra steril bir bez üzerine hayvan yerleştirin ve herhangi bir idrar toplamak için mesane altına gazlı bez yerleştirin.Deri kesiğinin yerini belirlemek için, L1 omurunu bulmak için son kaburgada parmakları hafifçe bastırın. Bir dönüm noktası olarak bu omur kullanarak ve neşter ile sıkıca bastırırken nazik yayılarak cilt gergin tutarak, kas ortaya çıkarmak için L1 sadece aşağı biten üç ila dört santimetre derili kesi yapmak için bir numara 10 cerrahi bıçak kullanın. Spinous süreçleri hissetmek için forseps ve makas kullanın.Oda fare diş forceps ile bir üst süreç üzerine güvenli bir şekilde kapmak için izin vermek için küçük rostral kesim olun. Ve süreçlere mümkün olduğunca yakın iki uzun, derin kesik yapın. Yerinde lateral kasları güvence altına aldıktan sonra, kafalarının şeklini belirlemek için süreçleri etrafında kas temizleyin.Daha sonra laminektomi bölgesini belirlemek için spinous süreçlerin başlarının şekillerini görselleştirin. T11 ve birebir T12 ve T13 süreçleri laminektomi nin yapıldığı yer olacaktır. Hedef alan doğru bir şekilde tespit edildikten sonra, intervertebral ligamentleri ortaya çıkarmak için omurları yavaşça yayın ve spinöz proseslerin küçük ısırıklarını ve omurların sırt yönüne sahip rongeurs kullanın.Orta hat kan damarı görülebilir böylece orta hat kemik uzak kemik temizleyin, açıkça omurilik dokusu ortaya koyan bir pencere bırakarak ve enkaz ücretsizdir. Daha sonra stabilize forceps spinous süreçleri rostral ve kaudektomi penceresine bir omurilik tutucu hayvan güvenli tutmak için sabitlemek. Ve nefes alma hareketlerinin etkisini inkar etmek için hayvanın karnını kaldırın.Virüsü enjektöre yüklemek için, pipet çözülmüş stokun yaklaşık beş mikrolitresini Parafilm parçasına yerleştirin ve cam iğneleri ucun içinde olacak şekilde yerleştirin. Saniyede 20 ila 100 nanolitre hızla en fazla dört mikrolitre virüs çekmek için mikro pompakullanın ve bloke olmadığından emin olmak için iğne ucundan virüs küçük bir miktar bırakmadan önce enjekte etmek için denetleyici ayarlayın. Herhangi bir fazla virüsü laboratuvar mendille silin ve mikromanipülatörleri yerleştirin, böylece vernier ölçeği görünür.İğneyi omuriliğin orta çizgisine yerleştirin ve iğneyi yanal olarak 0,8 milimetre yönlendirmek için mikromanipülatördeki veronis ölçeğini kullanın. Sonra girintisi kadar omurilik akor için iğne indirin, ama delinme değil, dura, ve iğne ucu 1,5 milimetre derinliğe battı kadar iğne ile dura delmek için hızlı bir büküm hareketi kullanın. İğne yerleştirildikten sonra, enjektörü dakikada 400 nanolitre hızla virüsü teslim etmesi için programlayın ve virüsün boya nın ön kısmındaki ilerlemeyi gözlemleyerek omurilik akoruna girdiğini doğrulayın.Enjeksiyon bittikten sonra, iğnenin virüsün yayılmasını kolaylaştırmak için iki ila beş dakika omurilikte dinlenmesine izin verin, bir sonraki enjeksiyon yerinde konumlandırma için iğneyi yavaşça geri çekmeden önce. Son enjeksiyondan sonra, lateral kas yaymak için kullanılan herhangi bir cihazların kaldırılmasına izin vermek için omurilik tutucu hayvan çıkarın. Sonra bir 4.0 kromik katgut sütür ile kas kapatın ve dokuz milimetrelik yara klipleri ile cilt zımba.Başarılı bir enjeksiyondan dört hafta sonra, yan taraftaki torasik omuriliğin gri maddesi içindeki nöronlarda, enjeksiyona ipsilateral olarak anlamlı GFP ekspresyonu gözlenir. Beyaz maddede, GFP ekspresyonu ipsilateral kordondaki aksonlarda, özellikle propriospinal aksona özgü alanlarda gözlenir. Gri madde nöronların daha yüksek büyütme nöronal hücre organları ve dendritler tipik bir sinyal ekspresyonu bir örnek ortaya koymaktadır.Nöronlarda GFP ekspresyonu da beyin sapı çekirdeklerinde görülebilir, pontin retiküler formasyon gibi. Başarılı bir omurilik enjeksiyonu prosedürü için önemli faktörler doğru vertebral hedefleme ve virüs doku ya giriyor sağlanması eğer bir rostral omurilik yaralanması bu işlemden önce yapılırsa, doğrudan enjeksiyon yaralanma etrafında bağlantıları yeniden nöronlar izlemek için kullanılabilir.

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Anatomy and Physiology

Neuroscience

Unit 1

Functions of the Central and Peripheral Nervous System

SCIENTISTS IN ACTION

A Functional Motor Unit in the Culture Dish: Co-culture of Spinal Cord Explants and Muscle Cells

Kültür Bulaşık A Fonksiyonel Motor Birim: Omurilik Eksplantlarından ve Kas Hücrelerinin Co-kültür

Human primary muscle cells cultured  aneurally in monolayer rarely contract spontaneously because, in the absence of  a nerve component, cell ...

Stereotaxic Injection of a Viral Vector for Conditional Gene Manipulation in the Mouse Spinal Cord

Fare Omurilik Koşullu Gen Manipülasyon için bir Viral Vector Stereotaksik Enjeksiyon

Intraparenchymal injection of a viral vector enables conditional gene manipulation in distinct populations of neurons or particular regions of the central ...

Production of RNA for Transcriptomic Analysis from Mouse Spinal Cord Motor Neuron Cell Bodies by Laser Capture Microdissection

Lazer Yakalama Mikroseksiyonu ile Fare Omurilik Motor Nöron Hücre Gövdelerinden Transkriptomik Analiz için RNA Üretimi

Preparation of high-quality RNA from cells of interest is critical to precise and meaningful analysis of transcriptional differences among cell types or ...

Spinal Cord Transection in the Larval Zebrafish

Larva Zebra balığı Omurilik Kesisi

Mammals fail in sensory and motor recovery following spinal cord injury due to lack of axonal regrowth below the level of injury as well as an inability ...

Diffusion Imaging in the Rat Cervical Spinal Cord

Sıçan Servikal Spinal Kord difüzyon Görüntüleme

Magnetic resonance imaging (MRI) is the state of the art approach for assessing the status of the spinal cord noninvasively, and can be used as a ...

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

Zebra balığı<em&gt; Situ</em&gt; Omurilik Omurilik duyusal ve motor nöronlar gelen Elektrofizyolojik Recordings Hazırlık

Zebrafish, first introduced as a developmental model, have gained popularity in many other fields. The ease of rearing large numbers of rapidly developing ...

Laminectomy and Spinal Cord Window Implantation in the Mouse

Farede Laminektomi ve Omurilik Penceresi İmplantasyonu

This protocol describes a method for spinal cord laminectomy and glass window implantation for in vivo imaging of the mouse spinal cord. An integrated ...

Thoracic Spinal Cord Hemisection Surgery and Open-Field Locomotor Assessment in the Rat

Sıçan içinde torasik omurilik Hemiseksiyon cerrahisi ve açık saha lokomotor değerlendirmesi

Spinal cord injury (SCI) causes disturbances in motor, sensory, and autonomic function below the level of the lesion. Experimental animal models are ...

Intra-Arterial Delivery of Neural Stem Cells to the Rat and Mouse Brain: Application to Cerebral Ischemia

Nöral Kök Hücrelerin Sıçan ve Fare Beynine İntra-Arteriyel Teslimatı: Serebral İskemiye Uygulama

Neural stem cell (NSC) therapy is an emerging innovative treatment for stroke, traumatic brain injury and neurodegenerative disorders. As compared to ...

In Vivo Intracellular Recording of Type-Identified Rat Spinal Motoneurons During Trans-Spinal Direct Current Stimulation

Trans-Spinal Doğrudan Akım Stimülasyonu Sırasında Tip-Tanımlanmış Sıçan Spinal Motoneurons In Vivo Hücre İçi Kayıt

Intracellular recording of spinal motoneurons in vivo provides a &#8220;gold standard&#8221; for determining the cells&#8217; electrophysiological ...