Name: data acquisition and analysis in brainstem evoked response audiometry in mice
Uploaded: 2019-05-10T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Data Acquisition and Analysis In Brainstem Evoked Response Audiometry In Mice at JoVE.com

המחברים רוצים להודות לד ר כריסטינה קולב (המרכז הגרמני למחלות ניווניות [DZNE]) וד ר רוברט סטארק (DZNE) על עזרתם בגידול בעלי חיים ובטיפול רפואי בעלי חיים. עבודה זו היתה נתמכת מבחינה כספית על ידי המכון הפדרלי לתרופות ומכשור רפואי (Bundesinstitut r Arzne, ומדיזיצידוטה, BfArM, בון, גרמניה).

כל הליכי החיות בוצעו על פי ההנחיות של המועצה הגרמנית לטיפול בבעלי חיים וכל הפרוטוקולים אושרו על ידי הוועדה המקומית והמוסד הלאומי לטיפול בבעלי חיים (Landesamt ר ' נאטור, האומה, ורראוצ'רשיץ, מדינה משרד צפון ריין-וסטפאליה, המחלקה לטבע, סביבה וצרכנות (LANUV NRW], גרמניה). המחברים מאשרים עוד כי כל הניסויים...

פרוטוקול זה מספק תיאור מפורט ואינטגרטיבי של איך להקליט את התגובות שמיעתי עורר המוח התגובה בעכברים. זה מציב דגש מיוחד על הטיפול בבעלי חיים, הרדמה, וגורמים מתודולוגיים פוטנציאליים פוטנציאלים. האחרון כולל, בין היתר, מיגדר, קו עכבר, גיל ותנאי דיור. יצוין כי כל הגורמים הללו יכולים להשפיע על אובד...

היבט מרכזי של פיזיולוגיה המוח היא יכולתה לעבד מידע סביבתי וכתוצאה מכך פלט פנימי או חיצוני שונים, כגון למידה, זיכרון, תגובות רגשיות, או תגובות מוטורי. גישות נסיוניות ואבחון שונות ניתן להשתמש כדי לאפיין את התגובה האלקטרולוגית של סוגי תאים עצביים בודדים או אשכולות/הרכבים של נוירונים בתוך מעגלים עצביים הקשורים גירוי. טכניקות האלקטרופיזיולוגיות הללו מכסות מימדים שונים של מידות על המיקרו-, מזו-ו-macroscale1. רמת מיקרוסקאלה כוללת מתח ומלחציים הנוכחית גישות במצבים שונים מלחציים טלאי באמצעות, למשל, תרבותי או בחריפות מאוד נוירונים1. אלה בטכניקות מחוץ לגופית לאפשר אפיון של ישויות נוכחיות הנוכחי ואפנון תרופתי שלהם2,3. חיסרון חיוני, עם זאת, הוא חוסר מידע מערכתי לגבי אינטגרציה מיקרו המעגלים מידע ועיבוד. ליקוי זה הוא להתגבר חלקית על ידי טכניקות מבחנה של מזוקנה, כגון מערכים רב אלקטרודה אשר מאפשרים הקלטות בו multielectrode בו לא רק הנוירונים בתרבית, אלא גם בפרוסות מוח חריפה4, 5. בעוד מיקרופרטירים ניתן לשמור בפרוסות המוח במידה מסוימת (למשל, בהיפוקמפוס), התקשרויות לטווח ארוך בדרך כלל אבדו6. בסופו של דבר, כדי לחקור את הקשרים הפונקציונליים בתוך מכלולים עצביים, מערכתי בטכניקות vivo electroפיסיולוגיים על סולם המקרו הם השיטה של בחירה7. גישות אלה כוללות, בין היתר, משטח (אפידורל) ועמוק (גרם) הקלטות EEG אשר מתבצעות בשני בני אדם ודגמי בעלי חיים1. אותות EEG מבוססים בעיקר על הקלט הסינפטיות מסונכרן על הנוירונים שיניים בשכבות בקליפת המוח שונים שיכולים להיות מעכבות או מרגש בקרן, למרות הדומיננטיות הכללית של קלט מרגש8. לאחר סינכרון, מרגש הפוטנציאל המבוסס על משמרות מבוסס על שדות חשמל החילוץ מסוכם ליצור אות של כוח מספיק כדי להיות מוקלט על הקרקפת באמצעות אלקטרודות משטח. בעיקר, הקלטה הקרקפת לזיהוי מן האלקטרודה היחידה דורשת את הפעילות של 10000 של הנוירונים באמצע הפירמידה ואת הארמנטריום מורכבים של התקנים טכניים וכלי עיבוד, כולל מגבר, מסנן תהליכים (המסנן נמוכה לעבור, מסנן מעבר גבוה, מסנן חריץ) ואלקטרודות עם מאפייני מנצח ספציפיים.
ברוב המינים בעלי החיים הניסיוניים (כלומר, עכברים וחולדות), הגישה האנושית המבוססת על EEG הקרקפת היא טכנית לא ישים, כמו האות שנוצר על ידי קליפת בסיס הוא חלש מדי בשל מספר מוגבל של נוירונים מסונכרנים הפירמידה9, 10,11. ב מכרסמים, פני השטח (קרקפת) אלקטרודות או אלקטרודות תת עורי הם מזוהמים באופן חמור על ידי אלקטרוג ' ובאופן מיידי הממצאים אלקטרו yoגראם שעושים הקלטות EEG באיכות גבוהה בלתי אפשרי9,11, 12. כאשר משתמשים בעכברים הנעים ללא הגבלה בחופשיות וחולדות, ולכן חובה להקליט ישירות מקליפת המוח באמצעות אלקטרודות אפידורל או ממבני הגרם העמוקים כדי להבטיח את החיבור הפיזי הישיר של קצה החישה של אלקטרודה מובילה/מושתל לאשכולות האותות העצביים של תאים. אלה גישות EEG יכול להתבצע או מרסנת קשורה מערכת ההתקנה או באמצעות שימוש בלתי מרסן שולחן רדיו EEG הגישה לגשת9,10,11. שתי הטכניקות יש את היתרונות והחסרונות שלהם והוא יכול להיות גישה רבת ערך באפיון האיכותי והכמותי של התפיסה רגישות/תפיסה של פעילות, מעגלי קצב, אדריכלות שינה, פעילות מנדנוד, וסנכרון, כולל ניתוח תדר זמן, ניתוח מקור, וכו '9,10,13,14,15,16,17.
הואיל ומערכות קשורות וטלמטריה רדיו מאפשרות הקלטות EEG תחת תנאי הרחקה/הרחקה או שאינם מרסמו, בהתאמה, תנאים ניסיוניים קשורים אינם תואמים את הדרישות עבור הקלטות ABR. הביקוש האחרון לגירויים אקוסטיים המוגדרים שוב ושוב לאורך זמן עם עמדות מוגדרות של רמקול ובעלי חיים ניסיוני ורמות לחץ קול מבוקרת (SPLs). זה יכול להיות מושגת על ידי קיבעון הראש תחת תנאי מרסנת או בעקבות הרדמה18,19. כדי להקטין את הלחץ הניסיוני, בעלי חיים מורדם בדרך כלל במהלך הניסויים abr, אבל יש לראות כי הרדמה יכול להפריע עם19ר',20.
כמאפיין כללי, EEG הוא בנוי על תדרים שונים בטווח מתח של 50-100 μV. תדרי רקע והגברה מאוד תלויים במצב הפיזיולוגי של החיה הניסיונית. במצב ער, ביתא (β) ו גמא (γ) תדרים עם משרעת תחתונה לשלוט מראש. כאשר בעלי חיים הופכים מנומנם או נרדם, אלפא (α), תטא (θ), ו דלתא (δ) תדרים להתעורר, מציג הגביר EEG משרעת21. פעם ערוץ חושי (למשל, מסלול אקוסטי) מגורה, הפצת מידע מתווכת באמצעות פעילות עצבית דרך מערכת העצבים ההיקפית והמרכזית. גירוי חושי כזה (למשל, אקוסטי) מעורר תגובות EPs או מעורר תגובה. בעיקר, פוטנציאל הקשורות לאירועים (ERPs) הם הרבה יותר נמוך משרעת מ EEG (כלומר, כמה מיקרוולטים בלבד). כך, כל מערכת ERP בודדת המבוססת על גירוי אחד יאבדו נגד השרעת הגבוהה יותר EEG הרקע. לכן, הקלטה של מערכת ERP דורשת את היישום החוזר של גירויים זהים (למשל, קליקים בהקלטות ABR) והבאים בממוצע כדי לחסל כל פעילות רקע EEG וחפצים. אם הקלטות ABR מתבצעת באמצעות בעלי חיים מורדם, קל להשתמש באלקטרודות תת עורי כאן.
בעיקר, AEPs כוללים EPs השהיה קצר, אשר בדרך כלל קשורים ABRs או הברה, ועוד, מאוחר יותר פוטנציאל התקדמות כגון השהיה EPs (תגובות השהיה [MLR]) ו-EPs השהיה ארוך22. וחשוב מכך, ההפרעה בעיבוד המידע של מידע השמיעה היא לעתים קרובות תכונה מרכזית של מחלות נוירופסיכיאטריות (מחלות מדיאואזיות, סכיזופרניה וכדומה) ומשויכת ל-aep שינויים23,24 ,25. בעוד חקירות התנהגותיות מסוגלים רק חשיפת ליקוי פונקציונלי, מחקרים aep לאפשר ניתוח זמן מדויק של תפקוד שמיעתי הקשורים מבנים נוירואנטומיים ספציפיים26.
ABRs כמו מוקדם, השהיה קצר באופן מהיר מזוהים בדרך כלל על ידי בינוני עד high-אינטנסיבי יישום לחץ, וייתכנו עד שבע פסגות ABRS (WI-wVII). הגלים החשובים ביותר (WI-wV) קשורים המבנים הנוירואנטומיים הבאים: WI לעצב השמיעה (החלק המרוחק, בתוך האוזן הפנימית); WII אל הגרעין של שבלול (החלק האבובי של עצב השמיעה, הפסקת גזע המוח); WIII לקומפלקס האוליארי העליון (SOC); WIV אל הלגול הצדדי (LL); WV כדי להפסיק את הלמנוס לרוחב (LL) בתוך הקולקולוס הנחותים (IC) על הצד השני צלעות27 (איור משלים 1). יצוין כי WII-wV צפויים להיות יותר ממבנה אנטומי אחד של מסלול השמיעה העולה לתרום להם. בעיקר, הקורלציה המדויקת של הפסגות והמבנים הבסיסיים של דרכי השמיעה עדיין לא הובהר במלואו.
ב audiology, ניתן להשתמש ב-abrs ככלי הקרנה ואבחון עבור ניטור כירורגי28,29. זה החשוב ביותר עבור זיהוי של הדיסקוזיס, הhyp, ו אלזיס (למשל, באובדן שמיעה הקשורות לגיל, אובדן רעש המושרה שמיעה, אובדן שמיעה מטבולית ומולדים, ו הפסד אסימטרי שמיעה ושמיעה כתוצאה מומים או מומים, פציעות ונצורות. ABRs גם רלוונטיים כמבחן הקרנה עבור ילדים לקויי היפראקטיבי, מבחינה אינטלקטואלית או עבור ילדים אחרים שלא יוכלו להגיב לaudiometry קונבנציונאלי (למשל, במחלות נוירולוגיות/פסיכיאטריות כגון ADHD, MS, אוטיזם וכו '29 , 30) ו בפיתוח והתאמה כירורגית של שתלים שבלול28. בסופו של דבר, abrs יכול לספק תובנה רבת ערך לתוך תופעות לוואי פוטנציאליות של נוירופסיכופרמצבטיקה, כגון antiepileptics31,32.
הערך של התרגום של ידע נוירולוגי המתקבל מדגמי עכבר תרופתי או טרנסגניים לבני אדם כבר הפגינו הגדרות רבות, במיוחד ברמה של ERPs בתבניות השמיעה של עכברים וחולדות33, 34,35. תובנה חדשה שונה AEPs מוקדם ושינויים משויכים בעיבוד מידע שמיעתי בעכברים וחולדות יכול ובכך להיות מתורגם לבני אדם והוא בחשיבות מרכזית אפיון והקלדה של שמיעתי, נוירולוגי, ו מחלות נוירופסיכיאטריות בעתיד. כאן אנו מספקים תיאור מפורט של כמה ABRs ניתן להקליט וניתח בהצלחה בעכברים עבור מדעי בסיסי, רעילות, ואת המטרות הפרמקולוגית.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>AEP/OAE Software for RZ6 (BioSigRZ software)</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>BioSigRZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Binocular surgical magnification microscope</td>
			<td>Zeiss Stemi 2000</td>
			<td>0000001003877, 4355400000000, 0000001063306, 4170530000000, 4170959255000, 4551820000000, 4170959040000, 4170959050000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cages (Macrolon)</td>
			<td>Techniplast</td>
			<td>1264C, 1290D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprox vet, 50mg/ml</td>
			<td>Virbac Tierarzneimittel GmbH</td>
			<td>PZN 11149509</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cold light source</td>
			<td>Schott KL2500 LCD</td>
			<td>9.705 202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton tip applicators (sterile)</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>EH12.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Custom made meshed metal Faraday cage (stainless steel, 2 mm thickness, 1 cm mesh size)</td>
			<td>custom made</td>
			<td>custom made</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Dexpanthenole (Bepanthen eye and nose creme)</td>
			<td>Bayer Vital GmbH</td>
			<td>PZN: 01578681</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Subdermal stainless steel Needle 
			electrodes, 27GA, 12mm</td>
			<td>Rochester Electro-Medical, Inc.</td>
			<td>S03366-18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drape sheets (sterile)</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>PZN 0366787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 70%</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>9065.5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/4&#39;&#39; Free Field Measure Calibration Mic Kit</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>PCB-378C0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves (sterile)</td>
			<td>Unigloves</td>
			<td>1570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps-curved, serrated</td>
			<td>FST</td>
			<td>11052-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 6 Software, V6.07</td>
			<td>GraphPad Prism Software, Inc.</td>
			<td>https://www.graphpad.com/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat-based surgical instrument sterilizer</td>
			<td>FST</td>
			<td>18000-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic 
			heating blanked</td>
			<td>ThermoLux</td>
			<td>461265 / -67</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketanest S (Ketamine), 25mg/ml</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>PZN 08707288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringer&#8217;s solution (sterile)</td>
			<td>B.Braun</td>
			<td>PZN 01471434</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matlab software</td>
			<td>MathWorks, Inc.</td>
			<td>https://de.mathworks.com/products/matlab.html</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medusa 4-Channel Low Imped. Headstage</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>RA4LI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medusa 4-Channel Pre-Amp/Digitizer</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>RA4PA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microphone</td>
			<td>PCB Pieztronics</td>
			<td>378C01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi Field Speaker- Stereo</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>MF1-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oscilloscope</td>
			<td>Tektronix</td>
			<td>DPO3012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical PC1 express card for Optibit Interface)</td>
			<td>Tucker-Davis Systems (TDT)</td>
			<td>PO5e</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Askina Braucel pads (cellulose absorbet pads)</td>
			<td>B.Braun</td>
			<td>PZN 8473637</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Preamplifier</td>
			<td>PCB Pieztronics</td>
			<td>480C02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RZ6 Multi I/O Processor system (BioSigRZ)</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>RZ6-A-PI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% saline (NaCl, sterile)</td>
			<td>B.Braun</td>
			<td>PZN:8609255</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SigGenRZ software</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>https://www.tdt.com/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software R (version 3.2.1) + Reshape 2 (Version 1.4.1) + ggplot 2 (version 1.0.1) + datatable (version 1.9.4), + gdata (version 2.13.3), + pastecs (version 1.3.18), + waveslim (version 1.7.5), + MassSpecWavelet (version 1.30.0)</td>
			<td>The R Foundation, R Core Team 2015</td>
			<td>Open Source Software (freely distributable)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sound attenuating cubicle</td>
			<td>Med Associates Inc.</td>
			<td>ENV-018V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard Pattern Forceps, 12cm and 14.5 cm length</td>
			<td>FST</td>
			<td>11000-12, 11000-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leukosilk tape</td>
			<td>BSN medical GmbH &#38; Co. KG</td>
			<td>PZN 00397109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Forceps- 1x2 Teeth 12 cm</td>
			<td>FST</td>
			<td>11021-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uniprotect ventilated cabinet</td>
			<td>Bioscape</td>
			<td>THF3378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilated cabinet</td>
			<td>Tecniplast</td>
			<td>9AV125P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (Rompun), 2%</td>
			<td>Bayer Vital GmbH</td>
			<td>PZN 1320422</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

data acquisition and analysis in brainstem evoked response audiometry in mice

גזע המוח מעורר תגובת אודיו (בע) היא בעלת רלוונטיות מרכזית בנוירופיזיולוגיה קלינית. כמו הפוטנציאל הגדול ביותר (EP) טכניקות, כגון פוטנציאל מעורר חזותית (veps) או הפוטנציאל מעורר המגע (seps), הפוטנציאלים מעורר השמיעה (aeps) מופעלות על ידי הצגת חוזר של גירויים זהים, ה (EEG) תגובה המתקבלת בממוצע, וכתוצאה מכך מובחנות חיובית (p) ושלילית (n). בבני אדם, הן השרעת והן את ההשהיה של פסגות בודדות ניתן להשתמש כדי לאפיין שינויים מהירות סנכרון והולכה בתוך המהירות העצבית הבסיסית. וחשוב מכך, aeps מיושמים גם במדע בסיסי פרה לזהות ולאפיין את תפקוד השמיעה במודלים תרופתי וגנטי בעלי חיים. עוד יותר, מודלים בעלי חיים בשילוב עם בדיקות תרופתי מנוצלים כדי לחקור את היתרונות הפוטנציאליים לטיפול באובדן שמיעה בלתי מבוקר (למשל, גיל או רעש המושרה שמיעה). כאן אנו מספקים תיאור מפורט ואינטגרטיבי של כיצד להקליט המוח השמיעה מעורר התגובות (ABRs) בעכברים באמצעות לחץ והטון פרץ יישום. מוקד ספציפי של פרוטוקול זה הוא על הדיור טרום ניסיוני בעלי חיים, הרדמה, ABR הקלטה, ABR תהליכים סינון, אוטומטי אדוה מבוסס משרעת פונקציה הצמיחה ניתוח, וזיהוי השהיה.

לחץ-והטון פרץ הקלטות ABR מעורר ניתן להשתמש כדי להעריך הבדלים הסף שמיעה, משרעת פונקציה הצמיחה, השוואת השהיה. לחץ-עורר ABRs במצב הגדלת SPL מתוארים באיור 1 עבור פקדים ושני שורות העכבר מוטציה למופת אשר לקויה עבור cav3.2 T-סוג מגודרת מתח ca2 + ערוץ (כלומר, cav</...

Watch this Scientific Journal Video about Data Acquisition and Analysis In Brainstem Evoked Response Audiometry In Mice at JoVE.com

Data Acquisition and Analysis In Brainstem Evoked Response Audiometry In Mice

גזע המוח מעורר תגובה audiometry הוא כלי חשוב נוירופיזיולוגיה קלינית. כיום, גזע המוח התגובה עורר מאומטריה הוא גם מיושם במדע הבסיסי מחקרים טרום קלינית מעורבים הן מודלים תרופתי וגנטי בעלי חיים. כאן אנו מספקים תיאור מפורט של איך התגובות שמיעתי גזע המוח ניתן להקליט וניתח בהצלחה בעכברים.

רכישת נתונים וניתוח בברטומטריה תגובה מעורר בעכברים

Brainstem evoked response audiometry (BERA) is of central relevance in the clinical neurophysiology. As other evoked potential (EP) techniques, such as ...

פרוטוקול זה מספק מידע מפורט על איך לתכנן, לבצע ולנתח קליק ופרץ טון עורר תגובות מערכת המוח השמיעתית בעכברים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא מאפשרת אפיון שמיעתי מורכב ומהיר של מודלים של עכברים פרמקולוגיים ומוטנטים. התובנות החדשות על ALT-er-ed מוקדם APP ושינוי הקשורים בעיבוד השמיעה בעכברים וחולדות ניתן לתרגם לבני אדם.לכן, שיטה זו היא בעלת חשיבות מרכזית באפיון ובפנוטיפים של שמיעתיים, נוירולוגיים ומחלות. שיטה זו היא החשובה ביותר לזיהוי של דיסקוסי, hypoacusis ו anacusis. לדוגמה, הקשורות לגיל, מטבולית הנגרמת על ידי רעש, אובדן שמיעה מולד ו aspi-met-acury, כמו גם בגירעונות שמיעה עקב עיוותים או מומים, פציעות neoplasms.משתמשים חדשים בטכניקה, צריכים להקדיש תשומת לב מיוחדת למיקום אלקטרו תקין וכיול טרום ניסיוני של המערכת. הדגמה חזותית של השיטה היא קריטית כדי להמחיש הרדמה, הקלטת ABR, תהליכי סינון ABR ו אוטומטי ABR neur-o-lass-es. התחל בהפניית המגבר הקדם המחובר למיקרופון, לפחות חמש דקות לפני הכיול, כדי לאפשר את שיווי המשקל של המערכת.תדליק את האוסצילוסקופ. לאחר מכן מקם את המיקרופון, המחובר למגבר קדם-מגבר בתוך התא המקלל, כדי לחקות את אוזן המורין הניסיונית. לאחר מכן, פתח את תוכנות העיבוד והרכישה הזמינות מסחרית ותכנת את פרוטוקולי הגירוי עבור הקליקים ופרצים הטון.התחל עם ישות גירוי לחץ כדי ניתוח ולקבוע סף לחץ. ואחריו סימטריית ABR של האוזן השמאלית והימין. משרעת ABR ואיחורים מאוחר יותר.לאחר מכן, השתמש באותה תוכנה כדי לאמת פרוטוקול גירוי פרץ טון באמצעות תוכנת עיצוב גירוי RZ סיג-Gen. ובודק את הגדרות הגירוי, תחת תוכנת רכישת ביו-סיג RZ. תכנת את טווח התדרים המתאים לבדיקה, בהתאם לשאלה המדעית, וודא שטווחי התדרים שיש להחיל עומדים ביכולות הטכניות של הרמקול הקולני.עבור ממוצע, הגדר את מספר גירויים אקוסטיקה רציפה, או קליקים או התפרצויות טון למשל, ב 300 פעמים, עם שיעור של 20 לשנייה; משך ממוצע של 25 אלפיות שנייה ואת גורם ההגברה של קדם מגבר, 20 פעמים. לאחר מכן, אמת את קצב הדגימה המתאים לרכישת נתוני ABR ולאחר מכן העבר מסנן באמצעות מסנן שווה חמאה בן שישה סקרים. הפעל את מסנן מהשורה הראשונה במידת הצורך.הפעל את כיול פרץ הטון על-ידי בחירת קובץ הכיול:CAL200K;בתוך התוכנה, כדי להפעיל את מצב תצורת הכיול. ולבחור היקפים בהתאם לתנאי הניסוי. השתמש במערכת המעבד כדי לבצע את הליך הכיול.ודא כי המפרט הטכני של המיקרופון והרמקול הרועש, במונחים של רמת לחץ קול או מגבלות SPL, טווח התדרים והפצה בהרמוניה. לאחר מכן, בחר והתחל את פרוטוקול גירוי הלחיצה המוגדר מראש. הפעל SPL בלחיצה אחת כדי לוודא כי הספקטרום של גירויים קול מנותח על ידי טרנספורמציה מהירה באינטרנט ארבע-ay של oscilloscope, תואם את הדרישות.בחר והתחל את פרוטוקול גירוי פרץ הטון המוגדר מראש, בטווח של 1 עד 42 קילוהרץ. אשר את ספקטרום התדרים של גירויי הבדיקה האקוסטית המוקלטת, באמצעות אוסצילוסקופ ו- FFT מקוון. לבסוף, השלם את כיול פרץ הטון על-ידי טעינת קובץ הכיול שנוצר לפרוטוקול גירוי פרץ הטון.התחל על ידי הצבת העכבר הרדמה בתוך תא מנחת קול, מרופד קצף אקוסטי. עבור הקלטה של גזע המוח monaural עורר פוטנציאל שמיעתי, להכניס אלקטרודות נירוסטה תת עורי בקודקוד, ביתר של סיכת העין ואת הגחוני-גחוני-גחוני של פינה ימין או שמאל בהתאם לאוזן להימדד. בצד השני, עבור הקלטות binaural, למקם את האלקטרודות השליליות הן הפינה הימנית והשמאלית.מקם את האלקטרודה הקרקעית בירך החיה. לפני הכניסה, טופס צורת וו בקצה האלקטרודה נירוסטה כי הוא קיבעון תת עורי של האלקטרודות מובטחת. וברגע מוכנס, כראוי למקם את rostrum של העכבר 10 ס"מ מול הרמקול הקולני.חבר את כל האלקטרודות לשלב הראש ובדוק את ההימנעות שלהן. לאחר מכן, בצע מדידות בלתי פעילות של כל האלקטרודות, לפני כל הקלטה, כדי לאמת מיקום אלקטרודה נכונה מוליכות. הקלטת ABRs בתנאי שדה פנויים באמצעות רמקול רם יחיד.לבסוף, לבצע ניתוח ABR באמצעות זיהוי סף אוטומטי וניתוח השהיית גל כדי לקבוע פסגות חיוביות וגלים שליליים. כשלב ראשון בניתוח ביצועי שמיעה כלליים, ABRs מעוררי קליקים עבור SPLs שונים, בין אפס ל- 90, נחקרו באמצעות מערכת זיהוי הסף האוטומטית של ABR. שינויים פוטנציאליים ברמות סף ABR שעוררו תדרי פרץ טון שונים נותחו.בקווי העכבר למופת, Cav3.2 פלוס, מינוס ו Cav3.2 מינוס, מינוס הציג קליק מוגבר טון פרץ סף שמיעה הקשורים בהשוואה לפקדים. לבסוף, פונקציית צמיחה משרעת ABR עורר קליק וניתוח השהיית טופס גל ABR בוצעו באמצעות גישה מבוססת גל. זה האחרון מאפשר תובנה על ההשפעה הספציו-זמנית האפשרית של הגן המעניין על עיבוד מידע שמיעתי בתוך האוזן הפנימית ואת גזע המוח.מיקום אלקטרודת ABR נכון במדידה וכיול המערכת של פינה חיוניים לביצוע טכניקה זו. הגישה השמיעתית המוצגת כאן, יכולה לשמש גם בשילוב עם מערכת טלמטריה לניתוח פוטנציאל מורכב, השהיה בינונית ושמיעתית מאוחרת. זה עוזר באפיון ובפנוטיפים של מחלות שמיעתיות, נוירולוגיות ונוירו.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

High Density Event-related Potential  Data Acquisition in Cognitive Neuroscience

צפיפות האירועים הקשורים גבוהה רכישת נתונים פוטנציאלים קוגניטיביים Neuroscience

Functional magnetic resonance imaging (fMRI) is currently the standard method of evaluating brain function in the field of Cognitive Neuroscience, in part ...

Basics of Multivariate Analysis in Neuroimaging Data

היסודות של ניתוח רב משתני של נתונים הדמייה

Multivariate analysis techniques for neuroimaging data have recently received increasing attention as they have many attractive features that cannot be ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

קלטות אלקטרו כפולות של תגובות Astroglial ועצביות עוררו-synaptically בפרוסות ביפוקמפוס חריפות

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

TIRFM and pH-sensitive GFP-probes to Evaluate Neurotransmitter Vesicle Dynamics in SH-SY5Y Neuroblastoma Cells: Cell Imaging and Data Analysis

TIRFM וGFP-בדיקות pH רגיש להערכת נוירוטרנסמיטר שלפוחיות Dynamics בתאי SH-SY5Y נוירובלסטומה: הדמיה נייד וניתוח נתונים

Synaptic vesicles release neurotransmitters at chemical synapses through a dynamic cycle of fusion and retrieval. Monitoring synaptic activity in real ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

שיטה פשוטה וזולה לקביעה קרה רגישות והסתגלות בעכברים

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Electroretinogram Analysis of the Visual Response in Zebrafish Larvae

ניתוח electroretinogram של התגובה החזותית בדג הזברה זחלים

The electroretinogram (ERG) is a noninvasive electrophysiological method for determining retinal function. Through the placement of an electrode on the ...

Auditory Brainstem Response and Outer Hair Cell Whole-cell Patch Clamp Recording in Postnatal Rats

גזע המוח השמיעתית תגובה והקלטה החיצוני תא שיער תיקון שלם-תא קלאמפ בחולדות כמחנכת

The outer hair cell is one of the two types of sensory hair cells in the mammalian cochlea. They alter their cell length with the receptor potential to ...

Cochlear Implant Surgery and Electrically-evoked Auditory Brainstem Response Recordings in C57BL/6 Mice

ניתוח שתל שבלולי והקלטות תגובה חשמלית עורר גזע המוח בעכברים C57BL/6

Cochlear implants (CIs) are neuroprosthetic devices that can provide a sense of hearing to deaf people. However, a CI cannot restore all aspects of ...

Reliable Acquisition of Electroencephalography Data during Simultaneous Electroencephalography and Functional MRI

רכישה אמינה של נתוני אלקטרואנצפלוגרפיה במהלך אלקטרואנצפלוגרפיה סימולטנית ו-MRI פונקציונלי

Simultaneous electroencephalography (EEG) and functional magnetic resonance imaging (fMRI), EEG-fMRI, combines the complementary properties of scalp EEG ...

Acquisition of Resting-State Functional Magnetic Resonance Imaging Data in the Rat

רכישת נתוני הדמיית תהודה מגנטית תפקודית של מצב מנוחה בחולדה

Resting-state functional magnetic resonance imaging (rs-fMRI) has become an increasingly popular method to study brain function in a resting, non-task ...