Name: data acquisition and analysis in brainstem evoked response audiometry in mice
Uploaded: 2019-05-10T14:00:00
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Os autores gostariam de agradecer ao Dr. Christina Kolb (centro alemão de doenças neurodegenerativas [DZNE]) e ao Dr. Robert Stark (DZNE) por sua assistência na criação de animais e na assistência à saúde animal. Este trabalho foi apoiado financeiramente pelo Instituto Federal de medicamentos e dispositivos médicos (Bundesinstitut für Arzneimittel und Medizinprodukte, BfArM, Bonn, Alemanha).

Todos os procedimentos animais foram realizados de acordo com as orientações do Conselho alemão de cuidados com os animais e todos os protocolos foram aprovados pela Comissão institucional e nacional de cuidados com os animais (Landesamt für Natur, Umwelt, und Verbraucherschutz, State Escritório de Renânia do Norte-Vestfália, departamento de natureza, meio ambiente e consumismo [LANUV NRW], Alemanha). Os autores certificam ainda que toda a experimentação animal foi realizada de acordo com o guia nacional de ins...

Este protocolo fornece uma descrição detalhada e Integrativa de como gravar respostas evocadas auditivas do tronco encefálico nos ratos. Coloca o foco específico no pré-tratamento animal, na anestesia, e em fatores de confundimento metodológicos potenciais. Estes últimos incluem, entre outros, sexo, linha do mouse, idade e condições de moradia. Deve-se notar que todos esses fatores podem ter impacto na perda auditiva neurossensorial e aspectos fundamentais do processamento da informação auditiva. Assim, a estr...

Um aspecto central da fisiologia cerebral é sua capacidade de processar informações ambientais, resultando em diferentes saídas intrínsecas ou extrínsecos, como aprendizado, memória, reações emocionais ou respostas motoricas. Várias abordagens experimentais e diagnósticas podem ser usadas para caracterizar a responsividade eletrofisiológica de tipos de células neuronais individuais ou clusters/conjuntos de neurônios dentro de um circuito neuronal relacionado a estímulos. Essas técnicas eletrofisiológicas abrangem diferentes dimensões espaço-temporais no micro, meso-e macrosescala1. O nível da microescala inclui a tensão e as aproximações atuais da braçadeira em modalidades diferentes da remendo-braçadeira usando, por exemplo, os neurônios cultivados ou agudamente dissociados1. Estas técnicas in vitro permitem a caracterização de entidades de corrente individual e sua modulação farmacológica2,3. Uma desvantagem essencial, no entanto, é a falta de informação sistêmica no que diz respeito à integração e ao processamento de informações de micro e macrocircuitos. Este prejuízo é parcialmente superado pelas técnicas in vitro da Mesoscale, tais como matrizes multieletrodos que permitem gravações multieletrodos extracelulares simultâneas não só em neurônios cultivados, mas também em fatias cerebrais agudas4, 5. Considerando que as microcircuitarias podem ser preservadas nas fatias cerebrais em uma extensão específica (por exemplo, no hipocampo), as interconexões de longo alcance são tipicamente perdidas6. Em última análise, para estudar as interconexões funcionais dentro de circuitries neuronais, as técnicas eletrofisiológicas in vivo sistêmicas na macrosescala são o método de escolha7. Estas abordagens incluem, entre outras coisas, a superfície (epidural) e profundas (intracerebral) EEG gravações que são realizadas em ambos os seres humanos e modelos animais1. Os sinais de EEG baseiam-se predominantemente na entrada sináptica sincronizada em neurônios piramidais em diferentes camadas corticais que podem ser inibitórias ou excitatórias no principal, apesar da predominância geral da entrada excitatória8. Em cima da sincronização, os deslocamentos potencial-baseados pós-sináptica excitatórios em campos elétricos extracelular são somados para dar forma a um sinal da força suficiente a ser gravado no escalpe usando elétrodos de superfície. Notavelmente, uma gravação de couro cabeludo detectável de um eletrodo individual requer a atividade de 10000 de neurônios piramidais e um arsenal complexo de dispositivos técnicos e ferramentas de processamento, incluindo um amplificador, processos de filtragem (filtro passa-baixo, filtro passa-alto, filtro de entalhe), e eletrodos com propriedades específicas do condutor.
Na maioria das espécies animais experimentais (ou seja, camundongos e ratos), a abordagem de EEG de couro cabeludo baseada em humanos não é tecnicamente aplicável, pois o sinal gerado pelo córtex subjacente é muito fraco devido ao número limitado de neurônios piramidais sincronizados9, 10,11. Em roedores, eletrodos de superfície (couro cabeludo) ou eletrodos subdérmicos são assim severamente contaminados por eletrocardiograma e artefatos predominantemente eletromiogramas que fazem gravações de EEG de alta qualidade impossíveis9,11, 12. when que usa ratos e ratos livremente moventes não, é conseqüentemente obrigatório gravar diretamente do córtice através dos elétrodos epidural ou das estruturas profundas, intracerebral para assegurar a conexão física direta da ponta de detecção eletrodo de chumbo/implantado para os aglomerados de células neuronais de geração de sinal. Estas aproximações de EEG podem ser executadas em uma instalação tethered de contenção do sistema ou em usar a aproximação implantáveis nonrestringing da telemetriaderádio de EEG9,10,11. Ambas as técnicas têm seus prós e contras e podem ser uma abordagem valiosa na caracterização qualitativa e quantitativa da atividade de susceptibilidade/apreensão convulsiva, ritmicidade circadiana, arquitetura do sono, atividade oscilatória e sincronização, incluindo análise de frequência de tempo, análise de fonte, etc.9,10,13,14,15,16,17.
Considerando que os sistemas amarrados e a telemetria de rádio permitem gravações de EEG circunstâncias de contenção/semirestraining ou nonrestringing, respectivamente, as circunstâncias experimentais relacionadas não combinam as exigências para gravações de ABR. A última demanda por estímulos acústicos definidos que são apresentados repetitivamente ao longo do tempo com posições definidas de um altifalante e de um animal experimental e níveis de pressão sonora controlados (SPLs). Isso pode ser conseguido tanto pela fixação da cabeça condições de restrição ou após a anestesia18,19. Para reduzir o estresse experimental, os animais são normalmente anestesiados durante a experimentação do PEATE, mas deve-se considerar que a anestesia pode interferir na ABRs19,20.
Como uma característica geral, o EEG é construído de freqüências diferentes em uma escala da tensão de 50-100 μV. frequências de fundo e amplitudes dependem fortemente do estado fisiológico do animal experimental. No estado acordado, predominam as frequências beta (β) e gama (γ) com menor amplitude. Quando os animais se tornam sonolento ou adormecem, surgem frequências alfa (α), (θ) e Delta (δ), exibindo aumento da amplitude do EEG21. Uma vez que um canal sensorial (por exemplo, a via acústica) é estimulado, a propagação da informação é mediada através da atividade neuronal através do sistema nervoso periférico e central. Tal estimulação sensorial (por exemplo, acústica) aciona os chamados EPs ou respostas evocadas. Notavelmente, os potenciais relacionados a eventos (ERPs) são muito mais baixos em amplitude do que o EEG (ou seja, apenas alguns microvolts). Assim, todo o ERP individual baseado em um único estímulo seria perdido de encontro ao fundo do EEG da elevado-amplitude. Portanto, uma gravação de um ERP requer a aplicação repetitiva de estímulos idênticos (por exemplo, cliques em gravações ABR) e a média subsequente para eliminar qualquer atividade de fundo EEG e artefatos. Se as gravações de ABR são feitas em animais anestesiados, é fácil usar eletrodos subdérmicos aqui.
Principalmente, os AEPs incluem EPs de curta latência, que normalmente estão relacionados a ABRs ou BERA, e ainda mais, potenciais de início tardio, como EPs de midlatência (respostas de midlatência [MLR]) e EPs22de longa latência. É importante ressaltar que o distúrbio no processamento de informações da informação auditiva é, muitas vezes, uma característica central das doenças neuropsiquiátricas (doenças desmielinizantes, esquizofrenia, etc.) e associada às alterações da AEP23,24 ,25. Considerando que as investigações comportamentais só são capazes de revelar comprometimento funcional, os estudos de AEP permitem uma análise espaciotemporal precisa da disfunção auditiva relacionada a estruturas neuroanatômicas específicas26.
ABRs como cedo, a curto-latência de EPs acusticamente são normalmente detectados após moderada a alta-intensa aplicação clique, e pode ocorrer até sete picos ABR (WI-wVII). As ondas mais importantes (Wi-wV) estão relacionadas às seguintes estruturas neuroanatômicas: wi ao nervo auditivo (porção distal, dentro da orelha interna); WII ao núcleo coclear (porção proximal do nervo auditivo, terminação do tronco encefálico); WIII ao complexo Olivar superior (SOC); WIV ao lemnisco lateral (ll); WV à terminação do lemnisco lateral (ll) dentro do colículo inferior (CI) no lado contralateral27 (Figura complementar 1). Deve-se notar que WII-wV são susceptíveis de ter mais de uma estrutura anatômica da via auditiva ascendente contribuindo para eles. Notavelmente, a correlação exata de picos e estruturas subjacentes do trato auditivo ainda não está totalmente esclarecida.
Na Audiologia, a ABRs pode ser utilizada como ferramenta de triagem e diagnóstico e para o monitoramento cirúrgico28,29. É mais importante para a identificação de Disacusia, hypacusis e anacusia (por exemplo, na perda auditiva relacionada à idade, perda auditiva induzida por ruído, perda auditiva metabólica e congênita, perda auditiva assimétrica e déficits auditivos devido a deformidades ou malformações, lesões e neoplasias)28. As ABRs também são relevantes como um teste de triagem para crianças hiperativas, intelectualmente deficientes ou para outras crianças que não seriam capazes de responder à audiometria convencional (por exemplo, em doenças neurológicas/psiquiátricas como ADHD, MS, autismo etc.29 , 30) e no desenvolvimento e montagem cirúrgica de implantes cocleares28. Finalmente, os ABRs podem fornecer insights valiosos sobre os potenciais efeitos colaterais ototóxicos de neuropsicofármacos, como antiepilépticos31,32.
O valor da tradução do conhecimento neurofisiológico obtido a partir de modelos farmacológicos ou transgênicos para o ser humano tem sido demonstrado em inúmeros ajustes, particularmente no nível de ERPs em paradigmas auditivos em camundongos e ratos33, 34,35. Novas percepções sobre os AEPs precoces alterados e as alterações associadas no processamento da informação auditiva em camundongos e ratos podem, assim, ser traduzidas para os seres humanos e é de importância central na caracterização e endofenotipagem de auditivo, neurológico e doenças neuropsiquiátricas no futuro. Aqui nós fornecemos uma descrição detalhada de como os ABRs podem com sucesso ser gravados e analisados nos ratos para finalidades científicas, toxicológicas, e farmacológicas básicas.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>AEP/OAE Software for RZ6 (BioSigRZ software)</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>BioSigRZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Binocular surgical magnification microscope</td>
			<td>Zeiss Stemi 2000</td>
			<td>0000001003877, 4355400000000, 0000001063306, 4170530000000, 4170959255000, 4551820000000, 4170959040000, 4170959050000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cages (Macrolon)</td>
			<td>Techniplast</td>
			<td>1264C, 1290D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprox vet, 50mg/ml</td>
			<td>Virbac Tierarzneimittel GmbH</td>
			<td>PZN 11149509</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cold light source</td>
			<td>Schott KL2500 LCD</td>
			<td>9.705 202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton tip applicators (sterile)</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>EH12.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Custom made meshed metal Faraday cage (stainless steel, 2 mm thickness, 1 cm mesh size)</td>
			<td>custom made</td>
			<td>custom made</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Dexpanthenole (Bepanthen eye and nose creme)</td>
			<td>Bayer Vital GmbH</td>
			<td>PZN: 01578681</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Subdermal stainless steel Needle 
			electrodes, 27GA, 12mm</td>
			<td>Rochester Electro-Medical, Inc.</td>
			<td>S03366-18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drape sheets (sterile)</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>PZN 0366787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 70%</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>9065.5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/4&#39;&#39; Free Field Measure Calibration Mic Kit</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>PCB-378C0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves (sterile)</td>
			<td>Unigloves</td>
			<td>1570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps-curved, serrated</td>
			<td>FST</td>
			<td>11052-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 6 Software, V6.07</td>
			<td>GraphPad Prism Software, Inc.</td>
			<td>https://www.graphpad.com/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat-based surgical instrument sterilizer</td>
			<td>FST</td>
			<td>18000-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic 
			heating blanked</td>
			<td>ThermoLux</td>
			<td>461265 / -67</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketanest S (Ketamine), 25mg/ml</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>PZN 08707288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringer&#8217;s solution (sterile)</td>
			<td>B.Braun</td>
			<td>PZN 01471434</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matlab software</td>
			<td>MathWorks, Inc.</td>
			<td>https://de.mathworks.com/products/matlab.html</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medusa 4-Channel Low Imped. Headstage</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>RA4LI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medusa 4-Channel Pre-Amp/Digitizer</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>RA4PA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microphone</td>
			<td>PCB Pieztronics</td>
			<td>378C01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi Field Speaker- Stereo</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>MF1-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oscilloscope</td>
			<td>Tektronix</td>
			<td>DPO3012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical PC1 express card for Optibit Interface)</td>
			<td>Tucker-Davis Systems (TDT)</td>
			<td>PO5e</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Askina Braucel pads (cellulose absorbet pads)</td>
			<td>B.Braun</td>
			<td>PZN 8473637</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Preamplifier</td>
			<td>PCB Pieztronics</td>
			<td>480C02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RZ6 Multi I/O Processor system (BioSigRZ)</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>RZ6-A-PI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% saline (NaCl, sterile)</td>
			<td>B.Braun</td>
			<td>PZN:8609255</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SigGenRZ software</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>https://www.tdt.com/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software R (version 3.2.1) + Reshape 2 (Version 1.4.1) + ggplot 2 (version 1.0.1) + datatable (version 1.9.4), + gdata (version 2.13.3), + pastecs (version 1.3.18), + waveslim (version 1.7.5), + MassSpecWavelet (version 1.30.0)</td>
			<td>The R Foundation, R Core Team 2015</td>
			<td>Open Source Software (freely distributable)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sound attenuating cubicle</td>
			<td>Med Associates Inc.</td>
			<td>ENV-018V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard Pattern Forceps, 12cm and 14.5 cm length</td>
			<td>FST</td>
			<td>11000-12, 11000-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leukosilk tape</td>
			<td>BSN medical GmbH &#38; Co. KG</td>
			<td>PZN 00397109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Forceps- 1x2 Teeth 12 cm</td>
			<td>FST</td>
			<td>11021-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uniprotect ventilated cabinet</td>
			<td>Bioscape</td>
			<td>THF3378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilated cabinet</td>
			<td>Tecniplast</td>
			<td>9AV125P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (Rompun), 2%</td>
			<td>Bayer Vital GmbH</td>
			<td>PZN 1320422</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

data acquisition and analysis in brainstem evoked response audiometry in mice

A audiometria evocada da resposta do brainstem (BERA) é da relevância central na neurofisiologia clínica. Como outras técnicas de potencial evocado (EP), tais como potenciais evocados visualmente (VEPs) ou potenciais evocados somatossensoriais (SEPs), os potenciais evocado auditivos (AEPs) são desencadeados pela apresentação repetitiva de estímulos idênticos, o a resposta electroencephalographic (EEG) de que é calculada subseqüentemente a média tendo por resultado as deflexões positivas (p) e negativas (n) distintas. Nos seres humanos, tanto a amplitude quanto a latência de picos individuais podem ser utilizadas para caracterizar alterações na velocidade de sincronização e condução nos circuitries neuronais subjacentes. É importante ressaltar que os AEPs também são aplicados na ciência básica e pré-clínica para identificar e caracterizar a função auditiva em modelos animais farmacológicos e genéticos. Ainda mais, modelos animais em combinação com testes farmacológicos são utilizados para investigar possíveis benefícios no tratamento da perda auditiva neurossensorial (por exemplo, déficits auditivos induzidos por idade ou ruído). Aqui nós fornecemos uma descrição detalhada e Integrativa de como gravar auditivo brainstem-evocado respostas (ABRs) em camundongos usando clique e Tone-Burst aplicação. Um foco específico deste protocolo está em habitação animal pré-experimental, anestesia, gravação ABR, processos de filtragem de ABR, análise de função de crescimento de amplitude baseada em wavelet automatizada e detecção de latência.

As gravações de ABR evocadas por estouro de clique e Tom podem ser usadas para avaliar diferenças de limiar auditivo, função de crescimento de amplitude e comparação de latência. Os ABRs Click-evoked no modo crescente SPL são representados na Figura 1 para controles e duas linhas de mouse exemplares mutantes que são deficientes para o cav3,2 T-tipo tensão-gated CA2 + Channel (i.e., CAv3,2+/- e CA v</...

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Data Acquisition and Analysis In Brainstem Evoked Response Audiometry In Mice

A audiometria evocada da resposta do brainstem é uma ferramenta importante na neurofisiologia clínica. Atualmente, a audiometria de resposta evocada do tronco encefálico também é aplicada na ciência básica e nos estudos pré-clínicos envolvendo modelos animais farmacológicos e genéticos. Aqui nós fornecemos uma descrição detalhada de como as respostas auditivas do tronco encefálico podem com sucesso ser gravadas e analisadas nos ratos.

Aquisição e análise de dados na audiometria de resposta evocada de tronco encefálico em camundongos

Brainstem evoked response audiometry (BERA) is of central relevance in the clinical neurophysiology. As other evoked potential (EP) techniques, such as ...

Este protocolo fornece informações detalhadas sobre como planejar, realizar e analisar respostas de brainstem auditivas em camundongos. A principal vantagem dessa técnica é que ela permite um perfil auditivo complexo e rápido de modelos de camundongos farmacológicos e mutantes. Os novos insights sobre o APP inicial alt-er-ed e a mudança associada no processamento auditivo em camundongos e ratos podem ser traduzidos para humanos.Portanto, esse método é de importância central na caracterização e fenotipagem de doenças auditivas, neurológicas e. Este método é mais importante para a identificação de disacusia, hipoacusia e anacusis. Por exemplo, na perda auditiva metabólica, congênita e aspi-met-acury, por exemplo, em déficits auditivos devido a deformidades ou malformações, lesões e neoplasias.Os usuários novos na técnica devem prestar atenção especial à adequada eletro-colocação e calibração pré-experimental do sistema. A demonstração visual do método é fundamental para ilustrar anestesia, gravação de ABR, processos de filtragem ABR e neur-o-lass-es automatizados. Comece ligando o pré-amplificador conectado ao microfone, pelo menos cinco minutos antes da calibração, para permitir o equilíbrio do sistema.Ligue o osciloscópio. Em seguida, posicione o microfone, conectado a um pré-amplificador dentro do cubical atenuante do som, para imitar o ouvido murino experimental. Em seguida, abra os softwares de processamento e aquisição disponíveis comercialmente e programe os protocolos de estímulo para os cliques e estouros de tom.Comece com a entidade de estímulo ao clique para analisar e determinar os limiares de clique. Seguido pela simetria ABR da orelha esquerda e direita. E amplitudes e latências ABR mais tardes mais tarde.Em seguida, use o mesmo software para verificar o protocolo de estimulação de explosão de tom usando o software de design de estímulo Sig-Gen RZ. E verifica as configurações de estímulo, sob o software de aquisição Bio-Sig RZ. Programe a faixa de frequência apropriada a ser testada, dependendo da questão científica, e certifique-se de que as faixas de frequência a serem aplicadas atendam às capacidades técnicas do alto-falante.Para a média, defina o número de estímulos acústicos sequenciais, cliques ou rajadas de tom, por exemplo, em 300 vezes, com uma taxa de 20 por segundo; uma duração média de 25 milissegundos e o fator de amplificação do pré-amplificador, 20 vezes. Em seguida, verifique a taxa de amostragem apropriada para aquisição de dados ABR e, em seguida, passe filtro usando um filtro de seis pesquisas de manteiga. Ative o filtro de entalhe, se necessário.Inicie a calibração da explosão de tom selecionando o arquivo calibração:CAL200K;dentro do software, para ativar o modo de configuração de calibração. E escolha perímetros de acordo com as condições experimentais. Use o sistema do processador para executar o procedimento de calibração.Certifique-se de que as especificações técnicas do microfone e alto-falante, em termos de nível de pressão sonora ou limites de SPL, faixa de frequência e distribuição se harmonizam. Em seguida, selecione e inicie o protocolo de estimulação de cliques pré-definido. Execute um SPL de um único clique para verificar se o espectro de estímulos sonoros é analisado pela transformação rápida e rápida do osciloscópio, corresponde aos requisitos.Selecione e inicie o protocolo de estimulação de explosão de tom pré-definido, dentro da faixa de um a 42 kilohertz. Confirme o espectro de frequência dos estímulos de teste acústico registrados, usando um osciloscópio e FFT on-line. Finalmente, complete a calibração da explosão de tom carregando o arquivo de calibração criado para o protocolo de estímulo de explosão de tom.Comece colocando o mouse anestesiado dentro de um cubículo atenuante de som, forrado com espuma acústica. Para o registro do tronco cerebral monaural evocava potenciais auditivos, insira eletrodos sub dérmicos de aço inoxidável no vértice, axial do olho-pino e ventral-lateral do pinão direito ou esquerdo, dependendo da orelha a ser medida. Na outra ponta, para gravações binaurais, coloque os eletrodos negativos tanto na pina direita quanto na esquerda.Posicione o eletrodo moído no quadril do animal. Antes da inserção, forme uma forma de gancho na ponta do eletrodo de aço inoxidável que é a fixação sub-dérmica dos eletrodos. E uma vez inserido, coloque corretamente o rostrum do mouse 10 centímetros oposto ao alto-falante.Conecte todos os eletrodos ao estágio da cabeça e verifique se há impedância. Em seguida, realize medições de impedância de todos os eletrodos, antes de cada gravação, para verificar o posicionamento e condutividade adequados do eletrodo. Grave ABRs em condições de campo livre usando um único alto-falante alto.Finalmente, realize a análise de ABR através de detecção automatizada de limiares e análise de latência de ondas para determinar picos positivos e ondas negativas. Como primeiro passo na análise do desempenho geral da audição, foram investigadas as ABRs evocadas por cliques para diferentes SPLs, entre zero e 90, utilizando o sistema automatizado de detecção de limiares ABR. Foram analisadas alterações potenciais nos níveis de limiar de ABR evocados por diferentes frequências de estouro de tom.Nas linhas exemplares do mouse, Cav3.2 plus, menos e Cav3.2 menos, menos exibidos aumento de limiares auditivos relacionados ao clique e ao tom em comparação com os controles. Por fim, a função de crescimento de amplitude ABR evocada por cliques e a análise de latência da forma de onda ABR foram realizadas por meio da abordagem baseada em ondas. Este último permite uma visão da possível influência spacio-temporal do gene de interesse no processamento de informações auditivas dentro do ouvido interno e do tronco cerebral.A colocação adequada do eletrodo ABR na medição e calibração do sistema do Pinna são essenciais para a realização desta técnica. A abordagem auditiva aqui apresentada, também pode ser utilizada em combinação com um sistema de telemetria para analisar potenciais complexos, de latência média e auditiva tardia. Isso ajuda na caracterização e no fenotipagem de doenças auditivas, neurológicas e neurológicas.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

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Aquisição confiável de dados de eletroencefalografia durante eletroencefalografia simultânea e ressonância magnética funcional

Simultaneous electroencephalography (EEG) and functional magnetic resonance imaging (fMRI), EEG-fMRI, combines the complementary properties of scalp EEG ...

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Resting-state functional magnetic resonance imaging (rs-fMRI) has become an increasingly popular method to study brain function in a resting, non-task ...