Name: data acquisition and analysis in brainstem evoked response audiometry in mice
Uploaded: 2019-05-10T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Data Acquisition and Analysis In Brainstem Evoked Response Audiometry In Mice at JoVE.com

Författarna vill tacka Dr Christina Kolb (tyska centrum för neurodegenerativa sjukdomar [DZNE]) och Dr Robert stark (DZNE) för deras hjälp i djuruppfödning och djur hälsovård. Detta arbete stöddes finansiellt av det federala institutet för droger och medicintekniska produkter (Bundesinstitut für Arzneimittel und Medizinprodukte, BfArM, Bonn, Tyskland).

Alla djurförsök utfördes enligt riktlinjerna från det tyska rådet för djuromsorg och alla protokoll godkändes av den lokala institutionella och nationella kommittén för djuromsorg (Landesamt für natur, Umwelt, und Verbraucherschutz, State Kontoret för Nordrhein-Westfalen, Institutionen för natur, miljö och konsumism [LANUV NRW], Tyskland). Författarna intygar vidare att alla djur experiment utfördes i enlighet med National Institutes of Health Guide för vård och användning av försöksdjur (NIH publicat...

Detta protokoll ger en detaljerad och integrativ Beskrivning av hur man spelar in auditiv framkallade hjärnstammen svar på möss. Det sätter särskild fokus på djur förbehandling, anestesi, och potentiella metodologiska confounding faktorer. Den senare omfattar bland annat kön, mus linje, ålder och boendeförhållanden. Det bör noteras att alla dessa faktorer kan påverka sensorineural nedsättning hörselnedsättning och grundläggande aspekter av auditiv informationsbehandling. Därför är lämplig stratifieri...

En central aspekt av hjärnans fysiologi är dess förmåga att bearbeta miljöinformation som resulterar i olika inneboende eller extrinsic produktion, såsom inlärning, minne, känslomässiga reaktioner, eller motoriska svar. Olika experimentella och diagnostiska metoder kan användas för att karakterisera den elektrofysiologiska lyhördhet av enskilda neuronala celltyper eller kluster/ensembler av nervceller inom en stimulans-relaterade neuronala kretsar. Dessa elektrofysiologiska tekniker täcker olika spatiotemporal dimensioner på mikro-, meso-och makro1. Den mikroanalys nivå omfattar spänning och ström klämma närmar sig i olika patch-Clamp lägen med, till exempel, odlade eller akut dissocierade nervceller1. Dessa in vitro-tekniker möjliggör karakterisering av enskilda nuvarande enheter och deras farmakologiska modulering2,3. En viktig nackdel är dock avsaknaden av systemisk information när det gäller mikro-och macrocircuitry-integrering och bearbetning av information. Denna försämring är delvis övervinnas genom in vitro-tekniker av mesoscale, såsom multielektrod arrayer som möjliggör samtidig extracellulära multielektrod inspelningar inte bara i odlade nervceller utan också i akuta hjärn skivor4, 5. mikrocirriteter kan bevaras i hjärn skivorna till en viss grad (t. ex. i hippocampus), långväga sammanlänkningar är typiskt förlorade6. I slutändan, för att studera de funktionella sammanlänkningar inom neuronala circuitries, systemisk in vivo elektrofysiologiska tekniker på makro är metoden för val7. Dessa metoder omfattar bland annat yta (epidural) och djupa (intracerebral) EEG-inspelningar som utförs i både människor och djurmodeller1. EEG-signaler är huvudsakligen baserade på den synkroniserade synaptiska ingången på pyramidala nervceller i olika kortikala skikt som kan vara hämmande eller excitatoriska i huvudmannen, trots den allmänna dominans av excitatoriska ingång8. Vid synkronisering, excitatoriska postsynaptiska potentialbaserade Skift i extracellulära elektriska fält summeras för att bilda en signal av tillräcklig styrka för att registreras i hårbotten med hjälp av ytan elektroder. Särskilt, en detekterbar hårbotten inspelning från en enskild elektrod kräver aktivitet av 10000 pyramidala nervceller och en komplex i av tekniska enheter och verktyg för bearbetning, inklusive en förstärkare, filtrering processer (lågpassfilter, högpassfilter, notch-filter) och elektroder med specifika ledaregenskaper.
I de flesta experimentella djurarter (dvs möss och råttor), den Human-baserade hårbotten EEG-metoden är tekniskt inte tillämplig, eftersom signalen som genereras av den underliggande cortex är för svag på grund av det begränsade antalet synkroniserade pyramidala nervceller9, 10,11. I gnagare, är ytan (hårbotten) elektroder eller subdermala elektroder således allvarligt förorenade av elektrokardiogram och huvudsakligen Elektromyogram artefakter som gör högkvalitativa EEG inspelningar omöjliga9,11, 12. När du använder tre fritt rörliga möss och råttor, är det därför obligatoriskt att direkt registrera antingen från cortex via epidural elektroder eller från den djupa, intracerebral strukturer för att säkerställa direkt fysisk anslutning av Avkännings spetsen av bly/implanterade elektroden till de signalgenererande neuronala cell klustren. Dessa EEG-metoder kan utföras antingen i en begränsande uppbundna systeminstallation eller genom att använda det icke-begränsande implanerbara EEG-radiotelemetrimetoden9,10,11. Båda teknikerna har sina för-och nackdelar och kan vara en värdefull metod i kvalitativ och kvantitativ karakterisering av kramp känslighet/krampanfall aktivitet, dygnsrytm rytmicitet, sömn arkitektur, oscillerande aktivitet, och synkronisering, inklusive tidsfrekvens analys, käll analys, etc.9,10,13,14,15,16,17.
Medan uppbundna system och radio telemetri möjliggör EEG-inspelningar under fasthållnings-/halvspänningeller icke-begränsande förhållanden matchar inte relaterade Försöksförhållanden kraven för ABR-inspelningar. Den senare efterfrågan på definierade akustiska stimuli som presenteras upprepande över tiden med definierade positioner av en högtalare och experimentella djur och kontrollerade ljudtrycksnivåer (SPLs). Detta kan uppnås endera vid Head fixering under att hindra villkorar eller efter anestesi18,19. För att minska den experimentella stressen, är djur normalt sövda under ABR experiment, men det bör övervägas att anestesi kan störa ABRs19,20.
Som en allmän egenskap, är EEG byggs upp av olika frekvenser i ett spänningsområde av 50-100 μV. bakgrunds frekvenser och amplituder beror starkt på det fysiologiska tillståndet hos försöksdjuret. I vakna tillstånd, beta (β) och gamma (γ) frekvenser med lägre amplitud dominerar. När djuren blir dåsig eller somna, alfa (α), theta (θ), och delta (δ) frekvenser uppstår, uppvisar ökad EEG amplitud21. När en sensorisk kanal (t. ex. den akustiska vägen) stimuleras, förmedlas informationsspridningen via neuronala aktivitet genom perifera och centralanervsystemet. Sådan sensorisk (t. ex. akustisk) stimulering utlöser så kallade EPs-eller framkallat svar. Särskilt, händelserelaterade potentialer (ERPs) är mycket lägre i amplitud än EEG (dvs, några mikrovolt endast). Således skulle varje enskilt ERP baserat på en enda stimulans förloras mot den högre amplitud EEG bakgrund. Därför kräver en inspelning av ett ERP repetitiv tillämpning av identiska stimuli (t. ex. klick i ABR-inspelningar) och efterföljande medelvärde för att eliminera alla EEG-bakgrundsaktiviteter och artefakter. Om ABR inspelningar görs i sövda djur, är det lätt att använda subdermala elektroder här.
I huvudsak inkluderar AEPs korta svarstider EPs, som normalt är relaterade till ABRs eller BERA, och ytterligare, senare debut potentialer såsom midlatency EPs (midlatens svar [MLR]) och lång latens EPs22. Viktigt är att störningar i informationsbehandlingen av hörsel informationen ofta är ett centralt inslag i neuropsykiatriska sjukdomar (demyelinierande sjukdomar, schizofreni etc.) och förknippade med AEP-förändringar23,24 ,25. Medan beteendemässiga utredningar är endast kapabla att avslöja funktionella nedskrivningar, AEP studier möjliggör exakt spatiotemporal analys av hörsel dysfunktion i samband med specifika neuroanatomiska strukturer26.
ABR så tidigt, kort latens akustiskt EPs upptäcks normalt vid måttlig till högintensiva klick program, och det kan förekomma upp till sju ABR toppar (WI-WVII). De viktigaste vågorna (Wi-wV) är relaterade till följande neuroanatomiska strukturer: Wi till hörselnerven (distala delen, inom innerörat); WII till Cochlear Nucleus (proximala delen av hörselnerven, hjärnstammen uppsägning); WIII till den överlägsna olivary Complex (SOC); WIV till den laterala lemniscus (ll); WV till uppsägning av den laterala lemniscus (ll) inom sämre COLLICULUS (IC) på kontralaterala sidan27 (kompletterande figur 1). Det bör noteras att WII-wV sannolikt kommer att ha mer än en anatomisk struktur i den stigande hörsel väg som bidrar till dem. I synnerhet är den exakta korrelationen mellan toppar och underliggande strukturer i hörsel-tarmkanalen fortfarande inte helt klarlagd.
I audiologi, ABRs kan användas som ett screening-och diagnostiskt verktyg och för kirurgisk övervakning28,29. Det är viktigast för identifieringen av dysacusis, hypacusis och anacusis (t. ex. i åldersrelaterade hörselnedsättning, Bullerorsakad hörselnedsättning, metabolisk och medfödd hörselnedsättning, och asymmetrisk hörselnedsättning och hörselnedsättningar på grund av missbildningar eller missbildningar, skador och neoplasmer)28. ABR är också relevanta som ett screeningtest för hyperaktiva, intellektuellt nedsatt barn eller för andra barn som inte skulle kunna reagera på konventionell audiometri (t. ex. vid neurologiska/psykiatriska sjukdomar som ADHD, MS, autism etc.29 , 30) och i utveckling och kirurgisk montering av cochleaimplantat28. Slutligen, ABR kan ge värdefull insikt i de potentiella ototoxiska biverkningar av neuropsykofarmaka, såsom antiepileptika31,32.
Värdet av översättningen av neurofysiologisk kunskap som erhållits från farmakologiska eller transgena musmodeller till människor har visats i många inställningar, särskilt på nivån av ERPs i auditiva paradigm hos möss och råttor33, 34,35. Ny insikt i förändrade tidiga AEPs och tillhörande förändringar i auditiv informationsbehandling hos möss och råttor kan således översättas till människor och är av central betydelse för karakterisering och endofenotypning av hörsel-, neurologiska-och neuropsykiatriska sjukdomar i framtiden. Här ger vi en detaljerad beskrivning av hur ABR kan registreras och analyseras på möss för grundläggande vetenskapliga, toxikologiska och farmakologiska ändamål.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>AEP/OAE Software for RZ6 (BioSigRZ software)</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>BioSigRZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Binocular surgical magnification microscope</td>
			<td>Zeiss Stemi 2000</td>
			<td>0000001003877, 4355400000000, 0000001063306, 4170530000000, 4170959255000, 4551820000000, 4170959040000, 4170959050000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cages (Macrolon)</td>
			<td>Techniplast</td>
			<td>1264C, 1290D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprox vet, 50mg/ml</td>
			<td>Virbac Tierarzneimittel GmbH</td>
			<td>PZN 11149509</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cold light source</td>
			<td>Schott KL2500 LCD</td>
			<td>9.705 202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton tip applicators (sterile)</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>EH12.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Custom made meshed metal Faraday cage (stainless steel, 2 mm thickness, 1 cm mesh size)</td>
			<td>custom made</td>
			<td>custom made</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Dexpanthenole (Bepanthen eye and nose creme)</td>
			<td>Bayer Vital GmbH</td>
			<td>PZN: 01578681</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Subdermal stainless steel Needle 
			electrodes, 27GA, 12mm</td>
			<td>Rochester Electro-Medical, Inc.</td>
			<td>S03366-18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drape sheets (sterile)</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>PZN 0366787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 70%</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>9065.5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/4&#39;&#39; Free Field Measure Calibration Mic Kit</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>PCB-378C0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves (sterile)</td>
			<td>Unigloves</td>
			<td>1570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps-curved, serrated</td>
			<td>FST</td>
			<td>11052-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 6 Software, V6.07</td>
			<td>GraphPad Prism Software, Inc.</td>
			<td>https://www.graphpad.com/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat-based surgical instrument sterilizer</td>
			<td>FST</td>
			<td>18000-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic 
			heating blanked</td>
			<td>ThermoLux</td>
			<td>461265 / -67</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketanest S (Ketamine), 25mg/ml</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>PZN 08707288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringer&#8217;s solution (sterile)</td>
			<td>B.Braun</td>
			<td>PZN 01471434</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matlab software</td>
			<td>MathWorks, Inc.</td>
			<td>https://de.mathworks.com/products/matlab.html</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medusa 4-Channel Low Imped. Headstage</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>RA4LI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medusa 4-Channel Pre-Amp/Digitizer</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>RA4PA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microphone</td>
			<td>PCB Pieztronics</td>
			<td>378C01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi Field Speaker- Stereo</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>MF1-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oscilloscope</td>
			<td>Tektronix</td>
			<td>DPO3012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical PC1 express card for Optibit Interface)</td>
			<td>Tucker-Davis Systems (TDT)</td>
			<td>PO5e</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Askina Braucel pads (cellulose absorbet pads)</td>
			<td>B.Braun</td>
			<td>PZN 8473637</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Preamplifier</td>
			<td>PCB Pieztronics</td>
			<td>480C02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RZ6 Multi I/O Processor system (BioSigRZ)</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>RZ6-A-PI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% saline (NaCl, sterile)</td>
			<td>B.Braun</td>
			<td>PZN:8609255</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SigGenRZ software</td>
			<td>Tucker-Davis Technologies (TDT)</td>
			<td>https://www.tdt.com/</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software R (version 3.2.1) + Reshape 2 (Version 1.4.1) + ggplot 2 (version 1.0.1) + datatable (version 1.9.4), + gdata (version 2.13.3), + pastecs (version 1.3.18), + waveslim (version 1.7.5), + MassSpecWavelet (version 1.30.0)</td>
			<td>The R Foundation, R Core Team 2015</td>
			<td>Open Source Software (freely distributable)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sound attenuating cubicle</td>
			<td>Med Associates Inc.</td>
			<td>ENV-018V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard Pattern Forceps, 12cm and 14.5 cm length</td>
			<td>FST</td>
			<td>11000-12, 11000-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leukosilk tape</td>
			<td>BSN medical GmbH &#38; Co. KG</td>
			<td>PZN 00397109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Forceps- 1x2 Teeth 12 cm</td>
			<td>FST</td>
			<td>11021-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uniprotect ventilated cabinet</td>
			<td>Bioscape</td>
			<td>THF3378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilated cabinet</td>
			<td>Tecniplast</td>
			<td>9AV125P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (Rompun), 2%</td>
			<td>Bayer Vital GmbH</td>
			<td>PZN 1320422</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

data acquisition and analysis in brainstem evoked response audiometry in mice

Hjärnstammen framkallade Response audiometri (BERA) är av central betydelse i den kliniska neurofysiologin. Som andra framkallat potential (EP) tekniker, såsom visuellt framkallade potentialer (veps) eller somatosensorisk framkallade potentialer (SEPS), den auditiva framkallade potentialer (aeps) utlöses av upprepad presentation av identiska stimuli, elektroencefalographic (EEG) respons som därefter i genomsnitt resulterar i distinkta positiva (p) och negativa (n) avböjelser. Hos människor kan både amplituden och latens av enskilda toppar användas för att karakterisera förändringar i synkronisering och överledning hastighet i de underliggande neuronala circuitries. Viktigt är att AEPs också tillämpas i grundläggande och preklinisk vetenskap för att identifiera och karakterisera hörselfunktionen i farmakologiska och genetiska djurmodeller. Ännu mer, djurmodeller i kombination med farmakologiska tester utnyttjas för att undersöka om potentiella fördelar vid behandling av sensorineural nedsättning hörselnedsättning (t. ex., ålder-eller Bullerorsakad hörselnedsättning). Här ger vi en detaljerad och integrativ Beskrivning av hur man spelar in auditiv brainstem-framkallat svar (ABRs) i möss med Klicka och Tone-burst ansökan. Ett specifikt fokus för detta protokoll är på pre-experimental djur boende, anestesi, ABR inspelning, ABR filtreringsprocesser, automatiserad Wavelet-baserade amplitud tillväxt funktion analys, och latens upptäckt.

Click-och Tone burst-evoked ABR inspelningar kan användas för att utvärdera hörsel tröskel skillnader, amplitud tillväxt funktion och latens jämförelse. Klick-framkallat ABRs i SPL ökande läge avbildas i figur 1 för kontroller och två exemplariska Mutant mus linjer som är bristfällig för cav3,2 T-typ spännings-gated ca2 + kanal (dvs., cav3,2+/- och ca v3,2 null mutanter [Cav3,2<...

Watch this Scientific Journal Video about Data Acquisition and Analysis In Brainstem Evoked Response Audiometry In Mice at JoVE.com

Data Acquisition and Analysis In Brainstem Evoked Response Audiometry In Mice

Brainstem framkallade respons audiometri är ett viktigt verktyg i klinisk neurofysiologi. Numera är hjärnstammen framkallat respons audiometri också tillämpas i grundforskning och prekliniska studier med både farmakologiska och genetiska djurmodeller. Här ger vi en detaljerad beskrivning av hur auditiva hjärnstammen svar kan framgångsrikt registreras och analyseras i möss.

Data insamling och analys i Brainstem framkallade respons audiometri hos möss

Brainstem evoked response audiometry (BERA) is of central relevance in the clinical neurophysiology. As other evoked potential (EP) techniques, such as ...

Detta protokoll ger detaljerad information om hur man planerar, utför och analyserar klick- och tonspräckning framkallat auditiva hjärnstammen svar hos möss. Den största fördelen med denna teknik är att den möjliggör komplex och snabb hörselprofilering av farmakologiska och mutanta musmodeller. De nya insikterna i alt-er-ed tidigt APP och tillhörande förändring i hörselbehandling hos möss och råttor kan översättas till människor.Därför är denna metod av central betydelse i karakteriseringen och fenotypning av auditiva, neurologiska och sjukdomar. Denna metod är viktigast för identifiering av dysacusis, hypoacusis och anacusis. Till exempel, i åldersrelaterade, buller-inducerad metabolisk, medfödd och aspi-met-acury hörselnedsättning samt i hörsel underskott på grund av missbildningar eller missbildningar, skador och neoplasmer.Användare ny till tekniken, bör ägna särskild uppmärksamhet åt korrekt elektro-placering och pre-experimentell kalibrering av systemet. Visuell demonstration av metoden är avgörande för att illustrera anestesi, ABR-inspelning, ABR-filtreringsprocesser och automatiserade ABR neur-o-lass-es. Börja med att sätta på förförstärkaren som är ansluten till mikrofonen, minst fem minuter före kalibreringen, för att möjliggöra jämvikt i systemet.Sätt på oscilloskopet. Placera sedan mikrofonen, ansluten till en förförstärkare inuti ljudet dämpande kubisk, att efterlikna den experimentella murine öra. Därefter öppnar kommersiellt tillgängliga bearbetning och förvärv mjukvaror och programmera stimulans protokoll för klick och ton skurar.Börja med klick stimulus entiteten till analys och bestämma klicktrösklar. Följt av ABR symmetri i vänster och höger öra. Och ABR amplituder och latenser senare.Nästa, använda samma programvara för att verifiera tone burst stimulering protokoll med sig-Gen RZ stimulus design programvara. Och kontrollerar stimulans inställningar, under Bio-Sig RZ förvärv programvara. Programmera lämpligt frekvensområde som ska testas, beroende på den vetenskapliga frågan, och se till att de frekvensintervall som ska tillämpas uppfyller den högljudda talarens tekniska kapacitet.För genomsnitt, ange antalet sekventiella akustik stimuli, antingen klick eller ton skurar till exempel, på 300 gånger, med en hastighet av 20 per sekund;en genomsnittlig varaktighet på 25 millisekunder och förstärkningsfaktorn i pre-förstärkare, 20 gånger. Därefter verifiera lämplig samplingsfrekvens för ABR-datainhämtning och sedan passera filter med hjälp av ett sex-poll smör-värt filter. Aktivera skårfiltret om det behövs.Starta tonspr burst-kalibreringen genom att välja kalibreringen:CAL200K-filen;inom programvaran, för att aktivera kalibreringskonfigurationsläget. Och välj omkrets efter de experimentella förhållandena. Använd processorsystemet för att utföra kalibreringsproceduren.Se till att de tekniska specifikationerna för mikrofonen och hög högtalare, i fråga om ljudtrycksnivå eller SPL-gränser, frekvensområde och fördelning harmoniserar. Sedan väljer du och startar det fördefinierade klickstimuleringsprotokollet. Kör ett enda klick SPL för att kontrollera att spektrumet av ljud stimuli analyseras av online snabb fyra-ay omvandling av oscilloskop, matchar kraven.Välj och starta den fördefinierade ton burst stimulering protokollet, inom intervallet ett till 42 kilohertz. Bekräfta frekvensspektrumet för de inspelade akustiska teststimuli, genom att använda ett oscilloskop och online FFT. Slutligen, slutföra ton burst kalibrering genom att ladda den skapade kalibreringsfilen till ton burst stimulans protokoll.Börja med att placera den sövda musen inuti ett ljuddämpande bås, fodrad med akustiskt skum. För registrering av monaural hjärnstam framkallat auditiva potentialer, infoga sub-dermal rostfria elektroder vid vertex, axiell av pin-eye och ventral-laterala av höger eller vänster pinna beroende på örat som skall mätas. I andra änden, för binaural inspelningar, placera de negativa elektroderna på både höger och vänster pinna.Placera markelektroden vid djurets höft. Före införandet, bilda en krok form på spetsen av rostfritt stål elektrod som är sub-dermal fixering av elektroderna garanteras. Och en gång in, ordentligt placera rostrum av musen 10 centimeter mittemot den högljudda högtalaren.Anslut alla elektroder till huvudet scenen och kontrollera deras impedans. Utför sedan impedansmätningar av alla elektroder, före varje inspelning, för att verifiera korrekt elektrodpositionering och ledningsförmåga. Spela in ABRs under fria fältförhållanden med hjälp av en enda högljudd högtalare.Slutligen genomföra ABR analys via automatiserad tröskel upptäckt och våg latens analys för att fastställa positiva toppar och negativa vågor. Som ett första steg i att analysera allmänna förhandlingen prestanda, klick-framkallade ABRs för olika SPLs, mellan noll och 90, undersöktes med hjälp av automatiserade ABR tröskel detektionssystem. Potentiella ändringar i ABR tröskelvärdet nivåer framkallat av olika ton burst frekvenser analyserades.I de föredömliga muslinjerna uppvisade Cav3.2 plus, minus och Cav3.2 minus, minus ökade klick- och tonspring relaterade hörseltrösklar jämfört med kontroller. Slutligen, klicka-framkallade ABR amplitud tillväxt funktion och ABR våg form latens analys genomfördes via wavelet baserad strategi. Den senare tillåter insikt i den eventuella spacio-temporala påverkan av genen av intresse på auditiv informationsbehandling inom innerörat och hjärnstammen.Korrekt ABR-elektrodplacering i PINNA:s mätning och systemkalibrering är väsentliga för att utföra denna teknik. Den auditiva tillvägagångssätt som presenteras här, kan också användas i kombination med ett telemetri system för att analysera komplexa, mitten av latens och late-audity framkallat potentialer. Detta hjälper i karakteriseringen och i fenotypning av hörsel-, neurologiska och neurosjukdomar.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

High Density Event-related Potential  Data Acquisition in Cognitive Neuroscience

High Density Händelse-relaterade Potentiella Datainsamling i kognitiv neurovetenskap

Functional magnetic resonance imaging (fMRI) is currently the standard method of evaluating brain function in the field of Cognitive Neuroscience, in part ...

Basics of Multivariate Analysis in Neuroimaging Data

Grunderna i multivariat analys i Neuroimaging Data

Multivariate analysis techniques for neuroimaging data have recently received increasing attention as they have many attractive features that cannot be ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

Dubbla Elektrofysiologiska Inspelningar av synaptiskt-framkallade astrogliala och neuronala svar i akut hippocampus skivor

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

TIRFM and pH-sensitive GFP-probes to Evaluate Neurotransmitter Vesicle Dynamics in SH-SY5Y Neuroblastoma Cells: Cell Imaging and Data Analysis

TIRFM och pH-känsliga GFP-sonder för att utvärdera Neurotransmitter Vesikel Dynamics i SH-SY5Y neuroblastomceller: cell imaging och dataanalys

Synaptic vesicles release neurotransmitters at chemical synapses through a dynamic cycle of fusion and retrieval. Monitoring synaptic activity in real ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

En enkel och billig metod för bestämning Cold Känslighet och anpassning hos möss

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Electroretinogram Analysis of the Visual Response in Zebrafish Larvae

Elektroretinogram Analys av Visual Response i Zebrafish Larver

The electroretinogram (ERG) is a noninvasive electrophysiological method for determining retinal function. Through the placement of an electrode on the ...

Auditory Brainstem Response and Outer Hair Cell Whole-cell Patch Clamp Recording in Postnatal Rats

Auditiv hjärnstammen svar och yttre hår Cell hela-cell Patch Clamp inspelning i Postnatal råttor

The outer hair cell is one of the two types of sensory hair cells in the mammalian cochlea. They alter their cell length with the receptor potential to ...

Cochlear Implant Surgery and Electrically-evoked Auditory Brainstem Response Recordings in C57BL/6 Mice

Cochleaimplantat kirurgi och elektriskt frammanade auditiv hjärnstammen svar inspelningar i C57BL/6 möss

Cochlear implants (CIs) are neuroprosthetic devices that can provide a sense of hearing to deaf people. However, a CI cannot restore all aspects of ...

Reliable Acquisition of Electroencephalography Data during Simultaneous Electroencephalography and Functional MRI

Tillförlitligt förvärv av elektroencefalografidata under samtidig elektroencefalografi och funktionell MRT

Simultaneous electroencephalography (EEG) and functional magnetic resonance imaging (fMRI), EEG-fMRI, combines the complementary properties of scalp EEG ...

Acquisition of Resting-State Functional Magnetic Resonance Imaging Data in the Rat

Förvärv av resting state funktionell magnetisk resonanstomografidata i råttan

Resting-state functional magnetic resonance imaging (rs-fMRI) has become an increasingly popular method to study brain function in a resting, non-task ...