Name: daily phototherapy with red light to regulate candida albicans biofilm growth
Uploaded: 2019-04-23T13:00:00
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我们感谢 Paula da Silveira 博士、Cecília Atem Gonçalves de Araújo Costa 博士、Shawn m. Maule、Shane m. Maule、Malvin N. Janal 博士和 Iriana Zanin 博士开展这项研究。我们也感谢亚历山大·约翰逊博士 (UCSF) 捐赠了这项研究中分析的毒株。

1. 文化媒体的准备
<ol><li>准备萨波特葡萄糖琼脂 (SDA)。悬浮65克 SDA, 加氯霉素 (50mgl), 在 1, 000 毫升的蒸馏水中。煮沸完全溶解介质。在 15 PSI (121°C) 下高压灭菌 30分钟, 冷却至40-50°c。混合好, 倒入20毫升的 SDA 到无菌 Petri 板 (大小: 100 毫米 x 15 毫米)。</li>
	<li>通过将6.7 克 YNB 和18克葡萄糖混合到 1, 000 毫升的超纯水中, 制备酵母氮碱 (YNB) 培养基, 补充 100 Mm 葡萄糖。使用搅拌器混合, 并使用0.22μm 真空...

<ol>
	<li>Sardi, J. C. O., Scorzoni, L., Bernardi, T., Fusco-Almeida, A. M., Mendes Giannini, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+species:+current+epidemiology,+pathogenicity,+biofilm+formation,+natural+antifungal+products+and+new+therapeutic+options.">Candida species: current epidemiology, pathogenicity, biofilm formation, natural antifungal products and new therapeutic options.</a> Journal of Medical Microbiology. 62 (Pt 1), 10-24 (2013).</li><li>Harriott, M. M., Noverr, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+albicans+and+Staphylococcus+aureus+form+polymicrobial+biofilms:+effects+on+antimicrobial+resistance.">Candida albicans and Staphylococcus aureus form polymicrobial biofilms: effects on antimicrobial resistance.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 53 (9), 3914-3922 (2009).</li><li>Srinivasan, A., Lopez-Ribot, J. L., Ramasubramanian, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overcoming+antifungal+resistance.">Overcoming antifungal resistance.</a> Drug Discovery Today Technologies. 11, 65-71 (2014).</li><li>Finkel, J. S., Mitchell, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+control+of+Candida+albicans+biofilm+development.">Genetic control of Candida albicans biofilm development.</a> Nature Reviews Microbiology. 9 (2), 109-118 (2011).</li><li>Zarnowski, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+entries+in+a+fungal+biofilm+matrix+encyclopedia.">Novel entries in a fungal biofilm matrix encyclopedia.</a> MBio. 5, e013333 (2014).</li><li>Mitchell, K. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Community+participation+in+biofilm+matrix+assembly+and+function.">Community participation in biofilm matrix assembly and function.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (13), 4092-4097 (2015).</li><li>Mitchell, K. F., Zarnowski, R., Andes, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fungal+super+glue:+the+biofilm+matrix+and+its+composition,+assembly,+and+functions.">Fungal super glue: the biofilm matrix and its composition, assembly, and functions.</a> PLoS Pathogens. 12, e1005828 (2016).</li><li>Dai, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blue+light+rescues+mice+from+potentially+fatal+Pseudomonas+aeruginosa+burn+infection:+efficacy,+safety,+and+mechanism+of+action.">Blue light rescues mice from potentially fatal Pseudomonas aeruginosa burn infection: efficacy, safety, and mechanism of action.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 57 (3), 1238-1245 (2013).</li><li>de Sousa, D. L., Lima, R. A., Zanin, I. C., Klein, M. I., Janal, M. N., Duarte, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+twice-daily+blue+light+treatment+on+matrix-rich+biofilm+development.">Effect of twice-daily blue light treatment on matrix-rich biofilm development.</a> PLoS One. 10 (7), e0131941 (2015).</li><li>Fontana, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+antibacterial+effect+of+photodynamic+therapy+in+dental+plaque-derived+biofilms.">The antibacterial effect of photodynamic therapy in dental plaque-derived biofilms.</a> Journal of Periodontal Research. 44 (6), 751-759 (2009).</li><li>Donlan, R. M., Costerton, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biofilms:+survival+mechanisms+of+clinically+relevant+microorganisms.">Biofilms: survival mechanisms of clinically relevant microorganisms.</a> Clinical Microbiology Reviews. 15 (2), 167-193 (2002).</li><li>Panariello, B. H. D., Klein, M. I., Pavarina, A. C., Duarte, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inactivation+of+genes+TEC1+and+EFG1+in+Candida+albicans+influences+extracellular+matrix+composition+and+biofilm+morphology.">Inactivation of genes TEC1 and EFG1 in Candida albicans influences extracellular matrix composition and biofilm morphology.</a> Journal of Oral Microbiology. 9 (1), 1385372 (2017).</li><li>Gulati, M., Lohse, M. B., Ennis, C. L., Gonzalez, R. E., Perry, A. M., Bapat, P., Valle Arevalo, A., Rodriguez, D. L., L, D., Nobile, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+culturing+and+screening+of+Candida+albicans+biofilms.">In vitro culturing and screening of Candida albicans biofilms.</a> Current Protocols in Microbiology. 50 (1), e60 (2018).</li><li>Roberts, A. E., Kragh, K. N., Bjarnsholt, T., Diggle, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+limitations+of+in+vitro+experimentation+in+understanding+biofilms+and+chronic+infection.">The limitations of in vitro experimentation in understanding biofilms and chronic infection.</a> Journal of Molecular Biology. 427 (23), 3646-3661 (2015).</li><li>Kuchar&#237;kov&#225;, S., Tournu, H., Lagrou, K., Van Dijck, P., Bujd&#225;kov&#225;, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detailed+comparison+of+Candida+albicans+and+Candida+glabrata+biofilms+under+different+conditions+and+their+susceptibility+to+caspofungin+and+anidulafungin.">Detailed comparison of Candida albicans and Candida glabrata biofilms under different conditions and their susceptibility to caspofungin and anidulafungin.</a> Journal of Medical Microbiology. 60 (Pt 9), 1261-1269 (2011).</li><li>Weerasekera, M. M., Wijesinghe, G. K., Jayarathna, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culture+media+profoundly+affect+Candida+albicans+and+Candida+tropicalis+growth,+adhesion+and+biofilm+development.">Culture media profoundly affect Candida albicans and Candida tropicalis growth, adhesion and biofilm development.</a> Memórias Do Instituto Oswaldo Cruz. 111 (11), 697-702 (2016).</li><li>Kadosh, D., Johnson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+the+Candida+albicans+filamentous+growth+program+by+relief+of+transcriptional+repression:+a+genome-wide+analysis.">Induction of the Candida albicans filamentous growth program by relief of transcriptional repression: a genome-wide analysis.</a> Molecular biology of the cell. 16 (6), 2903-2912 (2005).</li><li>Paschoal, M. A., Lin, M., Santos-Pinto, L., Duarte, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+antimicrobial+chemotherapy+on+Streptococcus+mutans+using+curcumin+and+toluidine+blue+activated+by+a+novel+LED+device.">Photodynamic antimicrobial chemotherapy on Streptococcus mutans using curcumin and toluidine blue activated by a novel LED device.</a> Lasers in Medical Science. 30 (2), 885-890 (2015).</li></ol>

成功培养白色念珠菌生物膜最关键的步骤是: 1) 在 ynb 培养基中进行预接种和接种, 辅以 100 mm 葡萄糖;2) 在粘附阶段等待 90分钟, 用0.89 的氯化钠仔细清洗两次井, 去除不粘的细胞;3) 在粘附细胞中加入 RPMI 培养基, 开始生物膜的形成, 因为 RPMI 会刺激菌丝生长。在养殖白色念珠菌时, 可能会发生非上传物。因此, 重要的是不要使用超过7天的菌落, 不要将盘子存放在 4°C, 也不要从现有的盘子...

糖尿病发病率的增加、免疫抑制治疗的应用、艾滋病病毒感染、艾滋病流行、侵入性临床程序和广谱抗生素的使用, 增加了白色念珠菌的发病率相关疾病1,2。白色念珠菌感染通常与生物膜的发育有关, 可能导致临床表现, 如念珠菌病, 或全身表现, 如念珠菌1,2。生物膜生长最值得注意的毒力因素之一是细胞外多糖基质的建立。生物膜的形成配合, 以提高对现有抗真菌药物的抵抗力, 环境压力, 和宿主免疫机制3。
白色念珠菌的生物膜生长始于浮游生物细胞早期粘附到底物上, 然后是酵母细胞通过底物表面的繁殖和菌丝生长。生物膜生长的最后阶段是成熟阶段, 其中酵母样发育被抑制, 菌丝发育扩大, 细胞外基质包裹生物膜 4.白色外多糖 (eps) 在基质中相互作用, 形成曼南葡聚糖复合物5,6。外多糖的相互作用对于防御生物膜对抗药物是至关重要的。因此,减少白色念珠菌细胞外基质的 eps 可以支持新的抗生物膜协议的发展口服念珠菌病控制。
光调节几种生物体的生长、发育和行为8它已被应用于光动力抗菌化疗 (pact) 中。PACT 应用特定波长的可见光和吸光光敏剂9。然而, 光敏剂在穿透生物膜方面存在困难, 导致效果较低 10.治疗药物不能完全浸润生物膜是生物膜偶尔抵抗传统抗菌治疗 3,5的原因。要使封闭的微生物细胞失活, 抗菌素需要渗透到细胞外基质中;然而, EPS 通过促使这些分子进入生物膜的运输水平或通过影响抗菌素对基质本身的反应11来描述这些分子的扩散障碍.
考虑到 PACT 的缺点, 光的使用本身就成为一个有价值的改进。初步数据显示, 蓝光治疗每天两次明显抑制 epps 不溶于突变链球菌生物膜的产生。由于 epps 不溶性的降低, 蓝光减少了生物膜的生长。然而, 在白色念珠菌生物膜中使用红光的光疗的结果是稀缺的。因此, 本研究的目的是评估红光光疗如何影响白色念珠菌生物膜的生长和排列。对于每天两次的治疗, 我们调整了实验室以前的方案9,12 , 以提供一个简单和可重复的生物膜模型, 提供有关活力, 干重和细胞外多糖的答案红灯处理后的金额.同样的协议也可以用来测试其他疗法。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1115px;" width="1115">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Clorhexidine 20%&#160;</td>
			<td style="width:372px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:123px;">C9394</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Dextrose (D-Glucose) Anhydroous</td>
			<td style="width:372px;">Fisher Chemical</td>
			<td style="width:123px;">D16-500</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ethanol 200 proof</td>
			<td style="width:372px;">Decon Laboratories</td>
			<td style="width:123px;">DSP-MD.43</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">LumaCare LC-122 A&#160;</td>
			<td style="width:372px;">LumaCare Medical Group, Newport Beach, CA, USA&#160;</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">NaCl&#160;</td>
			<td style="width:372px;">Fisher Chemical</td>
			<td style="width:123px;">S641-500</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NaOH&#160;</td>
			<td style="width:372px;">Fisher Bioreagents&#160;</td>
			<td style="width:123px;">BP 359-500</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phenol 5%</td>
			<td style="width:372px;">Milipore Sigma</td>
			<td style="width:123px;">843984</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">RPMI 1640 buffered with 3-(N-morpholino)</td>
			<td style="width:372px;">Sigma</td>
			<td style="width:123px;">R7755</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Sabouraud dextrose agar supplemented with chloramphenicol</td>
			<td style="width:372px;">Acumedia</td>
			<td style="width:123px;">7306A</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sulfuric acid&#160;</td>
			<td style="width:372px;">Fisher Chemical</td>
			<td style="width:123px;">SA200-1</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Yeast nitrogen base&#160;</td>
			<td style="width:372px;">Difco</td>
			<td style="width:123px;">DF0392-15-9</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3-(N-morpholino)propanesulfonic acid MOPS</td>
			<td style="width:372px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:123px;">M1254</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">&#160;24-well polystyrene plate&#160;</td>
			<td style="width:372px;">Falcon</td>
			<td style="width:123px;">353935</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

daily phototherapy with red light to regulate candida albicans biofilm growth

在这里, 我们提出了一个协议, 以评估每日二毛鸟红光治疗的结果,对白色念珠菌生物膜的生长。为了增加白色念珠菌 sn425的浮游生长, 在酵母氮基培养基上进行了接种。对于生物膜的形成, RPMI 1640 培养基, 具有高浓度的氨基酸, 被应用于帮助生物膜的生长。用非相干光装置 (红光; 波长 = 635 nm; 能量密度 = 87.6 j·cm-2) 每天治疗48小时的生物膜, 时间为 1分钟.作为一种正对照 (PC), 采用了0.12 的氯己定 (CHX), 作为负对照 (NC), 将0.12 的氯化钠应用于生物膜。经处理后对菌落形成单位 (CFU)、干重、可溶性和不溶性外多糖进行了定量。简单地说, 这里介绍的协议是简单的, 可重复的, 并提供了有关生存能力, 干重和细胞外多糖量红光治疗的答案.

图 2显示了白化病的日志10 cfu/ml 的结果后, 每日每日处理每日津贴与红光 1分钟.图 3显示了每日治疗后白色念珠菌生物膜的生物量 (mg) 的结果。与 NC (p = 0.000) 相比, 所有处理组的生物量都有所减少, 红光处理组的生物量减少与 PC 中观察到的减少相似。图 4和图 5<...

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Daily Phototherapy with Red Light to Regulate Candida albicans Biofilm Growth

红光光疗法调节白色念珠菌生物膜生长

在这里, 我们提出了一个协议, 以评估红光应用的结果,在白色念珠菌生物膜的生长。在白色念珠菌生物膜的整个生长过程中, 采用了波长为635纳米、能量密度为 87.6 j·cm-2 的非相干红光装置。

Here, we present a protocol to assess the outcomes of per diem red light treatment on the growth of Candida albicans biofilm. To increase the planktonic ...

念珠菌是免疫功能低下宿主中传播真菌感染的最常见原因。由于基质，治疗剂未能完全渗入生物膜是生物膜抵制传统疗法的一个原因。我们的协议评估光疗，使用红灯，如何干扰念珠菌生物膜的生长和排列。由于本研究采用的菌株具有细胞外基质特征，光器件已成功应用于其他浮游微生物悬浮液和生物膜，因此应用的方法已很成熟。该设备的最大优点是缩短治疗时间，使其在临床应用中更加明显。当培养念念者时，人们意识到抗体是可以获得的。因此，重要的是不要使用超过七天的菌落，不要在摄氏四度时启动板块，也不要从现有板块中重新感染细胞。同样，应变应在18小时的夜间生长前使用。首次使用分光光度计时，首先获得单位计数的聚落农场与光学密度值相关非常重要。因此，实验将开始使用生长期的中间，初始细胞浓度为每毫升10至7个细胞。这种细胞浓度已被证明提供最依赖和稳定物质生物膜。首先，在1000毫升蒸馏水中悬浮65克SDA，每升加50毫克氯霉素。将烧杯放在加热器上煮沸，以便完全溶解介质。然后将介质转移到玻璃瓶中。将瓶盖放在瓶子上，但不要完全拧下，以确保瓶子能够通风。将瓶子放在自风车中，在 15 PSI 和 121 摄氏度下对溶液进行消毒 30 分钟。将溶液冷却至 45 摄氏度左右。使用一次性的无菌移液器，将20毫升SDA和移液器混合到无菌培养板中。准备 YNB 介质，辅以 100 毫摩尔葡萄糖，将 6.7 克 YNB 和 18 克葡萄糖混合到 1000 毫升超纯水杯中。在烧杯中放置搅拌棒，将烧杯放在搅拌盘上混合。通过 0.22 微米真空过滤器系统过滤介质以进行灭菌。将 10.4 克 RPMI-1640 和 34 克 MOPS 混合到 1，000 毫升超纯水，准备 RPMI 介质。在没有热量的情况下混合搅拌器，通过添加一个正常的氢氧化钠将PH调整为7。使用 0.22 微米真空过滤器系统对介质进行灭菌。首先，在环境温度下解冻微生物念珠菌SN 425。种子 10 微升停止培养在以前准备的含有 SDA 的培养皿上， 辅以氯霉素。在37摄氏度下有氧孵育培养培养皿48小时。对于预孵化使用灭菌润滑油从培养皿中挑选10个念珠菌群，并放入含有10毫升YNB介质的离心管中，并辅以葡萄糖。在37摄氏度下有氧孵育管，16小时。然后，准备接种，通过添加这种启动培养到新鲜的YNB培养，辅以葡萄糖，在1至10比例稀释。使用分光光度计测量 540 纳米的初始 OD。在37摄氏度下有氧孵育接种8小时，在540纳米测量最终的OD。从初始 OD 中减去最终 OD，以检查接种的 OD 是否处于中日志生长阶段。为了获得每毫升10至7个细胞的入联，将进心机离心5分钟，达到5，500倍G.将上流液倒入含有次氯酸钠的烧杯中，并加入新鲜的YNB，将进一定能浓缩到上一体积的一半。在24孔聚苯乙烯板的每个孔中加入一毫升的加入。在37摄氏度下有氧孵育90分钟，使细胞粘附在井底。用一毫升0.12%氯己酸对照生物膜处理生物膜一分钟。对于阴性控制，用一毫升无菌，0.89%氯化钠处理生物膜一分钟。随后，洗井两次，每洗一分钟，用一毫升无菌0.89%氯化钠去除非粘附细胞。然后打开非相干红光，并使用功率计测量光的功率密度。根据每平方厘米 87.6 焦耳的能量密度要求确定曝光时间。将盘子放在红灯下。将光源和生物膜之间的距离保持到五毫升，以避免使样品变暖。暴露一分钟后，将消毒的RPMI介质加入一毫升，并在夜间37摄氏度下孵育。在早上，重复相同的洗涤，光处理，正负控制治疗，并孵育6小时与RPMI介质。再次，清洗生物膜两次，使其暴露在红灯下，并执行正负控制处理。在油井中吸进溶液并添加 RPMI 介质。重复孵育、洗涤、光处理和正负控制处理，直到实现48小时的生物膜发育。要开始加工，请丢弃介质，将一毫升无菌、0.89%氯化钠加入井中，并使用移液器尖端从井中刮出生物膜。将去除的生物膜转移到无菌管中。再加一毫升无菌，0.89%氯化钠到井里。再次划伤它，并添加悬架到同一管，总体积为2毫升。大力涡旋生物膜悬浮一分钟。在 CFU 分析中，将 0.1 毫升的等分从生物膜悬浮液转移到微离心管中，该管包含 900 微升的 0.89% 氯化钠溶液，每次稀释。在盐水溶液中，将生物膜溶液从10稀释到负片溶液，稀释至负4。种子50微升每次稀释到SDA板，并在37摄氏度孵育板48小时。计算殖民地并应用公式。对于干重量分析，首先称重并标记微型离心管。将0.1毫升的生物膜悬浮液和1毫升绝对乙醇加入管中，并在负20摄氏度下储存18小时。然后，将10，000次G离心10分钟。丢弃上流液，将管子放在干燥器中干燥样品一周。再次称重微离心管，并做减法以获得生物量重量。在这个实验中，与用氯化钠处理的负对照相比，用红灯进行一分钟的每死/量治疗后，CFU被减少。每日治疗后，Candida albicans生物膜的生物量结果显示，红光处理组的生物量与正对照组（用氯己海丁）观察到的生物量相似。这两组人之间的统计相似度也不同。虽然两者都显示生物量减少，相比使用氯化钠处理的负对。与负控制相比，在正对中观察到低量的念珠菌可溶性和不溶性EPS。即使统计学上没有显著性，红光的日用应用在数值上减少了 EPS 可溶性和 EPS 不溶性量。负对照组与红光处理组，表现出统计相似性。测量光的功率密度，在开始处理之前使用功率计来确定确切的应用周期。这些步骤可确保能量密度始终为每厘米 87.6 焦耳/ 平方。使用前面引用的公式。测量使用相同的光到板瓶，五毫米。可以研究光疗和抗真菌药物之间的关联，以检查使用红灯的预处理，然后进行药物应用，是否改善了药物对生物膜的渗透。对于每天两次的治疗，我们调整了实验室的协议，提供了一个简单且可重复的生物膜模型，在红灯处理后，该模型提供了有关生存能力、干重和细胞外多糖量的答案。该协议是通用的，可用于测试其他疗法，除了红灯，包括药物，其他灯，或光和药物的组合。与微生物一起工作需要特殊设备，如安全眼镜、纽扣实验室外套和硝基手套。

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Daily Phototherapy with Red Light to Regulate Candida albicans Biofilm Growth

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

一个96孔微孔板为基础的方法监测的形成和抗真菌的药敏试验白色念珠菌生物膜

Candida albicans remains the most frequent cause of fungal infections in an expanding population of compromised patients and candidiasis is now the third ...

科研

免疫与感染

Studying Microbial Communities In Vivo: A Model of Host-mediated Interaction Between Candida Albicans and Pseudomonas Aeruginosa in the Airways

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研究微生物群落<em&gt;在体内</em&gt;：主机之间介互动的典范<em&gt;白色念珠菌</em&gt;和<em&gt;铜绿假单胞菌</em&gt;在航空

Studying host-pathogen interaction enables us to understand the underlying mechanisms of the pathogenicity during microbial infection. The prognosis of ...

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

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来到光明的一面: 体内糖尿病无毛小鼠慢性伤口生物膜感染的监测

The presence of bacteria as structured biofilms in chronic wounds, especially in diabetic patients, is thought to prevent wound healing and resolution. ...

Visualization of Biofilm Formation in Candida albicans Using an Automated Microfluidic Device

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全自动微流控装置在白色念珠菌生物膜形成中的可视化

Candida albicans is the most common fungal pathogen of humans, causing about 15% of hospital-acquired sepsis cases. A major virulence attribute of C. ...

Deep Dermal Injection As a Model of Candida albicans Skin Infection for Histological Analyses

Deep Dermal Injection As a Model of Candida albicans Skin Infection for Histological Analyses

深部真皮注射液作为白色念珠菌皮肤感染模型的组织学分析

The skin is an extremely extended organ of the body and, due to this large surface, it is continuously exposed to microorganisms. Skin damage can easily ...

Visualization of Candida albicans in the Murine Gastrointestinal Tract Using Fluorescent In Situ Hybridization

Visualization of Candida albicans in the Murine Gastrointestinal Tract Using Fluorescent In Situ Hybridization

使用荧光原位杂交对毛尿胃肠道中的念珠菌的可视化

Candida albicans is a fungal component of the gut microbiota in humans and many other mammals. Although C. albicans does not cause symptoms in most ...

Clarifying and Imaging Candida albicans Biofilms

Clarifying and Imaging Candida albicans Biofilms

澄清和成像念珠菌生物膜

The microbial fungus Candida albicans can undergo a change from commensal colonization to virulence that is strongly correlated with its ability to switch ...

An Ex vivo Assay to Study Candida albicans Hyphal Morphogenesis in the Gastrointestinal Tract

An Ex vivo Assay to Study Candida albicans Hyphal Morphogenesis in the Gastrointestinal Tract

前体内分析研究胃 肠道的 念珠菌血脂磷

Candida albicans hyphal morphogenesis in the gastrointestinal (GI) tract is tightly controlled by various environmental signals, and plays an important ...

Rose Bengal-Mediated Photodynamic Therapy to Inhibit Candida albicans

Rose Bengal-Mediated Photodynamic Therapy to Inhibit Candida albicans

孟加拉玫瑰介导的光动力疗法抑制 白色念珠菌

Invasive Candida albicans infection is a significant opportunistic fungal infection in humans because it is one of the most common colonizers of the gut, ...

Use of In Vivo Imaging to Screen for Morphogenesis Phenotypes in Candida albicans Mutant Strains During Active Infection in a Mammalian Host

Use of In Vivo Imaging to Screen for Morphogenesis Phenotypes in Candida albicans Mutant Strains During Active Infection in a Mammalian Host

使用 体内 成像筛选哺乳动物宿主活动性感染期间 白色念珠 菌突变菌株的形态发生表型

Candida albicans is an important human pathogen. Its ability to switch between morphologic forms is central to&#160;its pathogenesis; these morphologic ...