Name: real-time in vitro monitoring of odorant receptor activation by an odorant in the vapor phase
Uploaded: 2019-04-23T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Real-time In Vitro Monitoring of Odorant Receptor Activation by an Odorant in the Vapor Phase at JoVE.com

Эта работа была поддержана грантов от них (DC014423 и DC016224) и обороны передовых исследований агентства RealNose проекта. YF остался в университете Дьюка при финансовой поддержке программы JSP-страницы для продвижения стратегических международных сетей для ускорения циркуляции талантливых исследователей (R2801). Мы благодарим Sahar Калима для редактирования рукописи.

1. Hana3A клетки культуры
<ol><li>Подготовить M10 (минимум основных средних (MEM) плюс 10% v/v плода бычьим сывороточным (ФБС)) и M10PSF (М10 плюс 100 мкг/мл пенициллин стрептомицином и амфотерицин B 1,25 мкг/мл).</li>
	<li>Культура клетки в 10 мл M10PSF в 100 мм ячейку культуры блюдо в инкубаторе в 37 ° C и 5% двуокиси углеро...

Восприятие запаха принципиально зависит от активации ORs. Следовательно для того чтобы треснуть сложные механизмы, использующие мозг воспринимать его летучие химические среды требуется понимание их функциональность. Однако понимание этого процесса сдерживается трудностями в создани...

Обоняние позволяет наземных животных взаимодействовать с их летучие химические среды привод поведения и эмоции. По существу процесс обнаружения запаха начинается с самого первого взаимодействия молекул одоранта с обонятельной системы, на уровне одоранта рецепторов (СПР)1. В млекопитающих ORs индивидуально выражаются в обонятельной сенсорных нейронов (OSNs), расположенный в обонятельного эпителия2. Они принадлежат к семейству рецепторов (GPCR) G-протеин и более точно родопсин как суб семье (также называемый класса A). СПР пара с стимулирующее G протеина GФОО чьи Активация приводит к лагеря производства последовали открытия циклических нуклеотидов воротами каналов и поколения потенциалы действия. Принято что ощутили запах опирается на определенный шаблон активированного СПР3,4 и поэтому запах признание комбинаторные схемы кодирования, где один или может быть активирован с помощью ряда отдушки и один одорантов можно активировать сочетание ORs. И через такие комбинаторной кодирования, постулируется, что организмы может обнаруживать и различать мириады летучих запах молекул. Один из ключей к пониманию, как воспринимают запахи — чтобы понять, как и ORs активируются данной запах.
В попытке прояснить одоранта- или взаимодействия, в пробирке функциональных анализов играют важную роль. Идентификация агонист пахучих лигандов для сирот ORs (или де orphanization) был очень активное поле за последние двадцать лет, с использованием различных в пробирке, ex vivo и в естественных условиях функциональных анализов5,6,7 ,8,9,10,11,12,13,14,,1516, 17.
В пробирке пробирного системы лучше всего подходит для подробных функциональных характеристик ПРС, включая определение функциональные домены и критических остатков СПР, а также потенциал инженерных приложений. Однако дальнейшее развитие ценных в пробирке систем для СПР был вызов, отчасти из-за трудностей с культивирования OSNs и функциональных выражение ORs в гетерологичных клеток. Первая задача заключалась в создании протоколов, которые разрешены для клеток поверхности выражения функциональной ORs в сопоставлении одоранта-или взаимодействия. Ряд независимых групп использовали различные подходы5,6,,78,9,10,11,12, 14,18,19,20. Одним из первых достижений было сделано, Krautwurst et al. в меткой N-конечная СПР с укороченной последовательность родопсина (Ро тегов) и наблюдается улучшение поверхности выражение в клетки человеческого эмбриона почек (ГЭС)13. Изменения, сделанные в тег придает последовательность или все еще путь для улучшения или выражение и функциональность19,21. Сайто et al. затем определил транспортировки рецептора протеина 1 (RTP1) и RTP2, который содействует или торговле. 22 сокращенный вариант RTP1, называемый RTP1S, также было показано быть даже более эффективным, чем оригинальный белка23. Разработка клеточной линии (Hana3A), которая стабильно выражает GФОО, REEP1, RTP1 и RTP2 24, в сочетании с использованием Репортеры циклический аденозинмонофосфат (лагерь) позволило идентификации одоранта-или взаимодействия. Механизм, по которому RTP семейство белков способствует клеток поверхности выражение ORs предстоит определить.
Одно предостережение этих установленных методов является, что они полагаются на стимуляции одоранта в жидкой фазе, что означает отдушки предварительно растворяют в средство стимуляции и стимулировать клетки путем замены носителя. Это очень отличается от физиологических условиях где одоранта молекулы достигают обонятельного эпителия в паровой фазе и активировать ORs путем растворения в слизистой оболочки носа. Для больше напоминают воздействия физиологически соответствующие стимулы, Sanz et al.20 предложил assay основанный на стимуляции пара путем нанесения капли раствора одоранта повесить под с внутренней стороны пластиковой пленки, размещены на верхней части клетки скважин. Они записали кальция ответы путем мониторинга интенсивности флуоресценции. Этот метод был первым для использования воздуха фаза одоранта стимуляции, но она не позволяет большой показ или активации.
Здесь мы разработали новый метод, который позволяет в режиме реального времени мониторинг в пробирке или активации через паров этапе одоранта стимуляции Glosensor пробу (рис. 1). Этот assay был использован ранее в контексте жидких одоранта стимуляции18,19,25,26,27,28,29, 30 , 31. Мониторинг палаты Люминометр сначала достижение равновесного уровня с испаряется одоранта до пластины чтения (рис. 1А). Одорант молекулы, затем сольватированного в буфер, купание Hana3A клетки, выражая или интерес, RTP1S и Glosensor белков (рис. 1Б). Если одорант агонистов или, или переключиться на активированные конформации и привязать GФОО, активации гуанилатциклазы adenylyl (AC) и в конечном итоге вызывают повышение уровня лагеря. Этот рост лагерь будет связывать и активировать Glosensor белка для создания свечения, катализирующих люциферин. Это свечение затем регистрируется с помощью люминометра и позволяет осуществлять мониторинг или активации. Этот метод является большой интерес в контексте или deorphanization, как он приносит в пробирке систем ближе к естественной восприятие запахов.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:867px;" width="866">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:205px;">0.05 % trypsin-EDTA</td>
			<td style="width:93px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">25300-054</td>
			<td style="width:449px;">0.05% Trypsin - EDTA (1x), phenol red - store at 4&#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">100 mm cell culture dish&#160;</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>353003</td>
			<td>100 mm x 20 mm cell culture dish&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">15 mL tube</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>352099</td>
			<td style="width:449px;">17 mm x 120 mm conical tubes</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:205px;">96-well plate</td>
			<td style="width:93px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">3843</td>
			<td style="width:449px;">96 well, with LE lid white with clear bottom Poly-D-lysine coated Polystyrene</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:205px;">Amphotericin</td>
			<td style="width:93px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">15290-018</td>
			<td style="width:449px;">Amphotericin B 250 &#181;g/mL - store at 4&#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">centrifuge machine</td>
			<td>Jouan</td>
			<td>C312</td>
			<td style="width:449px;">Centrifuge machine with swinging bucket rotor for 15 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Class II Type A/B3 fumehood</td>
			<td>NUAIRE</td>
			<td>NU-407-500</td>
			<td style="width:449px;">fumehood for cell culturing</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:205px;">FBS</td>
			<td style="width:93px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">16000-044</td>
			<td style="width:449px;">Fetal Bovine Serum - store at -20&#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:205px;">GloSensor cAMP Reagent</td>
			<td style="width:93px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">E1290</td>
			<td style="width:449px;">GloSensor cAMP Reagent luminescent protein substrate - store at -20&#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Incubator 37 &#176;C; 5 % CO2</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>11-676-604</td>
			<td style="width:449px;">Incubator for cell culturing</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Lipofectamine 2000 reagent</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11668-019</td>
			<td style="width:449px;">Lipofectamine 2000 Reagent 1mg/ml transfection reagent - store at 4&#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Luminometer POLARstar OPTIMA</td>
			<td>BMG LABTECH</td>
			<td>discontinued</td>
			<td style="width:449px;">96 well plate reader for luminescence</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:205px;">Mineral oil</td>
			<td style="width:93px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">M8410</td>
			<td style="width:449px;">Solvent for odorants - store at room temperature</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:205px;">Minimum Essential Medium (MEM)</td>
			<td style="width:93px;">Corning cellgro</td>
			<td style="width:119px;">10-010-CV</td>
			<td style="width:449px;">Minimum Essential Medium Eagle with Earle&#8217;s salts &#38; L-glutamine - store at 4&#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:205px;">Penicillin/Streptomycin</td>
			<td style="width:93px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P4333</td>
			<td style="width:449px;">Penicillin-Streptomycin solution stabilized with 10,000 U of penicillin and 10 mg streptomycin - store at -20&#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:205px;">pGlosensor</td>
			<td style="width:93px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">E2301</td>
			<td style="width:449px;">pGloSensor-22F cAMP luminescent protein plasmid - store at 4&#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">phase contrast microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>090-131.001</td>
			<td style="width:449px;">phase contrast microscope with x4, x10, x20 objectives</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:205px;">RTP1S</td>
			<td style="width:93px;">H. Matsunami lab</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:449px;">100 ng/&#181;L plasmid - store at 4&#176;C</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

real-time in vitro monitoring of odorant receptor activation by an odorant in the vapor phase

Обонятельные восприятие начинается с взаимодействием отдушки с рецепторами одоранта (или) выраженные обонятельной сенсорных нейронов (ОСН). Запах признание следующим комбинаторные схемы кодирования, где один или может быть активирован с помощью ряда отдушки и один одорантов можно активировать сочетание ORs. Через такие комбинаторной кодирования, организмы можно обнаруживать и различать мириады летучих запах молекул. Таким образом запах при данной концентрации можно описать активации шаблон СПР, который специфичен для каждого запаха. В этом смысле, растрескивание механизмы, которые мозг использует для восприятия запахов требует понимания одоранта-или взаимодействия. Вот почему обоняние сообщество привержено «де orphanize» эти рецепторы. Обычные в пробирке систем, используемых для идентификации одоранта- или взаимодействия использовали инкубирования ячейки СМИ с одоранта, который отличается от естественной обнаружения запахи через пара отдушки растворения в слизистую оболочку носа до взаимодействия с СПР. Здесь мы опишем новый метод, который позволяет для реального времени наблюдения или активации через паровой фазы отдушки. Наш метод основан на измерения лагеря выхода люминесценции, используя Glosensor assay. Он ликвидирует нынешние пробелы между подходами в vivo и in vitro и обеспечивает основу для biomimetic летучих химических датчика.

Мы показан ответ три мыши ORs, Olfr746, Olfr124 и Olfr1093 с помощью оксима пара стимуляции (рис. 3). Одновременно, мы использовали элемент пустой вектор (Ро pCI), чтобы заверить, что одоранта индуцированной деятельности протестированных ОРС были конкретные (рисA...

Watch this Scientific Journal Video about Real-time In Vitro Monitoring of Odorant Receptor Activation by an Odorant in the Vapor Phase at JoVE.com

Real-time In Vitro Monitoring of Odorant Receptor Activation by an Odorant in the Vapor Phase

Физиологически одорант рецепторы активируются одоранта молекул вдыхается в паровой фазе. Однако большинство в пробирке систем используют жидкой фазы одоранта стимуляции. Здесь мы представляем метод, который позволяет в реальном времени в пробирке мониторинга одоранта рецептор активации после стимуляции одоранта в паровой фазе.

Режиме реального времени в Vitro мониторинга одоранта рецептор активации одоранта в паровой фазе

Olfactory perception begins with the interaction of odorants with odorant receptors (OR) expressed by olfactory sensory neurons (OSN). Odor recognition ...

Наш протокол позволяет измерять обнаружение и дискриминацию летучих запахов с помощью панели рецепторов одоранта. Этот метод открывает возможность разработки биосенсоров на основе рецепторов одора. Этот метод позволяет в режиме реального времени в пробирке мониторинга активации рецепторов запаха на молекулы запаха в фазе пара.Он заполняет пробел между подходами in vitro и in vivo. Этот метод может быть использован для понимания кинетики событий, которые приводят к восприятию запаха, в том числе роль слизистых метаболических ферментов. Для начала подготовьтесь к M10 и M10 PSF согласно рукописи.Клетки культурированы в 10 миллилитров M10 PSF при 37 градусах цельсия и 5%углекислом газе. Наблюдайте за культурным блюдом под фазовой контрастной микроскопом. Когда он достигнет 100% слияния, разделить клетки на более низкую концентрацию, аспирируя средства массовой информации и мыть клетки мягко с 10 миллилитров PBS.Затем аспирировать PBS и добавить три миллилитров трипсина-EDTA. Пусть он реагирует в течение примерно одной минуты, пока клетки отмежеваться от блюда. Добавить пять миллилитров M10 для инактивации трипсина, и пипетки вверх и вниз, чтобы отделить клетки, прикрепленные к блюду.Перенесите восемь миллилитров клеточной суспензии из блюда в 15-миллилитровую трубку и центрифугировать трубку при 200-кратной Г в течение пяти минут. Аспирировать супернатант и повторно использовать клетки в пяти миллилитров M10 PSF путем трубопроводов вверх и вниз, чтобы разбить любую массу клеток. Избегайте создания пузырьков в трубке.Чтобы получить 20%-ное слияние клеток, добавьте девять миллилитров M10 PSF в новое 1000-миллиметровое блюдо клеточной культуры и перенесите один миллилитр повторного клеточного раствора. Инкубация при 37 градусах Цельсия и 5%углекислом газе. Это блюдо, сидящее при 20%-м слиянии, достигнет 100% слияния в течение 48 часов.Поместите блюдо под фазовый контрастный микроскоп для наблюдения. Возьмите 1/10 из 100%-клеточных культур слияния блюдо. Аспирировать средства массовой информации и мыть клетки осторожно с 10 миллилитров PBS.Затем лечить клетки с трипсином-ЭДТА и M10, центрифуга, и лечить снова с M10 PSF, как это было ранее выполнено. Чтобы реализовать одну пластину из 96-колодец, добавьте 500 микролитров из пяти миллилитров повторно натраченных клеток в 5,5 миллилитров свежих M10 PSF. Смешайте клетки и M10 PSF без генерации пузырьков воздуха.Pipette 50 микролитров разбавленных подвесных клеток в каждую колодец 96-ну пластины с помощью многоканальной пипетки. Инкубация на ночь при 37 градусах по Цельсию и 5%углекислом газе. Во-первых, поместите 96-хорошо пластины культурных ночь под фазовой контрастной микроскоп, наблюдать слияние клеток, и убедитесь, что это между 30%и 50%Подготовка первой трансфекции смесь в 1,5-миллилитровой трубки, которая содержит плазмиды, общие для всей пластины в соответствии с рукописью.Rho-pCi является пустым вектором отрицательного контроля, и Olfr1377 является положительным контролем, как известно, реагировать на испытанный ацетофенон. Разделите смесь на две трансфектные смеси, содержащие одну из контрольных плазмидов. Приготовьте вторую смесь трансфекции, содержащую 500 микролитров MEM и 20 микролитров реагента липофектамина 2000 года.Добавить половину второй смеси в каждый резервуар хорошо и осторожно перемешать путем трубопроводов вверх и вниз. Инкубировать трубку в течение 15 минут при комнатной температуре. Добавьте пять миллилитров M10 для одной пластины из 96 колодец.Добавить 2,5 миллилитров в каждый резервуар хорошо и аккуратно перемешать. Замените M10 PSF на ранее поцараженной пластине 96-колодец с 50 микролитров конечных трансфектных средств массовой информации. Инкубация на ночь при 37 градусах по Цельсию и 5%углекислом газе.Затем откройте дверь люминометра и вставьте трубку, соединенную с вакуумным насосом. Вакуум камеры люминометра на ночь. После трансфекции, наблюдать 96-хорошо пластины под фазовым контрастным микроскопом, чтобы обеспечить слияние клеток между 60%и 100% Подготовка стимуляции раствор сбалансированного раствора соли Хэнка, содержащего 10-миллимоляра HEPES и пять миллимоляра D-глюкозы.Удалить трансфекции среды из 96-хорошо пластины и мыть клетки, добавив 50 микролитров свежего раствора стимуляции для каждой хорошо. Чтобы разбавить раствор реагентов GloSensor cAMP, пипетка 2,75 миллилитров раствора стимуляции в пятими миллилитровую трубку и добавить 75 микролитров раствора реагентов CAMP. Удалите раствор стимуляции из скважин и добавьте 25 микролитров разбавленного раствора реагентов CAMP к каждой скважине.Инкубировать 96-хорошо пластины при комнатной температуре в темной и без запаха окружающей среды в течение двух часов. Во-первых, разбавить пахант ацетофенон до 1%в 10 миллилитров минерального масла и крышка трубки. До окончания времени инкубации реагентов CAMP добавьте 25 микролитров раствора одоранта к каждой пластине в новой пластине 96-колодец.Затем поместите эту одорантную пластину в камеру люминометра в течение пяти минут, чтобы уравночные камеры с летучими молекулами одоранта. Установите люминометр для записи люминесценции с нулевой задержкой секунд в течение 20 циклов 90-секундного измерения пластины, с интервалом 0,7 секунды между циклами. Прямо перед чтением пластины, удалить одорант пластины из камеры.В пластине 96 скважин, содержащей трансфицированные клетки, добавьте 25 микролитров одоранта в пространство между колодцами и быстро поместите пластину обратно в камеру. Начните измерение люминесценции всех скважин в течение 20 циклов в течение 30 минут. После измерения люминесценции удалите оставшийся одорант внутри люминометра, пылесосив одоранты в камере чтения в течение по крайней мере двух часов.Заменить свежим воздухом, отправив сжатый воздух в течение пяти минут, прежде чем инкубировать следующий запах, чтобы избежать перекрестного загрязнения летучих веществ запаха. Чтобы начать анализ данных, экспорт данных из люминометра программного обеспечения. Средние репликации одного и того же OR для каждого времени записи.Чтобы рассчитать нормализованный ответ OR на любой возможный контроль, разделите пустое векторное среднее значение на значение OR-усредняемое при каждом времени записи. Нормализация каждого ответа ИЛИ на их базальную активность путем деления усредного ответа ИЛИ на ноль секунд к каждому ответу времени записи. Чтобы получить единое значение ответа OR для кривой каждой или или, сумма всех значений люминесценции каждого времени записи для каждого или для того, чтобы получить область под кривой.В этом эксперименте, в режиме реального времени активации мышей ORs на паровой одорант стимул был проверен в течение 20 циклов измерения. Для обеспечения того, чтобы деятельность проверенных ОР, вызванная запахом, была специфической, использовалась пустая борьба с переносчиками. Данные по каждой из колодец были сначала нормализованы до пустого значения контроля вектора для каждого цикла.Затем, чтобы сравнить различные ORs'ответы, данные были нормализовывались до уровня OR базальной активности в этом анализе. Значения одной активации для каждой ОР вычислялись путем расчета области под кривой для каждой ИЛИ путем суммирования значений выбросов всех циклов измерений. Кроме того, зависит от дозы ответы могут быть измерены с помощью увеличения дозы одоранта.Зафиксирована реакция Olfr1377 на стимуляцию ацетофенона в пяти концентрациях. Только три более высокие концентрации смогли активировать Olfr1377. Чистая стимуляция соединения показывает тенденцию к снижению реакции ИЛИ с течением времени, вероятно, из-за токсичности клеток.Во время шага, вы должны добавить разбавленный запах между хорошо, и быть готовым, чтобы начать быстро запись пластины. Время между добавлением одоранта и мониторингом должно быть сведено к минимуму и постоянно между двумя экспериментами. В клетках атрии находятся биоопасные материалы, поэтому напоминаем утилизировать клетки в соответствующих диспансерах.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Odorant-induced Responses Recorded from Olfactory Receptor Neurons using the Suction Pipette Technique

Одоранта вызванных ответов Записано от обонятельных нейронов рецептора с помощью техники Всасывание пипеткой

Animals sample the odorous environment around them through the chemosensory systems located in the nasal cavity. Chemosensory signals affect complex ...

Monitoring Changes in the Intracellular Calcium Concentration and Synaptic Efficacy in the Mollusc Aplysia

Monitoring Changes in the Intracellular Calcium Concentration and Synaptic Efficacy in the Mollusc Aplysia

Мониторинг изменений в внутриклеточной концентрации кальция и синаптической эффективности в Моллюск<em&gt; Aplysia</em

It has been suggested that changes in intracellular calcium mediate the induction of a number of important forms of synaptic plasticity (e.g., ...

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Лазерно-индуцированное Травма спинного мозга модель для оценки Механизмы дегенерации аксонов в режиме реального времени

Injured CNS axons fail to regenerate and often retract away from the injury site. Axons spared from the initial injury may later undergo secondary axonal ...

Perforated Patch-clamp Recording of Mouse Olfactory Sensory Neurons in Intact Neuroepithelium: Functional Analysis of Neurons Expressing an Identified Odorant Receptor

Перфорированные патч-зажим записи из мышей Обонятельные сенсорные нейроны в неповрежденном нейроэпителии: Функциональный анализ нейронов выражая идентифицированного одоранта рецептор

Analyzing the physiological responses of olfactory sensory neurons (OSN) when stimulated with specific ligands is critical to understand the basis of ...

A Protocol for the Administration of Real-Time fMRI Neurofeedback Training

Протокол для управления реального времени МР-томографию Neurofeedback подготовки

Neurologic disorders are characterized by abnormal cellular-, molecular-, and circuit-level functions in the brain. New methods to induce and control ...

Assay to Measure Nucleocytoplasmic Transport in Real Time within Motor Neuron-like NSC-34 Cells

Анализ для измерения нуклеоцитоплазматического транспорта в реальном времени в моторных нейроноподобных клетках NSC-34

Nucleocytoplasmic transport refers to the import and export of large molecules from the cell nucleus. Recently, a number of studies have shown a ...

Live-cell Measurement of Odorant Receptor Activation Using a Real-time cAMP Assay

Жить клеточной измерение одоранта рецептор активации с помощью реального времени лагеря Assay

The enormous sizes of the mammalian odorant receptor (OR) families present difficulties to find their cognate ligands among numerous volatile chemicals. ...

Localization of Odorant Receptor Genes in Locust Antennae by RNA In Situ Hybridization

Localization of Odorant Receptor Genes in Locust Antennae by RNA In Situ Hybridization

Локализация генов-рецепторов одоранта в аутоантителе с помощью РНК<em&gt; Разное</em&gt; Гибридизация

Insects have evolved sophisticated olfactory reception systems to sense exogenous chemical signals. These chemical signals are transduced by Olfactory ...

Ocular Kinematics Measured by In Vitro Stimulation of the Cranial Nerves in the Turtle

Ocular Kinematics Measured by In Vitro Stimulation of the Cranial Nerves in the Turtle

Глазной кинематики, измеряется в Vitro стимуляции черепных нервов в черепаха

After animals are euthanized, their tissues begin to die. Turtles offer an advantage because of a longer survival time of their tissues, especially when ...