Name: excitation-scanning hyperspectral imaging microscopy to efficiently discriminate fluorescence signals
Uploaded: 2019-08-22T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Excitation-Scanning Hyperspectral Imaging Microscopy to Efficiently Discriminate Fluorescence Signals at JoVE.com

Forfatterne vil gerne anerkende støtte fra NSF 1725937, NIH P01HL066299, NIH R01HL058506, NIH S10OD020149, NIH UL1 TR001417, NIH R01HL137030, AHA 18PRE34060163, og Abraham Mitchell Cancer Research fund.

1. opsætning af enhed
<ol><li>Lyskilde: Vælg en bredbånds-spektral lyskilde med høj effekt og høj kollimation (en 300 W XE Arc-lampe blev brugt til disse studier).</li>
	<li>Lukker (valgfrit): Tilføj en udløser til den optiske sti for at reducere foto blegning for tidsforskudt billeddannelse.</li>
	<li>Tunable filter system: indarbejde en mekanisk tuning samling og tynd-film tunable filter (TFTF) indstillet til at aktivere den ønskede bølgelængde-justerbar excitation rækkevidde (f. eks 360-485 nm).</li>
	<li...

Den optimale anvendelse af en excitation-scanning hyperspectral Imaging set-up begynder med opførelsen af lysbanen. Især valg af lyskilde, filtre (tunable og dichroic), filter switching metode og kamera bestemme det tilgængelige spektralområde, eventuel scanningshastighed, detektorfølsomhed, og rumlig prøvetagning. Mercury Arc lamper tilbyder mange excitation bølgelængde toppe, men ikke giver en flad spektral udgang og vil kræve betydelige signal reduktion på output toppe at korrigere spektral billeddata tilbag...

Spectral Imaging kan udføres på en række forskellige måder og omtales i flere termer1,2,3,4. Spektral Imaging refererer generelt til data, som er erhvervet i mindst to rumlige dimensioner og en spektral dimension. Multispektral og hyperspectral billeddannelse udmærker sig oftest ved antallet af bølgelængde bånd, eller om spektral båndene er sammenhængende1. For denne applikation er hyperspectral data defineret som spektraldata erhvervet med sammenhængende bølgelængde bånd opnået ved mellemrum af Center bølgelængder ikke mindre end halvdelen af fuld bredde på halv maksimum (FWHM) af hver båndpas filter anvendes til excitation (dvs., 5 Nm midterbølge længde afstand for båndpas filtre med 14-20 Nm båndbredder). Den sammenhængende karakter af data båndene giver mulighed for en oversampling af datasæt, at sikre, at Nyquist kriterier er opfyldt, når prøvetagning af spektral domænet.
Hyperspectral Imaging blev udviklet af NASA i 1970 ' erne og 1980 ' erne i forbindelse med den første landsat satellit5,6. Indsamling af data fra flere sammenhængende spektralbånd tillod generering af et Radiance spektrum af hver pixel. Identificering og definition af Radiance spektret af individuelle komponenter gjorde det muligt ikke kun at detektere overfladematerialer ved deres karakteristiske spektre, men det tillod også fjernelse af mellemliggende signaler, såsom variationer i signalet på grund af atmosfæriske forhold. Begrebet påvisning af materialer ved hjælp af deres karakteristiske spektre blev anvendt på biologiske systemer i 1996, når Schröck et al. brugte kombinationer af fem forskellige fluorophorer og deres kendte spektre til at skelne mærkede kromosomer i en proces, der betegnes spektral karyotyping7. Denne teknik blev uddybet i 2000 af Tsurui et al. for fluorescens billeddannelse af vævsprøver, ved hjælp af syv fluorescerende farvestoffer og ental værdi nedbrydning for at opnå spektral adskillelse af hver pixel i lineære kombinationer af spektre i reference bibliotek8. Svarende til deres telemåling modparter, kan bidraget fra hver kendt fluoroforet beregnes fra hyperspectral billede, givet a priori oplysninger om spektret af hver fluoroforet.
Hyperspectral Imaging er også blevet anvendt i områderne landbrug9, astronomi10, biomedicin11, kemisk billeddannelse12, miljø anvendelser13, Eye Care14, levnedsmiddelvidenskab15, retsvidenskab16,17, medicinsk videnskab18, mineralogi19, og overvågning20. En vigtig begrænsning af nuværende fluorescens mikroskop hyperspectral Imaging systemer er, at standard hyperspectral imaging teknologi isolerer fluorescens signaler i smalle bånd ved 1) første filtrering af excitation lys til kontrolprøve excitation, så 2) yderligere filtrering udledt lys til at adskille fluorescens emission i smalle bånd, der senere kan adskilles matematisk21. Filtrering af både excitation-belysningen og den udsendte fluorescens reducerer mængden af tilgængeligt signal, hvilket sænker signal-til-støj-forholdet og nødvendiggør lange anskaffelses tider. Det lave signal og de lange anskaffelses tider begrænser anvendeligheden af hyperspectral Imaging som et diagnostisk værktøj.
En Imaging modalitet er blevet udviklet, der gør brug af hyperspectral Imaging, men øger det tilgængelige signal, og dermed reducere den nødvendige erhvervelse tid21,22. Denne nye modalitet, kaldet excitation-scanning hyperspectral Imaging, erhverver spektral billeddata ved at variere excitation bølgelængde og indsamle en bred vifte af udsendte lys. Det har tidligere vist sig, at denne teknik giver størrelses stigninger i signal-støj-forhold i forhold til emissions scanningsteknikker21,22. Stigningen i signal-støj-forhold skyldes i høj grad den brede båndpas (~ 600 nm) af emissions lyset detekteret, mens specificitet er tilvejebragt ved at filtrere kun excitation lys i stedet for fluorescens emission. Dette gør det muligt for alle udsendte lys (for hver excitation bølgelængde) at nå sensoren21. Derudover kan denne teknik bruges til at diskriminere autofluorescens fra udefrakommende etiketter. Desuden reducerer evnen til at reducere anskaffelsestid på grund af øget detekterbart signal faren for foto blegning samt tillader spektral scanninger ved en erhvervelse sats, der er acceptabelt for spektral video Imaging.
Målet med denne protokol er at tjene som en dataindsamling guide til excitation-scanning hyperspectral Imaging mikroskopi. Desuden er beskrivelser inkluderet, der hjælper med at forstå den lette vej og hardware. Også beskrevet er gennemførelsen af open source-software til en excitation-scanning hyperspectral Imaging mikroskop. Endelig, beskrivelser er fastsat for, hvordan du kalibrere systemet til en NIST-sporbare standard, justere software og hardwareindstillinger for nøjagtige resultater, og unmix det detekterede signal til bidrag fra individuelle komponenter.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:2119px;" width="2120">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Airway Smooth Muscle Cells</td>
			<td style="width:327px;">National Disease Research Interchange (NDRI)</td>
			<td style="width:360px;">Isolated from human lung tissues obtained from NDRI</td>
			<td style="width:1105px;">Highly autofluorescent, calcium sensitive cells</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Automated Shutter</td>
			<td style="width:327px;">Thorlabs Inc.</td>
			<td style="width:360px;">SHB1</td>
			<td>Remote-controllable shutter to minimize photobleaching</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Automated Stage</td>
			<td style="width:327px;">Prior Scientific</td>
			<td style="width:360px;">H177P1T4</td>
			<td>Remote-controllable stage for automated multiple field of view or stitched image collection.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Automated Stage Controller (XY)</td>
			<td style="width:327px;">Prior Scientific</td>
			<td style="width:360px;">Proscan III (H31XYZE-US)</td>
			<td>For interfacing automated stage with computer and joystick</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Buffer</td>
			<td style="width:327px;">Made in-house</td>
			<td style="width:360px;">Made in-house</td>
			<td>145 mM NaCl, 4 mM KCl, 20 mM HEPES, 10 mM D-glucose, 1 mM MgCl2, and 1mM CaCl2, at pH 7.3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Cell Chamber</td>
			<td style="width:327px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:360px;">Attofluor Cell Chamber, A7816</td>
			<td>Coverslip holder composed of surgical stainless steel and a rubber O-ring to seal in media and prevent sample and/or objective contamination</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Excitation Filters</td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">TBP01-378/16</td>
			<td>Center wavelength range (340-378 nm), Bandwidth (Minimum 16 nm, nominal FWHM 20 nm), Refractive index (1.88)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;"></td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">TBP01-402/16</td>
			<td>Center wavelength range (360-400 nm), Bandwidth (Minimum 16 nm, nominal FWHM 20 nm), Refractive index (1.8)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;"></td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">TBP01-449/15</td>
			<td>Center wavelength range (400-448.8 nm), Bandwidth (Minimum 15 nm, nominal FWHM 20 nm), Refractive index (1.8)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;"></td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">TBP01-501/15</td>
			<td>Center wavelength range (448.8-501.5 nm), Bandwidth (Minimum 15 nm, nominal FWHM 20 nm), Refractive index (1.84)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;"></td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">TBP01-561/14</td>
			<td>Center wavelength range (501.5-561 nm), Bandwidth (Minimum 14 nm, nominal FWHM 20 nm), Refractive index (1.83)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Fluorescence Filter Cube Dichroic Beamsplitter</td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">FF495-Di03</td>
			<td>Separates excitation and emission light at 495 nm (&#62;98% reflection between 350-488 nm, &#62;93% transmission between 502-950 nm), Filter effective index (1.78)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Fluorescence Filter Cube Longpass Filter</td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">FF01 496/LP-25</td>
			<td>Allows passage of light longer than 496 nm ( &#62;93% average transmission between 503.2-1100 nm), Refractive index (1.86)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">GCaMP Probe</td>
			<td style="width:327px;">Addgene</td>
			<td style="width:360px;">G-CaMP3; Plasmid #22692</td>
			<td>A single-wavelength GCaMP2-based genetically encoded calcium indicator</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Integrating Sphere</td>
			<td style="width:327px;">Ocean Optics</td>
			<td style="width:360px;">FOIS-1</td>
			<td>Used for accurate measurement of wide-angle illumination</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Inverted Fluorescence Microscope</td>
			<td style="width:327px;">Nikon Instruments</td>
			<td style="width:360px;">TE2000</td>
			<td>Inverted microscopes allow direct excitation of sample without the need to penetrate layers of media and/or tissue.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Mitotracker Green FM</td>
			<td style="width:327px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:360px;">M7514</td>
			<td>Labels mitochondria</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">NIST-Traceable Calibration Lamp</td>
			<td style="width:327px;">Ocean Optics</td>
			<td style="width:360px;">LS-1-CAL-INT</td>
			<td>A lamp with a known spectrum for use as a standard</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">NIST-Traceable Fluorescein</td>
			<td style="width:327px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:360px;">F36915</td>
			<td>For verifying appropriate spectral response of the system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">NucBlue</td>
			<td style="width:327px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:360px;">R37605</td>
			<td>Labels cell nuclei</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Objective (10X)</td>
			<td style="width:327px;">Nikon Instruments</td>
			<td style="width:360px;">Plan Apo &#955; 10X/0.45 &#8734;/0.17 MRD00105</td>
			<td>Useful for large fields of view</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Objective (20X)</td>
			<td style="width:327px;">Nikon Instruments</td>
			<td style="width:360px;">Plan Apo &#955; 20X/0.75 &#8734;/0.17 MRD00205</td>
			<td>Most often used for tissue samples</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Objective (60X)</td>
			<td style="width:327px;">Nikon Instruments</td>
			<td>Plan Apo VC 60X/1.2 WI &#8734;/0.15-0.18 WD 0.27</td>
			<td>Most often used for cell samples</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">sCMOS Camera</td>
			<td style="width:327px;">Photometrics</td>
			<td style="width:360px;">Prime 95B (Rev A8-062802018)</td>
			<td>For acquiring high-sensitivity digital images</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Spectrometer</td>
			<td style="width:327px;">Ocean Optics</td>
			<td style="width:360px;">QE65000</td>
			<td>Used to measure spectral output of excitation-scanning spectral system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Tunable Filter Changer</td>
			<td style="width:327px;">Sutter Instrument</td>
			<td style="width:360px;">Lambda VF-5</td>
			<td>Motorized unit for automated excitation filter tuning/switching</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Xenon Arc Lamp</td>
			<td style="width:327px;">Sunoptic Technologies</td>
			<td style="width:360px;">Titan 300HP Lightsource</td>
			<td>Light source with relatively uniform spectral output</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

excitation-scanning hyperspectral imaging microscopy to efficiently discriminate fluorescence signals

Flere teknikker er afhængige af påvisning af fluorescens signaler for at identificere eller studere fænomener eller for at belyse funktioner. Adskillelse af disse fluorescens signaler blev vist besværligt indtil fremkomsten af hyperspectral Imaging, hvor fluorescens kilder kan adskilles fra hinanden såvel som fra baggrunds signaler og autofluorescens (givet kendskab til deres spektral underskrifter). Men traditionelle, emission-scanning hyperspectral Imaging lider af langsomme anskaffelses tider og lav signal-til-støj nøgletal på grund af den nødvendige filtrering af både excitation og emission lys. Det har tidligere vist sig, at excitation-scanning hyperspectral Imaging reducerer den nødvendige erhvervelse tid samtidig øge signal-til-støj forholdet af erhvervede data. Ved hjælp af kommercielt tilgængeligt udstyr, beskriver denne protokol, hvordan man samler, kalibrerer og bruger et excitation-scanning hyperspectral Imaging mikroskopi system til adskillelse af signaler fra flere fluorescens kilder i en enkelt prøve. Selv om denne teknik er meget anvendelig på mikroskopisk billeddannelse af celler og væv, kan den også være nyttig for enhver form for eksperiment, der udnytter fluorescens, hvor det er muligt at variere excitation bølgelængder, herunder, men ikke begrænset til: kemisk billeddannelse, miljø anvendelser, øjenpleje, levnedsmiddelvidenskab, retsvidenskab, lægevidenskab og mineralogi.

Flere vigtige skridt fra denne protokol er nødvendige for at sikre indsamlingen af data, der er både nøjagtige og blottet for billeddannelse og spektral artefakter. Hvis du springer disse trin over, kan det resultere i data, der ser betydningsfulde ud, men som ikke kan verificeres eller gengives med andre spektral billedbehandlingssystemer, hvilket effektivt ophæver eventuelle konklusioner, der er foretaget med de pågældende data. Chief blandt disse vigtige trin er korrekt spektral ...

Watch this Scientific Journal Video about Excitation-Scanning Hyperspectral Imaging Microscopy to Efficiently Discriminate Fluorescence Signals at JoVE.com

Excitation-Scanning Hyperspectral Imaging Microscopy to Efficiently Discriminate Fluorescence Signals

Excitation-scanning Hyperspectral Imaging mikroskopi til effektivt at diskriminere fluorescens signaler

Spectral Imaging er blevet en pålidelig løsning til identifikation og adskillelse af flere fluorescens signaler i en enkelt prøve og kan let skelne signaler af interesse fra baggrund eller autofluorescens. Excitation-scanning hyperspectral Imaging forbedrer denne teknik ved at reducere den nødvendige billed erhvervelse tid samtidig øge signal-til-støj-forholdet.

Several techniques rely on detection of fluorescence signals to identify or study phenomena or to elucidate functions. Separation of these fluorescence ...

Denne protokol er signifikant, da den beskriver en metode, der kan bruges til at adskille flere fluorescerende signaler i en enkelt prøve. Sammenlignet med traditionelle metoder kan excitation-scanning øge eksperimentets hastighed og forbedre dataenes følsomhed. Ved hjælp af forskellige belysningskilder såsom en superkontinuumlaser kan denne metode anvendes til roterende disk- eller laserscanningskonfokale mikroskopsystemer.Når du udfører excitation-scanninger, spektrale billeddannelse mikroskopi, er det vigtigt at kontrollere, at excitation peak af hver fluorescerende etiket forekommer på en anden bølgelængde. Til at begynde med skal du konfigurere et omvendt fluorescensmikroskop og kamera som beskrevet i tekstprotokollen. Læg derefter prøven på scenen.Vælg 475 nanometer til første prøvevisning i rullemenuen i hovedvinduet for micromanager. Dobbeltklik derefter på feltet ud for eksponering, og indtast 100 for at indstille eksponeringstiden til 100 millisekunder. Klik til sidst på live for at se eksemplet.Klik nu på Auto. Knappen automatisk intensitetsvisningsområde for at bringe minimum- og maksimumværdierne ind i meningsfulde, visuelle områder. Brug derefter mikroskopets fokusknapper til at fokusere prøven.Når du er i fokus, skal du justere placeringen af prøven, så dets kant er i midten af synsfeltet. Finjuster derefter fokus. Eksemplet er i fokus, når kantfunktionerne i billedet ser skarpe ud.Nu skal du åbne den flerdimensionale erhvervelse værktøj. Klik på indlæsningsknappen i menuen, og vælg en forudindstillet indstilling, der indeholder et passende bølgelængdeområde til spektralantagelse. Når anskaffelsesindstillingerne er bekræftet, skal du flytte til et tomt område af prøven og klikke på hentning for at indsamle en spektral billedstak, der indeholder baggrund og støj, der kan bruges til subtraktion senere.Flyt derefter om eksemplet for at finde de lyseste områder. Prøverne vil sandsynligvis have mere intens fluorescens væk fra prøvens kant. Når det lyseste område er placeret, skal du tage en enkelt billedstak.Indlæs det erhvervede billede i Billede J, og brug Billede J's målefunktion til at bekræfte, at ingen bølgelængder indeholder overeksponerede pixel. Hvis en reduceret eksponeringstid er nødvendig på grund af overeksponering, skal baggrundsbilledet også tages tilbage med en ny eksponeringstid. Hvis det blev konstateret, at et af billederne indeholder kameraets opadgående detektionsgrænse, skal du justere eksponeringstiden for spektralscanningen for at sikre, at det maksimale signal i hele spektralområdet ikke overstiger kameraets dynamiske område.Med en passende eksponeringstid nu bestemt, placere en umærket prøve på scenen. Hent spektrale billeddata fra den ikke-mærkede prøve for at afgøre, om der er nogen underliggende autofluoresence. Placer derefter en enkelt mærket prøve på scenen.Indskære billeddata fra hver af de enkelt-mærkede prøver til brug som spektrale kontroller til at opbygge et spektralbibliotek. Udfør scanningen for hver kontrolprøve ved hjælp af en identisk eksponeringstid for bølgelængdeområdet og kameraindstillinger. Dernæst placeres et dias, der indeholder forsøgsprøven, på mikroskopet.Vælg et synsfelt, der har korrekt markerede celler, og hent spektralbilledet fra eksemplet ved hjælp af de fastlagte anskaffelsesindstillinger. Ret billeder til et fladt spektralrespons ved at trække baggrundsspektret fra prøvebilledet og multiplicere billedet med justeringskoefficienten. Her bruges et MATLAB-script til hurtigt at behandle billederne.Dernæst generere spektrale bibliotek. For at opnå de bedste resultater skal hvert slutmedlem normaliseres til bølgelængdebåndet med den største intensitet ved at bestemme, hvilket bølgelængdebånd der har den mest intense værdi, og dividere målingen ved hvert bølgelængdebånd med den maksimale værdi. Gem derefter spektraldataene som en dat-fil.Når spektralbilledet er færdige, skal de blandes. Den ublandet skridt vil generere en overflod billede for hver fluorescerende etiket, hvor overflod er mængden af relative fluorescerende signal i billedet fra den potentielle etiket. Åbn derefter hvert ublandet billede for visuelt at inspicere fordelingen af rene komponenter.Sammenlign størrelsen af fejlbilledet med størrelsen af de ublandede billeder. Hvis størrelsen af fejlbilledet svarer til de ublandet tæthedsbilleder, kan der ikke tages nøjagtigt højde for signaler i de spektrale billeddata. Endelig skal du kontrollere, at der ikke er nogen uidentificerede resterende strukturer ved at sammenligne fejlbilledet med de ublandede billeder.Når den udføres korrekt, den spektrale ubblanding proces tillader adskillelse af en spektralbillede stak i respektive bidrag fra hver fluorescens etiket. Her, en ublandet spektral billede sæt med individuelle billeder fremhæve luftveje glat muskelcelle autofluorescens, en GCaMP sonde og en mitokondriel etiket. Der er store fejl i forbindelse med de nukleare og perinuclear regioner af cellerne, der angiver, at de målte spektre af disse regioner ikke er godt tegnede sig for af spektre i spektra biblioteket.Ren spektre indsamlet fra mærkede celler, der også er autofluorescerende vil sandsynligvis forurene spektralprofilen for den rene komponent. Her kan man se forskellen i ublandet med ren spektre forurenet med autofluorescens, versus den korrigerede rene spektre efter skaleret subtraktion. Korrekt dataindsamling er afgørende, når billedbehandling følsomme prøver, da de kun kan overleve en enkelt billedbehandling session i modsætning til baggrunden og kontrol, som kan reimaged.Sørg for, at de korrekte hardware- og anskaffelsesindstillinger er forudbestemt så meget som muligt. Som et næste skridt, videoer skabt fra time-lapse data erhvervet ved hjælp af dette system kan bruges til at spore fluorescerende kilder i diskrete steder over tid, såsom anden messenger signal lokalisering. Vær forsigtig, når du bruger kraftige lyskilder for at undgå øjeneksponering.Sørg også for at bære ordentlig handsker, når du håndterer biologiske etiketter.

Research

JoVE Journal

Engineering

Use of a Multi-compartment Dynamic Single Enzyme Phantom for Studies of Hyperpolarized Magnetic Resonance Agents

Anvendelse af en Multi-rum Dynamic Single Enzyme Phantom for Studier af Hyperpolariserede Magnetic Resonance Agenter

Imaging of hyperpolarized substrates by magnetic resonance shows great clinical promise for assessment of critical biochemical processes in real time. Due ...

Dynamic Pore-scale Reservoir-condition Imaging of Reaction in Carbonates Using Synchrotron Fast Tomography

Dynamisk Pore-skala Reservoir-tilstand Imaging af reaktion i Karbonater Brug Synchrotron Fast Tomography

Underground storage permanence is a major concern for carbon capture and storage. Pumping CO2 into carbonate reservoirs has the potential to dissolve ...

Advanced Compositional Analysis of Nanoparticle-polymer Composites Using Direct Fluorescence Imaging

Avanceret analyse af sammensætningen af ​​nanopartiklers-polymer Composites Brug Direct Fluorescens Imaging

The fabrication of polymer-nanoparticle composites is extremely important in the development of many functional materials. Identifying the precise ...

Sub-nanometer Resolution Imaging with Amplitude-modulation Atomic Force Microscopy in Liquid

Sub-nanometer Resolution Imaging med Amplitude-modulation Atomic force mikroskopi i Liquid

Atomic force microscopy (AFM) has become a well-established technique for nanoscale imaging of samples in air and in liquid. Recent studies have shown ...

Microfluidic Imaging Flow Cytometry by Asymmetric-detection Time-stretch Optical Microscopy (ATOM)

Microfluidic Imaging Flow Cytometry by Asymmetric-detection Time-stretch Optical Microscopy ATOM

Mikrofluidisk Imaging Flow Cytometry ved asymmetrisk detektion Time-stretch Optical Microscopy (ATOM)

Scaling the number of measurable parameters, which allows for multidimensional data analysis and thus higher-confidence statistical results, has been the ...

Novel Photoacoustic Microscopy and Optical Coherence Tomography Dual-modality Chorioretinal Imaging in Living Rabbit Eyes

Roman Photoacoustic mikroskopi og optisk kohærens tomografi Dual-modalitet Chorioretinal Imaging i levende kanin øjne

Photoacoustic ocular imaging is an emerging ophthalmic imaging technology that can noninvasively visualize ocular tissue by converting light energy into ...

Synchrotron X-ray Microdiffraction and Fluorescence Imaging of Mineral and Rock Samples

Synkrotron X-ray Microdiffraction og fluorescens billeddannelse af mineralsk og Rock prøver

In this report, we describe a detailed procedure for acquiring and processing&#160;x-ray microfluorescence (&#956;XRF), and Laue and powder ...

Label-Free Imaging of Single Proteins Secreted from Living Cells via iSCAT Microscopy

Label-fri Imaging af enkelt proteiner udskilles fra levende celler via iSCAT mikroskopi

We demonstrate interferometric scattering (iSCAT) microscopy, a method capable of detecting single unlabeled proteins secreted from individual living ...

Multiplexing Focused Ultrasound Stimulation with Fluorescence Microscopy

Multiplexing fokuseret ultralyd Stimulation med Fluorescens mikroskopi

By focusing low-intensity ultrasound pulses that penetrate soft tissues, LIPUS represents a promising biomedical technology to remotely and safely ...

In Situ Transmission Electron Microscopy with Biasing and Fabrication of Asymmetric Crossbars Based on Mixed-Phased a-VOx

In Situ Transmission Electron Microscopy with Biasing and Fabrication of Asymmetric Crossbars Based on Mixed-Phased a-VOx

In Situ Transmission Electron Mikroskopi med biasing og fremstilling af asymmetriske overliggere baseret på blandet faset en-VOx