Name: excitation-scanning hyperspectral imaging microscopy to efficiently discriminate fluorescence signals
Uploaded: 2019-08-22T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Excitation-Scanning Hyperspectral Imaging Microscopy to Efficiently Discriminate Fluorescence Signals at JoVE.com

Forfatterne vil gjerne erkjenne støtte fra NSF 1725937, NIH P01HL066299, NIH R01HL058506, NIH S10OD020149, NIH UL1 TR001417, NIH R01HL137030, AHA 18PRE34060163, og Abraham Mitchell Cancer Research Fund.

1. enhetsoppsett
<ol><li>Lyskilde: Velg en bred bånds lys kilde med høy effekt og høy kollimasjon (en 300 W XE lys bue lampe ble brukt til disse studiene).</li>
	<li>Shutter (valgfritt): Legg til en lukker til den optiske banen for å redusere photobleaching for tidsforløp avbildning.</li>
	<li>Tunable filter system: innlemme en mekanisk tuning montering og Thin-Film tunable filter (TFTF) satt til å muliggjøre ønsket bølgelengde-justerbar eksitasjon rekkevidde (f. eks, 360-485 NM).</li>
	<li>Mikroskop: Bruk en ...

Den optimale bruken av et hyperspektral bildeoppsett med eksitasjon skanning begynner med byggingen av lys banen. Spesielt valg av lyskilde, filtre (tunable og dichroic), filter veksling metoden, og kameraet bestemme tilgjengelig Spectral Range, mulig skannehastighet, detektor følsomhet, og romlig prøvetaking. Mercury Arc lamper tilbyr mange eksitasjon bølgelengde topper, men gir ikke en flat Spectral output og vil kreve betydelig signal reduksjon ved utgangs toppene for å korrigere Spectral bildedata tilbake til en ...

Spectral Imaging kan utføres på en rekke måter, og er referert til av flere termer1,2,3,4. Vanligvis refererer Spectral Imaging til data ervervet i minst to romlige dimensjoner og en Spectral dimensjon. Multispectral og hyperspektral bilde er oftest preget av antall bølgelengde bånd eller om Spectral band er sammenhengende1. For dette programmet er hyperspektral data definert som Spectral data ervervet med sammenhengende bølgelengde band oppnås ved avstand fra sentrum bølgelengder ikke mindre enn halvparten av full bredde ved halv maksimal (FWHM) av hvert båndpassfilter som brukes for eksitasjon (dvs. 5 NM senter bølgelengde avstand for bånd pass filtre med 14-20 NM båndbredder). Sammenhengende natur av data båndene tillater en oversampling av datasettet, slik at Nyquist kriterier er oppfylt når prøvetaking av Spectral domenet.
Hyperspektral Imaging ble utviklet av NASA på 1970-og 1980-tallet i forbindelse med den første Landsat satellitten5,6. Innsamling av data fra flere sammenhengende Spectral band tillot generering av et utstråling spektrum av hver piksel. Identifisere og definere stråleglans spekteret av individuelle komponenter gjorde det mulig å ikke bare oppdage overflate materialer av deres karakteristiske Spectra, men det også tillatt for fjerning av mellomliggende signaler, for eksempel variasjoner i signalet på grunn av atmosfæriske forhold. Konseptet med å påvise materialer ved hjelp av deres karakteristiske Spectra ble brukt på biologiske systemer i 1996, da Schröck et al. brukte kombinasjoner av fem forskjellige fluorophores og deres kjent Spectra å skille merket kromosomer i en prosess betegnes Spectral karyotyping7. Denne teknikken ble utarbeidet på 2000 av Tsurui et al. for fluorescens avbildning av vevsprøver, ved hjelp av syv fluorescerende fargestoffer og en talls verdi nedbryting for å oppnå Spectral separasjon av hver piksel i lineære kombinasjoner av Spectra i referansen bibliotek8. I likhet med sine eksterne sensing motstykker, kan bidraget til hver kjente fluoroforen beregnes fra hyperspektral bildet, gitt a priori informasjon av spekteret av hver fluoroforen.
Hyperspektral Imaging har også blitt brukt i områdene landbruk9, astronomi10, biomedisin11, Chemical Imaging12, miljømessige applikasjoner13, Eye Care14, mat Science15, Forensic Science16,17, Medical Science18, mineralogi19, og overvåkning20. En nøkkel begrensning av gjeldende fluorescens mikroskop hyperspektral Imaging systemer er at standard hyperspektral Imaging teknologi isolerer fluorescens signaler i trange bånd med 1) først filtrere eksitasjon lys for å kontrollere prøven eksitasjon, deretter 2) ytterligere filtrering slippes lys for å skille fluorescens utslipp til smale band som senere kan skilles matematisk21. Filtrering både eksitasjon belysning og slippes fluorescens reduserer mengden tilgjengelig signal, som senker signal-til-støy-forhold og nødvendiggjør lengre oppkjøp ganger. Den lave signal og lange oppkjøpet ganger begrense anvendelsen av hyperspektral Imaging som et diagnostisk verktøy.
En Imaging modalitet er utviklet som gjør bruk av hyperspektral Imaging men øker tilgjengelig signal, og dermed redusere den nødvendige oppkjøpet tid21,22. Denne nye modalitet, kalt eksitasjon-skanning hyperspektral Imaging, kjøper Spectral bildedata ved å variere eksitasjon bølgelengde og samle et bredt spekter av slippes ut lys. Det har tidligere vist at denne teknikken gir størrelsesordener økninger i signal-til-støy-forhold i forhold til utslipps skanning teknikker21,22. Økningen i signal-til-støy-forhold er i stor grad på grunn av den brede bånd pass (~ 600 NM) av utslipps lyset oppdaget, mens spesifisitet er gitt ved å filtrere bare eksitasjon lys i stedet for fluorescens utslipp. Dette gjør at alle slippes lys (for hver eksitasjon bølgelengde) for å nå detektoren21. I tillegg kan denne teknikken brukes til å diskriminere autofluorescence fra eksogene etiketter. Videre kan evnen til å redusere anskaffelses tiden på grunn av økt synlig signal reduserer faren for photobleaching i tillegg til at Spectral skanner på en anskaffelses hastighet som er akseptabelt for Spectral video Imaging.
Målet med denne protokollen er å tjene som en datainnsamling guide for eksitasjon-skanning hyperspektral Imaging mikroskopi. I tillegg er beskrivelser inkludert som bidrar til å forstå lys banen og maskinvaren. Også beskrevet er gjennomføringen av åpen kildekode-programvare for en eksitasjon-skanning hyperspektral Imaging mikroskop. Til slutt, beskrivelser er gitt for hvordan du skal kalibrere systemet til en NIST-sporbar standard, justere programvare og maskinvare for nøyaktige resultater, og unmix det oppdagede signalet inn bidrag fra enkelte komponenter.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:2119px;" width="2120">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Airway Smooth Muscle Cells</td>
			<td style="width:327px;">National Disease Research Interchange (NDRI)</td>
			<td style="width:360px;">Isolated from human lung tissues obtained from NDRI</td>
			<td style="width:1105px;">Highly autofluorescent, calcium sensitive cells</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Automated Shutter</td>
			<td style="width:327px;">Thorlabs Inc.</td>
			<td style="width:360px;">SHB1</td>
			<td>Remote-controllable shutter to minimize photobleaching</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Automated Stage</td>
			<td style="width:327px;">Prior Scientific</td>
			<td style="width:360px;">H177P1T4</td>
			<td>Remote-controllable stage for automated multiple field of view or stitched image collection.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Automated Stage Controller (XY)</td>
			<td style="width:327px;">Prior Scientific</td>
			<td style="width:360px;">Proscan III (H31XYZE-US)</td>
			<td>For interfacing automated stage with computer and joystick</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Buffer</td>
			<td style="width:327px;">Made in-house</td>
			<td style="width:360px;">Made in-house</td>
			<td>145 mM NaCl, 4 mM KCl, 20 mM HEPES, 10 mM D-glucose, 1 mM MgCl2, and 1mM CaCl2, at pH 7.3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Cell Chamber</td>
			<td style="width:327px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:360px;">Attofluor Cell Chamber, A7816</td>
			<td>Coverslip holder composed of surgical stainless steel and a rubber O-ring to seal in media and prevent sample and/or objective contamination</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Excitation Filters</td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">TBP01-378/16</td>
			<td>Center wavelength range (340-378 nm), Bandwidth (Minimum 16 nm, nominal FWHM 20 nm), Refractive index (1.88)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;"></td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">TBP01-402/16</td>
			<td>Center wavelength range (360-400 nm), Bandwidth (Minimum 16 nm, nominal FWHM 20 nm), Refractive index (1.8)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;"></td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">TBP01-449/15</td>
			<td>Center wavelength range (400-448.8 nm), Bandwidth (Minimum 15 nm, nominal FWHM 20 nm), Refractive index (1.8)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;"></td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">TBP01-501/15</td>
			<td>Center wavelength range (448.8-501.5 nm), Bandwidth (Minimum 15 nm, nominal FWHM 20 nm), Refractive index (1.84)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;"></td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">TBP01-561/14</td>
			<td>Center wavelength range (501.5-561 nm), Bandwidth (Minimum 14 nm, nominal FWHM 20 nm), Refractive index (1.83)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Fluorescence Filter Cube Dichroic Beamsplitter</td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">FF495-Di03</td>
			<td>Separates excitation and emission light at 495 nm (&#62;98% reflection between 350-488 nm, &#62;93% transmission between 502-950 nm), Filter effective index (1.78)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Fluorescence Filter Cube Longpass Filter</td>
			<td style="width:327px;">Semrock Inc.</td>
			<td style="width:360px;">FF01 496/LP-25</td>
			<td>Allows passage of light longer than 496 nm ( &#62;93% average transmission between 503.2-1100 nm), Refractive index (1.86)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">GCaMP Probe</td>
			<td style="width:327px;">Addgene</td>
			<td style="width:360px;">G-CaMP3; Plasmid #22692</td>
			<td>A single-wavelength GCaMP2-based genetically encoded calcium indicator</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Integrating Sphere</td>
			<td style="width:327px;">Ocean Optics</td>
			<td style="width:360px;">FOIS-1</td>
			<td>Used for accurate measurement of wide-angle illumination</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Inverted Fluorescence Microscope</td>
			<td style="width:327px;">Nikon Instruments</td>
			<td style="width:360px;">TE2000</td>
			<td>Inverted microscopes allow direct excitation of sample without the need to penetrate layers of media and/or tissue.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Mitotracker Green FM</td>
			<td style="width:327px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:360px;">M7514</td>
			<td>Labels mitochondria</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">NIST-Traceable Calibration Lamp</td>
			<td style="width:327px;">Ocean Optics</td>
			<td style="width:360px;">LS-1-CAL-INT</td>
			<td>A lamp with a known spectrum for use as a standard</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">NIST-Traceable Fluorescein</td>
			<td style="width:327px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:360px;">F36915</td>
			<td>For verifying appropriate spectral response of the system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">NucBlue</td>
			<td style="width:327px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:360px;">R37605</td>
			<td>Labels cell nuclei</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Objective (10X)</td>
			<td style="width:327px;">Nikon Instruments</td>
			<td style="width:360px;">Plan Apo &#955; 10X/0.45 &#8734;/0.17 MRD00105</td>
			<td>Useful for large fields of view</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Objective (20X)</td>
			<td style="width:327px;">Nikon Instruments</td>
			<td style="width:360px;">Plan Apo &#955; 20X/0.75 &#8734;/0.17 MRD00205</td>
			<td>Most often used for tissue samples</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Objective (60X)</td>
			<td style="width:327px;">Nikon Instruments</td>
			<td>Plan Apo VC 60X/1.2 WI &#8734;/0.15-0.18 WD 0.27</td>
			<td>Most often used for cell samples</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">sCMOS Camera</td>
			<td style="width:327px;">Photometrics</td>
			<td style="width:360px;">Prime 95B (Rev A8-062802018)</td>
			<td>For acquiring high-sensitivity digital images</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Spectrometer</td>
			<td style="width:327px;">Ocean Optics</td>
			<td style="width:360px;">QE65000</td>
			<td>Used to measure spectral output of excitation-scanning spectral system</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Tunable Filter Changer</td>
			<td style="width:327px;">Sutter Instrument</td>
			<td style="width:360px;">Lambda VF-5</td>
			<td>Motorized unit for automated excitation filter tuning/switching</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Xenon Arc Lamp</td>
			<td style="width:327px;">Sunoptic Technologies</td>
			<td style="width:360px;">Titan 300HP Lightsource</td>
			<td>Light source with relatively uniform spectral output</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

excitation-scanning hyperspectral imaging microscopy to efficiently discriminate fluorescence signals

Flere teknikker er avhengige av påvisning av fluorescens signaler for å identifisere eller studere fenomener eller belyse funksjoner. Separasjon av disse fluorescens signalene ble påvist tungvint inntil advent av hyperspektral Imaging, der fluorescens kilder kan skilles fra hverandre så vel som fra bakgrunnen signaler og autofluorescence (gitt kjennskap til deres Spectral signaturer). Imidlertid, tradisjonell, utstråling-skanning hyperspektral tenkelig lide fra langsom oppkjøpet timene og lav signal-å-bråk forhold på grunn av det på krevd filterene av begge to eksitasjon og utstråling lyset. Det har tidligere vist at eksitasjon hyperspektral Imaging reduserer nødvendig anskaffelsestid samtidig øke signal-til-støy ratio av ervervet data. Ved hjelp av kommersielt tilgjengelig utstyr, beskriver denne protokollen hvordan å montere, kalibrere, og bruke et eksitasjon-skanning hyperspektral Imaging mikroskopi system for separasjon av signaler fra flere fluorescens kilder i en enkelt prøve. Mens svært aktuelt for mikroskopisk bildebehandling av celler og vev, denne teknikken kan også være nyttig for alle typer eksperiment utnytte fluorescens der det er mulig å variere eksitasjon bølgelengder, inkludert men ikke begrenset til: kjemisk Imaging, miljø applikasjoner, øye pleie, mat vitenskap, rettsmedisinske vitenskap, medisinsk vitenskap, og mineralogi.

Flere viktige skritt fra denne protokollen er nødvendig for å sikre innsamling av data som er både nøyaktig og blottet for bildebehandling og Spectral gjenstander. Hvis du hopper over disse trinnene, kan det føre til at data vises betydelig, men ikke kan verifiseres eller reproduseres med andre bildebehandlings systemer, og dermed effektivt oppheve eventuelle konklusjoner gjort med nevnte data. Chief blant disse viktige trinnene er riktig Spectral output korreksjon (del 3). Korrigeri...

Watch this Scientific Journal Video about Excitation-Scanning Hyperspectral Imaging Microscopy to Efficiently Discriminate Fluorescence Signals at JoVE.com

Excitation-Scanning Hyperspectral Imaging Microscopy to Efficiently Discriminate Fluorescence Signals

Eksitasjon-skanning hyperspektral tenkelig mikroskopi å effektivt diskriminere fluorescens signaler

Spectral Imaging har blitt en pålitelig løsning for identifisering og separasjon av flere fluorescens signaler i en enkelt prøve og kan lett skille signaler av interesse fra bakgrunn eller autofluorescence. Eksitasjon-skanning hyperspektral Imaging forbedrer på denne teknikken ved å redusere den nødvendige bildet oppkjøpet tid samtidig øke signal-til-støy-forhold.

Several techniques rely on detection of fluorescence signals to identify or study phenomena or to elucidate functions. Separation of these fluorescence ...

Denne protokollen er betydelig da den beskriver en metode som kan brukes til å skille flere fluorescerende signaler i en enkelt prøve. Sammenlignet med tradisjonelle metoder kan eksitasjonsskanning øke hastigheten på eksperimentet og forbedre følsomheten til dataene. Ved å bruke forskjellige belysningskilder som en superkontinuumlaser, kan denne metoden gjelde for spinning disk eller laserskanning confocal mikroskopsystemer.Når du utfører eksitasjonsskanninger, spektral bildemikroskopi, er det viktig å kontrollere at eksitasjonstoppen for hver fluorescerende etikett skjer ved en annen bølgelengde. For å begynne, sett opp et invertert fluorescensmikroskop og kamera som beskrevet i tekstprotokollen. Deretter laster du prøven på scenen.Fra rullegardinmenyen i mikromanagerens hovedvindu velger du 475 nanometer for første prøvevisning. Dobbeltklikk deretter på boksen ved siden av eksponeringen og skriv inn 100 for å angi eksponeringstiden til 100 millisekunder. Til slutt klikker du på live for å se eksemplet.Klikk nå på Auto. Knappen for visningsområde for automatisk intensitet for å bringe minimums- og maksimumsverdiene inn i meningsfulle, visuelle områder. Deretter bruker du mikroskopets fokusknotter til å fokusere prøven.Når du er i fokus, justerer du plasseringen av prøven slik at kanten er i midten av synsfeltet. Finjuster deretter fokuset. Prøven er i fokus når kantfunksjonene i bildet ser skarpe ut.Åpne nå det flerdimensjonale anskaffelsesverktøyet. Klikk lastknappen i menyen og velg en forhåndsinnstilt innstilling som inneholder et passende bølgelengdeområde for spektralanskaffelse. Når anskaffelsesinnstillingene er bekreftet, flytter du til et tomt område i eksemplet og klikker på henting for å samle inn en spektral bildestakk som inneholder bakgrunn og støy som skal brukes til subtraksjon senere.Deretter beveger du deg rundt prøven for å finne de lyseste områdene. Prøver vil sannsynligvis ha mer intens fluorescens vekk fra kanten av prøven. Når den lyseste regionen er plassert, ta en enkelt bildestakk.Last det kjøpte bildet inn i bilde J, og bruk Bilde Js målefunksjon for å bekrefte at ingen bølgelengder inneholder overeksponerte piksler. Hvis en redusert eksponeringstid er nødvendig på grunn av overeksponering, bør bakgrunnsbildet også tas opp igjen med en ny eksponeringstid. Hvis noen av bildene ble funnet å inneholde den oppadgående deteksjonsgrensen til kameraet, justerer du eksponeringstiden for spektralskanningen for å sikre at det maksimale signalet i hele spektralområdet ikke overskrider kameraets dynamiske rekkevidde.Med en passende eksponeringstid nå bestemt, plasser en umerket prøve på scenen. Hent spektrale bildedata fra det umerkede eksemplet for å finne ut om det er noen underliggende autofluoresens. Deretter plasserer du en enkeltmerket prøve på scenen.Hent spektrale bildedata fra hvert av de enkeltmerkede eksemplene som skal brukes som spektrale kontroller for å bygge et spektralbibliotek. Utfør skanningen for hver kontrollprøve ved hjelp av en identisk eksponeringstid for bølgelengdeområde og kamerainnstillinger. Deretter plasserer du et lysbilde som inneholder den eksperimentelle prøven på mikroskopet.Velg et visningsfelt som har riktig merkede celler, og hent spektralbildedataene fra eksemplet ved hjelp av de bestemte anskaffelsesinnstillingene. Korriger bilder til en flat spektral respons ved å trekke bakgrunnsspekteret fra eksempelbildet og multiplisere bildet med korreksjonskoeffisienten. Her brukes et MATLAB-skript til raskt å behandle bildene.Deretter genererer du spektralbiblioteket. For best resultat, normaliser hvert sluttmedlem til bølgelengdebåndet med størst intensitet ved å bestemme hvilket bølgelengdebånd som har den mest intense verdien og dele målingen på hvert bølgelengdebånd med den maksimale verdien. Lagre deretter spektraldataene som en dat-fil.Når du er ferdig, må du pakke ut spektrale bildedata. Det blinkende trinnet vil generere et overflodsbilde for hver fluorescerende etikett, hvor overflod er mengden av relativt fluorescerende signal i bildet fra den potensielle etiketten. Deretter åpner du hvert ubxed bilde for å visuelt inspisere fordelingen av rene komponenter.Sammenlign størrelsen på feilbildet med de av de ubyxed bildene. Hvis størrelsen på feilbildet ligner på de ubxed overflod bildene, signaler i spektral bildedata kan ikke være nøyaktig redegjøres for. Til slutt må du kontrollere at det ikke finnes uidentifiserte gjenværende strukturer ved å sammenligne feilbildet med de ubysede bildene.Når den utføres riktig, tillater spektral unmixing prosessen separasjon av en spektral bildestakk i respektive bidrag fra hver fluorescensetikett. Her, en unmixed spektral bilde sett med individuelle bilder fremhever luftveiene glatt muskelcelle autofluorescence, en GCaMP sonde og en mitokondrie etikett. Det er store feil forbundet med de kjernefysiske og perinukleære regionene i cellene som indikerer at den målte spektra av disse regionene ikke er godt redegjøret for av spektra i spektralbiblioteket.Ren spektra samlet inn fra merkede celler som også er autofluorescent vil trolig forurense spektral profil for den rene komponenten. Her kan man se forskjellen på unmixing med ren spektra forurenset med autofluorescence, versus korrigert ren spektra etter skalert subtraksjon. Riktig datainnsamling er viktig når de avbilde sensitive prøver, da de bare kan overleve en enkelt bildeøkt i motsetning til bakgrunnen og kontrollene som kan reimaged.Kontroller at de riktige innstillingene for maskinvare og anskaffelse er forhåndsbestemt så mye som mulig. Som et neste trinn kan videoer som er opprettet fra tidsforløpsdata som er anskaffet ved hjelp av dette systemet, brukes til å spore fluorescerende kilder på diskrete steder over tid, for eksempel lokalisering av andre messenger-signaler. Vær forsiktig når du bruker kraftige lyskilder for å unngå øyeeksponering.Pass også på at du bruker riktige hansker ved håndtering av biologiske etiketter.

Research

JoVE Journal

Engineering

Use of a Multi-compartment Dynamic Single Enzyme Phantom for Studies of Hyperpolarized Magnetic Resonance Agents

Bruk av en Multi-kupé Dynamic enkelt enzym Phantom for studier av Hyperpolariserte magnetisk resonans Agents

Imaging of hyperpolarized substrates by magnetic resonance shows great clinical promise for assessment of critical biochemical processes in real time. Due ...

Dynamic Pore-scale Reservoir-condition Imaging of Reaction in Carbonates Using Synchrotron Fast Tomography

Dynamisk Pore-skala Reservoir-tilstand Imaging av Reaction i karbonater Bruke Synchrotron Fast Tomography

Underground storage permanence is a major concern for carbon capture and storage. Pumping CO2 into carbonate reservoirs has the potential to dissolve ...

Advanced Compositional Analysis of Nanoparticle-polymer Composites Using Direct Fluorescence Imaging

Avansert Sammensetningsanalyse av Nanopartikkel-polymer Composites bruker direkte Fluorescens Imaging

The fabrication of polymer-nanoparticle composites is extremely important in the development of many functional materials. Identifying the precise ...

Sub-nanometer Resolution Imaging with Amplitude-modulation Atomic Force Microscopy in Liquid

Sub-nanometer Resolution Imaging med Amplitude-modulasjon Atomic Force Microscopy i væske

Atomic force microscopy (AFM) has become a well-established technique for nanoscale imaging of samples in air and in liquid. Recent studies have shown ...

Microfluidic Imaging Flow Cytometry by Asymmetric-detection Time-stretch Optical Microscopy (ATOM)

Microfluidic Imaging Flow Cytometry by Asymmetric-detection Time-stretch Optical Microscopy ATOM

Mikrofluidisk Imaging Flow Cytometry ved asymmetrisk deteksjon Time-stretch Optical Microscopy (ATOM)

Scaling the number of measurable parameters, which allows for multidimensional data analysis and thus higher-confidence statistical results, has been the ...

Novel Photoacoustic Microscopy and Optical Coherence Tomography Dual-modality Chorioretinal Imaging in Living Rabbit Eyes

Romanen Photoacoustic mikroskopi og Optical Coherence tomografi Dual-modalitet Chorioretinal Imaging i levende kaninøyne

Photoacoustic ocular imaging is an emerging ophthalmic imaging technology that can noninvasively visualize ocular tissue by converting light energy into ...

Synchrotron X-ray Microdiffraction and Fluorescence Imaging of Mineral and Rock Samples

Synchrotron X-ray Microdiffraction og fluorescens avbildning av Mineral og Rock prøver

In this report, we describe a detailed procedure for acquiring and processing&#160;x-ray microfluorescence (&#956;XRF), and Laue and powder ...

Label-Free Imaging of Single Proteins Secreted from Living Cells via iSCAT Microscopy

Etikett-fri Imaging av enkelt proteiner skilles ut fra levende celler via iSCAT mikroskopi

We demonstrate interferometric scattering (iSCAT) microscopy, a method capable of detecting single unlabeled proteins secreted from individual living ...

Multiplexing Focused Ultrasound Stimulation with Fluorescence Microscopy

Multiplexing fokusert ultralyd stimulering med fluorescens mikroskopi

By focusing low-intensity ultrasound pulses that penetrate soft tissues, LIPUS represents a promising biomedical technology to remotely and safely ...

In Situ Transmission Electron Microscopy with Biasing and Fabrication of Asymmetric Crossbars Based on Mixed-Phased a-VOx

In Situ Transmission Electron Microscopy with Biasing and Fabrication of Asymmetric Crossbars Based on Mixed-Phased a-VOx

In Situ Transmission Electron Mikroskopi med biasing og fabrikasjon av asymmetriske tverrligger basert på blandet faset a-VOx