Name: a colorimetric assay of citrate synthase activity in drosophila melanogaster
Uploaded: 2020-01-16T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Colorimetric Assay of Citrate Synthase Activity in Drosophila Melanogaster at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av tilskudd fra National Natural Science Foundation i Kina (31401013 og 31471010), Science and Technology Commission of Shanghai kommune, Shanghai Pujiang program (14PJ1405900), og Natural Science Foundation of Shanghai (19ZR1446400).

1. fargemetrisk citrate syntase aktivitet analysen for D. melanogaster16
<ol><li>Samle ti voksne fluer for hver prøve. Samle minst tre eksemplarer prøver for hver genotype.</li>
	<li>Forbered 500 μL av is kald utvinnings buffer som inneholder 20 mM HEPES (pH = 7,2), 1 mM EDTA og 0,1% Triton X-100 i et 1,5 mL reagensrør for hver prøve.</li>
	<li>Bedøve voksen fluer med CO2 på en anestesi pad og isolere ønsket vev. For å isolere den voksne fly thoraxes, for eksempel fi...

<ol>
	<li>Yee, C., Yang, W., Hekimi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+intrinsic+apoptosis+pathway+mediates+the+pro-longevity+response+to+mitochondrial+ROS+in+C.+elegans.">The intrinsic apoptosis pathway mediates the pro-longevity response to mitochondrial ROS in C. elegans.</a> Cell. 157 (4), 897-909 (2014).</li><li>Sarasija, S., Norman, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+gamma-Secretase+Independent+Role+for+Presenilin+in+Calcium+Homeostasis+Impacts+Mitochondrial+Function+and+Morphology+in+Caenorhabditis+elegans.">A gamma-Secretase Independent Role for Presenilin in Calcium Homeostasis Impacts Mitochondrial Function and Morphology in Caenorhabditis elegans.</a> Genetics. 201 (4), 1453-1466 (2015).</li><li>Oxenoid, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Architecture+of+the+mitochondrial+calcium+uniporter.">Architecture of the mitochondrial calcium uniporter.</a> Nature. 533 (7602), 269-273 (2016).</li><li>Hekimi, S., Wang, Y., Noe, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+ROS+and+the+Effectors+of+the+Intrinsic+Apoptotic+Pathway+in+Aging+Cells:+The+Discerning+Killers!.">Mitochondrial ROS and the Effectors of the Intrinsic Apoptotic Pathway in Aging Cells: The Discerning Killers!.</a> Frontiers in Genetics. 7, 161 (2016).</li><li>Kim, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+Biosynthesis+Coordinates+a+Mitochondrial-to-Cytosolic+Stress+Response.">Lipid Biosynthesis Coordinates a Mitochondrial-to-Cytosolic Stress Response.</a> Cell. 166 (6), 1539-1552 (2016).</li><li>Wang, Y., Hekimi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+dysfunction+and+longevity+in+animals:+Untangling+the+knot.">Mitochondrial dysfunction and longevity in animals: Untangling the knot.</a> Science. 350 (6265), 1204-1207 (2015).</li><li>Ray, A., Martinez, B. A., Berkowitz, L. A., Caldwell, G. A., Caldwell, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+dysfunction,+oxidative+stress,+and+neurodegeneration+elicited+by+a+bacterial+metabolite+in+a+C.+elegans+Parkinson's+model.">Mitochondrial dysfunction, oxidative stress, and neurodegeneration elicited by a bacterial metabolite in a C. elegans Parkinson's model.</a> Cell Death &amp; Disease. 5, e984 (2014).</li><li>Tronstad, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+and+quantification+of+cellular+mitochondrial+morphology+and+content.">Regulation and quantification of cellular mitochondrial morphology and content.</a> Current Pharmaceutical Design. 20 (35), 5634-5652 (2014).</li><li>Wiegand, G., Remington, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Citrate+synthase:+structure,+control,+and+mechanism.">Citrate synthase: structure, control, and mechanism.</a> Annual Review of Biophysics and Biophysical Chemistry. 15, 97-117 (1986).</li><li>Lopez-Lluch, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calorie+restriction+induces+mitochondrial+biogenesis+and+bioenergetic+efficiency.">Calorie restriction induces mitochondrial biogenesis and bioenergetic efficiency.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 103 (6), 1768-1773 (2006).</li><li>MacInnis, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superior+mitochondrial+adaptations+in+human+skeletal+muscle+after+interval+compared+to+continuous+single-leg+cycling+matched+for+total+work.">Superior mitochondrial adaptations in human skeletal muscle after interval compared to continuous single-leg cycling matched for total work.</a> Journal of Physiology. 595 (9), 2955-2968 (2017).</li><li>Gillen, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Twelve+Weeks+of+Sprint+Interval+Training+Improves+Indices+of+Cardiometabolic+Health+Similar+to+Traditional+Endurance+Training+despite+a+Five-Fold+Lower+Exercise+Volume+and+Time+Commitment.">Twelve Weeks of Sprint Interval Training Improves Indices of Cardiometabolic Health Similar to Traditional Endurance Training despite a Five-Fold Lower Exercise Volume and Time Commitment.</a> PLoS One. 11 (4), e0154075 (2016).</li><li>Mukherjee, S., Basar, M. A., Davis, C., Duttaroy, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emerging+functional+similarities+and+divergences+between+Drosophila+Spargel/dPGC-1+and+mammalian+PGC-1+protein.">Emerging functional similarities and divergences between Drosophila Spargel/dPGC-1 and mammalian PGC-1 protein.</a> Frontiers in Genetics. 5, 216 (2014).</li><li>Mukherjee, S., Duttaroy, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spargel/dPGC-1+is+a+new+downstream+effector+in+the+insulin-TOR+signaling+pathway+in+Drosophila.">Spargel/dPGC-1 is a new downstream effector in the insulin-TOR signaling pathway in Drosophila.</a> Genetics. 195 (2), 433-441 (2013).</li><li>Diop, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PGC-1/Spargel+Counteracts+High-Fat-Diet-Induced+Obesity+and+Cardiac+Lipotoxicity+Downstream+of+TOR+and+Brummer+ATGL+Lipase.">PGC-1/Spargel Counteracts High-Fat-Diet-Induced Obesity and Cardiac Lipotoxicity Downstream of TOR and Brummer ATGL Lipase.</a> Cell Reports. 10 (9), 1572-1584 (2015).</li><li>Rera, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+longevity+and+tissue+homeostasis+by+the+Drosophila+PGC-1+homolog.">Modulation of longevity and tissue homeostasis by the Drosophila PGC-1 homolog.</a> Cell Metabolism. 14 (5), 623-634 (2011).</li><li>Wei, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNF34+modulates+the+mitochondrial+biogenesis+and+exercise+capacity+in+muscle+and+lipid+metabolism+through+ubiquitination+of+PGC-1+in+Drosophila.">RNF34 modulates the mitochondrial biogenesis and exercise capacity in muscle and lipid metabolism through ubiquitination of PGC-1 in Drosophila.</a> Acta Biochimica et Biophysica Sinica (Shanghai). 50 (10), 1038-1046 (2018).</li><li>Tennessen, J. M., Barry, W. E., Cox, J., Thummel, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+studying+metabolism+in+Drosophila.">Methods for studying metabolism in Drosophila.</a> Methods. 68 (1), 105-115 (2014).</li><li>Bosco, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+oxygen+concentration+and+pressure+on+Drosophila+melanogaster:+oxidative+stress,+mitochondrial+activity,+and+survivorship.">Effects of oxygen concentration and pressure on Drosophila melanogaster: oxidative stress, mitochondrial activity, and survivorship.</a> Archives of Insect Biochemistry and Physiology. 88 (4), 222-234 (2015).</li></ol>

Metabolske studier med Drosophila som modell må ta hensyn til genetisk bakgrunn, kosthold, og lager vedlikehold av fluene18. For å unngå virkningene av ulike genetiske bakgrunner på måling av citrate syntase aktivitet, bør ulike stammer av Drosophila være backcrossed til kontroll belastningen for 10 generasjoner. Den genetiske bakgrunnen for alle Drosophila stammer som brukes i våre eksperimenter er w1118, så vi brukte w1118 </...

Mitokondrier er best kjent som kraft-produserende organeller i de fleste eukaryote organismer, som produserer energi valuta, ATP, gjennom tricarboxylic syre syklus (dvs. Krebs syklus) og oksidativt fosforylering. Mitokondrier er også funnet å spille viktige roller i en rekke andre fysiologiske prosesser, slik som regulering av apoptose1, ca2 + homeostase2,3, reaktiv oksidasjon arter (ros) generasjon4, og endoplasmatiske retikulum (er)-stress respons5. Mitokondrie dysfunksjon kan påvirke noen organ i kroppen i alle aldre og er en primær årsak til metabolsk, aldring-relaterte6, og nevrodegenerative sykdommer7. Intakt mitokondrier er mechanistically relatert til mitokondrie funksjon. Dermed riktig kvantifisering av intakt mitokondrie massen er svært viktig for å evaluere mitokondrie funksjon8. Citrate syntase, en rate-begrensende enzym i det første trinnet av tricarboxylic acid syklus9, er lokalisert i mitokondrie matrise innen eukaryote celler, og dermed kan brukes som en kvantitativ markør for tilstedeværelsen av intakt mitokondrie masse9,10. Citrate syntase aktivitet kan også brukes som en normalisering faktor for intakt mitokondrie proteiner11,12.
Frukten fly, Drosophila melanogaster, er et utmerket modell system for å studere mitokondrie funksjon, som mange molekyler og stier som spiller sentrale roller i mitokondrier er evolutionarily bevart fra Drosophila til mennesker13,14,15. Her presenterer vi en protokoll for en rask og enkel metode for måling av citrate syntase aktivitet ved et fargemetrisk analysen i Drosophila vev homogenater16 i en 96 brønn plateformat. I citrate syntase aktivitet analysen, citrate syntase i Drosophila vev homogenate katalyserer reaksjonen av oxaloacetate med acetyl koenzym A (acetyl COA) å danne citrate COA-sh og H+. CoA-SH reagerer deretter med 5, 5 '-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid) (DTNB) for å generere en farget produkt, 2-Nitro-5-thiobenzoate (TNB), som lett kan måles spektrofotometrisk ved 412 NM. Citrate syntase aktivitet kan gjenspeiles av frekvensen av farge produksjon.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid (HEPES)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>V900477</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol (TRIZMA Base)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>V900483</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetyl-CoA</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A2181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dithio-bis-nitrobenzoic acid (DTNB)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D8130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>V900106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxaloacetate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>O4126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pellet pestle</td>
			<td>Sangon</td>
			<td>F619072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pellet pestle motor</td>
			<td>Tiangen</td>
			<td>OSE-Y10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plate reader</td>
			<td>BioTek</td>
			<td>Eon</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein BCA Assay kit</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>P0010S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>WPI</td>
			<td>14124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sangon</td>
			<td>A110694-0100</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a colorimetric assay of citrate synthase activity in drosophila melanogaster

Mitokondrier spiller de mest prominente rollene i cellenes metabolisme ved å produsere ATP gjennom oksidativt fosforylering og regulere en rekke fysiologiske prosesser. Mitokondrie dysfunksjon er en primær årsak til en rekke metabolske og nevrodegenerative sykdommer. Intakt mitokondrier er avgjørende for riktig funksjon. Enzymet citrate syntase er lokalisert i mitokondrie matrise og dermed kan brukes som en kvantitativ enzym markør av intakt mitokondrie masse. Gitt at mange molekyler og trasé som har viktige funksjoner i mitokondrier er svært bevart mellom mennesker og Drosophila, og at en rekke kraftige genetiske verktøy er tilgjengelige i Drosophila, Drosophila fungerer som en god modell for å studere mitokondrie funksjon. Her presenterer vi en protokoll for rask og enkel måling av citrate syntase aktivitet i vev homogenate fra voksen fluer uten å isolere mitokondrier. Denne protokollen er også egnet for måling av citrate syntase aktivitet i larver, kulturperler celler, og pattedyr vev.

Figur 1 presenterer et eksempel på kinetisk KURVER for OD absorbansen på 412 NM over tid innhentet ved hjelp av citrate syntase aktivitet fargemetrisk analysen for å måle Drosophila thorax vev homogenater av ulike genotyper. Det er velkjent at PGC-1 α er en Master regulator av mitokondrie kognitiv. PGC-1 α er funksjonelt bevart mellom Drosophila og mennesker. Drosophila RNF34 (dRNF34) er en E3 ubiquitin ligase for Drosophi...

Watch this Scientific Journal Video about A Colorimetric Assay of Citrate Synthase Activity in Drosophila Melanogaster at JoVE.com

A Colorimetric Assay of Citrate Synthase Activity in Drosophila Melanogaster

Vi presenterer en protokoll for et fargemetrisk analyse av citrate syntase aktivitet for kvantifisering av intakt mitokondrie masse i Drosophila tissue homogenater.

En fargemetrisk analysen av citrate syntase aktivitet i Drosophila Melanogaster

Mitochondria play the most prominent roles in cellular metabolism by producing ATP through oxidative phosphorylation and regulating a variety of ...

Drosophila fungerer som et godt modellsystem for å studere mitokondriefunksjon. Her presenterer vi en protokoll for måling av citrate syntaseaktivitet i vevhomogenat fra voksne fluer. Denne protokollen krever ikke isolering av mitokondrier.Det er raskt og enkelt, og det er egnet for måling av citrate syntaseaktivitet i larver, kultiverte celler og pattedyrvev. Begynn med å samle voksne fluer for hver prøve, og sørg for å samle minst triplicate prøver for hver genotype. Forbered 500 mikroliter iskald ekstraksjonsbuffer med 20 millimolar HEPES, en millimolar EDTA og 0,1% triton X-100 i et 1,5-milliliter prøverør for hver prøve.Bedøve den voksne flyr med karbondioksid på en anestesipute. For å isolere thoraxene, fest dem med et par tang og isolere flymagene ved å kutte langs grensen til thoraxen og magen med en saks. Samle fly thoraxes for citrate synthase aktivitet analyse.Overfør 10 voksne fly thoraxes til 100 mikroliter iskald ekstraksjon buffer umiddelbart og homogenisere dem med en pestle på isen. Hold prøvene kalde ved å homogenisere i fem til 10 sekunder på is, la dem sitte på is i fem sekunder, og gjenta til alle vevene er helt homogenisert. Aliquot 10 mikroliter av hver homogenisert prøve i et nytt rør for proteininnhold måling, holde disse rørene på is også.Tilsett 400 mikroliter iskald ekstraksjonsbuffer til hver gjenværende prøve for et totalt volum på 500 mikroliter og pipette opp og ned forsiktig for å blande. For hver reaksjon, tilsett en mikroliter fortynnet cellelylat til 150 mikroliter av den nyberederte reaksjonsløsningen. Bland godt ved å forsiktig pipettering, sørg for å unngå bobledannelse, og bruk deretter en plateleser til å måle absorbansen ved 412 nanometer hvert 10 til 30 sekund i fire minutter ved 25 grader Celsius.Plott dataene som absorbans over tid, og beregn deretter skråningen for den lineære delen av kurven. Til slutt deler du reaksjonshastigheten eller hellingen etter prøveproteinkonsentrasjonen for å normalisere citratsyntaseaktiviteten. Det var hypotetisk at knockdown av dRNF34 i Drosophila muskel ville øke mitokondrie citrate syntase aktivitet mens knockdown av dPGC-1 ville reversere denne økningen.En innledende lineær enzymatisk hastighet ble etablert for hver analyse;bakkene i trendlinjene representerer de maksimale reaksjonsratene som tilsvarer de maksimale citratesyntase aktivitetene til de forskjellige genotypene. De maksimale citratesyntaseaktivitetene ble beregnet ut fra kinetiske kurver og normalisert ved proteinkonsentrasjon. Resultatene viste at syntaseaktiviteten til fly thoraxes faktisk økt med muskelspesifikk dRNF34 knockdown og økningen ble reversert av muskelspesifikt dPGC-1 knockdown.Når du homogeniserer prøven, er det viktig å tippe røret og sjekke homogenatet for å sikre at det ikke er blodpropper og at vevet i røret er helt homogenisert. Etter prøveinnsamling bør alle prøvebehandlinger utføres på is. Citrate syntase aktivitetsanalysen brukes til å kvantifisere intakt mitokondriemasse.Riktig kvantifisering av intakt mitokondriemasse er svært viktig for evaluering av mitokondriefunksjon.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

A Colorimetric Assay of Citrate Synthase Activity in Drosophila Melanogaster

Detection of the pH-dependent Activity of Escherichia coli Chaperone HdeB In Vitro and In Vivo

Detection of the pH-dependent Activity of Escherichia coli Chaperone HdeB In Vitro and In Vivo

Påvisning av pH-avhengig aktivitet av<em&gt; Escherichia coli</em&gt; Anstand HdeB<em&gt; In Vitro</em&gt; og<em&gt; I Vivo</em

Bacteria are frequently exposed to environmental changes, such as alterations in pH, temperature, redox status, light exposure or mechanical force. Many ...

A Fluorescence-based Assay of Phospholipid Scramblase Activity

En fluorescens-baserte analysen av fosfolipid Scramblase aktivitet

Scramblases translocate phospholipids across the membrane bilayer bidirectionally in an ATP-independent manner. The first scramblase to be identified and ...

A Colorimetric Method for Measuring Iron Content in Plants

Kolorimetrisk metode for å måle jerninnhold i planter

Iron, one of the most important micronutrients in living organisms, is involved in basic processes, such as respiration and photosynthesis. Iron content ...

Mapping Metabolism: Monitoring Lactate Dehydrogenase Activity Directly in Tissue

Kartlegging metabolisme: Overvåking laktat Dehydrogenase aktivitet direkte i vev

Mapping enzymatic activity in space and time is critical for understanding the molecular basis of cell behavior in normal tissue and disease. In situ ...

An In Vitro Assay to Detect tRNA-Isopentenyl Transferase Activity

An In Vitro Assay to Detect tRNA-Isopentenyl Transferase Activity

I Vitro analysen å oppdage tRNA-Isopentenyl Transferase aktivitet

N6-isopentenyladenosine RNA modifications are functionally diverse and highly conserved among prokaryotes and eukaryotes. One of the most highly conserved ...

Caffeine Extraction, Enzymatic Activity and Gene Expression of Caffeine Synthase from Plant Cell Suspensions

Koffein utvinning, enzymatisk aktivitet og genuttrykk av koffein syntase fra anlegget celle suspensjoner

Caffeine (1,3,7-trimethylxanthine) is a purine alkaloid present in popular drinks such as coffee and tea. This secondary metabolite is regarded as a ...

A Fluorogenic Peptide Cleavage Assay to Screen for Proteolytic Activity: Applications for coronavirus spike protein activation

En Fluorogenic peptid Cleavage analysen til skjermen for proteolytiske: programmer for coronavirus pigge protein aktivisering

Enveloped viruses such as coronaviruses or influenza virus require proteolytic cleavage of their fusion protein to be able to infect the host cell. Often ...

Continuous Fluorescence-Based Endonuclease-Coupled DNA Methylation Assay to Screen for DNA Methyltransferase Inhibitors

Kontinuerlig fluorescensbasert endonukleasekoblet DNA-metyleringsanalyse for å screene for DNA-metyltransferasehemmere

DNA methylation, a form of epigenetic gene regulation, is important for normal cellular function. In cells, proteins called DNA methyltransferases (DNMTs) ...

Measuring Caspase Activity Using a Fluorometric Assay or Flow Cytometry

Måling av kaspaseaktivitet ved hjelp av fluorometrisk analyse eller flowcytometri

The activation of cysteine proteases, known as caspases, remains an important process in multiple forms of cell death. Caspases are critical initiators ...

Smartphone as an Analytical Device to Quantify Protein Using Bradford Assay

RGBradford: Protein Quantitation with a Smartphone Camera

An Alternative Approach to Protein Quantification by Bradford Assay Using a Smartphone (Video) | JoVE

RGBradford: Proteinkvantifisering med et smarttelefonkamera

Protein quantitation is an essential procedure in life sciences research. Amongst several other methods, the Bradford assay is one of the most used. ...